蛋白琥珀酸铁口服溶液中的铁含量测定

【摘要】 目的 测定蛋白琥珀酸铁口服溶液中的铁含量。方法 先用强酸将蛋白琥珀酸铁破坏,使三价铁离子[Fe(Ⅲ)]游离,用还原剂将Fe(Ⅲ)还原为二价铁离子[Fe(Ⅱ)],Fe(Ⅱ)与2,2’-联吡啶溶液形成红色的2,2’ -联吡啶络合物[Fe(CH8N2)3]Cl2,利用比色法测定铁含量。结果 2,2’ -联吡啶络合物在波长525nm处有最大吸收,Fe(Ⅱ)浓度在24.99～149.94μg/ml范围内服从Beer定律,标准曲线回归方程为:Y=0.0065X-0.0279,相关系数r=0.9991,变异系数0.60%,回收率98.86%～100.02%。结论 本方法操作简便、快速、准确,可以用于蛋白琥珀酸铁口服溶液中铁含量的测定。

【关键词】蛋白琥珀酸铁口服溶液;铁含量;2,2’-联吡啶;比色法

Determination of iron in Iron Proteinsuccinylate Oral Solution

LU xiao-ping,YE xin-wu,WANG lin,HANG xia-qing. Jiangsu Jumpcan Pharmaceutical Co., Ltd. 225321,China

【Abstract】 Objective To determine the content of iron in Iron Proteinsuccinylate Oral Solution.Methods Fe(Ⅲ) was dissociated by destruction of Iron Proteinsuccinylate using strong acid firstly, then Fe(Ⅲ) was reduced to Fe(Ⅱ) by reductant. The mixture of Fe(Ⅱ) and 2,2’-bipyridine solution led to the red complex 2,2’-bipyridine[Fe(CH8N2)3]Cl2,and the content of iron was determined by colorimetric method. Results The complex of 2,2’-bipyridine showed absorption maximum at 525nm, Fe(Ⅱ) concentration was in accordance with Beer law from 24.99-149.94 μg/ml. The regression equation of standard curve: Y=0.0065X-0.0279 (r=0.9991). The average recovery was 98.86%-100.02%(RSD=0.60%). Conclusion The method was convenient, quick and accurate for the determination of the content of iron of this product.

【Key words】 Iron Proteinsuccinylate Oral Solution; Content of iron; 2,2’-bipyridine; Colorimetric method

作者单位:225441江苏济川制药有限公司药物研究院

蛋白琥珀酸铁由酪蛋白经琥珀酸酐酰化后与Fe3+络合而制得,用于治疗各种缺铁性贫血症。对该药的铁含量测定方法国内尚未见报道,为更好的控制该药的质量,笔者建立了该药铁含量的测定方法,本法重复性好,结果令人满意。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器 10%盐酸羟胺溶液 精密称取盐酸羟胺10 g置100 ml容量瓶中,加水溶解稀释至刻度,即得。

0.3%联吡啶溶液 取2,2’-联吡啶0.15 g置50 ml容量瓶中,加适量水,加冰醋酸3 ml,振摇溶解,然后加水至刻度,摇匀。

标准铁溶液 精密称取硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2.12H2O] 0.0863 g,置100 ml容量瓶中,加水溶解,加硫酸0.25 ml,加水至刻度,摇匀,即得。供试品溶液 精密量取蛋白琥珀酸铁口服溶液2 ml,置50 ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀。

盐酸羟胺(分析纯);2,2’-联吡啶(分析纯);硫酸铁铵(分析纯);冰醋酸(分析纯);硫酸(分析纯);盐酸(分析纯);80%水合肼溶液(分析纯);以上所用水均为纯化水。UNICO 7200 可见分光光度计 尤尼柯(上海)仪器有限公司

1.2 实验方法 取标准铁溶液2 ml置50 ml量瓶中,加盐酸2.0 ml,摇匀,加10%盐酸羟胺溶液3.0 ml,摇匀,然后加0.3%联吡啶溶液5.0 ml,摇匀,加80%水合肼溶液3.0 ml,摇匀,然后加水至刻度,摇匀,放置30 min,经紫外-可见分光光度法扫描,在525nm波长处有最大吸收。

1.3 样品处理 精密移取标准铁溶液和蛋白琥珀酸铁口服溶液各2 ml,置50 ml量瓶中,加盐酸2.0 ml,摇匀,加10%盐酸羟胺溶液3.0 ml,摇匀,然后加0.3%联吡啶溶液5.0 ml,摇匀,加80%水合肼溶液3.0 ml,摇匀(加水合肼溶液后溶液会发热,应冷至室温,每加一种试剂后都要摇匀),然后加水至刻度,摇匀,放置30 min,得供试品溶液。

1.4 标准曲线绘制 精密称取硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2.12H2O]0.2158 g,置100 ml量瓶中,加水溶解,加硫酸0.5 ml,加水至刻度,摇匀,得含铁249.9 μg/ml的标准铁储备液,分别精密移取1 ml、2 ml、3 ml、4 ml、5 ml、6 ml置10 ml量瓶中,加水稀释至刻度,制得一系列标准铁溶液,各精密移取2 ml分别于50 ml量瓶,按1.3项下“加盐酸2.0 ml”起操作,在525nm波长处分别测定吸光度,以吸光度为横坐标(A),以浓度(以铁计)为纵坐标(C),绘制标准曲线。

2 结果与讨论

2.1 显色原理

先用强酸(盐酸)将蛋白琥珀酸铁破坏,使Fe(Ⅲ)游离出来,用盐酸羟胺将Fe(Ⅲ)还原成Fe(Ⅱ)。Fe(Ⅱ)与2,2’-联吡啶溶液形成红色的2,2’ -联吡啶络合物[Fe(CH8N2)3] Cl2,在波长525 nm处测量红色络合物的吸光度。

2.2 最大吸收波长的选择

按实验方法显色操作,根据2,2’ -联吡啶络合物[Fe(CH8N2)3]Cl2的吸收曲线,测定2,2’ -联吡啶络合物的最大吸收波长为525 nm,因此本实验选择525 nm为吸收波长。

2.3 络合离子的形成速度及稳定性

室温下2,2’ -联吡啶络合物[Fe(CH8N2)3]Cl2可较快的形成并很快达到稳定,络合离子在0.2 h～2 h内保持稳定。本实验进行显色操作30 min后测定,结果理想。

2.4 标准曲线 标准曲线如图1。回归方程为:Y=0.0065X-0.0279r=0.9991线性范围24.99～149.94μg/ml。

图1 标准曲线

2.5 方法精密度的考察

随机抽取一批蛋白琥珀酸铁口服溶液样品按实验方法处理后,进行显色操作,做六批平行实验,结果如表1,相对标准偏差0.60%,方法精密度高。

2.6 方法准确度的考察 随机抽取三批蛋白琥珀酸铁溶液样品,按实验方法处理后进行显色操作,同时做加样回收实验,结果如表2,回收率98.86%～100.02%,方法准确度高。

表1

精密度实验(n=6)

序号123456

铁含量(%)99.14100.0499.1498.6998.2498.99

平均值99.04%

变异系数0.60%

表2

样品测定及加样回收率

序号123456789

Fe加入量(mg)21.3821.3421.4226.6826.7126.6632.0932.0532.03

测得量(mg)21.2821.1321.4326.4526.6726.5531.7332.0331.89

回收率(%)99.5499.03100.0299.1299.8599.5998.8699.9599.56

平均回收率(%)99.50

3 小结

先用强酸(盐酸)将蛋白琥珀酸铁破坏,使Fe(Ⅲ)游离出来,用盐酸羟胺将Fe(Ⅲ)还原成Fe(Ⅱ)。Fe(Ⅱ)与2,2’-联吡啶溶液形成红色的2,2’ -联吡啶络合物[Fe(CH8N2)3] Cl2,利用比色法测定铁含量,标准曲线回归方程:Y=0.0065X-0.0279,相关系数r=0.9991,变异系数0.60%,回收率98.86%～100.02%。本方法操作简便、快速、准确,可以用于蛋白琥珀酸铁口服溶液中铁含量的测定。

参 考 文 献

[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典.化学工业出版社,2005:附录50.

[2] 杜晓霞,武仲涛,孟坚,宋如,张健.两性霉素B中的铁含量测定.中国抗生素杂志, 2008, 33(9): 578-579.

[3] 李纯新,甘韵宏.ADA脱硫液中微量铁的测定-2,2’-联吡啶分光光度法.云南化工,1994,4:35-38.

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