细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值

[摘要] 目的 探讨细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值。方法 对该院收集82例胸腔积液患者，分别行常规细胞涂片和细胞块切片联合免疫组化染色检测，比较两种方法对胸腔积液病理的诊断价值。结果 细胞块切片结合免疫组化阳性率为100%，明显高于常规细胞学涂片的阳性率56.10%，差异有统计学意义（P

[关键词] 细胞涂片；细胞块切片；胸腔积液；免疫组化染色；诊断

[中图分类号] R730.48 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）01（a）-0179-02

胸腔积液的来源主要于非小细胞肺癌、肺腺癌和恶性彩胸膜间皮瘤等，长期以来，胸腔腔积液的诊断主要采用细胞涂片检查，其诊断的敏感度可达78%[1]。但单纯应用细胞涂片进行检查，无法对转移性癌和浆膜腔原发性间皮性肿瘤进行区别，这给临床治疗带来了较大的困难，目前临床研究发现，常规细胞块切片结合免疫组化染色的检测方法效果较好[2]。为探讨细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值，该研究采用常规细胞块切片结合免疫组化染色的检测方法对2010年6月―2012年7月收集82例胸腔积液患者进行诊断，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院呼吸内科收治的82例胸腔积液患者为研究对象，其中男52例，女30例，年龄16～77岁，平均年龄为（46.83±3.09）岁；纳入标准：送检标本均为胸腔积液；每1例患者均给予常规细胞涂片和细胞块切片及免疫组化染色检测。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 患者入院第2天清晨由护理人员收集患者新鲜的胸腔积液100 mL，分为4个试管进行离心，转速：2 500 r/min，离心时间：10～15 min；离心后采用移液枪吸出上清液；取部分沉渣进行常规细胞涂片学检查，合并余下的沉渣，加入戊二醛 2.5 mL 进行固定，离心，转速：2 500 r/min，离心时间：5 min；离心后采用移液枪吸出上清液，取出沉渣，滤纸包好后，常规脱水，用石蜡包埋切片，应用HE染色。

1.2.2 免疫组化 采用 Maxvision 快捷免疫组织化学 S-P法染色，Maxvision 试剂盒及二氨基联苯胺（ DAB） 显色试剂均购于福建迈新有限公司。CEA、CK7、WT-1、CR抗体均购于自基因公司，染色过程严格按照试剂盒说明书进行。

结果判断[3]：CEA 及 CK7 在胞浆或胞浆胞膜同时出现棕黄色为阳性，Calretinin在细胞浆、细胞核和细胞膜或细胞浆膜出现棕黄色为阳性，WT-1 的细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。间皮细胞或腺癌细胞达 10% 以上细胞阳性诊断为阳性。

1.3 统计方法

采用SPSS16.0软件对数据进行统计学分析，计数资料采用χ2检验。

2 结果

2.1 各组阳性率比较分析

细胞块切片结合免疫组化阳性82例，阳性率为100%，常规细胞学涂片的阳性46例，阳性率56.10%，细胞块切片结合免疫组化阳性率明显高于常规细胞学涂片，差异有统计学意义（P

2.2 腺癌与间皮性肿瘤细胞不同抗体表达分析

结果显示，CEA、CK7 是腺癌较为特异性的抗体，而CR 是间皮性肿瘤细胞较为特异性的抗体，各抗体在腺癌细胞和间皮性肿瘤细胞均有交叉表达，见表 2。

3 讨论

胸腔积液是胸部肿瘤的常见并发症[4]，肿瘤患者并发胸腔积液后，使间皮细胞、肿瘤细胞均浸泡于胸腔积液中，长期受胸腔积液的刺激，致使间皮细胞和肿瘤细胞均发生形态学改变，而使两种细胞应用常规方法很难鉴别是出来[5]。传统的检测方法是细胞学涂片，常规细胞学涂片操作易于掌握，且可有效保持细胞的形态特点，但其准确性及敏感性不高，尤其是对恶性胸腔积液患者的诊断准确性较低，约为60%[6]。

免疫组化染色法是利用已标记的特异性抗体来检测细胞内未知抗原，并通过酶所产生的着色反应来显示细胞的活性、定位及其分布。此方法操作易于掌握，阳性物质定位准确、特异性强。同时，细胞块的应用弥补了传统细胞涂片方法单一的缺点，使细胞标本得以保存，具有了连续切片的性质，更利于进行多项检查。

该组研究结果显示，常规细胞学涂片的诊断阳性率为56.10%，这与以往报道相似。采用CEA、CK7、WT-1、CR抗体进行免疫组化检验，结果显示，82例患者均得到了明显的诊断，其诊断阳性率为100.00%；说明细胞块切片联合免疫组化染色可显著提高胸腔积液诊断的阳性率，为临床的治疗提供了理论参考，值得临床广泛推广和应用。

[参考文献]

[1] 斯向东，李庆.细胞块切片及免疫组化在恶性浆膜腔积液诊断中的应用体会[J].中国现代医生，2011，49（28）：114-115.

[2] 张志刚，梁希军，崔东辉，等.间皮细胞、癌胚抗原、角蛋白、波型蛋白在胸腔积液临床诊断中的作用[J].中国全科医学，2007，10（24）：2080-2081.

[3] 侯刚，尹燕，韩丹，等.胸腔积液脱落细胞免疫组化染色对肿瘤来源鉴别诊断价值的探讨[J]. 中华肿瘤防治杂志，2012，19（21）：1647-1648.

[4] 唐应成，梁利斌，杨瑞仙，等.胸腔积液细胞块免疫组化染色的病理诊断价值[J]. 第三军医大学学报，2012，34（15）：1568-1569.

[5] 谢深科，舒千玉，姚军.细胞块免疫标记在胸腹水细胞病理诊断与鉴别诊断中的价值[J].中国医疗前沿，2011，6（4）：73-74.

[6] Swiderek J，Morcos S，Donthireddy V，et al. Prospective study to determine the volume of pleural fluid required to diagnose malignancy[J].Chest，2010，137（1）：68-73.

（收稿日期：2013-11-05）