化学发光法范文

化学发光法范文第1篇

关键词：POCT法；化学发光法；血HCG；检测

HCG检测在临床上用途广泛，多用于早孕检测，胚胎发育检测和宫外孕诊断中，也可用于葡萄胎，绒毛癌等异常妊娠的诊疗中[1]。十分具有临床价值。一般进行血HCG检测需要采用化学发光法检测，化学发光法检测操作较为繁琐，且需要使用专用仪器，结果也较慢，而近年新兴的检测方法POCT则更加简便快速，且无需购买专用的大型检测用仪器，在床边即可检测，如可以保证其检测的正确性、精密度，则可以进行临床应用，适宜于基层单位[2]。本文现分析POCT法定量读数仪与化学发光法检测血HCG的结果，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料 我院2011年12月1日～2014年12月1日妇产科所采集的200例受检者血HCG标本，其中161例来自门诊，39例来自住院部。均为女性，年龄19～46岁，平均年龄（26.7±4.6）岁。

1.2方法

1.2.1仪器与试剂 POCT法采用采用奥普公司U2型金标斑点定量读数仪，艾博生物医药（杭州）有限公司生产的人绒毛膜促性腺激素（hCG）检测试剂，化学发光法采用Beckman Access-II型化学发光仪和配套的试剂、定标液、质控物、校准液。

1.2.2检测方法 首先进行精密度试验，选用化学发光仪配套的质控物1份（HCG浓度均值9382mIU/ml），选用2份临床高值（血HCG浓度在8000～15000mIU/ml为高值；低值100～300mIU/ml）标本和化学发光仪配套质控物朔源的自制质控物进行批内的检测[3]。然后进行批内的检测，采用以上三种水平的质控物，使用两种检测方法在同一天分别连续进行20次检测，进行两种方法检测的均值、标准差、精密度计算。再进行批间的检测，以上三种水平质控物每天上午测定1次，在下午时再测定1次，进行连续20d的检测，并进行两种方法检测的均值、标准差、精密度计算。

1.3统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示t检验，计数资料采用χ2检验，以P

2结果

POCT法检测批内精密度均值为6.40%，化学发光法批内精密度均值为5.47%，两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）。POCT法检测批间精密度均值为8.28%，化学发光法检测批间精密度均值为6.81%，两者比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1，表2。

3讨论

POCT属于快速实验的一种，可用于血HCG检验，且其优势在于出结果速度相当快，且操作十分简便，可以快速的进行血清和尿液中的HCG含量，适用于急诊、门诊等需要快速检测的院内部门，也适用于基层医院[4]。同时POCT法花销较低，甚至可在社区医疗中普及，这是其一大优势所在[5]。但POCT法检测血HCG结果一度遭到质疑，POCT能否相对正确的提供血HCG含量是目前值得探讨的问题[6]。

本研究进行了对照精密度试验，将POCT法检测结果与十分准确的化学发光法进行对比，结果显示POCT法检测批内精密度均值为6.40%，化学发光法批内精密度均值为5.47%，POCT法检测批间精密度均值为8.28%，化学发光法检测批间精密度均值为6.81%，数据十分接近且无统计学差异，说明了POCT法检测血HCG定量虽然正确性并未完全符合化学发光法结果，然而也与其相当，在这样的精密度下，已经可以满足大多数患者的诊疗需求[7]。临床工作中，血HCG数据一般运用于孕后3个月内检测，而此时HCG的数值增长幅度很大，因此很容易了解到其趋势呈总增长或降低，数据处在相应妊娠天数应有区间内即可，过分的追求其精度并无必要，因此固然POCT法存在一定，也可满足临床所需，同时可以通过质控系统的建立，进一步提高POCT法检测血HCG的准确性，使其发挥更大的作用。但POCT法虽然简单快捷，结果比较准确，但也并不能作为血HCG的准确值进行使用，需要注意，一般用法为POCT床边检测，以供医护人员了解近段时间内患者血HCG升降情况，但疾病诊断以及患者疗效评定需要用到血HCG指标时，则不推荐采用POCT进行检测。

综上所述，POCT法检测血HCG精密度与化学发光法相似，完全可以满足临床需求，且其具有检测快速，花销低等优势，在规范的操作以及完善的质控系统下，可发挥重大的作用。

参考文献：

[1]高晓霞.196例POCT法与化学发光法血HCG检测结果的分析[J].中国医药导刊，2012，14（8）：1412-1413.

[2]黄芬芬，蔡云，邓春艳，等.两种β-HCG血清学检测方法比较[J].中国社区医师（医学专业），2012，14（2）：280.

[3]万晓燕，狄文，刘芳荪，等.阴道超声检查联合血β-HCG检测在输卵管妊娠药物治疗中的作用[J].实用妇产科杂志，2013，29（10）：762-765.

[4]武红.血β-HCG+孕酮（P）检测结合阴道超声诊断早孕结局的临床观察[J].中国医疗前沿，2013，（22）：77-78.

[5]莫晓媚，李化会，魏平平，等.标本稀释液对电化学发光法检测血清人绒毛膜促性腺激素结果的影响[J].中国临床保健杂志，2013，（6）：604-606.

[6]陈广新.放射免疫分析法与化学发光法检测血清HCG效果对比分析[J].国际医药卫生导报，2012，18（10）：1505-1506.

化学发光法范文第2篇

【关键词】 化学发光法；研究进展；综述

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.686 文章编号：1004-7484（2012）-08-2967-02

1 化学发光概述

所谓化学发光（chemiluminescence，CL）实际上是产生于化学反应过程中的一种光辐射。化学发光法的基本原理就是：化学反应的反应物或生成物吸收了反应释放的化学能由基态跃迁至电子激发态，再由激发态的最低振动能级返回基态，同时将能量以光辐射的形式释放出来，产生化学发光。

2 常见化学发光体系及其应用

2.1 鲁米诺化学发光体系 鲁米诺是1928年Albrecht首先发现的一种发光试剂。鲁米诺属肼类有机化。由于鲁米诺及其衍生物性质稳定，结构简单，易于合成，且无毒不污染环境，水溶性较好，从而成为研究最多，使用最早，应用范围最广泛的化学发光试剂之一。它在碱性溶液中可以被强氧化剂氧化而处于激发态，激发态回到基态时同时发射425nm的蓝光，所以鲁米诺的发光体都是3-氨基邻苯二甲酸根。

2.2 吖啶类化合物的化学发光体系一光泽精化学发光体系 光泽精（Lucigenin，LC）化学发光体系是一个性能优良、应用广泛的化学发光体系，在国内对该体系的研究与应用还很少。国外对LC发光体系作了较深入、系统的研究。和鲁米诺一样，光泽精在碱性介质中被H2O2氧化，裂解为激活态，发出蓝色的光，其发光效率也较高，只是氧化产物N-甲基吖啶酮难溶于水，常沉积在反应器壁上，为此常加入表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）使之增活。

2.3 过氧化草酸酯类化学发光体系 过氧草酯类化合物的化学发光反应被认为是目前效率最高的非酶催化的发光反应，最大量子产率可达34%。这类反应通常由草酸酯与一种氧化剂作用产生高能中间体，并由此中间体激发合适的荧光剂而产生化学发光。

3 化学发光法的研究进展

3.1 新化学发光体系和新型发光试剂的研究 作为化学发光法的研究的一个发展方向来说就是要探索新的化学发光体系，并在此基础之上开发新型发光试剂。这显然是十分重要的发展方向。比如，在化学发光试剂的研究方面，我们可以在荧光物质方面进行一些创新，针对荧光和化学发光之间的经验规则我们可以对类似结构进行适当的应用和改进，可以引入鳌合基团，借助鳌合基团的选择性来优化化学发光。这样我们就可以得到了具有较好选择性的化学发光新试剂。按照这种创新思路，鲁米诺及其衍生物逐渐发展起来，并在临床实践过程中得以广泛的应用。

3.2 试验装置的微型化、集成化和专一化 从试验装置的发展上来看，微型化、集成化和专一化将是以后的发展趋势之一。针对化学发光传感器的研究从发展趋势上，“将化学发光试剂固定”逐渐要成为今后的发展趋势之一。

3.3 其它技术在化学发光分析中的应用 对于其他技术而言在今后的应用中可以联合多项技术进行全方位的发展和研究。可以利用的技术有毛细管电泳、流动注射技术、微透析技术、传感器技术和芯片技术等等，同时可以借助相关的先进仪器进行改造和完善。

参考文献

[1] Karuppannan S，Chambron JC.Supramolecular chemical sensors based on pyrene monomer-excimer dual luminescence.Chem Asian J，2011，6（4）：964-84.

[2] 孔海霞，刘萍，田云霞，等.应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸（FT3）化学发光法.第三军医大学学报，2012，34（3）：201-205.

[3] 周考文，顾雪梅，崔晓超，等.毛细管电泳电致化学发光法测定家犬体内甲氧氯普胺的血药浓度.化学学报，2011，69（2）：221-225.

[4] Watanabe N，Nagatomo R，Okubo S，et al.[Evaluation of latex agglutination test for anti-treponemal antibody in comparison with chemical luminescence tests].Rinsho Byori，2011，59（2）：115-20.

[5] 吴婴.放射免疫分析与电化学发光法测定血清FT3、FT4结果分析.放射免疫学杂志，2010，23（1）：29-30.

[6] 丁保军，杨凤林，朱珍亮，等.流动注射-化学发光法定量测定同一水域中的腐殖酸.光谱学与光谱分析，2008，28（3）：530-533.

化学发光法范文第3篇

【摘要】流动注射化学发光法在近些年来得到了迅速发展，因为其分析的速度快，成本低廉，并且线性广泛，需要的仪器设备简单。它对于测定生物和药物中的金属、非金属、无机盐以及蛋白质内的各种化学物质有些高敏感度。本文把流动注射化学发光法能够检测的六个部分中的药物检测作为重点进行论述。

【关键词】流动注射；化学发光；药物分析

1流动注射化学发光法的概念

流动注射即flow injection是丹麦的著名学家Ruzicka和Hansen提出的，它的出现摆脱了溶液化学分析平衡理论，，是非平衡条件下的化学分析为可能。因为流动注射的范围广，检测分析中包括高灵敏度、高选择性但不稳定的反应、动力学反应以及化学发光和生物反应，因此它能够得到一个平衡的体系无法提供一个更为广泛的信息［1］。流动注射分析是一种容易实现现场与邻近实验室连线的自动分析系统［2］。它的优点在于所需要的仪器少，并且设备简单，灵敏度高，试剂量也很少，并且反应度和灵敏度高，能够检测的维度广，被各个领域应用，成为一个检测的主流技术。

2 流动注射化学发光法药物分析

药物是人们日常生活不可缺少的必备品，因此药物安全是现在社会是人们热点关注的问题，因为药物分析研究本身需要检测仪器的高敏感度，并且测定量一定要精确，而且检测仪器繁重并且所需要的药剂量高，而流动注射化学发光法却打破了大仪器、大药剂量的检测方式。它给药物的流动注射化学发光最有效的痕量分析技术。

3 流动注射化学发光法的应用

3.1流动注射化学发光法在农药分析检测应用

农药作为现在农业生产必备的生产资料，在防御病虫害，保护农作物生长以及生产量有着非常重要的作用。但是农药因为药物中的成分以及大量使用给人类身体健康以及动物身体健康都有着胃寒和影响，即便对植物本身也有着影响。因此，需要流动注射化学发光法进行农药成分的测定以及农作物的农药残留检测，该方法主要应用于农药分析中一下物质，如表1：

表1application of flow injection chemiluminescence in pesticide analysis

测定药物 测定样本 试剂 反应介质 线性范围 检出限

氨基乙酸 药剂 荧光素-NBS C(NaOH)=0.17mol・L-1 0.1～100.0 3.0×10-2

异丙威 杀虫剂 连二亚硫酸钠 C(H2SO4)mol・L-1 0.1～10.0 8.0×10-2

抗蚜威 水样 罗丹明B-Cu2+-H2O2 C（多聚磷酸)mol・L-1 0.1～10.0 5.8×10-2

敌敌畏 蔬菜样品 鲁米诺- H2O2-OP C(NaOH)=0.04 mol・L-1 0.08～25.0 2.2×10-2

代森锌 杀菌剂 荧光素-NBS C(NaOH)=0.02 mol・L-1 0.9～700.0 3.0×10-1

敌百虫 杀菌剂 鲁米诺- H2O2 pH(NaOH-NaOCO3)=1.8 0.01～10.0 3.2×10-3

乐果 合成样品 鲁米诺- H2O2 pH(NaOH)=12.0～12.5 0.01～10.0 8.0×1032

敌草快 除草剂 铁氰化钾-奎宁 C(NaOH)= 0.1mol・L-1 0.01～0.6 2.0×10-3

注：NBS：溴代琥珀酰亚胺；OP；聚乙二醇辛基苯醚

3.2流动注射化学发光法在医用药品分析中的应用

在现代社会中，人们更加关注自身的身体健康，医药分析显得极为重要，流动注射化学发光法对于药效作用机制以及动力学和吉利等方面的作用，并且对于一些计量敏感，副作用多的药物成分进行分析是一般科学实验室的器材的灵敏度无法比拟的，而流动注射化学发光法却能够用简单的仪器和小的检测药剂量，分析出医药分析，如图2所示：

表2application of flow injection chemiluminescence in pesticide analysis

测定药物 测定样本 试剂 反应介质 线性范围 检出限

仑氨西林 合成样品 鲁米诺- H2O2 C(NaOH)=0.05mol・L-1 0.1～10.0 5.6×10-2

白藜芦醇 药剂 NCS-鲁米诺 C(NaOH)=0.1mol・L-1 0.0025～0.08 8.0×10-2

邻二苯酚 血清 KIO4-鲁米诺 C(NaOH)=0.1mol・L-1 0.1～10.0 1.5×10-4

舒必利 片剂 铈（Ⅳ）-亚硫酸钠 C(C2H402)=0.1mol・L-1 0.0084～0.12 3.1×10-3

异烟肼 药剂 荧光素-NBS C(NaOH)=0.01 mol・L-1 0.1～10.0 6.0×10-3

去乙酰毛花苷 注射剂 KIO4-鲁米诺 0.01～10.0 3.2×10-3

强力酶素 尿样 罗丹6G-Ce（Ⅳ） C(H2SO4)= 0.02mol・L-1 7.9×10-7～1.9×10-5 8.2×1032

诺氟沙星 胶囊 KIO4-鲁米诺 C(NaOH)=2.0 mol・L-1 0.006～1.0 9.0×10-4

注：NCS：N-氯代丁儿酰亚胺；*标注数字单位为：mol・L-1

4展望

流动注射化学发光法的应用领域在药物分析领域不断的延伸发展，因为它具有高灵敏性，检测体系高尖端，能够开发新的搞笑发光试剂以及发光体系。此外流动注射化学发光分析技术和其他的技术的联合使用更够满足更多化学、免疫、矿物质、临床医药等领域。由此可以看出流动注射化学发光法对于药物分析领域的发展十分广阔。

参考文献

［1］ Waseen,A，Yaqoob M ，Nabi A．Talanta,2007，71(1)：56．

［2］ Motyka K，njia A，Mikusgka P，et a1．Talanta，2007，71(2)：900．

［3］ Zhang S S,Zhong H ，Ding C F Ana1．Chem．，2008，80(19)：7206．

［4］ HAN Xiao-zhan(韩小战)．Shanxi Science and Technology(山西科技)，2007，6(3)：127．

［5］ JIN Shao-xiang(金少祥)．Physical Testing and Chemical Analysis Part B：Chemical Analysis(理化检验一化学分册)，2009，45(2)：238．

［6］ Qu P，Yan S C，I．u H，at a1．Microchim Acta。2008，163(3―4)：321．

［7］ Feng Q Z，Zhao I X。Yan W ，et a1．Ana1．Bioana1．Chem．，2008，391(3)：10739．

［8］ SU I．ing，ZHANG Hai―tao(苏苓，张海涛)．Environmental Science and Technology(环境科学与技术)，2009，32(4)：112．

［9］ Iiu X M，I i S Y，Zhang J S，et a1．Journal of Chromatography B，2009，27(1)：3144．

［10］ XUE Guang-rong，XIA Min-yong(薛光荣，夏敏勇)．Chemical Analysis And Meterage(化学分析计量)，2008，17(1)：38．

化学发光法范文第4篇

关键词：化学发光分析；植物激素；应用进展

0 引言

化学发光分析法是一种高灵敏的微量及痕量分析法，具有仪器设备简单、灵敏度高、操作方便、易与其他技术联用和实现自动化显著等优点，在药物分析、食品分析环境监测等领域的应用日益广泛。植物激素作为内源性植物生长调节剂，在植物的生长发展中具有重要研究意义，其测定方法受到国内外广大研究者的关注。化学发光分析法以高灵敏痕量分析优势在植物激素分析测定中具有重要应用。本文介绍了化学发光分析的原理，并综述了化学发光分析法植物激素分析中的应用进展。

1 化学发光分析

化学发光分析法是依据某一时刻化学发光反应产生的辐射光强来确定参与反应的相应组分的含量的分析方法。化学发光体系是化学发光法的应用前提和基础。高灵敏度、高选择性的化学发光体系的选择和使用是建立满意化学发光分析方法的关键。随着化学发光分析技术的成熟及其与其他技术的联用迅速发展，人们已发现了许多新的化学发光体系，目前常见的化学发光体系有：鲁米诺化学发光体系、高锰酸钾发光体系、Ce（IV） 发光体系、过渡金属超常氧化态发光体系等。

2 化学发光法在植物激素分析的应用

植物激素主要有6类：生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯和油菜素甾醇。植物激素在植物体内含量甚微，分离时易破坏，掌握植物体内激素的含量变化规律，可更好地控制植物的发育，但其在使用的同时，对环境、以及人类的健康的影响亦日趋严重，已引起了人们广泛的关注[1]。化学发光分析法具有线性范围宽、灵敏度高、仪器设备简单和分析速度快等优点，其在实际样品中植物激素的含量检测中已有文献报道。张韶虹等[2]基于吲哚乙酸（IAA）对 [Ru（phen）32+]-Ce（Ⅳ）化学发光体系的发光增强作用，建立了一种化学发光直接检测IAA的新方法，该方法实现了合成样品中IAA含量的准确测定。Xi等[3]采用高效液相-化学发光法（[Ru（phen） 32+]-KMnO4体系）实现了绿豆芽中的吲哚乙酸和脱落酸的含量检测，检出限分别为0.02 μg/mL、0.2 μg/mL。Neves[4]等采用Ce（Ⅳ）-HNO3-β-环糊精为发光体系实现了环境水样中IAA的含量测定，检出限为0.1mg/L。刘丽珍等[5]利用铁氰化钾-鲁米诺体系分析测定了土壤中IAA的含量，方法的检出限5.8×10-10 mol/L。米娟等[6]采用固相萃取-化学发光法测定Leukamenin E处理前后拟南芥中IAA含量的变化，回收率为90.9～100.9%。马桂贤等[7]采用铁氰化钾化学发光体系实现了土壤和池塘水中IAA的含量测定，检出限为3.0×10-8mol/L。Han等[8]采用高锰酸钾-甲醛体系对生物样品和土壤提取液中IAA进行了含量测定，检出限为1.0 nM。周国华等[9]发展了一种简化的磁性免疫分析方法，结合CdSe/ZnS纳米粒子放大化学发光信号，实现了脱落酸的高灵敏检测，脱落酸的检测范围为1pM到10 nM。

3 研究展望

随着化学发光分析法的应用日益广泛，化学发光分析法与流动注射系统、免疫技术、液相色谱等技术的联用必将拓宽化学发光分析法在植物激素分析中的应用，从而在农业和工业生产中起到重要作用。

参考文献：

[1] 张冬敏，李亮，钟凤林.吲哚乙酸在蔬菜上的应用[M].现代农业科技，2011（24）： 204-205.

[2] 张韶虹，郗 娟，何治柯. Ru（phen）32+-Ce（Ⅳ）化学发光体系检测吲哚乙酸的研究[J]. 分析科学学报. 2005， 4（21）： 387-389.

[3] Xi ZJ， Zhang ZJ， Sun YH， Shi ZL， TianW. Determination of indole-3-acetic acid and indole-3-butyric acid in mung bean sprouts using high performance liquid chromatography with immobilized Ru （bpy） 32+-KMnO4 chemiluminescence detection.Talanta，2009，79（2）： 216-221.

[4] Neves A I P， Albert-García J R， Calatayud J M.Chemiluminometric determination of the pesticide 3-indolyl acetic acid by a flow injection analysis assembly. Talanta，2007，71（1）： 318-323.

[5] 刘丽珍，韩素琴.鲁米诺-铁氰化钾化学发光体系测定吲哚乙酸[J].山西师范大学学报（自然科学版），2009（02）：74-77.

[6] 米娟，周敏，丁兰，李玉杰，刘彩云，马永钧，陈慧. 固相萃取-化学发光法测定植物中的吲哚乙酸. 分析试验室.2011（8）： 44-47.

[7] 马桂贤，赵守苗，王会丽，赵盼，韩素琴. 铁氰化钾化学发光体系测定吲哚-3-乙酸[J].山西师范大学学报（自然科学版），2009（4）：63-65.

[8] Han S. Chemiluminescence determination of indole derivatives in human body fluids and soil by flow injection analysis using potassium permanganate. Microchim. Acta， 2010，168（1）： 169-175.

化学发光法范文第5篇

【关键词】 化学发光； 放射免疫； 胰岛素

中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2013）28-0068-01

胰岛素可以分解血糖，对于治疗糖尿病等症状有很好的功效，所以测试血清中胰岛素的含量有非常重要的医学意义。目前盛行的两种检测血清中胰岛素的方法为化学发光法和放射免疫法，它们的费用、精准度都不相同。本研究主要针对这两种方法作出对比和分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取笔者所在医院于2012年8月-2013年2月收治的糖尿病患者90例，均接受放射免疫法检测、化学发光法检测胰岛素。其中男49例，年龄19～68岁，平均（43±5）岁；女41例，年龄21～70岁，平均（41±4）岁。

1.2 检测方法

先用真空干燥管采患者的静脉血，且于室温下离心约10～20 min以后置于冷藏室保存[1]。

1.2.1 化学发光检测法 本研究中使用的化学发光检测仪器为罗氏公司生产的E170化学发光仪，它有极高自动化程度和高速准确的测试性能。将所采样本加入到反应器中混合，再记下显示读数[2]。

1.2.2 放射免疫检测法 本研究中使用的放射免疫检测仪器为先进技术工业公司生产的CM570801分析仪，它性能好、检测灵敏度高。因本过程涉及到放射性物质，故须在特定环境中由专业工作人员进行检测。

1.3 统计学方法

本研究所得结果由SPSS 12.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，进行t检验，以P

2 结果

化学发光法和放射免疫法的批内变异系数、批间变异时间比较差异无统计学意义（t=1.78，P>0.05）。化学发光法和放射免疫法检测结果虽有差异，但是它们之间的相关度却很高，相关系数r值为0.994。详见表1。

3 讨论

近年来人们的生活水平和生活方式都发生了很大的变化，糖尿病患者逐渐增多。胰岛素作为胰岛分泌的可以降低血糖、促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素，其地位非常重要，若血糖中胰岛素含量太低则会引发糖尿病。所以检测血清中胰岛素的含量有非常重要的医学意义[3]。目前临床上最常用的检测血清中胰岛素含量的方法是化学发光检测法和放射免疫检测法，两者效果皆很好而且特点各异。应用化学发光检测法和放射免疫检测法检测同一份标本，两个结果之间有显著性差异，但两种方法检测结果之间高度相关。

化学发光检测法优点为：设备简单，环保无污染等，以化学发光作为标记物进行定量检测，其试剂具有稳定和无毒的优点。但它也有自身的缺点，如试剂价格较昂贵、需要特殊的设备来进行检测[4]。放射免疫检测法优点主要表现在适用范围、使用复杂程度等，以及特异性很好。它的缺点：只能测定特定物质、放射性物质因有半衰期保存的时间较短、放射性物质会造成环境污染和机体损伤等[5]。本研究结果显示，化学发光法和放射免疫法的批内变异系数、批间变异时间比较差异无统计学意义（t=1.78，P>0.05）。化学发光法和放射免疫法检测结果虽有差异，但是它们之间的相关度却很高，相关系数r值为0.994，因此所测得的结果均是可信的。

综上所述，放射免疫和化学发光检测方法均有可取之处和局限性，两者在检测时间、检测效果以及费用等方面皆不尽相同，临床上可根据具体情况来选择检测方法。另外，若能将两者结合，充分发挥其优点，也许可以有更好的效果。

参考文献

[1]鲁彦，岳建云，苑芳，等.化学发光法和放射免疫法检测胰岛素[J].医学研究杂志，2012，41（7）：40-41.

[2]De Vries M G，Westerink B H C，Verporte E，et al.Development of micro-fluidic glucose sensing system based on an enzymatic micro-reactor and chemiluminescence detection[J].Science China（Chemistry），2012， 4（24）： 515-523.

[3]吕莉，冯凭.不同血糖水平人群血清脂联素水平与胰岛素抵抗的关系[J].现代诊断与治疗，2008，1（22）：9-11.

[4]孙振亚，郑定容，杨庆，等.化学发光免疫法与放射免疫法检测血清PSA的比较[J].中国热带医学，2010，24（9）：1660-1661.

[5]John Pickup.ODL insulin pump therapy and continuous glucose monitoring[J].Oxford Medicine，2011，13（78）：1783-1786.

化学发光法范文第6篇

关键词化学发光法孕酮试剂

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.27.186

孕酮(4-孕烯-3，20-二酮)是一个C21类固醇激素，分子量314.5。孕酮是人体内分泌的一种重要的性激素，未孕女性的孕酮主要由黄体分泌，孕妇则主要由胎盘分泌。男女两性的肾上腺皮质及男性的也分泌少量孕酮［1］。孕酮的异常分泌与经前期紧张、子宫内膜的不规则脱落、痛经及黄体功能不全有关。血清孕酮浓度的测定在临床上用于判断有无排卵及未孕女性的黄体功能，对鉴别诊断宫内早早孕、先兆流产、难免流产及异位妊娠有重要价值［2］，对判断男性生殖功能状态也有一定作用。郑州安图生物生产的化学发光孕酮检测试剂，采用竞争抑制法，在固相微孔板上包被羊抗鼠IgG的二抗，操作时将特异性抗孕酮抗体溶液、HRP标记的孕酮溶液和血清样本一起加入到微孔板内，室温孵育60分钟后，经过清洗，加入化学发光底物，在检测仪上进行读数，检测信号值与血清标本中的孕酮含量成反比。本文对该试剂的灵敏度、标准曲线线性、特异性、重复性、稀释准确性进行检测评价并与进口贝克曼化学发光孕酮检测试剂进行比较并综合分析［3］。现将试验结果报告如下。

资料与方法

随机抽样送检血清标本40份，-20℃保存。

仪器：LUMO化学发光仪、IWO洗板机，DXI800化学发光仪。

试剂：孕酮发光定量检测试剂盒，DXI800配套试剂。

方法：灵敏度计算，测定20份0值标准品，计算测定发光信号值的(x±S)，灵敏度=(x±S)回算的浓度值；特异性计算，测定睾酮(20ng/ml)、雌二醇(1000pg/ml)，回算浓度值；重复性，3次测定同3份血清标本，计算其3次测定结果的变异系数CV%；稀释回收率，用稀释液稀释两份高值标本，回收率=实测值/理论值×100%。操作严格按照试剂说明书进行，试验标本收集后，-20℃保存，室温复溶后统一测定。

统计学处理：采用SPSS10.0统计分析软件进行统计分析。

结果

灵敏度、标准曲线线性：国产孕酮检测试剂的灵敏度较高，满足临床需求，用logit-log的曲线拟合方式对标准曲线进行线性拟合R20.995以上。

特异性：特异性即交叉反应性，睾酮含量20ng/ml，雌二醇含量1000pg/ml时孕酮测定结果为0.10ng/ml和0.15ng/ml，相当于与20ng/ml的睾酮和1000pg/ml的雌二醇交无交叉反应。

重复性：3份血清标本，进行3次测定，3份标本的变异系数分别为8.64%、4.57%、5.60%，均＜10%。

稀释回收率：把两份血清标本用稀释液倍比稀释后，测定其孕酮含量，各稀释比的测定稀释回收率85%～110%。

被评价试剂与对比试剂检测结果的比较：对随机抽样的40份标本用两种试剂进行同时测定标本中孕酮含量，并将两者测定结果进行统计学分析，r2=0.9790，直线回归方程y=1.0067x+0.2636，P＜0.001，两者呈显著相关性。

讨论

临床检测血清孕酮的方法有放射免疫法、酶联免疫法、化学发光法、电化学发光法、磁微粒化学发光法等。酶联免疫法由于其灵敏度较低，已基本不再应用。放射免疫法，存在着放射性核素污染，试剂保存期短等缺点，目前也较少有医院使用。占主流的是化学发光法，相应试剂和仪器主要有国产和进口贝克曼、雅培、罗氏等，进口试剂价格昂贵，本文旨在对国产试剂进行评价，即能够有较好的性能，满足临床应用，又有较低廉的价格。本次评价的国产化学发光试剂，是一种基于微孔板式化学发光方法。结果显示，被评价的国产试剂的灵敏度0.09ng/ml，与20ng/ml的睾酮、1000pg/ml的雌二醇无交叉，三份标本的重复测定结果变异系数分别为8.64%、4.57%、5.60%，均＜10%，稀释回收率85%～110%，与进口对比试剂的相关系数r2=0.9790，P＜0.001，表明该国产试剂在灵敏度、特异性、重复性、稀释回收率等指标上能满足临床测定的要求，与进口对比试剂具有显著的相关性和符合性。国产化学发光孕酮检测试剂既能满足临床需要又能符合国情降低患者负担，在本院使用过程中，比较稳定，值得进一步推广使用。

参考文献

1杨钢,主编.内分泌生理与病理生理学.天津:天津科学技术出版社,2000:465-572.

2来婷,蒋庆春.血清孕酮在鉴别宫内早早孕、先兆流产、难免流产及异位妊娠的价值［J］.中国临床实用医学,2007,1(3):34-36.

3吴端宗,林国诚.ELISA测定血清LH、FSH的方法学评价［J］.现代检验医学杂志,2002,17(2):15-16.

化学发光法范文第7篇

[关键词] 化学发光法;CA125;卵巢肿瘤

[中图分类号] R737.31 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)06-81-02

CA125的主要用途是协助诊断卵巢癌,估计疗效和监测病程[1]。随着化学发光仪的普及,化学发光法检测血清CA125已成为鉴别卵巢肿瘤性质的常规项目。然而,由于化学发光法检测CA125的高灵敏度和低特异性,导致了较高的假阴性和假阳性率。现分析锡矿山中心医院2006年8月～2009年8月的化学发光法CA125检测病例223例,以期让CA125更好地应用于临床。

1临床资料

1.1一般资料

本组病例共223例,为2006年8月～2009年8月在娄底市锡矿山中心医院妇产科住院患者,年龄最小者8岁,最大者61岁,平均年龄37.2岁。

1.2分析方法

全部病例手术前均行化学发光法CA125检测,以65U/mL作为界限,≥65U/mL为阳性,

1.3统计学处理

计数资料采用χ2检验,P

2结果

该223病例,手术后经病理确诊,卵巢浆液性癌7例,浆液性囊腺瘤62例,黏液性癌2例,黏液性囊腺瘤86例,单纯性囊肿25例,黄体囊肿29例,其他肿瘤12例。化学发光法检测浆液性癌阳性6例,浆液性囊腺瘤阳性41例,黏液性癌阳性2例,黏液性囊腺瘤34例阳性,单纯性囊肿8例阳性,黄体囊肿2例阳性,其他5例阳性;免疫组化CA125浆液性癌7例阳性,浆液性囊腺瘤62例阳性,其他2例阳性。经χ2检验,化学发光法检测CA125与免疫组化CA125诊断卵巢肿瘤差异具有显著性(χ2= 6.95,P

3讨论

CA125作为卵巢癌的首选标志物,是1983年由Bast等从上皮性卵巢癌抗原检测出可被单克隆抗体OC125结合的一种糖蛋白。95%的健康成年妇女CA125水平≤35U/mL,如果患者血清CA125的水平是基线水平的两倍,就应立即进行物理检查,如阴道超声和CT检查;CA125迄今为止是用于卵巢癌的早期诊断、疗效观察,如果以65U/mL为界限,ⅢⅣ期癌变准确率可达100%。CA125临床正常参考范围为血清

CA125是一种相对分子量为200KD的糖蛋白,在血清中CA125以群体形式存在,普遍分布于胸膜、心包、腹膜、子宫内膜、生殖道和系膜等间皮组织细胞表面。当这些部位发生恶性变或受到炎症刺激时,血清CA125水平将显著升高。浆液性腺癌CA125的升高幅度比黏液性腺癌更明显;在复发监测中,CA125的升高可早于临床几个月;在消化道恶性肿瘤如胰腺癌、肝癌、胃癌、肠癌,以及慢性胰腺炎、肝硬化、肺腺癌、特别是浆膜腔结核[2]、盆腔炎性病变、子宫内膜异位症时,血清CA125水平亦可升高。在卵巢良性囊腺瘤和恶性囊性上皮瘤的穿刺液中,CA125水平可明显升高。因此,CA125不能作为卵巢癌单一的检测指标。鉴于CA125的非特异性,在许多良性和恶性病变中,均显示水平升高[3]。Bilgin等[4]回顾分析728例妇科癌症病人中10例腹、盆腔病变误诊为晚期卵巢癌的病例,该10例因疑似晚期卵巢癌实施手术,经各项检查显示,10例有数种腹、盆腔病变,如积液、肿块、肥厚等,血清CA125水平升高,其中6例已临床确诊卵巢癌,但穿刺结果为良性细胞,实施剖腹探查,病理确诊为结核,抗结核化疗后2个月,全部治愈,CA125恢复正常。对于腹膜结核被误诊为晚期卵巢癌的病人,腹部穿刺不能排除结核,血清CA125水平升高不能鉴别诊断。刘洋等[5]在临床实践中发现,大量结核病人血清CA125水平也呈升高趋势,结核病人血清CA125水平明显高于正常对照组,阳性率高达85.7%,经抗结核治疗后,随病情的缓解CA125水平呈下降趋势,病愈后CA125水平恢复到正常参考范围内。

CA125起源于胎儿体腔上皮组织,免疫组化证实,CA125在胎儿体腔上皮有表达。CA125是卵巢浆液性癌一种癌蛋白,卵巢上皮性肿瘤中,浆液性癌、内膜样癌、透明细胞癌、小细胞癌CA125阳性。在病理诊断中,CA125用于区别卵巢原发性和转移性癌,主要是证实卵巢特异性抗原或非卵巢性抗原存在,有报道CA125抗原表达有实用价值,因为此抗原仅存在于苗勒管衍生的上皮组织如卵巢上皮、输卵管上皮、子宫内膜和宫颈内膜上皮等,这些组织发生的癌CA125呈阳性表达,但黏液性癌一般没有表达。卵巢其他的肿瘤如性索-间质肿瘤、卵巢的生殖细胞肿瘤、神经外胚层肿瘤及伴有肝样分化的肿瘤免疫组织化学CA125阴性[6]。

血清CA125的临床意义:(1)卵巢癌病人血清CA125水平明显升高,手术和化疗有效者CA125水平很快下降,若有复发时,CA125升高可先于临床症状之前。(2)其他非卵巢恶性肿瘤也有一定的阳性率,如乳腺癌40%、胰腺癌50%、胃癌47%、肺癌44%、结肠直肠癌32%,其他妇科肿瘤43%。(3)非恶性肿瘤,如子宫内膜异位症、卵巢囊肿、盆腔炎、胰腺炎、肝炎、肝硬化等虽有不同程度升高,但阳性率较低。(4)胸腹水中发现有CA125升高,羊水中也能检出较高浓度的CA125。(5)早期妊娠头3个月内也有CA125升高的可能。(6)行经期、子宫纤维变性、急性输卵管炎、胸膜炎和心包感染等也稍高[7]。

化学发光检测血清CA125,受体腔上皮、卵巢、输卵管、子宫内膜上皮以及间皮等多种抗原因素的影响,灵敏度高而特异性差,在许多病理诊断免疫组织化学CA125阴性的肿瘤中,也呈现CA125明显升高的现象;而病理免疫组织化学CA125是以抗体直接作用于受检组织细胞,排除了其他组织因素的影响,因而特异性高,应用价值大。我们的检测结果亦表明化学发光法检测血清CA125与免疫组织化学CA125的差异具有显著性。

综上所述,化学发光法检测血清CA125不是卵巢癌的特异性标志物,不能作为卵巢癌单一的检测指标,输卵管腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、胰腺癌、乳腺癌、肺腺癌以及慢性胰腺炎、肝炎、肝硬化、浆膜腔结核、盆腔炎、胸腹腔积液、子宫内膜异位等患者血清CA125水平也会升高。CA125作为一种非特异癌胚抗原,其实际参考意义也并不局限于单纯的盆腔肿瘤,在良性病变中也有一定的参考价值。

[参考文献]

[1] 周小华,姚平雁. 最新临床检验诊断结果的应用及评估统计全书[M].北京:中国知识出版社,2005:803.

[2] 于维霞,张治荣,郭悦鹏. CA125检测在活动性结核判定及疗效评估中的价值[J]. 中国实用内科杂志,2003,(2):2.

[3] Sevinc A, Camic, Turk HM,et al. How to interpret serum CA125 levels in patients with serosal involvement? A clinical dilemma[J]. Oncology,2003,65(1):1-6.

[4] Bilgin T,Karabay A,Dolar E,et al. Pexitoneal tuberculosis oith pelvic abdominal mass,ascites and elevated CA125 mimicking advanced ovarian carcinoma: a series lf 10 cases[J]. Int J Gynecol Cancer,2001, 11:290-294.

[5] 刘洋,申红,汪远山. 蛋白芯片法检测CA125在卵巢癌筛查和诊断中的价值[J]. 中国误诊学杂志,2003,3(6):855-856.

[6] 纪小龙. 免疫组织化学新编[M]. 北京:人民军医出版社,2005:353 -369.

[7] 何军,韩辉. 血清CA125水平临床意义的研究进展[J]. 新疆医科大学学报,2007,30(5):46.

化学发光法范文第8篇

关键词：梅毒；化学发光免疫测定；TP血球凝集试验

随着我国改革开放政策的实施，人口流动量大，梅毒（syphilis）的发病率呈现逐年上升的趋势。分布范围和人群也呈扩大化趋势。本文针对梅毒螺旋体抗体（TP抗体）探讨化学发光免疫测定（CLIA）对检测梅毒的应用价值。

1.资料与方法

1.1一般资料 用盲法进行预实验，根据样本的估算公式，纳入739例梅毒患者，经临床病历证实。其中梅毒Ⅰ期279例，梅毒Ⅱ期294例，梅毒Ⅲ期72例，潜伏期梅毒42例。同时选取住院患者中的52例非梅毒患者，作为阴性对照，经临床病例和患者症状证实，为SLE，肺结核患者，也有部分为心血管疾病患者。

1.2仪器和试剂 TP血球凝集试验（TPHA）试剂盒由Omega公司提供。化学发光仪型号：北京科美生物技术有限公司提供的CHEMCLINl500；化学发光法试剂盒由北京科美生物技术有限公司提供。

1.3方法 TPHA和CLIA均按照试剂盒说明书操作，对患者梅毒螺旋体抗体进行血清血检测。TPHA的结果均有两人以上的实验员进行判读。

1.4统计学方法 采用x2检验。

2.结果

Ⅰ期279例，梅毒Ⅱ期294例，TPHA和CLIA检出率100%，两种方法结果一致。梅毒Ⅲ期72例，TPHA检出72例和CLIA检出69例；潜伏期梅毒42例，TPHA检出42例和CLIA检出37例；其中3例非梅毒患者被CLIA检测为阳性。其他非梅毒患者49例检测为阴性，见表1。

由试验得出：化学发光法检测梅毒特异性抗w的敏感度为：98.85%，特异度为：93.55%；诊断比值比为：1386.29；阳性预测值：99.56%；阴性预测值：85.96%；患病率：92.96%；阳性似然比：15.33；阴性似然比：0.01。

3.讨论

Ⅰ期、Ⅱ期梅毒两种方法均检测阳性，且结果一致。潜伏期梅毒和梅毒Ⅲ期中，CLIA检测8例为假阴性，这与患者抗体前带反应有关。在非梅毒患者中，由于CLIA灵敏度高，有患者产生生物学假阳性的出现。后查验化学发光值，均为低值，处于检测灰区。

化学发光免疫测定（CLIA）的原理主要是：标本与稀释液混合，标本里抗TP抗体同包被的TP抗原结合，进行抗原抗体反应，清洗以后，加入标记吖啶脂抗人IgM或IgG抗体，接着洗涤，加入预激和激发液，通过检测反应液的相对光强度以反映血清TP抗体的浓度水平。有研究显示CLIA检测各期梅毒螺旋体的敏感度均较高，在98.7%-100.0%之间，特异高。这种方法从检测到结果判定均操作方便，由仪器自动完成，人为干扰较少，结果客观准确。与本次研究而得出的敏感度98.85%和特异度93.55%并无显著性差异。

TP血球凝集试验（TPHA）试剂成本较高，操作较麻烦，若使用时间长，保存不当易发生自凝现象和生物学假阳性。由于本院就诊患者多，使用速度快和频率高，故本实验的结果可靠准确。本实验同样证实对Ⅰ期、Ⅱ期梅毒及潜伏期梅毒诊断均为100%，敏感性高和特异性强。一般用于梅毒的确诊试验，适用于验证潜伏期梅毒和非梅毒螺旋体感染以及临床高度怀疑的梅毒患者。

化学发光法范文第9篇

关键词：溶血；化学发光法；CEA；AFP

临床上有多种检测AFP和CEA的方法，如酶联免疫吸附法、放射免疫法等等[1]。而化学发光免疫分析法是最近几年新发展起来的一项标记免疫技术，其自动化程度与灵敏度具高且安全无污染，是一种很好的免疫测定技术，可以用来测定多个项目，如肿瘤标志物、药物浓度等等。我们通过实验来探讨溶血对化学发光法检测CEA和AFP结果的影响，现将结果报道如下：

1.资料与方法

1.1取样：随机抽取当日静脉血标本30份，待血液标本凝固后，以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清即作为非溶血的标本，记作A1、B1组；然后把剩下的标本进行搅拌使其溶血，再以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清即得到中度溶血标本，记作A2、B2组；最后将剩下的放入冰箱冷冻室，次日取出自然溶解后以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清，即得到重度溶血标本，记作A3、B3组。

1.2方法：利用化学发光免疫分析仪分别测定非溶血标本、中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值，每份标本测3次，记录下每次测得的结果数值，最后取平均值得到结果。

1.3观察指标：通过测得的中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值与非溶血标本测得的CEA与AFP值做比较，来得出结论。

1.4统计学方法：采用spss16.0进行数据的统与处理计，将中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值与非溶血标本测得的CEA与AFP值做t检验，P>0.05表示无统计学联系，P

2.结果：

采用t检验对于结果进行统计分析。对于CEA的测定，中度溶血组（A2 ）相对于非溶血组（A1 ），P

3.讨论：

甲胎蛋白（AFP）是在胎儿发育的早期阶段，有卵黄囊和肝脏合成的一种血清糖蛋白，分子量为70Kd，电泳时位于α1球蛋白和白蛋白之间，但在出生后不久便慢慢消失，血清AFP浓度的检测是诊断原发性肝癌和胚胎细胞肿瘤的重要指标；癌胚抗原（CEA）是一种结构复杂的可溶性糖蛋白，分子量约为180Kd，胚胎期的时候主要存在于胎儿的肝脏、胰腺以及胃肠管中，出生后大幅度降低，胃肠道恶性肿瘤时常见血清CEA的异常升高，而在肺癌、乳腺癌等其他恶性肿瘤患者的血清中，CEA也常常升高，故而CEA是一种广谱肿瘤标志物[2]。

血液标本中的CEA和AFP可以用多种方法予以测定，常规的有酶联免疫吸附法、放射免疫法等等，而近年来发展迅速的化学发光免疫分析法具有灵敏度高、自动化程度高、安全无污染等优点[3]。而化学发光免疫分析法的原理是采用双抗体夹心法，首先加入抗体致敏微粒，然后再在其中加入适量的待测样本，最后需要将标记抗体加入其中即可。由于化学发光氧化剂具有氧化作用，我们便可以通过这种氧化作用，测得的光量子数就和待测样本中的抗原浓度成正比，从而测出结果[4]。化学发光反应的原理实际上与酶联免疫以及放射免疫中的双抗体夹心法和竞争法有着非常类似的地方[5-6]。但是化学发光反应是测得的光量子数就和待测样本中的抗原浓度成正比，即线性关系，其本身并不受到颜色反应的一些影响与干扰。从理论上来说的话，黄疸、脂血以及溶血标本并无影响，但有研究显示，到了实际的操作检测中，标本的溶血程度不同对于化学免疫检测的项目可以产生不同程度的影响[3-4]。研究显示，当标本溶血后，会对许多实验室检验的结果有着非常大的影响，从而导致得出错误的分析与结果，误导临床研究与诊治[7]。溶血标本对检验结果影响的原因大致有以下几种：①标本的颜色可能会受到标本溶血的干扰，比如说乙肝表面抗原的酶联免疫吸附试验来检测血红蛋白的释放会造成本底的升高以致过氧化物酶释放出来从而产生假阳性，又比如说胆红素的重氮反应等等。②细胞内外待检测物浓度的差异，比如说钾、镁等电解质，又如乳酸脱氢酶、醛缩酶、丙氨酸氨基转移酶等等。

从以上研究中我们不难发现，血液标本的溶血尤其是重度的溶血确实会对实际中临床检验产生较为巨大的影响，从而导致得出错误的分析与结果，误导临床研究与诊治。这样就要求我们在实际工作中要非常认真地做好标本的保存与处理，要及时地运送、检验标本，保持标本的新鲜，减少并尽量避免溶血的发生，从而能够达到有效的因为溶血而导致的检测结果的误差，提高临床诊断治疗的正确性[8]。此外我们也要根据检测项目的不同从而采取不同的标准来决定标本是否可用。这样既可以保证检测结果的准确性，提高临床诊断治疗的正确性，又可以避免重复抽血对患者造成的身体上的痛苦与经济上的损失。

参考文献

[1]叶应妩，申子余，等.全国临床检验操作规程（第三版）[M].东南大学出版社，2006：689.

[2]王鸿利，尚红，王兰兰，等.实验诊断学（第二版）[M].人民卫生出版社，2005：333-334.

[3]胡达拜尔迪·艾则孜，艾百都拉·斯迪克. 标本溶血对检测AFP、CEA结果影响的探讨[J].中国中医药资讯，2010，2（29）：31.

[4]王莉，覃运荣，吕世华. 溶血对化学发光法检测AFP、CEA结果影响的探讨[J].实用医技杂志，2005，12（3）：660.

[5]肖华龙，尹政芳.化学发光免疫分析实验及其临床评价[J].苏州医学院学报，2000，20（6）：536.

[6]罗炜，王慧.化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的比较[J].上海医学检验杂志，2000，15（3）：149.

[7]高银河，任忠良，孟昭歧.生化检验血液标本室前质控不容忽视[J].陕西医学检验，2005，15（4）：49.

化学发光法范文第10篇

【关键词】 克林霉素；鲁米诺；化学发光；流动注射

【Abstract】 Objective A novel assay for the determination of clindamycin was presented.Methods The action was significant in the chemiluminescence system of luminol-hydrogen peroxide with clindamycin as an enhancer. The enhancement of CL intensity was proportional to the concentration of clindamycin.Results The enhanced chemiluminescence intensity was linear with the concentration of clindamycin over the range from 1.0 pg/ml to 1.0 ng/ml (r2 = 0.9996)， the detection limit was 0.3 pg/ml (3σ) with a relative standard deviation of less than 3.0% (n = 5). The proposed method was applied successfully in the assay of clindamycin in capsules， human urine and serum without any pre-treatment procedure.Conclusion The proposed method offers advantages of simplicity， high sensitivity， selectivity and wide linear for the determination of clindamycin.

【Key words】 clindamycin； luminol； flow injection； chemiluminescence

克林霉素为一种抗生素，适用于葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等引起的皮肤软组织感染、上下呼吸道感染、急慢性骨髓炎等。测定克林霉素方法很多，主要有配置不同检测器的高效液相色谱法（如紫外检测器［1］、质谱检测器［2］、电化学检测器［3］）、胶体电动色谱［4］等。采用流动注射化学发光法测定克林霉素尚未见报道。化学发光法具有以下优点：灵敏度高、线性范围宽、快速测定、设备便宜、操作简单。在鲁米诺-过氧化氢体系中，克林霉素能够显著加强该体系的发光强度， 且克林霉素的浓度从1.0pg/ml到1.0ng/ml，相对标准偏差少于3.0%(n=5)，检出限为0.3pg/ml (3σ)。当流速为2.0ml/min时，测定克林霉素能在0.5min内完成。该方法被成功地应用于克林霉素胶囊、尿样、血样的测定，且回收率为86.2%～108.8%。

1 实验部分

1.1 试剂 实验中所用试剂均为分析纯。鲁米诺购自Fluka， Biochemika，其贮备液为2.5×10-2mol/L；5×10-5 mol/L过氧化氢溶液；0.05mol/L氢氧化钠溶液；克林霉素购自陕西省药物管理所，其标准液为1.988mg/ml； 实验中所用水均由二次水经Milli-Q (Millipore，Bedford， MA， USA)纯化。

1.2 实验操作 开动蠕动泵待记录仪基线稳定后，按图1所示流动注射分析流路，在流速为2ml/min条件下，将鲁米诺溶液与过氧化氢溶液同载液混合后通过六通阀与克林霉素试液进入混合管，在氢氧化钠存在的条件下在发光池内产生化学发光。发光强度用光电倍增管接收，然后用记录仪记录发光强度值。

P：蠕动泵；V：流通阀；MT：混合管；FC：流通池；

W：废液；D：检测部；R：记录仪

图1 流动注射系统装置示意图

2 结果与讨论

2.1 鲁米诺-过氧化氢化学发光动力学特性 实验发现从进样到出现发光最大强度需3s，在15s后趋于零。

2.2 反应条件

2.2.1 鲁米诺和过氧化氢浓度及pH值对化学发光强度的影响 实验表明，当鲁米诺和H2O2的浓度分别为1.0×10-7mol/L和1.0×10-5mol/L时，克林霉素对该体系有最强的化学发光信号。由于鲁米诺的化学发光反应是在碱性条件下进行的，所以通过使用氢氧化钠来提高该体系的灵敏度。实验结果表明氢氧化钠的浓度为0.025mol/L时，该体系有最强的化学发光信号。

2.2.2 流路参数 实验表明，当流速为2.0ml/min，混合管长度为5.0cm时，实验有良好的灵敏度和重现性，发光信号具有最大的信噪比。

2.3 克林霉素胶囊的测定 取克林霉素胶囊10粒，研细混匀。称量适量的质量，用水溶解，过滤，定容于250ml的容量瓶中。移取适量该溶液稀释到工作浓度范围，用标准加入法测定回收率，结果见表1。

2.4 人血清和尿液中克林霉素的测定 本文所提出的方法可初步用于测定尿液和血清中克林霉素的含量。取志愿者的新鲜尿液加入适量的标准克林霉素溶液并稀释到工作浓度范围，标准加入法测定回收率。血样来源于西北大学附属医院，测定方法同上述，结果见表2。 表1 克林霉素胶囊的测定 （n=5）

表2 人血清b和尿液a中克林霉素的测定 (n=5)

注：a：尿液；b：血清

【参考文献】

1 Batzias GC， Delis GA， Koutsoviti-Papadopoulou M. A new HPLC/UV method for the determination of clindamycin in dog blood serum. J Pharmaceut Biomed Anal， 2004， 35 (3)： 545-554.

2 Cherlet M， Croubels S， de Backer P. Determination of clindamycin in animal plasma by high-performance liquid chromatography combined with electrospray-ionization mass spectrometry. J Mass Spectrom， 2002， 37(8)： 848-853.

3 Hornedo-Nunez A， Getek TA， Korfmacher WA，et al.High-performance liquid chromatography of clindamycin and clindamycin phosphate with electrochemical detection. J Chromatogr， 1990， 503 (1)： 217-225.