比较婴儿血液和母乳中人巨细胞病毒检测在诊断婴儿感染中的价值

【摘要】 目的 通过对婴儿血液和母乳中人巨细胞病毒（HCMV）定量检测， 为临床儿科医生诊断HCMV感染选择合适送检标本提供依据。方法 选取疑似HCMV感染婴幼儿的血液及母乳标本各220例， 应用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）进行定量检测， 比较两种标本的阳性率。结果 220例母乳标本的HCMV-DNA阳性率58.18%（128/220）明显高于婴儿血液标本的阳性率4.55%（10/220）（P

【关键词】 人巨细胞病毒；血液；母乳

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2016.16.064

HCMV又称为涎病毒， 属疱疹病毒科， 是人类疱疹病毒中最大的一种病毒， 这种病毒进入细胞内会导致细胞增大， 又称巨细胞病毒。HCMV是造成婴幼儿发生系统感染的最常见、最主要的病原体[1]。临床表现以黄疸、肝脾肿大、血小板减少性紫癜、气促、发绀等消化道和呼吸道症状为主。本文通过比较疑似HCMV感染患儿血液及其母乳， 两种不同送检标本的HCMV-DNA定量检测， 统计两种标本的阳性率， 为临床医生诊断HCMV感染选择合适送检标本提供依据。现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 收集2015年3～11月本院儿科门诊及病房疑似HCMV感染患儿的血液及其母乳标本各220例， 其中男141例， 女79例， 年龄6～60 d。疑似HCMV感染患儿临床表现为新生儿黄疸、小头畸形、血小板减少性紫癜、肝脾肿大、肝炎综合征、中枢神经系统疾病等相关的症状和体征。

1. 2 方法 应用FQ-PCR进行定量检测。

1. 2. 1 标本采集 采集患儿2 ml静脉血；母乳采用挤压法留取乳汁5 ml置于无菌密闭试管内， 将两种标本及时送检。

1. 2. 2 仪器与试剂 仪器使用美国ABI7300荧光核酸定量扩增仪， 检测HCMV试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。操作步骤严格按照仪器使用说明书和试剂说明书进行， 检测结果以>1.00E+003 copies/ml作为阳性标本。

1. 2. 3 质量控制 每批样本检测除4个标准品外， 另外加入阴、阳性对照及室内质控品各1例， 并且只有标准品、对照品及室内质控均在范围内才可发临床报告， 以便保证检验结果的可靠性。

1. 3 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P

2 结果

220例患儿血液标本中检测出HCMV-DNA阳性10例， 阳性率为4.55%。母乳标本检出阳性128例， 阳性率58.18%， 两种标本检测HCMV-DNA阳性率比较， 差异有统计学意义（P

3 讨论

HCMV属疱疹病毒科， 是疱疹病毒家族中的重要成员之一， 可引起人类巨细胞感染， 在我国巨细胞病毒感染广泛流行[2]。通常情况下很多正常人身上都潜伏有巨细胞病毒， 常潜伏在唾液腺、乳腺、肾脏、子宫颈等腺体中。在大多数免疫正常个体是无症状感染， 而在免疫抑制个体、胎儿、新生儿如果感染可出现明显病症[3]， HCMV感染分先天性和获得性感染， 先天性感染表现为肝脾肿大、持续性黄疸、皮肤瘀点、小头畸形、智力低下和运动障碍等。获得性感染多为自限性疾病， 临床表现一般较轻， 虽然多数婴幼儿为亚临床感染， 但其症状的发生率仍高于成年人。婴儿感染后应该进行早期诊断、及时治疗以免延误病情， 对患儿造成更大的伤害。目前对HCMV感染的诊断除了根据患者的临床症状外， 病毒分离和培养是诊断的金标准[4]， 但由于该项目技术要求高、价格贵、时间长等原因不适合在临床应用。同时血清学免疫球蛋白M（IgM）检出率低， 不适合早期检测。HCMV-DNA检测技术可提高检测灵敏度和特异性， 比较适用于婴幼儿HCMV感染检测及治疗效果观察， 是较好的诊断指标[5]。

本次研究分别收集220例6～60 d疑似HCMV感染婴儿血液及其母亲乳汁同时进行HCMV-DNA检测， 检测结果显示母乳阳性率为58.18%（128/220）高于婴儿血液阳性率4.55%

（10/220）（P

HCMV-DNA阳性婴儿的母乳HCMV-DNA也都为阳性， 并且检测数值要高于婴儿血液数值， 表明患儿HCMV感染源来自于母亲乳汁。分析原因可能是哺乳期女性发生HCMV感染或复发， 通过母乳喂养含有HCMV的乳汁使婴儿感染， 这也是婴儿感染HCMV的重要传播途径[7]。母乳检出的128例阳性中有128例婴儿血液结果为阴性， 分析原因一方面可能与母乳中HCMV含量高低及婴儿的个体差异有关， 母乳中含量高的传染力相对较强， 婴儿的免疫力弱的被感染的可能性较大。第二方面可能与婴儿母乳喂养的时间有关。本次研究婴儿年龄最小6 d， 母乳喂养时间短。所以婴儿血液中未查出HCMV-DNA。对于单独母乳HCMV-DNA检测指标高应停止母乳喂养；如继续母乳喂养， 应该检测母乳的HCMV-DNA， 当检测结果为正常时可继续喂养， 并且要定期复检。

综上所述， 对疑似HCMV感染婴儿除送检患儿血液外更应该选择送检阳性率高的母乳， 可以提高HCMV-DNA的检出率， 以免造成漏诊， 耽误病情。

参考文献

[1] 陈倩， 钟天鹰， 张其华.荧光定量PCR法检测母乳巨细胞病毒感染和母婴传播.中国优生与遗传杂志， 2005， 13（11）：42-43.

[2] 阮强， 何蓉. 人巨细胞病毒感染的实验室检测与诊断.实用儿科临床杂志， 2012， 27（10）：729-731.

[3] Lin YH， Yeh CY. Recurrent cytomegalovirus colitis with megacolon in an immunocompetent elder man. J Med Virol， 2010， 82（4）：638-641.

[4] 方峰， 董永绥.诊治巨细胞病毒感染时应注意的几个问题.中国实用儿科杂志， 2000， 15（2）：86.

[5] 张正娥， 居文慧.妊娠期巨细胞病毒感染.中外妇儿健康， 2011，

19（8）：86-87.

[6] 徐莉莉， 牟文凤， 杨丽， 等.婴儿血液、尿液及母乳中病毒DNA

检测在诊断HCMV感染中的应用.中国当代儿科杂志， 2013， 15（9）：748-750.

[7] Alkhawaja S， Ismaeel A， Botta G， et al. The prevalence of congential and perinatal cytomegalovirus infections among newborns of seropositive mothers. J Infect Dev Ctries， 2012， 6（5）：410-415.

[收稿日期：2016-01-21]