白细胞介素范文

白细胞介素范文第1篇

Study of protective effect of interleukin10 on ischemia/reperfusioninduced lung injury following lung transplantation

【Abstract】 AIM: To investigate the protective effects of Interleukin10 (IL10) on ischemia/reperfusion (I/R)induced lung injury following rat lung transplantation and to explore its mechanisms. METHODS: Thirtysix SD rats were randomly divided into 3 groups with 12 rats in each group: sham operation group (control), lung transplantation group and IL10 treatment group. IL10 was administered to the recipient rats through intratrachea way. The wet/dry ratio of lung, lung permeability index and neutrophil percentage in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were detected. The serum level of tumor necrosis factor α（TNFα）was detected by enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS: The wet/dry ratio of lung, lung permeability index and neutrophils percentage in BALF of I/R group were (657±089),（2349±513）×10－4 and (4984±653)％, significantly higher than those of the control group（P001）. The administration of IL10 to recipient rats before the operation markedly reduced the indexes above to (423±058), （1596±304）×10－4 and (2033±426)％, respectively（P001）. The serum level of TNFα（μg/L）increased to (086±011) after lung transplantation, markedly higher than that of control group, however, the IL10 treatment could reduce its level significantly to ［(039±005),P001］. CONCLUSION: IL10 protects the lung function against I/R injury after transplantation, which is related to its inhibition of TNFα release and activation of neutrophils.

【Keywords】 lung transplantation;reperfusion injury; interleukin10

【摘要】 目的： 探讨白细胞介素10（IL10）对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用及机制. 方法： 将SD大鼠36只随机分为3组，每组12只，即假手术对照组（Control）、肺移植组和肺移植加IL10处理组. 观察受体气管内滴入IL10对移植肺再灌注损伤的保护作用. 肺功能指标包括血氧分压、肺湿干重比、肺通透性指数、支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数和分类；ELISA法检测受体血清中肿瘤坏死因子α（TNFα）含量. 结果： 肺移植术后1 h，肺湿干重比、肺通透指数和BALF中中性粒细胞百分比分别为(657±089)、（2349±513）×10－4和(4984±653)％，显著高于对照组(P001)，经气管内给予受体大鼠IL10可明显降低上述指标至(423±058)、（1596±304）×10－4和(2033±426)％(P001)；肺移植组血清TNFα含量（μg/L）为(086±011)，较对照组显著升高（P001），IL10可明显降低血清TNFα水平至［(039±005),P001］. 结论： IL10对移植肺缺血/再灌注损伤有显著的保护作用，与其抑制中性粒细胞激活和炎性因子TNFα分泌有关.

【关键词】 肺移植；再灌注损伤； 白细胞介素10

0引言

肺缺血/再灌注(I/R)损伤是肺移植术后移植肺功能障碍的主要原因, 而肺对I/R损伤较其他实质性脏器更为敏感，这也使肺移植的发展远远落后于心脏、肝脏和肾脏移植. 因此，改善移植肺I/R损伤，保护肺功能，是促进肺移植迅速发展的关键所在. 白细胞介素10（IL10）是一种由多种细胞生成的具有广泛生物学活性的细胞因子，可以调节T细胞、B细胞和肥大细胞等分化发育，在炎症、免疫反应、病毒感染等过程中均发挥重要作用. 研究表明，IL10可发挥抗炎作用，一方面抑制炎性细胞的激活、迁移与黏附，另一方面抑制炎症因子的合成与释放［1］. IL10对器官移植后再灌注损伤有无保护作用目前尚未见报道.我们在大鼠肺移植手术模型的基础上，观察受体气管内滴注IL10对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用，并初步探讨其机制，以期为临床上移植肺I/R损伤的防治提供新的治疗策略.

1材料和方法

11材料成年SD雄性大鼠24只，体质量220～260 g（由第四军医大学实验动物中心提供）. 随机分为3组，每组12只，即假手术对照组（Control）、肺移植组和IL10+肺移植组. 大鼠TNFα ELISA检测试剂盒为美国Endogen公司产品，IL10购于Boehringer公司.

12方法

121大鼠肺移植手术供体鼠以50 g/L氯胺酮（150 mg/kg）ip麻醉. 经口气管插管，动物呼吸机控制呼吸.尾iv 1 000 U肝素，开胸游离左肺门，于肺处于半膨胀状态时于远端结扎左主支气管. 4℃灌注液灌洗至移植物完全变色，自肺静脉流出液呈无色透明后，将支气管，动、静脉尽可能地远离左肺切断，剪除周围组织，取出左肺浸泡于灌洗液中. 修剪肺动、静脉并分别套管，自动脉以灌洗液冲洗，检查动、静脉是否通畅. 受体大鼠麻醉及插管方法同供体，开胸后游离左肺动、静脉及左主支气管，以血管夹夹闭动静脉，靠远端切断，以肝素冲洗供、受体动静脉残端. 将套管套入受体血管腔内，以丝线结扎固定，从而完成血管吻合. 依次开放静脉和动脉，可见移植肺血液充盈自白色变至红色，动、静脉均充盈呈暗红色. 将受体的左主支气管末端翻转至套管上并以丝线结扎固定，套入供体的左主支气管，经固定后分别剪去支气管两端结扎线，移植肺逐渐扩张自红色变至粉红色，使移植肺完全扩张后纳入胸腔. 吻合满意标准为移植肺充气及弹性回缩好，呈粉红色，肺动静脉充盈好，吻合口无漏血，气管不漏气.以湿纱布覆盖胸腔. IL10处理组在肺移植手术前给予受体气管内滴注IL10 4000 U（溶于05 mL生理盐水）. 移植肺再灌注60 min后结束实验.

122肺组织湿干重比的检测实验结束后半数动物取部分左肺组织，用滤纸吸净表面液体，以分析天平称取湿重，再置入80℃的烤箱中，24 h 后称取干重，二者之比为肺湿干重比.

123肺通透指数测定其余半数动物于实验结束后抽取动物肺动脉血，离心制备血清；以Hanks液5 mL经左主支气管灌洗，反复3次，收集支气管肺泡灌洗液（BALF），采用考马斯亮蓝蛋白测定法检测BALF上清及血清中蛋白浓度，BALF中蛋白浓度与血清蛋白浓度之比为肺通透性指数.

124BALF中白细胞计数取1 mL BALF液离心，将其沉渣涂片，瑞氏染色，光镜下计数BALF中的白细胞数量及中性粒细胞百分比.

125血清TNFα含量的检测将上法制得血清部分置-20℃保存，待所有实验结束后，采用双抗体夹心ELISA法检测血清TNFα含量. 操作按照试剂盒说明进行.

统计学处理： 所有数据均以x±s表示，组间比较采用SPSS110统计软件进行方差分析，两两比较采用LSDt，方差不齐时，组间比较采用非参数秩和检验，P<005表示有统计学意义.

2结果

21肺组织湿干重比及肺通透指数检测结果肺移植组肺湿干重比和肺通透指数显著高于对照组(P001)，IL10处理组上述两指标均显著低于单纯肺移植组（P001，Tab 1）.

表1肺组织湿/干重比和肺通透性指数　略

22BALF中白细胞数和血清TNFα含量肺移植组BALF中白细胞数和中性白细胞百分比较正常对照组显著增高(P001)，血清中TNFα含量也显著高于对照组(P001)；IL10处理组BALF中白细胞数和中性白细胞百分比较单纯肺移植组明显降低(P001)，血清中TNFα含量也显著低于肺移植组（P001, Tab 2）.

表2BALF中白细胞数、中性粒细胞百分比和血清TNFα含量　略

3讨论

随着医学的发展，肺移植的存活率得到明显的改善. 但由于肺耐受缺血时间较其他实体器官短，因而I/R损伤已经成为肺移植术后高死亡率的主要原因之一，阐明其发生机制并寻求相应的治疗措施是当今医学界亟待攻克的一项重要课题.

肺毛细血管通透性增高是肺I/R损伤后的基本病理改变，表现为血管内液渗出增多，有大量蛋白漏出，可检测到肺湿干重比增加，肺通透性指数即BALF与血清中蛋白浓度之比增高，因此，肺湿干重比及肺通透性指数是常用来作为评价肺I/R损伤的基本指标. 我们在肺移植后1 h 检测到肺湿干重比及肺通透指数均较对照组明显增高，而给与受体大鼠支气管内滴注IL10可明显减轻移植肺损伤，表现为使肺湿干重比及肺通透指数显著下降.

缺血再灌注损伤的机制之一是过度的炎症反应，其中TNFα是主要的致炎因子［2］，参与机体炎症反应和免疫反应全过程. I/R损伤后，TNFα的释放可激活多形核白细胞（PMN），增加白细胞、内皮细胞黏附分子的表达，促进白细胞黏附于毛细血管或小血管壁，促进中性粒细胞的聚集和激活间质组织释放蛋白水解酶，使细胞膜损伤和细胞自融，这是引起肺I/R损伤的主要原因之一. IL10是人体内自然产生的抗炎介质，具有多种抑制性效应，可广泛抑制炎症介质，抑制肺内中性粒细胞聚集及脱颗粒，重建体内炎症介质及抗炎介质的平衡［3］. 本实验结果表明，给与IL10治疗后，受体大鼠血清中TNFα含量明显减低，BALF中白细胞总数及中性粒细胞百分比较单纯肺移植组亦显著降低，表明IL10对肺损伤的保护作用与其抑制TNFα产生或释放以及中性粒细胞的浸润和激活有关.

已有研究表明，IL10可广泛抑制免疫效应分子产生，是细胞因子合成的抑制因子［4，5］，其抗免疫排斥反应的作用已越来越受到重视. 本实验结果提示IL10还可通过抑制炎性介质的释放而减轻大鼠移植肺缺血/再灌注损伤，因此，IL10在器官移植领域具有重要的意义，其作用机制值得进一步研究.

【参考文献】

［1］ 夏春芳, 霍勇. 白细胞介素10的细胞生物学效应及其信号转导［J］. 国外医学免疫学分册，2001;24(5): 269-272.Xia CF, Huo Y. The cytobiological effects and signal transduction of interleukin10 ［J］. Foreign Med Fascic Immunol, 2001; 24(5):269-272.

［2］ Yao YM, Yu Y, Wu Y, et al. The role of gut as a cytokinegenerating organ in remote organ dysfunction after intestinal ischemia and reperfusion ［J］ . Chin Med J, 1998; 111(6):514-518.

［3］ Lubberts E, Joosten LA, Helsen MM, et al. Regulatory role of interleukin 10 in joint inflammation and cartilage destruction in murine streptococcal cell wall (SCW) arthritis. More therapeutic benefit with IL4/IL-10 combination therapy than with IL10 treatment alone ［J］ . Cytokine, 1998; 10(5):361-369.

［4］ Minguela A, Torio A, Marin L,et al. Implication of soluble and membrane HLA class I and serum IL10 in liver graft acceptance ［J］.Hum Immunol, 1999; 60(6):500-509.

白细胞介素范文第2篇

[关键词]湿疹；白细胞介素-7；白细胞介素-25；表达特点

[中图分类号]R751 [文献标识码]B [文章编号]2095-0616（2016）05-208-04

湿疹是由于各种内外因素导致的皮肤炎症，是临床常见病和多发病，发病后迁延难愈，给患者的生活带来很多不便，主要表现为瘙痒及红斑水泡等临床表现，慢性期会出现表皮细胞间隙的水肿，存在不同程度的棘层的肥厚和淋巴细胞浸润。外源性的因素主要是由气候及环境条件、外在的理化因素的刺激相关，内源性的因素与系统性疾病、情绪、精神等因素有关。但其病因尚未完全明确，目前普遍认为与Th2的免疫反应性疾病相关，Th1/Th2失衡是湿疹的重要机制之一，相关细胞因子白细胞介素-7是一种多潜能的细胞因子，具有广泛的免疫效应，不但可以刺激前体的B细胞，还可以促进T细胞的分化和生长，目前对其生物学功能研究还尚少；白细胞介素-25是近年发现的Th2细胞因子，可以协同诱导Th2相关细胞因子参与免疫应答和上皮细胞分泌，引起嗜酸性粒细胞的增多。湿疹作为常见的变态反应性疾病，目前对白细胞介素-7、白细胞介素-25的研究较少，因此进一步探讨两细胞因子在湿疹患者中的特异性表达对深圳的发病机制的探讨有起到一定积极的作用，并为变态反应性疾病提供一定的临床依据。

1资料与方法

1.1一般资料

选择我院2013年1月-2014年11月确诊为湿疹的患者100例，其中男56例，女44例，平均年龄（46.3±10.2）岁，按照临床表现进行分期，急性期患者35例，其中男17例，女18例，平均（46.3±10.2）岁；亚急性期患者35例，其中男18例，女17例，平均年龄（44.7±11.3）岁；慢性期患者30例，其中男13例，女17例，平均年龄（45.9±10.4）岁。同时纳入我院体检科检查的健康志愿者30例作为对照组，其中男14例，女16例，平均年龄（42.5±9.6）岁，各组患者的一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究已获得医院伦理委员会批准。

1.2诊断标准

参照《中国临床皮肤病学》对湿疹的诊断标准进行制定。

1.3纳入标准

（1）符合本病诊断标准；（2）年龄20～60岁；（3）过去的1个月内没有服用过抗组胺类药物；（4）依从性强，愿意接受本临床研究。

1.4排除标准

（1）年龄60岁的患者，妊娠期、哺乳期的患者；（2）有免疫系统疾病或其他严重的系统性疾病和恶性肿瘤的患者；（3）不愿意接受本临床研究，依从性差的患者。

1.5研究方法

1.5.1白细胞介素-7、白细胞介素-25检测 采用酶联免疫吸附法（ELISA）（上海西塘生物科技有限公司）检测白细胞介素-7、白细胞介素-25的浓度水平。设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品；样本孔中加入待测样本，空白孔不加；除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，用封板膜封住反应孔，37℃恒温孵育。洗板，每孔加入底物，37℃避光孵育。滴加终止液并立即在450nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。详细操作步骤严格按照Human IL-7/IL-25 ELISA kit试剂盒说明书进行。连接计算机绘制标准曲线，并求得血清中IL-7、IL-25表达水平。

1.5.2其他实验室指标检查 血常规、血液生化、尿蛋白定量、尿常规、血沉等均由医院检验科、免疫学实验室完成。

1.6统计学处理

所有收集的数据资料均妥善存档，采用SPSS21.0统计软件对数据做统计分析。本研究中计量资料数据正态分布资料采用（x±s）表示，非正态分布资料采用中位数表示。遵循正态分布而且方差齐，两组间的比较采用独立样本t检验，百分率的比较采用x2检验，P

2结果

2.1湿疹患者及正常对照组中白细胞介素-7、白细胞介素-25水平比较

观察各种受试者白细胞介素-7、白细胞介素-25水平表达水平，结果显示，湿疹的急性期和亚急性期患者白细胞介素-7、白细胞介素-25表达水平高于对照组患者，差异有统计学意义（P0.05）。见表1。

2.2实验室指标比较

4组患者的实验室指标数据比较，结果显示，湿疹各组患者与对照组的实验室指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

2.3相关性分析

湿疹患者白细胞介素-7、白细胞介素-25的表达水平与患者的实验室各项指标之间的相关性分析，结果显示，白细胞介素-7与白细胞介素-25的表达水平之间具有相关性（P0.05）。见表3。

3讨论

湿疹是一种发病于表皮即真皮层的非传染性皮肤病，可以导致皮肤出现红斑、糜烂、水泡等炎症性反应。多发病于过敏性体质患者，由于机体受到外界的刺激或由于慢行系统性疾病等引发。可伴有剧烈的疼痛或者瘙痒，且症状迁延难愈，给患病患者带来了极大的痛苦，影响着正常的工作生活。目前临床上根据湿疹的临床特征及病情严重程度分为急性、亚急性、慢性湿疹三种主要的类型。长期以来人们根据T细胞的分化和功能分为Th1和Th2两种，其中Th1主要分泌的是干扰素介导细胞的免疫，Th2通过分泌细胞因子而激活B细胞产生免疫球蛋白等抗体，两者都发挥着重要的免疫调节作用，两者的平衡对变态反应性疾病发挥着重要的机制，近年来发现的新型的Th-7，通过动物实验表明其在免疫性疾病中发挥着重要的作用，可诱发自身免疫系统及过敏性疾病，具有很强的促进免疫炎症的作用，诱导多种细胞发生炎症介质，其主要的效用细胞因子白细胞介素-7可能参与变态反应性疾病发病的过程，在迟发性接触反应及气道过敏性反应中气道明显的调节作用。白细胞介素-25可以通过增强活化的Th2的扩增，促进细胞的免疫应答反应，以嗜酸性粒细胞与细胞浸润为特征，研究显示，白细胞介素-25可能参加表皮细胞的变态反应，通过嗜酸细胞和嗜碱细胞的固定效应器产生，在呼吸道中聚集可以提高Th2细胞介导的炎性反应。

本研究结果提示，湿疹的急性期和亚急性期患者白细胞介素-7、白细胞介素-25表达水平高于对照组及慢性期患者，差异比较具有统计学意义，此研究结果提示白细胞介素-7、白细胞介素-25参与了湿疹疾病的发生和发展，且与疾病的严重程度具有相关性，随着疾病的严重加重，湿疹的进展期的患者外周血中白细胞介素-7、白细胞介素-25表达水平要高于病情稳定的患者。其他临床研究也发现在过敏性哮喘的患者中外周血及肺泡灌洗液中的白细胞介素-7高于对照组，表明白细胞介素-7与哮喘有着一定的相关性，参与了过敏炎症反应发展。另一项持续性慢性变应性鼻炎患者中发现白细胞介素-25表达水平表达增高，与炎性倾润细胞数有着明显的正相关性，提示白细胞介素-25表达增高可能促进慢性炎症和组织的重塑。白细胞介素-7、白细胞介素-25本研究发现也是引起湿疹患者一系列症状的其中一种重要介导因素。

本研究的相关性研究结果发现，湿疹患者白细胞介素-7、白细胞介素-25的表达水平与患者的实验室各项指标之间的相关性分析，结果显示，白细胞介素-7与白细胞介素-25的表达水平之间具有相关性（P0.05）。目前发现白细胞介素-7与白细胞介素-25在许多炎症性疾病中通常同时出现，被看做一个紧密相连的轴系统，对于免疫性细胞疾病具有显著的正相关性。白细胞介素-7与白细胞介素-25与湿疹的发生发展有着密切的相关性，但是两者与本研究的实验室指标之间虽然数据有所差异，但无统计学意义，有可能与患者数量少一级患者体质之间的差异有关，需要在接下来的研究中进一步验证。

白细胞介素范文第3篇

关键词 新生儿 败血病 白介素6 白介素8

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.14.116

新生儿败血症是新生儿期的危重病症，是导致新生儿死亡的重要原因之一，因此，早期诊治成为改善患儿预后的关键。但新生儿败血症早期症状不典型，目前常用的血培养等诊断方法存在一定的时限性，使早期诊断受到限制。本研究通过检测新生儿败血症白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素8(IL-8)的变化，旨在探讨其对新生儿败血症的诊断价值。

资料与方法

2010年3月～2011年4月收治新生儿败血症患儿62例，男34例，女28例，平均年龄6天，其诊断符合新生儿协作组制定的新生儿败血症诊断标准；对照组为同期在产科出生的健康足月新生儿55例。

标本采集：所有研究对象在入院当天应用抗生素治疗前采集25ml静脉血，立即离心分离血浆，用于检测IL-6和IL-8，败血症组治疗后恢复期再次采集25ml静脉血作IL-6和IL-8检测。方法：应用酶联免疫(ELISA)双抗体夹心法测定血浆IL-6和IL-8水平。

统计学处理：用SPSS130统计学软件，检测结果以(X±S)表示，组间分析采用t检验，以P＜005为差异有统计学意义。

结 果

两组2项指标的检测结果：败血症组急性期血浆IL-6水平显著高于恢复期，败血症组急性期血浆IL-6水平显著高于对照组(P＜001)，见表1。

两组2项指标的检测结果：败血症组急性期血浆IL-8水平显著高于恢复期，败血症组急性期血浆IL-8水平显著高于对照组(P＜001)，见表2。

讨 论

IL-6是一种多功能细胞因子，其在炎性反应中具有抗炎及促炎双重作用。抗炎反应作用表现为诱导肝脏合成一系列急性反应蛋白，以保护或限制炎性反应。IL-6可作为早期判断新生儿细菌感染的指标，其水平的升高和疾病的严重程度有关。有研究证明，在临床症状出现前2天，血中IL-6已明显升高，IL-6为早期诊断极低出生体质量儿败血症灵敏而可靠的指标。本研究中败血症组治疗前较恢复期水平与对照组水平明显增高，有统计学意义。对于足月儿和早产儿，无论是早发性细菌感染还是晚发性细菌感染，败血症组血浆IL-6水平均较正常对照组和恢复期显著增高，并有较好的敏感性和特异性。

IL-8系一种多源的细胞因子，可由单核细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、软骨细胞、血管内皮细胞、T淋巴细胞等在白细胞介素-1、肿瘤坏死因子-α、刀豆蛋白A等诱导剂作用下合成和释放。在正常情况下，IL-8含量很低，而当机体存在炎性病变时，可刺激单核细胞和内皮细胞大量分泌IL-8，在1-3小时内迅速升高，由于被白细胞受体结合，其半衰期短［1］，IL-8对中性粒细胞有趋化作用，促使其释放超氧离子和初级颗粒成分。同时IL-8也是T细胞趋化因子，可使淋巴细胞迁移数量增加。因而IL-8是典型的炎性细胞趋化因子之一。许多研究显示［2，3］，新生儿细菌感染时血清IL-8水平升高，有较好的灵敏度和特异性，可用于早期诊断新生儿细菌感染，同时能辅助临床评价治疗效果而且IL-8血中水平既不受胎龄影响，也不因出生时间而改变［4］。

参考文献

1 Orlikowshy TW,Ncunhocffer F,Goclz R,et al.Evaluation of IL-8 concentration in plasma and lysed EDTA-blood in healthy neonates and those with suspected early onset bacterial infection.Paediatr Res,2004,56:804-809.

2 朱建幸,张永红,沈铮,等.新生儿细菌感染时IL-8、IL-10、IL-13水平的研究及其临床意义［J］.中国当代儿科杂志,2004,6(5):365.

3 张永红,沈铮,朱晓东,等.新生儿细菌感染时血清IL-8和IL-13水平变化［J］.临床儿科杂志,2004,22(9):598-600.

白细胞介素范文第4篇

【关键词】 哮喘;白细胞介素．5;白细胞介素．12

支气管哮喘(以下简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾患,由多种炎性细胞和炎性介质及细胞因子参与其过程,近年来,不少学者认为细胞因子失衡在哮喘的发病中起着重要的作用,本文旨在探讨哮喘患者血清中IL．5和IL．12的变化。

1 材料与方法

1．1 动物及分组 大鼠48只,雌雄各半,体质量(200±40)g,由河南省实验动物中心提供，大鼠随机分为两组:正常对照组和支气管哮喘组(模型组),每组24只。

1．2 试剂 卵白蛋白(OVA)为Sigma公司产品,YY99801型雾化吸入器购自上海亿圣科技有限公司，大鼠．5．10检测试剂盒购自武汉博士得生物工程公司。

1．3 动物模型的建立[1] 模型组动物腹腔注射OVA10 mgAL(OH)3~10 mg,生理盐水1 ml的悬液,第10天重复1次,对照组动物腹腔注射AL(OH)3~10 mg生理盐水1 ml,第14天开始连续5 d两组动物均以1%OVA雾化吸收发敏,每次20 min,观察临床症状。

1．4 细胞因子的检测 发敏5 d后,以大鼠尾静脉取血2 ml,离心分离血清,低温冰箱保存,用ELISA法分别检测IL．5和IL．12水平，操作严格按照试剂盒说明书进行。

1．5 统计学处理 实验数据均以均数±标准差表示,两组间比较采用t检验,检验水准a=0．05。

2 结果

对照组的IL-5、IL．12的检测结果分别为(15．34±2．96)pg/ml,(79．32±5．99)pg/ml,模型组的分别为(39．15±11．10)pg/ml,(34．18±0．78)pg/ml。模型组与对照组比较,模型组大鼠血清中IL-5水平显著高于对照组，(P

3 讨论

在哮喘气道炎症中,种种炎性调节/反应细胞的分化、成熟、激活及释放介质受到一系列因子的调控,包括细胞因子(CK),趋化因子、转录因子、黏附因子等,其中以CK最为重要。嗜酸性粒细胞(EOS)在气道炎症中发挥极其重要的作用,(EOS)颗粒相关蛋白如主要碱基蛋白等可以直接损害支气管上皮,引起支气管平滑肌收缩,并可导致气道反应性增强,IL-5是Th2淋巴细胞产生的一种细胞因子,它可以增强EOS对血管内皮细胞的黏附能力并对EOS具有强烈的趋化作用;IL-5还可以促使EOS的最终分化,延长其存活时间[2]。许多研究表明IL-5由于对EOS具有重要的调节作用从而参与哮喘的发病过程。本实验表明模型组大鼠血浆中IL-5水平明显高于对照组。IL．12是近年来发现的具有抗炎作用的细胞因子,能下调多种炎症介质。考虑有以下机制：①调节体内辅助T淋巴细胞亚群(Th1/Th2)细胞免疫应答的平衡。 IL．12通过促进纯真型T细胞分化为Th1细胞;对特异性抗原进行应答过程,发挥协同刺激功能，诱导分化后的Th1细胞产生大量的IFN．r(r干扰素);促进IFN．r产生型的记忆Th1细胞的分化等作用而激发机体诱导IFN．r的产生,因而形成一个正反馈调节,加强Th1类细胞的应答反应,抑制Th2型的细胞免疫应答；②诱导细胞因子产生 IL．2与IL．2RB2结合通过JAK2(酪氨酸激酶)/STAT4(signal transducerandactivator of transcription protein4)途径增加IFN．r的产生[3]。IL．12还可以诱导多种细胞因子的产生,包括肿瘤坏死因子a(TNF．a)、粒．巨噬细胞集落刺激因子(GM．CSF)、IL．2、IL．8、IL．10等。IL．12还通过IFN．r的作用抑制TGF2B(转化生长因子B)的产生。有报道认为,IL．12可抑制IL．4及IL．4诱导的IgE的产生[4]。由此可见,IL．12及其所诱导的细胞因子构成了复杂的网络系统,它们之间的相互作用调节着机体细胞之间的相互平衡;③刺激活化CD3+T细胞(包括CD4+和CD8+)增殖 ，IL．12诱导T细胞最大增殖水平低于IL．2的刺激增殖作用,但刺激50%最大增殖所需细胞因子浓度远低于IL．2；④促进B细胞I生和Ig类型转化，IL．12对某些种类的I生具有抑制作用。在小鼠体内,IL．12可使与Th1型细胞免疫应答有关的IgG2a、IgG2b、IgG3的产生增加10~1000倍,而抑制与Th2型细胞免疫应答有关的抗体如IgG1,IL．12还能够强有力地抑制IgE的应答反应;⑤IL．12可抑制嗜酸粒细胞向气道内浸润，其机制一方面是通过直接抑制嗜酸性粒细胞的活性,另一方面是通过抑制血管内皮细胞上粘附分子的表达,从而阻滞嗜酸粒细胞与血管内皮细胞的粘附;⑥IL．12能够增强NK细胞及LAK细胞(淋巴因子激活的杀伤细胞)的细胞毒活性,并能加强特异性CTL(肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞)的应答反应。减轻气道炎症,降低支气管高反应性,减少哮喘的发生，具有潜在的治疗作用。在本实验中观察到模型组大鼠血清中IL．12水平明显低于对照组。结合IL-5水平检测的结果,说明哮喘中细胞因子紊乱,其实质是Th0向Th1/Th2功能性极化失衡的结果[5．7]。本研究表明,IL-5、IL．12可能在哮喘的发病中起到一定的作用,因此对支气管哮喘的诊断及治疗有一定的意义。

参考文献

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白细胞介素范文第5篇

【关键词】三磷酸腺苷结合盒转运体A1 IL-18 IL-12 胆固醇流出

中图分类号：R34文献标识码：B文章编号：1005-0515（2011）10-009-03

Influence of IL-18 and IL-12 on Cholesterol efflux

JIANG Hailu1 LI Tong2

(1. Cardiovascular Institute of Nanhua UniversityHunan Hengyang 421001 ；2. Shenzhen Second People’s HospitalGuangdong Shenzhen 518036)

【Abstract】Objective IL-18 and IL-12, mainly produced by activated macrophages, are multifunctional cytokines which have been found to be excessively expressed in inflammatory atherosclerosis lesions.This study was to investigate the changes of cholesterol efflux, ATP-binding cassette transporter A1 (ABCA1) mRNA and protein expression in THP-1 macrophage derived foam cells after treated by IL-18, IL-12, or both, and to discover the combined effects and mechanisms of IL-18 and IL-12 on the down-regulation of ABCA1 in foam cells. Conclusions These findings suggest that combined treatment with IL-18 and IL-12 can down-regulate the expression of ABCA1 mRNA and protein, promote the accumulation of lipid and decrease cellular cholesterol efflux in THP-1 macrophage derived foam cells.

【Keywords】ATP-binding cassette transporter A1 IL-18R IL-12 Nucleus factor-κB Cholesterol efflux

白细胞介素18（IL-18）和白细胞介素12（IL-12）是具有多种生物学功能的炎症因子，近来发现两者在动脉粥样硬化（As）斑块中过量表达。大量流行病学调查证实，血清IL-18水平与心血管疾病的风险呈正相关，提示IL-18介导了人体As病变的发生发展[1-3]。IL-12是一种与IL-18具有类似功能的炎性细胞因子，在As斑块中，IL- 12与IL-18共表达[4]。本研究观察IL-18及IL- 12作用下ABCA1表达及胆固醇流出的变化，为明确炎症与RCT的关系提供新的理论依据。

1 资料与方法

1.1 细胞培养

THP-1细胞生长于含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养液中，于37℃、5% CO2培养箱中静置培养。培养液中加10 mmol/L的HEPES、1.0×105μ/L的青霉素和100 mg/L的链霉素，取对数生长期细胞进行实验。在每次实验前用160 nmol/L的佛波酯诱导THP-1细胞24 h，使其贴壁并转化为巨噬细胞。

1.2 胆固醇流出实验

胆固醇流出检测按本实验室的常规方法进行，THP-1细胞用0.2μCi/ml[3H]胆固醇在含有10%小牛血清RPMI-1640培养液共同孵育待细胞长至85%时，用PBS液洗涤细胞，置含脂蛋白的无血清RPMI-1640培养液中培养24小时。PBS液洗涤细胞，闪烁液裂解细胞后，用闪烁计数法检测培养液和细胞中的[3H]胆固醇。胆固醇流出率用培养液中CPM除以总CPM(培养液CPM+细胞CPM)，再乘以100%来表示。

1.3 高效液相色谱分析

待细胞处理结束后，弃培养基，PBS洗3遍，加入细胞裂解液200μl，反复冻融3次裂解细胞，BCA法定量蛋白后，7.2%三氯乙酸沉淀蛋白，800×g离心10min，取上清进行胆固醇检测,以豆甾醇为内标。取100μl上清液，加入8.9mol/L氢氧化钾溶液200μl，水解胆固醇酯后为细胞内总胆固醇检测样品。各样品分别与内标液混匀，用正己烷和无水乙醇抽提后，1.5mol/L的三氧化铬进行氧化衍生并真空干燥，100μl 乙晴-异丙醇（80:20）溶解样品，上样于高效液相色谱仪。采用C-18柱，柱温4℃，流速1mL/min，250nm紫外光检测，胆固醇以峰面积定量，内标校准，以mg/g细胞蛋白为单位。

1.4 细胞白的提取

弃去培养基，用冰浴PBS（含PMSF）洗涤细胞三次，用细胞刮子从培养瓶壁上刮落细胞后收集到离心管中，1000转离心5分钟，去上清液，加1ml冰浴PBS（含PMSF），洗涤沉淀，并将细胞移至Ep管，4℃ 14000转离心5min，弃上清，加入400μl冰冻的缓冲液A（10mM Hepes,1.5mM Mgcl2,10mM Kcl,1mM DTT,0.5%Np-40,100μg/ml PMSF）将细胞重悬，用移液枪将匀浆吹吸15-20次，冰上静置15min后。4℃ 14000转离心20sec，沉淀用冰浴缓冲液A洗一次，用不含Np-40的缓冲液A洗一次，同上方法离心，沉淀重新悬浮在0.5倍体积的冰浴缓冲液C（20mM Hepes,1.5mM Mgcl2,420mM Nacl,1mM DTT,0.2mM EDTA,100μg/ml PMSF）中。样品用旋涡振荡仪，振荡20分钟，14000g离心20秒，上清含细胞核提取物，放置于新的Ep管，加入等体积的冰浴缓冲液D（20mM Hepes(pH7.9), 100mM Kcl, 20%甘油, 1mM DTT, 0.2mM EDTA, 100μg/ml PMSF），立即冰冻－80℃保存。使用时，样本与SDS缓冲液一起煮沸后，-20℃ 保存备用。

1.5 统计学分析

实验所得数据采用均数±标准差（x±s）表示。用SPSS 12.0进行统计处理，组间比较采用方差分析及t检验, 以P＜0.05判定差异的显著性。

2 结果

2.1 IL-18对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的影响

THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度（0，2，20，200 ng/ml）IL-18处理24h后，提取细胞总RNA和蛋白，通过实时荧光定量PCR和Western blot测定细胞内ABCA1基因和蛋白质表达的变化。结果显示，用IL-18单独处理细胞，ABCA1 mRNA和蛋白表达无显著变化（图1）。

图1 不同浓度IL-18对ABCA1 mRNA表达的影响（n=3）

*P＞0.05 vs 0ng/ml组

2.2 IL-12对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的影响

THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度（0，0.2，2，20 ng/ml）IL-12处理24h后，提取细胞总RNA和蛋白，通过实时荧光定量PCR和Western blot测定细胞内ABCA1基因和蛋白质表达的变化。结果显示，用IL-12单独处理细胞，ABCA1 mRNA和蛋白质表达无显著变化（图2）。

图2 不同浓度IL-12对ABCA1 mRNA表达的影响（n=3）

*P＞0.05 vs 0ng/ml组

3 讨论

近年来，越来越多的研究证明动脉粥样硬化（As）具有慢性炎症疾病的病理生理过程，在As斑块中大量的炎性细胞浸润和炎性因子的表达促进斑块的发生、发展和破裂[5]。流行病学调查研究显示，高密度脂蛋白（high density lipid，HDL）水平与As相关的心血管疾病的风险呈负相关，其主要抗As的机制与HDL促进胆固醇逆向转运（RCT）有关[6]。RCT是将外周胆固醇转运到肝脏进行代谢的过程，其中HDL的主要成分载脂蛋白A-I（apolipoprotein A-I，apoA1-I）通过ABCA1促进巨噬细胞内胆固醇流出是RCT的关键环节[7]。最近的研究显示，炎症反应抑制体内RCT，可能为炎症促进As提供理论基础。然而，炎症影响RCT的具体机制还有待进一步阐明，其中炎症状态下脂质转运体ABCA1的表达变化可能是其关键机制[8-9]。ABCA1的表达受到多因素多水平的调控。在转录水平，多种促炎细胞因子，如TNF-α[10]、IL-1β[11]、C反应蛋白（CRP）[12]和IFN-γ[13]等通过LXR下调ABCA1的表达，从而抑制胆固醇的流出。在转录后水平，促炎蛋白，如LPS[14]、EPA[15]、钙蛋白酶[16]和钙调蛋白[17]等通过下调ABCA1的稳定性促进其降解，这些研究提示炎症状态下ABCA1的表达受到多种因素调节。

IL-18和IL-12是在As斑块中过量表达的炎症细胞因子，两者的水平与心血管疾病的风险呈正相关[18-20]。IL-18属于IL-1超家族成员，目前认为其是内源性和获得性免疫炎症反应的重要调节子[21]。IL-12由IL-12p40、IL-12p35两个亚基组成的，其中IL-12p35普遍表达于各类细胞，而IL-12p40主要表达于免疫细胞。在静止状态下，各种细胞中的IL-12p35是很微量的，在免疫反应时，IL-12p40可大量合成[22]。IL-12具有类似于IL-18的功能，对IL-18的生物学功能具有协同效应，两者的协同作用对于诱导IFN-γ等炎症因子的表达[23, 24] 、启动Th1反应[25, 26]和树突状细胞（DC）成熟[27, 28]等具有重要作用。虽然IL-18最初的功能被认为与诱导IFN-γ有关，然而最近的研究显示IL-18具有多种促As的功能。生理状态下，IL-18及其受体主要在血管平滑肌细胞和内皮细胞表达，炎症细胞表达IL-18R相对较少。但在As斑块中IL-18及其受体过量表达，尤其在巨噬细胞中表达明显。在血管平滑肌细胞、内皮细胞和巨噬细胞中，IL-18诱导IL-6、IL-8、ICAM-1和基质金属蛋白酶（MMPs）的表达，而且，与IL-12共同作用后，IL-18能促进平滑肌细胞IFN-γ的表达，这些作用对于As的形成具有重要意义[29]

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白细胞介素范文第6篇

因子及其他炎性介质,从而导致肾脏免疫损害。白细胞介素-6与急性肾小球肾炎、原发性肾病综合征、IgA肾病、紫癜性肾炎、狼疮性肾炎、慢性肾炎等疾病有相关性,本文主要是对白细胞介素-6在肾小球疾病中的作用进行综述。

[关键词] 白细胞介素-6;肾小球疾病;炎性介质;免疫损害

[中图分类号] R692.6 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2010)06(a)-014-02

白细胞介素-6主要由单核巨噬细胞合成,肾脏的固有细胞如系膜细胞、上皮细胞、内皮细胞亦可合成,其分子量为21～26 KD。白细胞介素-6是具有多种生物活性的细胞因子,是炎性反应的诱导者。白细胞介素-6在肾小球疾病中的表达与肾小球的数目呈正相关,还可刺激系膜细胞产生血小板活化因子及其他炎性介质,从而导致肾脏免疫损害的进一步发展。

1 白细胞介素-6与急性肾小球肾炎(AGN)的关系

余建莉等[1]研究发现急性肾炎急性期和肾功能不全的患儿血清白细胞介素-6水平明显增高,认为白细胞介素-6对AGN患儿有无感染及病情轻重的评估有一定的意义,且白细胞介素-6参与了急性肾炎的病理过程,同时认为白细胞介素-6增高标志着免疫系统的激活,可作为检测急性肾炎病情严重程度的指标。

2 白细胞介素-6与原发性肾病综合征的关系

原发性肾病综合征是以T细胞紊乱为主导致免疫紊乱的一种肾小球疾病,细胞因子中白细胞介素-6是较具有代表性的TH2类的细胞因子,同时白细胞介素-6还可影响肾病综合征基底膜的结构和通透性,有研究发现激素敏感型血PBMC培养上清液中白细胞介素-6水平增高,而激素耐药型肾病综合征其白细胞介素-6水平不增高,所以康国贵等[2]研究认为检测白细胞介素-6水平可能对预测激素的疗效及调整治疗方案具有重要的意义。钟志敏等[3]发现细胞因子随病情的严重程度而变化,其中白细胞介素-6升高最明显,认为白细胞介素-6是判断肾病综合征疾病严重程度的敏感指标。

3 白细胞介素-6与IgA肾病的关系

白细胞介素-6可刺激肾小球系膜细胞增生,增加IgA的结合位点,可使IgA沉积增加从而导致肾脏损害,国外Bantis C[4]研究发现IgA肾病中白细胞介素-6基因G-174C表达具有多态性,并发现白细胞介素-6基因G-174C表达缺失导致IgA肾病的发生。另有Stangou M[5]研究发现尿白细胞介素-6水平较恢复期明显增高,与肾脏的病理损害呈正相关,并且为肾小管间质损害提供重要的信息。追踪8年的Harada K等[6]研究认为白细胞介素-6可预测肾脏疾病长期的进展,国内刘小平等[7]研究发现小鼠血清白细胞介素-6水平与IgA肾病的肾脏病理损害呈正相关,检测到血清白细胞介素-6与小鼠尿红细胞与尿蛋白的改变呈正相关,认为白细胞介素-6可间接反映肾组织病理损害程度。同时认为白细胞介素-6导致血IgA增多,从而导致肾脏免疫复合物增加,最终导致肾脏损害。

4 白细胞介素-6与紫癜性肾炎的关系

白细胞介素-6作为前炎症因子对紫癜性肾炎肾小球起破坏作用。白细胞介素-6促使B细胞分化,使IgA分泌活跃,在肾脏沉积增加,导致肾脏损害。国外Watts RA等[8]研究发现紫癜性肾炎治疗前白细胞介素-6水平较治疗后增加。余振等[9]研究发现紫癜性肾炎血清白细胞介素-6水平急性期与缓解期均较对照组高,认为白细胞介素-6参与了紫癜性肾炎急性期的发病过程。且其活化的T细胞可分泌大量的白细胞介素、细胞因子如白细胞介素-6,炎性反应可加重血管内皮细胞的损害,而过敏性紫癜的病理改变为变态反应性小血管炎,主要是血管内皮功能障碍。

5 白细胞介素-6与狼疮性肾炎的关系

Hiroheta S等[10]发现狼疮性脑炎脑脊液中白细胞介素-6水平较血清中白细胞介素-6水平高。考虑系统性红斑狼疮病变时局部白细胞介素-6产生过多,认为狼疮性肾炎尿白细胞介素-6检测是较好的检测手段。白细胞介素-6抗体通过参与维持B细胞高活性状态的自分泌途径促使IgG自发性生成,而在狼疮性肾炎中表达。白细胞介素-6与狼疮性肾炎的活跃有关并被认为是狼疮性肾炎活动性的指标之一。Hash H等[11]减少MRL-Faslpr老鼠体内白细胞介素-6的生成,监测6个月白细胞介素-6水平,MRL-Faslpr老鼠白细胞介素-6的缺乏导致狼疮活跃性减低,减少了狼疮性肾炎的发病率。认为白细胞介素-6可导致未成熟的T细胞转化为毒性T细胞并抑制正常T细胞,且白细胞介素-6可使肾脏内皮细胞释放巨噬细胞,导致巨噬细胞浸润,故白细胞介素-6缺乏,导致狼疮性肾炎的发病率减少及狼疮的活跃性减低。

6 白细胞介素-6与慢性肾炎的关系

白细胞介素-6可促使系膜增生,导致肾脏血流动力学的改变,从而加速了肾小球的硬化过程,另外白细胞介素-6是肾小球细胞增殖自分泌信使,可促进肾小球系膜细胞的纤维化,肾衰竭患儿血白细胞介素-6水平显著升高,与患者是否接受血液净化无相关性,另有Panichi V等[12]研究发现25%的慢性肾衰竭患者出现血白细胞介素-6水平升高,其升高程度与肾功能呈负相关,Garibotto G等[13]研究发现外周组织骨骼肌释放白细胞介素-6在慢性肾炎中起了重要的作用。白细胞介素-6基因的多态性导致了慢性肾小球肾炎病情的进展,并且是加速病情进展至终末期肾病的独立风险。并认为白细胞介素-6不仅是前炎性因子和炎性介质,还是具有多种作用的媒介,根据不同的疾病而表现出不同的炎性机制。

7 白细胞介素-6与其他肾小球损害

白细胞介素-6可作为急性胰腺炎肾损害的指标,原因是白细胞介素-6使血栓调节蛋白活性降低,加重肾缺血及血栓程度,还可导致其他炎性细胞分泌,直接导致肾脏损害。白细胞介素-6通过激活T、B细胞,加速细胞凋亡,促进胰岛细胞的破坏、系膜细胞的增殖导致糖尿病患者肾脏的损害。

总之白细胞介素-6是由肾小球固有细胞产生,同时又会加剧肾脏的损害,故希望通过减低血白细胞介素-6水平从而减轻肾小球疾病的损害,延缓病程,提高肾小球疾病患者的生活质量。

[参考文献]

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白细胞介素范文第7篇

Induction of secretion of interleukin8 from lung epithelial cells by trypsin

【Abstract】　AIM: To investigate the actions of trypsin on the secretion of interleukin8 (IL8) from human lung epithelial cells. METHODS: A549 cells were cultured in a 12well culture plate. The challenge was performed by adding various concentrations of trypsin or trypsin inhibitor into each well, respectively. After 2 h, 8 h or 16 h, the reactions were terminated by removing the supernatant from each well. A sandwich ELISA was used to determine the levels of IL8 in supernatants. RESULTS: Following 16 h incubation, trypsin induced the secretion of IL8 in a concentration dependent manner. As low as 1 μg/L trypsin was able to induce IL8 release from epithelial cells and the maximum of accumulated release of IL8 was observed with 3 μg/L trypsin, which was 5fold more than the baseline release. However, when trypsin concentration increased over 3 μg/L, the extent of increased secretion of IL8 decreased. Soybean trypsin inhibitor (SBTI) and α1antitrypsin (α1AT) inhibited trypsin induced secretion of IL8. The time course showed that the actions of trypsin initiated at 2 h and reached their peak at 16 h. CONCLUSION: Trypsin is a potent secretogogue of IL8 release from cultured human lung epithelial cells, indicating that it is likely to be involved in the pathophysiological process of airway inflammation.

【Keywords】 trypsin；epithelial cells; interleukin8; lung

【摘要】 目的： 探讨胰蛋白酶对人上皮细胞白细胞介素8（IL8）分泌的影响. 方法： 人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内，并分别用不同浓度的胰蛋白酶和/或胰蛋白酶抑制剂进行刺激. 刺激时间为2 h、8 h和16 h. 用ELISA方法检测上清液中的IL8水平. 结果： 经过16 h的培养，胰蛋白酶可引起浓度相关性IL8释放，胰蛋白酶在浓度1 μg/L时就可引起IL8的释放量增加，3 μg/L时诱导IL8的释放量达高峰,为基础分泌量的5倍，但随着胰蛋白酶浓度的增加，IL8的释放量反而下降. 胰蛋白酶抑制剂可以抑制胰蛋白酶诱导IL8释放的作用. 时间相关曲线表明，胰蛋白酶从2 h起即可引起IL8释放，16 h达高峰. 结论： 胰蛋白酶可促进人肺上皮细胞分泌IL8，表明它能积极参与呼吸道的炎症过程.

【关键词】 胰蛋白酶；上皮细胞；白细胞介素8；肺

0引言

蛋白酶激活受体（protease activated receptor, PAR）属G蛋白耦联受体家族中的亚类，目前有PAR14 4个成员组成，PAR2可在人呼吸道上皮细胞和多种呼吸道肿瘤上皮细胞系表面表达［1-5］. 胰蛋白酶主要由胰腺分泌，在体内主要参与肠道消化功能. 最近研究表明，胰蛋白酶还是PAR2的激动剂，胰蛋白酶在人PAR2的R34?S35LIGKV处切断受体的N末端暴露系锁配体SLIGKV，从而激活PAR2参与肺部炎症［6］，而PAR2的缺乏可以降低气道炎症反应［7］. 因此，我们利用人肺癌上皮细胞系A549细胞探讨胰蛋白酶对上皮细胞IL8分泌的影响.

1材料和方法

1.1材料

胰蛋白酶、大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)、α1抗胰蛋白酶(α1AT)、青、链霉素均购于Sigma公司，DMEM 培养液、胎牛血清（FBS）、胰蛋白酶EDTA消化液均购自Gibco公司.

1.2方法

1.2.1细胞培养人肺癌上皮细胞系A549细胞（购自中国科学院上海细胞研究所）接种于50 mL培养瓶内，用DMEM完全培养液（含100 g/L FBS, 10×104 U/L青霉素和100 mg/L链霉素），于37℃，50 mL/L CO2培养箱中培养.

1.2.2上皮细胞激发实验待细胞铺满瓶底后，用2.5 g/L胰蛋白酶EDTA消化液消化，将获得的细胞分种于12孔培养板各孔内，用1 mL完全培养液培养至细胞相互融合后，换无血清培养液培养16 h. 然后向每孔的细胞内加入不同浓度的胰蛋白酶和/或胰蛋白酶抑制剂进行激发实验. 胰蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶加入细胞前在冰上孵育30 min,细胞培养2, 8和16 h后收集上清液，离心后于-80℃冻存. 全部实验为双样，每组实验均重复5次.

1.2.3细胞上清IL8水平检测用人IL8 ELISA检测试剂盒（Biosource）, 检测细胞上清液中的IL8水平，并用酶标仪 (Molecular Devices公司) 于450 nm波长处测定吸光度（A）.

统计学处理： 数据以x±s表示,采用SPSS(11.0版)软件进行单因素方差分析,组间方差不齐时采用非参数秩和检验. P<0.05为有统计学意义.

2结果

2.1胰蛋白酶对肺上皮细胞系IL8释放的影响经过16 h的培养，胰蛋白酶可引起浓度相关性IL8释放增加， 胰蛋白酶1 μg/L时就可引起IL8释放量增加， 3 μg/L时达高峰,为基础分泌量的5倍，但随着胰蛋白酶浓度的再增加, IL8的释放量反而下降 （Fig 1）. 时间关系曲线显示，胰蛋白酶引起A549细胞分泌IL8从2 h起就有所增加，16 h增加最显著（Fig 2）.

2.2胰蛋白酶抑制剂对胰蛋白酶诱导释放IL8的抑制作用胰蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶与A549细胞共同培养16 h后结果显示：SBTI在浓度为10和30 mg/L时可分别抑制胰蛋白酶诱导的A549细胞释放IL8的作用（Fig 3）. α1AT在浓度为10 mg/L也能抑制胰蛋白酶引起的IL8释放（Fig 4）.

3讨论

研究表明，PAR2激活能介导气管平滑肌的收缩、促进炎症性细胞的游走和血管的通透性增加，介

n=5. bP<0.05 vs the corresponding.

导嗜酸性粒细胞的浸润［8］，调节血管舒张与收缩，调节消化道和皮肤的功能等［9］. 呼吸道上皮细胞PAR2的激活还可导致基质金属蛋白酶（MMP9）［10］、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）［1,2］、酸性粒细胞趋化因子［4］、前列腺素E2（PGE2）、白细胞介素（IL）6等［4］细胞因子的释放，提示PAR2可能参与气道的炎症和重塑. 激活PAR2的蛋白酶主要有胰蛋白酶、肥大细胞类胰蛋白酶及凝血因子Ⅶa, Xa［11］.

我们的研究表明,胰蛋白酶对呼吸道上皮细胞IL8的分泌有显著促进作用,表明胰蛋白酶能通过激活PAR积极参与呼吸道的炎症过程，间接证明了PAR在哮喘和慢性阻塞性肺疾病的发病过程中起着一定的作用. 胰蛋白酶可引起肺上皮细胞高达5倍的IL8释放，表明它对IL8的释放促进作用是高效的. IL8的释放量高达1.7 μg/L，达到了IL8发挥其生理和病理生理功能的浓度. 胰蛋白酶抑制剂SBTI对胰蛋白酶诱导IL8释放的抑制作用，表明胰蛋白酶的作用是通过其水解活性实现的，也表明胰蛋白酶抑制剂可能有抗炎作用. α1抗胰蛋白酶对胰蛋白酶诱导的IL8释放也具有抑制作用，它作为机体内源性的胰蛋白酶抑制剂可能在呼吸道的抗炎反应机制中起一定作用.

从时间关系曲线上看，胰蛋白酶对IL8分泌的刺激作用是一个比较缓慢的过程，这可能表明分泌出的IL8是由上皮细胞新合成的，而不是原有贮存的IL8的单纯释放.

我们发现，A549细胞系可同时表达PAR14四种受体［12］，而胰蛋白酶既可酶切PAR2又可酶切PAR4从而激活受体，因此，胰蛋白酶引起的肺上皮细胞IL8的释放，是单纯由PAR2或PAR4介导还是PAR2与PAR4同时参与，值得进一步探讨.

【参考文献】

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白细胞介素范文第8篇

[关键词]人牙囊细胞；白细胞介素－1O；破骨细胞分化因子

[中图分类号]R783 [文献标识码]A [文章编号]1008―6455(2007)02一02 34―03

牙囊是一层包绕未萌出牙齿的纤维囊性结缔组织，牙囊细胞通过参与破骨作用使牙槽骨吸收，进而形成牙齿萌出道，在牙齿萌出过程中发挥着关键作用。这一过程受到许多因子的调控，其中骨保护素(osteoprotegerin，OPG)和破骨细胞分化因子(RANKIJ)是直接控制破骨细胞形成和分化的功能因子。白细胞介素10(IL-IO)是一种炎症抑制因子，具有抑制破骨的作用。研究表明它能够抑制牙槽骨的破骨细胞性骨吸收。本实验研究体外培养的人牙囊细胞IL-IO蛋白的表达及其对RANKL表达的影响，进一步探讨牙齿萌出的机制。

1材料和方法

1．1实验材料：DMEM培养液(Hyclone，uSA)，胎牛血清(Gibco，USA)，兔抗人IL-10多克隆抗体(Santa Cruz，USA)，辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG抗体(Santa Cruz，USA)，IL-IO(Pepro Tech，USA)，TRIzol Reagent(Invitrogen，USA)，逆转录试剂盒(Invitrogen，USA)。

1．2人牙囊细胞的体外培养与鉴定：取12～16岁因正畸需要拔除的下颌第三磨牙的牙囊组织，采用组织块加胶原酶消化法培养人牙囊细胞。细胞抗波形丝蛋白染色阳性，抗角蛋白染色阴性，表明细胞来源于外胚问充质，无牙源性上皮混杂。取第5代人牙囊细胞进行实验。

1．3人牙囊细胞中IL-IO的免疫组化染色：取生长状态良好的第5代人牙囊细胞进行爬片。细胞爬片用4％多聚甲醛固定lOmin，然后用PBS振洗5min×3次。0．3％的TritonX-100滴在爬片上lOmin，增加细胞通透性；然后滴加3％H202 lOmin，阻断内源性过氧化物酶；滴加10％羊血清封闭30min；不洗，滴加兔抗人IL-IO多克隆抗体后置入湿盒4℃过夜，空白对照组滴加PBS；次日在37℃温箱复温1h，滴加辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG抗体，置入37℃温箱lh；以上每步之后用PBS振洗5min×3次，然后DAB显色5～l0min。苏木素复染，逐级脱水，透明，中性树胶封片。

1．4RT-PCR检测IL－10对人牙囊细胞RANKL表达的影响：取生长状态良好的第5代人牙囊细胞，在终浓度为25ng／m1 IL-IO作用下分别于0、1、3、6h收获细胞。用TRIzol Reagent提取细胞总RNA。取2℃总RNA用逆转录试剂盒完成cDNA第一链的合成，然后进行PCR扩增。RANKL引物序列：上游引物：5’GGCTCATGGTTAGATCTGGC-3’： 下游引物：5’TGACCAATACTTGGTGCTTCC-3’；该引物产生351bp的eDN段。GAPDH引物序列：上游引物：5’GCTCTCCAGAACATCTACC-3’；下游引物：5’GTGTCGCTGTTGAAGTCAG-3’；该引物产生266bp的eDN段。引物由上海生物工程公司合成。反应条件为：RANKL 94℃预变性2min：94℃变性30s，59℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸lOmin。GAPDH 94℃ C预变性2min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸lOmin。PCR产物经1．5％琼脂糖凝胶电泳，在紫外透射仪下观察，凝胶图像分析系统成像。计算RANKL与GAPDH的灰度值之比，用来评定RANKL的相对表达量。以上实验重复进行3次。统计分析采用SPSSIO．0软件进行单因素方差分析(P＜O．05)，认为有显著性差异。

2结果

2．1人牙囊细胞中IL-IO的表达：人牙囊细胞中IL―10表达阳性，胞质呈棕褐色，空白对照组表达阴性(如图1)。

2．2 IL-IO对人牙囊细胞RANKL表达的影响：PCR产物测序结果与基因库中公布的RANKL(NM003701)的序列100％一致。RANKL、GAPDH的扩增产物分别为351bp、266bp(如图2)。25ng／mlIL-IO作用于人牙囊细胞1、3、6 h，RANKL的表达均有显著性降低(P＜O．05)，即在6h的作用时间内，25ng／m1 IL-IO降低人牙囊细胞RANKL的表达，且具有时间依赖性(如图3)。

3讨论

IL-IO主要由Th2细胞、B细胞和单核细胞产生。有研究证实牙周膜细胞产生IL-IO[5~。本实验表明人牙囊细胞也产生IL-IO。Liu等发现大鼠牙囊细胞表达IL-IO，并且牙囊在大鼠出生后牙齿萌出的l～9天时间内都表达IL-IO。这说明IL-IO参与了牙齿萌出的过程。Al-Rasheed报道IL-IO基因敲除小鼠的牙槽骨吸收加速。IL-IO可以抑制牙槽骨的破骨细胞性骨吸收。

OPG和RANKL是调控骨代谢的两种重要因子。人牙囊细胞表达0PG和RANKL。RANKL是一种膜结合蛋白，属肿瘤坏死因子超家族成员，存在于骨髓基质细胞和成骨细胞表面。它的跨膜信号受体是破骨细胞前体细胞表面的RANK。成骨细胞表面的RANKL与破骨细胞前体细胞表面的RANK结合，使破骨细胞分化和激活，形成破骨细胞性骨吸收。RANK-RANKL途径被认为是在破骨作用发生的过程中起关键作用的途径，牙齿萌出时在牙槽骨中发生的破骨作用也是通过这一途径进行的。研究表明，缺乏RANKL基因的小鼠全身缺乏破骨细胞，牙齿不萌出。OPG属肿瘤坏死因子受体超家族成员，是一种分泌型糖蛋白，由成骨细胞合成。OPG作为RANKL的饵受体，竞争性地结合RANKL，使RANKL不能与RANK结合，阻断RANK-RANKL途径，抑制破骨细胞性骨吸收。

本实验进一步表明：IL-IO降低人牙囊细胞RANKL的表达，因此在牙齿萌出过程中对牙槽骨的吸收发挥抑制作用。从细胞和分子水平研究大鼠牙齿萌出的过程中发现，大鼠出生后9～11天RAN-KL升高，除此时期外RANKL都保持较低水平。研究还发现，大鼠牙齿萌出的特定时期是在出生后第3天和第10天。大鼠出生后第3天，第一磨牙牙囊中单核细胞数量达到峰值，牙齿周围的牙槽骨中破骨细胞数量也最多，破骨作用最强，导致牙槽骨吸收，牙齿萌出。虽然此时RANKL保持较低水平，但OPG降低较多，使RANKL／0PG比值增加，牙槽骨发生破骨细胞性骨吸收。第3天以后OPG表达增加，RANKL仍然保持较低水平，RANKL／0PG比值降低，牙槽骨吸收受抑制。大鼠出生后第10天，破骨细胞数量较多，破骨作用较强，此时RANKL升高，虽然OPG水平较高，但RANKL／0PG比值增加，牙槽骨也发生破骨细胞性骨吸收，牙齿萌出。第10天牙槽骨的破骨细胞性骨吸收强度低于第3天。这说明正常牙齿萌出的过程中存在牙齿萌出的特定时期和非牙齿萌出的特定时期，在非牙齿萌出的特定时期牙槽骨吸收受到抑制。IL-IO可以通过降低RANKL的表达抑制牙槽骨的破骨细胞性骨吸收，在非牙齿萌出的特定时期发挥作用，而且IL-IO自身也能抑制破骨细胞性骨吸收，这样可以保证在非牙齿萌出的特定时期牙槽骨保持正常状态。

本实验首次证实人牙囊细胞产生IL-IO，IL-IO通过降低人牙囊细胞RANKL的表达，在牙齿萌出过程中起重要的调控作用，为进一步研究牙齿萌出机制打下基础。

白细胞介素范文第9篇

【关键词】白细胞介素13；支气管哮喘；综述文献

支气管哮喘已被证实属于慢性气道炎症。以多种炎症细胞如嗜酸性粒细胞，淋巴细胞等的浸润为特征，同时伴有哮鸣音和气道高反应性。其有2个炎症通道，糖皮质激素通道和白三烯通道。研究表明，白细胞介素（IL）参与支气管哮喘发病的各个环节。而，而白细胞介素13在近年来的研究中，被发现具有越来越重要的作用。本文就白细胞介素13（IL13）在支气管哮喘发作中的作用，做一综述。

1白细胞介素13的结构与其来源

IL-13可由CD4及Th2细胞进行分泌，其可对嗜酸性粒细胞产生活化作用，并对IgE的分泌起到促进作用。IL-13的分子量是12000μ，其存在形式为非糖基化蛋白，且5号染色体是其基因定位。IL-3，IL-4，IL-5和GM-CSF的基因也存在于该基因附近。以上几个基因都属于IL-4家族，且IL-13与IL-4家族基因的结构和调控序列具有相似性，因此有学者推断，IL-13可能属于IL-4家族。

IL-13与IL-12互相抑制，在哮喘的发病机制中，互相影响。研究表明，在哮喘患者的支气管中，可发现IL-12mRNA的阳性细胞降低，而IL-13mRNA的阳性细胞增多。经过激素疗法，对激素敏感的患者组中，其FEV1值在IL-13mRNA的表达下降时而下降，并且在IL-12mRNA的表达增多时而提高。因此，我们可以推断，IL-12/IL-13的不平衡是产生哮喘的重要原因。

2生物学效应及作用机制

2.1对单核巨噬细胞系应答的调节作用IL-13对于人体的单核细胞产生的作用具有多变性。若人体外周血附近的单核细胞粘附性较强，则IL-13可对细胞的表型及形态产生明显的作用。在IL-13的培育下，这些细胞的生长可发生树突状或平铺等情况，且可有细胞集落形成，对培育的单核细胞的生长时间具有增强的作用，从而使其生长活力不低于30天。根据酶联免疫吸附试验，IL-13对趋化因子，炎症生长因子及造血因子等的转录水平具有抑制作用[1]。IL-8、IL-1β、P40、α干扰素（IFN-α）、巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）、IL-1α等均包括在内。而IL-8主要是由单核细胞及巨噬细胞产生，在这些细胞的表面，均可表达IL-8受体。IL-8可通过以上细胞，从而达到发生炎症的部位，从而引发过敏反应。MIP-1α属于β亚家族趋化因子之一，可激发并趋化单核细胞及T细胞。此外，单核细胞可激活单核细胞并产生IL-1rα，而IL-13对该过程具有促进作用。IL-1rα可竞争性抑制IL-1α与IL-1β的结合及Ⅰ型与Ⅱ型IL-1的受体结合。对于急慢性的炎症过程，IL-1rα对IL-1的作用具有抑制作用，从而产生抗炎作用。结果发现，IL-13对炎症因子的促进及合成作用诱导IL-1rα产生抗炎作用。通过对小鼠的巨噬细胞进行研究，发现IL-13可作用于巨噬细胞，从而降低一氧化氮的产生量。而一氧化氮可对巨噬细胞的作用产生影响，同时还能决定是否能杀死寄生虫，所以IL-13可双重调节免疫应答。

2.2对B细胞的增殖及分化的诱导作用IL-13对B细胞的表达具有诱导作用，且对于分泌型IgM，Ⅱ类抗原及CD72的表达具有诱导作用。对于B细胞产生的IgG及IgE也有诱导作用。最新的研究表明，就IgE的基因转录而言，IL-13同样具有诱导作用[2]，且对于B细胞合成DNA具有促进作用。总体而言，IL-13对于B细胞的分化及增值，具有促进作用，可有效提高B细胞的增长。

2.3T细胞趋化的抑制作用研究表明，T细胞在RAN Tes或IL-8的作用下，可发生趋化运动，而IL-13可抑制这种运动，并抑制这些因子的产生。IL-13对于损失部位或炎症部位的趋化运动，具有抑制作用，因而可有效地调节炎症。

2.4血管内皮细胞因子表达的诱导根据流式细胞仪技术及间接免疫荧光的检测结果发现，IL-13可诱导1（VCAM-1）表，且是剂量依赖性的[3]。IL-13与适宜浓度的IL-13（15μg/ml）产生作用，24小时后可使嗜酸性粒细胞产生粘附作用。这也表示IL-13对于VCAM-1的表达具有选择性地刺激作用。所以，IL-13可有效地诱导血管内皮细胞因子的表达。

2.5调节中性粒细胞及天然杀伤细胞IL-13对T细胞趋化的抑制作用可对中性粒细胞运动产生影响。IL-13对于中性粒细胞产生IL-1ra的可产生诱导作用，且该作用主要发生在转录。

3IL-13和支气管哮喘的关系

在理论上，IL-13对于支气管哮喘的病理作用有3个作用。首先，IL-13可诱导血管内皮粘附因子的表达，对嗜酸性粒细胞的聚集作用产生诱导作用。其次，对于TH2细胞的表达具有促进作用。最后，参与内源性哮喘及过敏反应的表达。

哮喘的本质是慢性炎症，且以气道高反应性为其主要临床特点。通常会使用支气管激发试验来确诊支气管哮喘。因而，我们可以推断，支气管哮喘是通过气道炎症引起的。而相关的试验也表明，IL-13明显诱导支气管哮喘。

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白细胞介素范文第10篇

【关键词】 喉癌

摘 要：目的：研究血清可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）和一氧化氮（NO）水平在喉癌患者中的检测和临床意义。方法：应用单克隆、多克隆双抗体夹心ELISA及硝酸还原酶法检测sIL-R和NO水平。40例喉癌患者为观察组，同期住院的29例声带息肉患者作为良性对照组，30名健康志愿者作为健康对照组。结果：喉癌患者sIL-R水平较良性对照组或健康对照组显著升高（P<0.001），与喉癌淋巴结转移、临床分型亦密切相关；喉癌患者NO水平显著高于良性对照组或健康对照组（P<0.01）。结论：血清sIL-R 水平检测可做为喉癌诊断的一项辅助指标，并有助于了解喉癌的大小，病程发展及淋巴结转移情况等；NO可能在分子水平上参与了喉癌的发生发展，其检测可作为喉癌患者病情演变的监测指标。

关键词：喉癌； 血清可溶性白细胞介素-受体；一氧化氮

The Detection and Significance of sIL-R and NO in Serum

of Patients with Laryngeal Cancer

Abstract: Objective： To research the detection and clinical significance of sIL-R and NO in serum of patients with laryngeal cancer. Method： Detected the level of sIL-R and NO in serum through monoclonal and polyclonal diploantibody enzyme-linked immunoadsordent assay and nitrate reductase methods. There were 40 patients with laryngeal cancer in observing group， and 29 cases of vocal polyp of the same hospital in benign constracting group. 30 cases healthy volunteer were treated as healthy constracting group. Result： The level of sIL-R in patients with laryngeal cancer was significantly higher than benign contrasting group or healthy volunteer group (P<0.001)， and it was closely related to the condition of lymphonodus metastasis and clinical typing. The level of NO in observing group was significantly higher than benign contrasting group or healthy volunteer group (P<0.01).Conclusion： The detection of sIL-R in serum can be applied as an assist marker of diagnosing laryngeal cancer. It will be useful to know the size ， course and the condition of lymphonodus metastasis of the cancer . NO may be take part in the genesis and development of laryngeal cancer from molecule level and its detection is a useful parameter to estimate the development of laryngeal of cancer .

Key words: Laryngeal cancer； sIL-R； NO

可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）现今已被作为某些恶性肿瘤的诊断、预后与指导治疗的一项重要指标，而一氧化氮（NO）是一种新型的生物细胞信使分子和效应分子，对肿瘤的增长、转移有一定的作用及影响［1］。但目前有关可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）和一氧化氮（NO）水平在喉癌中变化情况的报道极少，本研究通过对喉癌患者进行二者的检测，并与良性和健康组对照，探讨二者与喉癌的关系及临床意义，并进一步提出临床治疗的检测指标。

1 资料与方法

1.1 资料的来源与分组。病例选自2003年1月至2004年12月，经病理检查证实并在广东医学院附属医院治疗的喉癌患者40例，为观察组，平均年龄（59.23±12.37）岁，其中Ⅰ期5例、Ⅱ期11例、Ⅲ期18例、Ⅳ期6例；另选择同期住院的声带息肉患者29例作为良性对照组，男性21例，女性8例，平均年龄（41.39±14.28）岁；正常献血员30例作为健康对照组，其中男性18例，女性12例，平均年龄(39.85±13.51)岁。

1.2 标本的收集与测定

1.2.1 标本的收集：采静脉血2～3ml，室温下静置2h，经2000r/s离心15min后分离血清， 将标本均于-20℃以下冰柜保存备测。观察组患者在行治疗前1d清晨取血。

1.2.2 可溶性白细胞介素-2受体和一氧化氮的检测：IL-R采用ELISA间接法检测，按试剂盒说明书进行。IL-R检测试剂盒来源于本校免疫教研室。用标准A(OD)值减去空白对照A值绘制标准曲线，在曲线上检得样品sIL-R含量，结果以U/ml表示。NO的测定采用硝酸还原酶法，即用硝酸还原酶特异地将NO3-还原为NO2-，通过检测血清NO3-和NO2-之和反应体内一氧化氮水平［2］，使用波长540nm比色测定，分别读取测定管和标准管的消光值A，按下式计算：测定管A÷标准管A×100=标本NO含量(μmol/L)，一氧化氮试剂盒(酶法)由南京提供，采用上海分析仪器厂752型分光光度计进行比色法测定。

1.3 治疗方法：观察组患者的治疗依据病情的不同分别采用部分喉切除术、全喉切除术、全喉切除术加单侧颈廓清术及全喉切除术加部分甲状腺切除术，并结合放射治疗，本组患者治疗后均采用及定期门诊复查两种形式长期随访。

1.4 统计学处理：采用SAS9.0进行统计学分析，资料中数据均以均数±标准差(±s )表示，进行成组设计的t检验。

2 结 果

2.1 血清可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）水平的比较：观察组sIL-R水平高于良性对照组和健康对照组，有显著性差异（P<0.001）。观察组Ⅳ期患者 sIL-R水平高于Ⅰ期患者，差异有统计学意义（P<0.001）；Ⅱ、Ⅲ期患者sIL-R水平高于Ⅰ期患者，差异有统计学意义（P<0.01）；Ⅳ期患者sIL-R水平与Ⅱ、Ⅲ期患者相比，差异无统计学意义（P>0.05）（见表1）。表1 各组血清sIL-R水平的比较（略）

2.2 血清可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）水平与子宫颈癌的淋巴结转移、分化程度的关系：伴有淋巴结转移的患者的血清sIL-R水平高于未发生转移的患者，差异有统计学意义（t=2.75，P<0.01）；Ⅳ期和Ⅱ、Ⅲ期 sIL-R水平均高于I期，差异有统计学意义（t=6.72，P<0.001；t=3.21，P<0.01）。

2.3 血清一氧化氮（NO）水平的比较：喉癌患者血清NO水平明显高于良性对照组和健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；喉癌I期患者，NO含量为85.93±14.21μmol/L;Ⅱ、Ⅲ期为99.52±15.76μmol/L; Ⅳ期为108.39±16.71μmol/L。分化程度越低，NO含量越高，差异有显著性(P <0.05)。（见表2）。表2 各组血清NO水平的比较（略）

3 讨 论

sIL-R是由多种细胞诸如成熟的活化性T细胞、B淋巴母细胞、未成熟的骨髓前体细胞和胚胎胸腺细胞产生的一种复合糖蛋白，主要由成熟的活化性T细胞产生， 作为一种低亲和力受体与细胞膜上白细胞介素-受体竞争结合IL-，作用类似封闭因子，其通过中和活化T细胞周围的IL-和抑制已活化的T细胞的克隆性扩增，从而抑制机体的免疫反应［3］，与某些疾病的变化密切相关。因此，血清中sIL-R水平的检测可间接地反映机体的细胞免疫功能状态，目前已成为肿瘤免疫的监测指标。

我们的研究结果表明子喉癌病人血清sIL-R水平异常增高，观察组sIL-R水平与正常对照组及良性对照组相比均显著升高，并且喉癌患者中，低分化和中分化者sIL-R水平显著高于高分化者，已发生淋巴道转移的患者sIL-R水平高于未发生转移者。这说明sIL-R水平可做为喉癌的辅诊断指标，对于区分喉部良性疾病与喉癌，以及判断喉癌的大小，病程发展及淋巴结转移情况等有参考价值。

一氧化氮(NO)是一种新型的生物细胞信使分子和效应分子，由一氧化氮合酶催化L-Arg和分子氧反应生成。浓度较高的NO可通过抑制细胞DNA复制降低呼吸链中关键酶的活性，生成具有强氧化性的羟自由基等途径［4］而发挥细胞毒作用，并参与体内一系列生理和病理条件下的生物过程，调节循环、神经、免疫等系统生理功能，同时也能参与包括肿瘤在内的病理过程，对肿瘤细胞的增殖、转移有一定影响。

本研究结果显示，喉癌病人血清NO水平异常增高，观察组NO水平明显高于正常对照组和良性对照组，并且喉癌患者中，低分化和中分化者NO水平显著高于高分化者，分化程度越低，NO水平越高。这可能是癌细胞可直接或间接通过白细胞介素、肿瘤坏死因子等间接激活巨噬细胞等多种细胞，促进NO合成，造成体内NO水平升高。结果提示NO 可能参与喉癌患者的肿瘤免疫，在喉癌的发生发展中起重要作用。其含量的测定能反映喉癌的病理分化程度，可作为监测喉癌患者病情演化的一项重要指标。

参考文献：

［1］杜晓东，栾信庸，舒畅. 一氧化氮在耳鼻咽喉科肿瘤的研究进展［J］.临床耳鼻咽喉科杂志,2002,16(6):573-575.

［2］Nathan C. Nitric oxide as secretory product of mammalian cell ［J］. FASEBJ, 1992,6(12):3051-3064.

［3］Lissanip B, Barnis G, Rovekki F, et al.The biological significance of solube interleukin- receptors in solid tumors［J］. Eur Cancer,1990,26(1):33-36．