ER、VEGF、MVD在肺癌组织中的表达及其临床意义

[摘要] 目的探讨雌激素受体(ER)与血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与生物学行为的关系。方法76例临床资料完整的肺癌手术切除标本，采用免疫组化方法检测其中ER、VEGF及微血管密度(MVD)的表达情况。结果76例NSCLC的ER的阳性表达率为69.7％(53/76)，VEGF的阳性表达率为48.7％(37/76)。临床分期低、无淋巴结转移和中高分化的ER表达要高于临床分期高、有淋巴结转移和低未分化的的肺癌组织，临床分期低、有淋巴结转移和低未分化的VEGF和MVD的表达要高于临床分期低、无淋巴结转移和中高分化的肺癌组织，差异均具有统计学意义(P

[关键词] 非小细胞肺癌；雌激素受体；血管内皮生长因子；微血管密度

[中图分类号]R734.2 [文献标识码]A [文章编号] 1672-4208(2009)11-0008-02

肺癌是人类常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率逐年增加。近年来，雌激素受体(ER)的检测在乳腺癌、子宫内膜癌及前列腺癌等激素依赖性肿瘤中应用较多，但肺癌组织中雌激素受体的研究起步较晚，对雌激素受体表达意义的认识也不统一。笔者用免疫组化方法研究雌激素受体(ER)、血管内皮生长因子(VEGF)、第八因子相关抗原(Fvm)的表达情况，探讨雌激素受体(ER)、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)与临床病理特征的关系。

1　材料与方法

1.1　标本来源收集青海大学附属医院病理科2007年9-月～2008年11月保存的肺癌术后组织标本76例，均为石蜡包埋标本。患者年龄33-79岁，中位年龄49.82岁。其中鳞癌34例，腺癌42例。标本按世界卫生组织(WHO)1999年肺癌组织学分类、分级标准进行诊断。取同期癌旁正常肺组织(经检验均为阴性)20例做阴性对照组。

1.2　检验试剂　SP(KIT-9720)试剂盒及免疫组化ER(MAB-0501)、VEGF(MAB-0243)、Fvm(MAB-0217)试剂均购于福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3　检测方法　所有标本均经10％中性甲醛固定24 h，常规石蜡包埋切片，制成4ttm厚连续切片，黏附于APES处理过的载玻片上，75℃烤片l h，脱蜡、水化、蒸馏水浸泡冲洗，免疫组织化学染色。用已知阳性标本作阳性对照；以PBS液代替一抗作阴性对照。

1.4　结果判定　光镜下观察，以细胞核显示棕色颗粒为阳性细胞；阳性细胞数少于25％为ER阴性，大于25％为ER阳性。VEGF阳性表达表现为肿瘤细胞的细胞浆或细胞膜上的阳性物质呈棕黄色。采用F标记微血管，血管内皮细胞胞浆着色为棕黄色。MVD的计数标准：按照Wei-dner计数方法，在低倍镜下寻找微血管密集区，然后在高倍镜下计数5个不同视野的微血管数，取平均值为间质微血管密度，单位为个/400倍视野。单个着色的内皮细胞或者内皮细胞丛均按独立血管计数；不以血管腔形成或管腔内有无红细胞为计数标准；管腔较大且有较厚肌层或管腔内有8个以上红细胞者，不在计数之列。

1.5　统计学处理　计数资料(因素间差异分析及配对资料相关性分析)采用x2检验；微血管密度用x±s表示，计量资料用t检验，均应用SPSS 16.0统计分析软件进行。

2　结果

2.1　肺癌组织中ER、VEGF的表达与临床病理的关系76例肺癌组织中ER阳性表达率69.7％(53/76)，VEGF阳性表达率48.7％(37/76))。ER、VEGF和MVD的表达与患者的性别、年龄和病理类型无关(P>0.05)，而与有无淋巴结转移、肿瘤细胞分化程度和临床分期有相关性(P

2.2　VEGF蛋白表达与ER的关系VEGF与ER同时阳性者有17例，同时阴性者有3例，VEGF阳性者ER阴性20例，VEGF阴性者ER阳性36例；ER与VEGF的表达呈负相关(x2=4.571，r=-0.504，JP=0.044)。

2.3　MVD与ER、VEGF及临床病理的关系 经方差分析和t检验，不同性别、年龄和病理类型的肺癌MVD差异无统计学意义(P>0.05)，但在肿瘤细胞分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期上的差别具有统计学意义(P

2.4　ER和VEGF的阴性对照ER和VEGF在20例正常肺组织中未见ER和VEGF阳性表达，与在肺癌中ER和VEGF的表达差异有统计学意义(P

3　讨论

VEGF是一种糖蛋白，按所含的氨基酸数目不同可分为4种形式：VEGF121、VEGF165、VEGF189、VEGF206。大量实验表明它们在血管形成过程中发挥核心作用，具有非常强大的促进内皮细胞有丝分裂的能力，也是目前发现的最强烈的增加血管通透性的物质之一。Ito H等人用免疫组化法对80例肺癌患者的手术标本进行VEGF检测，经分析发现VEGF的表达与肿瘤的分期和预后显著相关(P

本研究发现ER和VEGF与肺癌的有无淋巴结转移、肺癌的分化程度和TNM分期是密切相关的(P

微血管密度(MVD)即用免疫组化的方法标记瘤体内微血管，然后计数其单位面积中的微血管数，可以间接判断肿瘤的血管形成能力。这是目前研究最多的检测方法，以Weidner建立的方法应用最广，他对标本取材、抗体选择以及计数方法等均提出了较成熟的原则。本实验显示76例NSCLC组织的MVD在有淋巴结转移组要明显高于无淋巴结转移组(P

综上所述，ER和VEGF共同参与了NSCLC的肿瘤血管生成过程，同时检验ER、VEGF和MVD的表达状态，可全面了解肿瘤血管形成的生物学信息，有助于深入研究肿瘤血管形成的分子调节机制及内分泌药物的研究和开发。