免疫印迹技术对幽门螺杆菌感染的分型诊断及其临床意义

【摘要】探讨免疫印迹技术对幽门螺杆菌感染的分型诊断及其临床意义。方法：对我院收治的52例上消化道疾病患者和30名健康无症状志愿者的血清进行免疫印迹技术检测，根据其血清中的幽门螺杆菌空泡毒素（VacA）、细胞毒素（CagA）和尿素酶（Ureas）等Hp抗体的表达情况进行分型，并结合胃镜检测与呼气试验进行分析。 结果：研究结果表明慢性胃炎组的HpⅠ型阳性率为75.0%，消化性溃疡组患者的HpⅠ型阳性率为88.6%， 胃癌组患者中HpⅠ型阳性率为100%，均高于无症状的健康志愿者 HpⅠ型阳性率26.7%。研究数据表明从慢性胃炎组，消化性溃疡组到胃癌组，其病变程度不断加剧，VacA/CagA 表达不断加强，即HpⅠ型感染的趋势不断加大，健康志愿者中其多表现为阴性或受到致病性较低的HpⅡ型感染。结论：免疫印迹法检测血清Hp抗体具有简单、灵敏度高、特异性强的优点，可以为临床治疗及判断预后提供一定依据，其在临床上的进一步发展让胃病患者更加期待。通过Hp感染分型诊断，使医患双方最佳时间决定是否行胃镜检查，对及时发现早期胃癌有着重要意义。

【关键字】免疫印迹技术；幽门螺杆菌感染；分型诊断；临床意义

【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2014）01-0295-01幽门螺杆菌（Helicobacter pylori， Hp ）被公认为慢性胃炎及消化性溃疡的致病菌， 其自1983年由warren及marshall发现以来一直为国内外学者研究热点[1]。其为一种革兰氏阴性微需氧细菌，临床上一般将其为两类：即Ⅰ型和Ⅱ型，其在上消化道疾病的发病中具有十分重要的作用，现代研究逐渐表明Hp感染是导致慢性胃炎、胃癌、消化性溃疡、胃粘膜相关性淋巴组织恶性肿瘤的诱因之一。我国目前普通人群中的感染率已达50%以上 ，Hp感染的及时诊断具有重大的临床意义[2]。我们采用免疫印迹法检测Hp抗体，结合14C 呼气试验和胃镜检查进行分析，从而确定Hp的感染类型以及不同类型的HP与人体上消化道疾病的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取我院自2012 年3月～ 2013 年9 月收诊的上消化道疾病患者52例患者为试验组，其中男30例，女22例，年龄13 ～ 77 岁，平均46.3岁，其中慢性胃炎12例，胃癌5例，消化性溃疡35例，所有患者均经胃镜与 14C呼气试验检查。此外随机选取30例无上消化道疾病的健康志愿者为对照组，其中男23例，女7例，年龄20 ～ 67 岁，平均36.3岁。

1.2 检测方法

1.2.1 胃镜检测 根据患者入院后胃镜检测报告结果，将换患者检测结果分为慢性胃炎、胃癌、胃和（或）十二指肠溃疡等。

1.2.2 14C-UBT 检查 采用深圳海得威生物技术有限公司提供的仪器和试剂，患者在空腹条件下，经饮用凉水漱口后服用尿素[14C]胶囊-粒，静坐15分钟后，患者进行吹气检测，检测结果大于100dpm/mm ol 14CO2 为阳性。14C 呼气试验阳性为Hp 现症感染患者。

1.2.3 免疫印迹检测 采用深圳伯劳特生物制品有限公司的Hp 免疫印迹检测试剂盒。HpⅠ型为产细胞毒素的菌株，免疫印迹技术显示CagA抗体阳性和/或VaeA 抗体阳性；HpⅡ型为不产细胞毒素（ CazA抗体和VacA 抗体） 的菌株、UreA 阳性者。本研究通过根据不同的区带区分不同类型的Hp，例如128 KD和116 KD区带，其与CagA抗体相关，Ⅰ型Hp可出现；66 KD和30 KD区带，其与尿素酶抗体相关，分别为UreB和UreA抗体，Ⅰ型和Ⅱ型Hp均可出现；95 KD和91 KD区带，其与VacA抗体相关，Ⅰ型Hp可出现。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0 软件包进行统计学分析，用χ2 检验。以P < 0. 005 有统计学意义。

2 结果

研究结果表明慢性胃炎组的HpⅠ型阳性率为75.0%，其高于无症状的健康志愿者 HpⅠ型阳性率26.7%，P0.05；消化性溃疡组患者的HpⅠ型阳性率为88.6%，其远高于无症状的健康志愿者 HpⅠ型阳性率26.7%，P

3 讨论

上述数据表明从慢性胃炎组，消化性溃疡组到胃癌组，其病变程度不断加剧，VacA/CagA表达不断加强，即HpⅠ型感染的趋势不断加大，健康志愿者中其多表现为阴性或受到致病性较低的HpⅡ型感染。

Hp通过对胃黏膜上皮细胞的粘附、以及通过胃肠激素的作用和细胞壁脂多糖脂质A的致炎作用，释放酶与细胞毒素，诱发疾病的发生。Hp的VacA 基因型和CagA 蛋白导致60%的Hp临床分离株使上皮细胞存在空泡样式，Hp侵入人体后， HP的尿素酶（Urease）及其分泌的空泡毒素（VacA）和细胞毒素相关蛋白（CagA）会诱导人体产生非保护性抗体，根据Hp是否分泌VacA（空泡毒素）/CagA（细胞毒素）将其分为Ⅰ型和Ⅱ型[2]，不同类型的Hp，其致病能力有很大差异，能够较早的对Hp感染的类型进行确认，对患者的治疗具有重大的意义。

临床上用来诊断感染的方法很多[3-5]，而免疫印迹法检测血清Hp抗体具有简单、灵敏度高、特异性强的优点，其可对Hp感染进行分型， 但其在Hp检测方面存在着缺陷，不能作为Hp症状感染或作为疗效观察的指标 ，临床上仍然需要结合胃镜检测与呼气试验作为评价临床治疗效果与预后的指标 ，但免疫印迹技术可应用于对Hp感染分型诊断，为临床治疗及判断预后提供一定依据，其在临床上的进一步发展让胃病患者更加期待，通过Hp感染分型诊断，使医患双方最佳时间决定是否行胃镜检查，对及时发现早期胃癌有着重要意义。

参考文献

[1]Etukudo OM， Ikpeme EE， Ekanern EE. Seroepidemiology of helicobacter pylori infection among children seen in a tertiary hospital in Uyo， southern Nigeria[J]. Pan Afr Med J， 2012（3）：39.

[2]王丽姣，周国华，冷明芳，颜君，陈叶青，王静. 免疫印迹试验在检测幽门螺杆菌感染中的临床价值. 临床消化病杂志. 2012， 24（3）：182-183.

[3]王晓波，庄小芳，郭峰.2种非侵入检测方法对幽门螺杆菌感染的诊断价值[J].新疆医科大学学报， 2012，35（7）：949-952.

[4]周兴，袁伟.PCR检测技术在幽门螺杆菌诊断检测中的应用探讨[J].检验医学与临床，2012，9（19）：2430-2431.

[5]周洪.幽门螺杆菌实验检测技术的研究进展[J].中国医药指南，2012，10（22）：103-105.

作者简介：李春娴 民族：汉 出生年：1972 籍贯：四川泸州 职称：主治医师 学历：学士学位 主要从事工作方向：消化专业。