高效液相色谱法测定鼻炎丸中盐酸小檗碱的含量

（驻马店市食品药品检验所，河南　驻马店，463000）

【摘要】　鼻炎丸是我院自制的用于治疗睑皮炎、结膜炎、泪囊炎、麦粒肿、沙眼等的口服制剂，为了更好的控制其质量，我们采用了HPLC法测定了鼻炎丸中主要成分小檗碱的含量， HPLC方法：采用NUCLEOSILC18（10μm，4.6 mm×250 mm）柱，流动相:乙腈-0.05mol・L-1磷酸二氢钾-二甲胺（45：55：0.2）[3、4]；流速：1mL・min-1；检测波长：346nm，柱温30℃。结果：HPLC法测定的盐酸小檗碱的平均含量为0.0246 mg・mL-1薄层板上各斑点分离度好，清晰度高，方法的重现性好。鼻炎丸中黄连的薄层色谱与其小檗碱色谱一致，扫描定量测定的回收率为100.03%，RSD为0.7% 。结论：该方法简便、快速、准确、可靠，可作为鼻炎丸中小檗碱的含量测定方法。

【关键词】　鼻炎丸；小檗碱；含量

鼻炎丸为中药口服制剂，主要用于治疗睑皮炎、结膜炎、泪囊炎、麦粒肿、沙眼，其成分涉及黄连、、连翘等12味中药，疗效很好。1　实验材料

仪器与试剂　SP88000高效液相色谱仪（美国），含积分仪SP4290，紫外可见光检测器SP8450；ZF-2型三用紫外仪（上海市安亭电子仪器厂）；定量毛细管（美国Drummond）；薄层层析用硅胶G（青岛海洋化工厂）；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号0713-200605）；黄连对照药材（中国药品生物制品检定所，批号0875-200704）；鼻炎丸（济源市中医院制备）；阴性对照样品，按处方量称取不含被检药材的处方药物按制备工艺制成；色谱柱：NUCLEOSILC18（10μm，4.6 mm×250 mm，美国）甲醇（分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司）；乙腈（色谱纯，邯郸市四友生物医学技术有限公司）；其它化学试剂均为国产分析纯。2　实验方法与结果2.1　标准曲线的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品23.8mg于25ml量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml于25ml量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度。精密量取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml，分别置于10ml量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。精密进样10ul，以小檗碱浓度X（mg・mL-1）对峰面积Y回归，得回归方程：Y=1223.8.1X-5745.1，r=0.9994。在0.0008 mg∽0.0205 mg范围内呈良好线性关系。2.2　空白试验

精密称取缺黄连的鼻炎丸适量，按“3.3”项下制备供试品液的方法制备空白对照液，进样进行HPLC检测，由所得色谱图可知，在小檗碱峰的相应位置无干扰峰出现。2.3　样品制备

取鼻炎丸12g，精密称量，用滤纸包封，置索氏提取器中，以石油醚加热回流提取至无色后，再用甲醇回流提取至无色为止。提取液回收甲醇，残留物以甲醇定量移入25 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以0.45μm滤膜过滤，即得供试液。精密进样10ul，以外标法计算小檗碱的含量。共测3批鼻炎丸，测定结果见下表。

样品测定结果2.4　稳定性试验

取供试品液每隔2h进样，并测定峰面积1次，共测定5次，结果RSD=1.4%（n=5），表明供试品液在10h内稳定。2.5　重复性试验

取同一批号样品5份，按含量测定方法测定，结果RSD=1.8%（n=5）。2.6　精密度试验

取供试品液，重复多次进样，进行日间精密度测定。结果RSD为1.9%（n=5）。2.7　回收率试验

精密称取已测知含量的鼻炎丸约11g，共10份。1-5份分别加入0.2049 mg・mL-1的盐酸小檗碱对照品液0.4ml，6-10份分别加入0.8ml，混匀，按制备供试品液的方法制样。外标法计算盐酸小檗碱的含量及回收率。结果见下表。3　结论

我在本次实验中，采用的HPLC法测定鼻炎丸中小檗碱的含量，方法简便，快速，重复性好，可作为鼻炎丸中小檗碱的含量测定方法。我在实验中，发现紫外分光光度法能有效的消除还原剂对盐酸小檗碱含量的影响，保证制剂质量。应用紫外分光光度法去测定鼻炎丸中盐酸小檗碱的含量是我们进一步研究的方向。参考文献[1]中华人民共和国药典，国家药典委员会编，2010年版，一部 [2] 刘思源 高效液相色谱法测定克淋通胶囊中盐酸小檗碱的含量.中国药业,2005

回收率试验结果