超高效液相色谱—串联质谱法测定玉米中硝磺草酮及其代谢物残留量

摘要：建立了超高效液相色谱串联质谱法测定玉米中硝磺草酮及其代谢物（MNBA）的残留分析方法。样品用乙腈水溶液提取，取适量提取液用甲酸酸化至p 2，过LB固相萃取柱进行净化，用甲醇乙醚（7∶，VV）洗脱，洗脱液用氮气吹至近干，用 mmolL醋酸铵乙腈（2∶7，VV）定容后进行质谱分析，利用基质校正曲线对其准确定量。硝磺草酮和MNBA在～2 μgL浓度范围内呈线性关系，相关系数均大于99，在添加浓度～ μgkg范围内，硝磺草酮及其代谢物MNBA的平均回收率为88%～%，相对标准偏差在%～28%之间，硝磺草酮和代谢物MNBA定量限分别为 和2 μgkg。

关键词：硝磺草酮； 液相色谱串联质谱； 玉米； 代谢物

引言

硝磺草酮（Mesotrione）是由瑞士先正达公司（yngenta）开发的新型三酮类除草剂，通过抑制对羟苯基丙酮酸双加氧酶（PP）的活性而最终降低类胡萝卜素的合成，使植物“白化而死亡，主要用来防治玉米田阔叶杂草和部分禾本科杂草。22年8月，硝磺草酮在我国的行政保护期到期，它将在我国大规模生产和推广应用，同时，也会对农产品安全、后茬作物及其它非靶标生物带来潜在的危害。我国规定硝磺草酮在玉米中的最大允许限量（MRL）值为 mgkg，欧盟规定硝磺草酮及其代谢物（Methylsulfonyl2nitrobenzoic acid，MNBA）在玉米中MRL值为 mgkg。

硝磺草酮为难挥发性化合物，对热不稳定，无法进行气相色谱分析。目前，检测硝磺草酮的主要方法是高效液相色谱法和液相色谱质谱联用法。22年，Alfemes等报道了硝磺草酮及其2个代谢物（MNBA和AMBA（2aminomethylsulfonylbenzoic acid））在玉米、土壤和水中的高效液相色谱荧光分析方法，样品需通过液相色谱馏分收集器净化，收集的净化液再经衍生生成AMBA，再通过荧光检测器测定，该方法前处理繁琐，衍生不稳定，耗时长，不利于大批量样品的测试工作。尽管文献采用液相色谱质谱联用法测定了食品中硝磺草酮的残留量，但均未涉及到硝磺草酮代谢物MNBA检测方法。本研究采用LB固相萃取柱实现了两种化合物的同时净化，并优化了色谱质谱条件和定容液比例，建立了能够同时测定玉米中硝磺草酮及其代谢物MNBA的超高效液相色谱电喷雾串联质谱（UPLEIMM）的分析方法。本方法对硝磺草酮和MNBA定量限分别为和2 μgkg，能够满足国际残留限量测定的需要。

2实验部分

2仪器与试剂

AUI Ultra Performance L超高效液相色谱系统（美国Waters 公司）；Micromass uattro Ultima P 三重四级杆串联质谱仪，配带电喷雾离子源（EI）及Masslynx 工作站 Version ；2 Basic高速分散匀浆机（德国IA公司）； Laborata 型旋转蒸发仪（德国eidolph公司）； N NEVAPM2型氮吹仪（美国Organomation 公司）；Oasis LB artridge固相萃取小柱（PE， mg6 mL，美国Waters公司）。

硝磺草酮及代谢物MNBA标准品（德国rEhrenstorfer公司）；Nal、乙醚、氨水（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；甲酸（色谱纯，阿沙埃莎（天津）化学有限公司）；甲醇、乙腈（色谱纯，美国飞世尔科技公司）。

22色谱质谱条件

色谱条件：AUI UPL BE Amide色谱柱（ mm×2 mm×7 μm）；柱温 ℃；样品室温度 ℃；进样体积 μL；流动相A为%氨水乙腈，流动相B为 mmolL 醋酸铵含 %氨水）；流速 mLmin；梯度洗脱程序：～ min，% A；～2 min，%～6% A；2～ min， 6%～% A。

质谱条件：EI源，负离子模式；多反应监测扫描（MRM）；毛细管电压 kV；锥孔电压 V；离子源温度 ℃；脱溶剂气温度 ℃；锥孔反吹氮气流量 Lh；脱溶剂气流量 6 Lh；光电倍增器电压 6 V；碰撞室真空度76 Pa。其它条件参数见表。