药物支架体外释放测试方法(流通池法)研究报告

【摘要】1.1　材料：药物支架 1.1.1　仪器与设备　Agilent　UV8453　SOTAX　CE7　smart溶出度仪　GPL501气压测漏仪。 1.2　方法 1.2.1　样品分组　3组3个批次各6支样品，按28天为一个测试周...

【摘要】　目的　建立一种药物支架体外释放度测定的方法。因药物支架的单支产品上的雷帕霉素药物含量最高不超过1mg，且药物是与聚合物结合，属于缓释制剂，对于这么低剂量的药物浓度如进行体内释放度测试，存在一定的难度和相对较大的误差，所以依据中国药典缓释制剂指导原则，采用流通池法进行释放度的测定。结果　该方法模拟体内环境条件，能够代表药物在体内的生物利用度；介质的选择及测试方法的适用性已经在《药物支架系统药物含量测试方法研究报告》中进行论证，且残余药量数据测定结果表明雷帕霉素在该测试过程中无降解反应。结论　采用流通池法进行固体制剂的研究越来越广泛，其优点是对现行药典释放度测定方法的补充和完善，在药物的溶出、释放，特别是在缓释制剂的研究和质量控制方面有着非常广阔的前景。

【关键词】　雷帕霉素；药物支架；药物体外释放；扩张球囊

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.01.465　文章编号：1004-7484（2013）-01-0390-01

实验材料为表面覆盖有雷帕霉素和载药聚合物聚乳酸的药物支架，雷帕霉素是一种免疫抑制剂，主要实验材料为表面覆盖有雷帕霉素和载药聚合物聚乳酸的药物支架，雷帕霉素是一种免疫抑制剂，主要用于抑制血管内皮增生，起到防止血管再狭窄的作用，载药聚合物聚乳酸，是一种可降解物质，并可控制药物的释放速率，释放度是保证产品安全有效性的一项重要检测，同时也是保证和衡量带药医疗器械中的药物支架的生产工艺及质量是否合理和稳定的重要指标之一。到目前为止，国内对支架中使用此类药物仍未建立起统一的质量标准和分析检测方法，雷帕霉素药物支架的企业注册标准中，释放度的检测方法各不相同，一般测试方法为静态条件下用25%的乙醇溶液作为释放介质，该方法的最大缺陷在于：第一，介质的选择上，乙醇是一种有机溶剂，雷帕霉素在乙醇中易溶，乙醇溶液的浓度对雷帕霉素的溶解度有很大的影响；第二，介质在测试时要进行转移，操作过程中会有部分药物损失，造成一定的误差。本方法研究中使用模拟人体环境的仪器装置，该装置使支架在流动的溶出介质中，与血液流中的冲刷比较相似，释放介质为与人体血液酸碱度比较接近的含0.2%的吐温20的PBS（pH=7.4）缓冲溶液，且雷帕霉素原料药几乎不溶于该溶液中，释放温度为37　1℃，因为整个释放过程是全封闭的，可以避免操作过程中药物的损失。

1　仪器与材料

1.1　材料：药物支架

1.1.1　仪器与设备　Agilent　UV8453　SOTAX　CE7　smart溶出度仪　GPL501气压测漏仪。

1.2　方法

1.2.1　样品分组　３组３个批次各6支样品，按28天为一个测试周期进行测试，批号（规格）分别为120418（4024）、120596（3036）、E120340（3018）。

1.2.2　样品处理　将同一批号的6支产品分别用气压测漏仪在标称压力（6atm）下将球囊打开取下支架放置于溶出杯中。

1.2.3　仪器设备　加热水浴至恒温设定值，调整仪器参数，用溶出介质清洗管道；放置好溶出杯，操作仪器，向溶出杯外层注入温水；加溶出介质25ml，设定泵流速16ml/min，检测时间点设定为0.5h、2h、8h、24h、48h、28d，检测波长为278nm，待各参数稳定后开始测试。

1.2.4　释放率的测定　用紫外分光光度计测定各时间点在278ｎｍ下的吸光度，由浓度-吸光度的标准曲线方程计算出介质中的雷帕霉素的浓度。

1.2.5　药物残留量测定　将释放度测试结束后的样品，用乙酸乙酯做溶剂，提取支架表面的药物，测试方法同2.4。

2　检测结果

2.1　释放率与测试时间的一级方程拟合。

2.2　原质量标准测试结果（采用成品检验数据）　对2012年部分数据进行统计平均损失药量约为

10%。

3　结论

3.1　支架植入术后，前2周是平滑肌增值和迁移发生的高峰，整个迁移约4-5周，为了有效地抑制平滑肌的增值迁移，减少细胞外基质的产生，并减少药物残留对再内皮化的影响，笔者认为药物洗脱支架应在4-5周左右释放完全较合理，而本实验的结果是28天释放率大于90%。

3.2　美国FDA药物洗脱冠脉支架指导原则中对释放度的要求是：2hours10%-20%，8hours40%-70%，24hours>80%，测试结果均能够满足要求。

3.3　释放率与时间曲线符合一级方程且相关性较好，R2均大于等于0.99，组内与组间的RSD均小于5%。

3.4　残余药量与释放率的和均大于等于100%，是因为在进行计算时使用的是药物标示量，而实际药物含量要略高于标示量。

3.5　两种测试方法比较，25%乙醇做介质药物损失较大且测试结果分散度较大。

参考文献

［1］　中华人民共和国药典 2010年版　二部　国家药典委员会编　中国医药科技出版社出版　ISBN978-7-75067-4438-6附录XIX　D缓释、控释和迟释制剂指导原则　附录201-203页.

［2］　同2：附录X 释放度测定方法　附录87-88页.

［3］　Guidance　for　Industry Coronary　Drug-Eluting　Stents-　Nonclinical　and　Clinical　Studies　U.S.Department　of　Health　and　Human　Services　Food　and　Drug　Administration　Center　for　Devices　and　Radiological　Health　（CDRH）Center　for　Drug　Evaluation　and　Research　（CDER）March，2008.

［4］　章娜，冯晓明，陈华.雷帕霉素药物支架释放度测定.药物分析杂志，2010（7）.

［5］　张华巍，杨庭树.药物涂层支架的前景及展望.中国组织工程研究与临床康复，2007（1）：137-140页.