高效液相色谱法测定鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量

【摘要】目的：探讨用反相高效液相色谱法测定鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量。方法：采用Symetry Shield RP18（5 ?滋m 4.6mm×250 mm） Columm色谱柱；以0.05 mol/L磷酸二氢钠缓冲液（pH 2.6）-乙腈（50∶50）为流动相；检测波长233 nm。结果：水杨酸在20.4~61.2 ?滋g/ml浓度范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.0%。结论：本法简便、准确、快速，适用于鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量测定。

【关键词】高效液相色谱法；鞣柳硼三酸散；水杨酸；含量测定

文章编号：1009-5519（2007）17-2552-01 中图分类号：R9 文献标识码：A

Determination of coutent of salicylic acid in tannic acid，salicylic acid and boric acid powder by HPLC

YANG Da-yong1，CHEN Wen-qiu2，YU Shi-xiao2，et al.

(1.Sichuan Provincial Corps Hospital of Chinese People's Armed Police Forces，Sichuan 614000，China;2.Sichuan Leshan Insepction Institute for Drug Control，Sichuan 614000，China)

【Abstract】Objective:To determine the content of salicylic acid in tannic acid，salicylic acid and boric acid powder by HPLC.Methods:The chromatographic column was Symmetry Shield RP18 5?滋m 4.6 mm×250 mm column and the mobile phase was 0.05 mol/L KH2PO4(pH 2.6)-acetonitrile(50∶50);the detective wavelength was 233 nm.Results:It took a good linear relationship when the sample size of salicylic acid within the range of 20.4~61.2 ?滋g/ml;the averge recovery was 99.0%.Conclusion:The method is accurate，fast，which can be used for the content determination of solicylic acid in tannic acid，salicylic acid and boric acid powder.

【Key words】HPLC；Tannic acid；Salicylic acid and Boric acid powder；Salicylic acid；Content determination

鞣柳硼三酸散是由鞣酸、水杨酸、硼酸组成，用于手、足癣治疗的外用复合制剂，收载于《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第十册[1]，在质量标准中，对制剂中的有效成分均未进行定量分析，我们采用反相高效液相色谱法对该制剂中的水杨酸进行了含量测定，得到了满意的效果。报道如下：

1 仪器与试药

美国Waters 515 HPLC pump高效液相色谱仪；Waters 2487紫外检测器，Empower Pro数据处理工作站，水杨酸对照品（中国药品生物制品检定所）、鞣酸、硼酸为药用原料，乙腈（上海陆都化学试剂厂，色谱纯），其它试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件：色谱柱：Symetry Shield RP18（5 ?滋m 4.6mm×250 mm）Columm色谱柱，柱温40 ℃，流动相0.05 mol/L磷酸二氢钠缓冲液（pH 2.6）-乙腈（50∶50），流速1.00 ml/min，检测波长233 nm，进样量20 ?滋l。

2.2 水杨酸贮备液的制备：称取水杨酸对照品25.50 mg，置25 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.3 阴性对照贮备液的制备：称取鞣酸23.50 mg，硼酸11.70 mg置25 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

2.4 系统适用性试验：重复性：取水杨酸贮备液1.00 ml，分别置25 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液分5次进样，结果有较好的重复性，水杨酸峰面积变化不大，RSD为0.7%。分离度：取水杨酸贮备液1.00 ml，阴性对照贮备液1.00 ml，分别置25 ml量瓶中，加流动稀释至刻度，摇匀，滤过，作为对照品溶液和阴性对照液；另取水杨酸贮备液1.00 ml，阴性对照贮备液1.00 ml置25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。取上述三种溶液，滤过，取续滤液分别进样，结果：样品溶液与对照组溶液色谱图中，在相同时间位置上有相应的色谱峰，而阴性对照液色谱图中在相同的时间位置无相应的色谱峰；且样品溶液色谱图中水杨酸色谱峰与其它物质色谱峰的分离度均大于1.5。

2.5 线性关系：取水杨酸对照品1.00 ml、1.50 ml、2.00 ml、2.50 ml、3.00 ml分别置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液分别进样，以水杨酸峰面积（A）与水杨酸浓度（ug/ml）作回归曲线得：A=6.336×104Ｃ-2.0297×104，r=0.9999，n=5。

2.6 回收率试验：取水杨酸贮备液2.40 ml、2.20 ml、2.00 ml、1.80 ml、1.60 ml，分别置50 ml量瓶中，各加阴性对照贮备液2.00 ml，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进样，结果见表1。

2.7 样品测定：分别称取4次批次自制样品适量（约相当于水杨酸25 mg），精密称定，置25 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1 ml，置25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进样。结果见表2。

2.8 稳定性试验；将样品测定项下溶液放置0、2、4、8、16小时后分别测定，结果水杨酸色谱峰面积变化不大，RSD（%）为0.8%。

3 讨论

该实验方法结果准确，方便，快速，测定溶液稳定，适用于该制剂含量测定。

参考文献：

[1] 国家药典委员会.《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第十一册[S].国家药品监督管理局，2002.296.

收稿日期：2007-04-30