临床检验中化学发光免疫分析的应用

摘要：目的：探讨研究临床检验中化学发光免疫分析的应用。方法：用于临床研究的100例乙肝患者是由我院自2012年3月至2014年3月期间内收治的，分别利用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附测定法检验其血样中的乙型肝炎病毒核心抗体，对比分析两种检验方法的阳性检出率。结果：利用化学发光免疫分析法检验的乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率为97%，利用酶联免疫吸附测定法检验的乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率为79%，两组检验结果的数据比较差异具有统计学意义（P

关键词：临床检验;化学发光免疫分析;应用;阳性检出率

化学发光是一种常见的科学现象，利用化学发光现象可以进行免疫分析检验，这种技术在近年来得到了越来越广泛的推广。在此之前，临床上主要采用免疫酶技术、免疫荧光技术以及放射免疫技术等进行临床检验，这几种检验方法各有优缺点，在临床应用上均存在一定的缺陷。而随着化学发光免疫分析技术的不断发展，其在临床检验中操作简单、检测速度快、灵敏度高、易于控制以及污染少等优点逐渐显现出来，因此越来越受到了医学界的青睐。我院近年来也在临床检验中化学发光免疫分析的应用方面做出了许多临床研究与实践，并取得了一定的成果，现将我院自2012年3月至2014年3月期间内收治的两组共100例乙肝患者纳入临床研究对象，分别利用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附测定法检验其血样中的乙型肝炎病毒核心抗体，对比分析两种检验方法的阳性检出率，报道如下：

1资料与方法

1.1 一般资料

用于临床研究的100例乙肝患者是由我院自2012年3月至2014年3月期间内收治的，其中男性患者有52例、女性患者有48例，各占总数的52%、48%;年龄在20-75岁之间不等，平均年龄（47±3.6）岁;病程在5个月-23年之间不等，平均病程（8.72±2.13）年;所有患者均自愿提供血液样本进行检验。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂

仪器分别选用瑞士罗氏公司所生产的E601电化学发光全自动免疫分析仪和北京普朗公司所生产的DNM-9602A酶联免疫检测仪，试剂分别选用瑞士罗氏公司所生产的ECLIA检验试剂和沈阳惠民公司所生产的ELISA检验试剂。

1.2.2 检验方法

令100例患者清晨空腹，抽取其静脉血液作为检验样本，然后分别利用化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附测定法检验其血样中的乙型肝炎病毒核心抗体。化学发光免疫分析法的操作步骤如下：①采用还原剂将待测血样进行预处理;②在血样标本中加入乙型肝炎核心抗原并进行恒温培育，使其与血样标本中的乙型肝炎病毒核心抗体形成抗原抗体复合物;③分别加入经生物素标记的乙型肝炎病毒核心抗体和经钌标记的乙型肝炎病毒核心抗体，使其与乙型肝炎核心抗原结合;④加入由链霉素包被的磁珠以形成固相复合物;⑤待电极表面吸附磁珠后使用三丙胺清洗液进行冲洗，从而令电极表面结合物发生发光反应;⑥根据检出光信号来确定血样标本中的乙型肝炎病毒核心抗体数量，光信号越强，则血样标本中的乙型肝炎病毒核心抗体数量越少。酶联免疫吸附测定法的操作步骤如下：①在血样标本中加入经辣根过氧化物酶标记的乙型肝炎病毒核心抗体酶结合物并进行恒温培育，使酶标抗体与血样标本中的乙型肝炎病毒核心抗体经竞争结合微孔板上固相抗原的结合位点;②洗涤血样标本后加入底物，从而令结合于固相的酶标抗体显色;③根据结合于固相的酶标抗体数量来确定血样标本中的乙型肝炎病毒核心抗体数量，结合于固相的酶标抗体数量越少，则血样标本中的乙型肝炎病毒核心抗体数量越多。

1.3 统计学分析

对上述临床研究中所记录的数据皆利用SPSS 19.0统计学软件进行统计，对所有计数资料均采取t检验，对计量资料均采取卡方检验，P

2 结果

利用化学发光免疫分析法检验的乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率为97%，利用酶联免疫吸附测定法检验的乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率为79%，两组检验结果的数据比较差异具有统计学意义（P

表1 两种检验方法的检验结果对比表

3 讨论

化学发光免疫分析是临床上近年来所推广使用的一种新型标记免疫检验技术，它具有操作简单、检测速度快、灵敏度高、易于控制以及污染少等优点。在应用学科上，化学发光免疫分析的一级学科为免疫学、二级学科为应用免疫、三级学科为免疫学检测和诊断。化学发光免疫技术主要包括有两个反应过程，即免疫反应过程和化学发光反应过程，其整个工作原理如下：首先在抗原或者抗体上面标记化学发光物质或其他发光的酶标记物，使其发生免疫反应，也即发生抗原和抗体的特异性结合，从而形成复合物，然后再在复合物中加入氧化剂或发光底物，使复合物发光，最后再根据经仪器检测所得到的发光强度与待测物质的浓度所呈现的线性关系来达到浓度测定的目的。其中，能够发生化学发光的物质大多都是有机化合物，而其发光反应也大多都是氧化反应，这主要是因为有机化合物的氧化反应能够提供足够的中间体，当这些中间体具有了较高的能量后，就能够释放光子发光。总体来说，化学发光免疫技术主要可以分为发光物免疫测定、发光酶免疫测定以及发光辅助因子免疫测定等几种类型。

乙型肝炎病毒核心抗体是人体发生乙肝病毒感染后最易产生的检测指标，它的临床检测率非常高，通常情况下，急性乙肝、慢性乙肝以及乙肝病毒携带者血样中的高效价乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率可高达90%以上。近年来，随着临床检验技术的不断发展，化学发光免疫分析在乙肝患者乙型肝炎病毒核心抗体的检测中也得到了越来越广泛的应用，并取得了显著的效果。

本文主要以乙肝患者血样中乙型肝炎病毒核心抗体的检验为例来研究临床检验中化学发光免疫分析的应用，并将其与酶联免疫吸附测定法进行对比。本组所选取的100例乙肝患者均为自愿提供血液样本进行检验。根据本次临床研究结果显示：利用化学发光免疫分析法检验的乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率为97%，利用酶联免疫吸附测定法检验的乙型肝炎病毒核心抗体阳性检出率为79%，两组检验结果的数据比较差异具有统计学意义（P

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