有关病毒性肝炎患者的临床探讨

【中图分类号】R511 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2012)01－0232－01

【摘要】 了解不同程度病毒性肝炎患者静脉血中碳氧血红蛋白（COHb）的变化并分析其临床意义，探讨一氧化碳（CO）在肝脏疾病中的作用。方法采用双波长分光光度法测量不同程度病毒性肝炎患者血中COHb的浓度，并与正常对照组进行比较，对各组间COHb水平进行统计学分析。结果病毒性肝炎患者组血中COHb水平较正常对照组有显著性差异，病毒性肝炎重度组COHb水平与血中丙氨酸氨基转移酶（ALT）统计分析显示具有正相关性。结论不同程度病毒性肝炎患者血中COHb水平的改变提示CO在肝脏炎性疾病中发挥一定的作用。

【关键词】 碳氧血红蛋白；病毒性肝炎

近年来，有研究显示CO作为一种多效信使分子，与肝脏的炎症及应激、肝脏微循环等有着密切关系。但其详细的作用机制仍不完全清楚。国内外相关的研究较多集中在动物实验方面，在病毒性肝炎患者中的相关研究报道较少，本研究关注CO在病毒性肝炎患者中的变化，分析并讨论CO所发挥的作用。

1 资料与方法

1.1 研究对象

1.1.1 一般资料符合纳入标准的55例病毒性肝炎入: 选者为2005年3月～12月在我院的患者；正常对照组包括肝病中心科室工作人员及医科大学成教学院学生，符合排除标准。

1.1.2 排除标准⑴有吸烟史者，每日吸烟量＞2支者，以及有相关职业接触史者，如炼钢工人；⑵有慢性肺部疾病，如慢性支气管炎、慢肺源性心脏病、支气管哮喘病史等；⑶有冠心病、高血压病史；⑷溶血性疾病患者。

1.2 仪器和试剂上海棱光技术有限公司生产的22PC型分光光度仪；一氧化碳；普氧；普氮；血液稀释液（Tris液）：连二亚硫酸钠（分析纯）；具塞试管20支；天平；离心管；玻璃珠；移液器。

1.3 试剂制备Tris液配置方法：称取三羟甲基氨甲烷（分析纯）1.21 g，溶于1000 ml热蒸馏水中。

1.4 检测方法入选者均于清晨8点左右抽取肘静脉血2 ml置于含抗凝剂EDTA管中，具体操作步骤为：⑴取10 ml具塞试管2支（1支为试剂空白管，另1支为测定管）。各放入2粒玻璃珠，并加满Tris液（13～15 ml，体积差异不影响测定准确度）；⑵将Tris液2 ml加入EDTA管稀释后抽取5μl加入空白管，再加入40 mg连二亚硫酸钠，颠倒混匀；⑶用移液器吸取待检血标本5μl，放入测定管中，加连二亚硫酸钠40 mg，补满Tris液后盖塞（勿进气泡），颠倒混匀，l0～l5分钟后比色；⑷将试剂空白管和测定管待测液分别倒入1 cm比色皿中，以试剂空白液调零点，记录测定液420 nm和432 nm吸光度值（即A420、A432）；⑸为减少测定样品的误差，所有测定样品均在同一仪器重复测定两次以上，取均值。

1.5 饱和度计算COHb饱和度按下列公式计算：式中：aHb420为Hb在420 nm波长的吸光度；aHb432为Hb在432 nm波长的吸光度；aCOHb420为COHb在420 nm波长的吸光度；aCOHb432为COHb在432 nm波长的吸光度。

2 结果

2.1 不同程度肝炎患者COHb水平与对照组的比较

2.1.1 轻、中、重度组肝炎患者年龄与对照组的比较肝炎组入选病例55例，按照肝功损害程度分为轻度肝炎组21例、中度肝炎组14例、重度肝炎组20例三组，各组年龄与对照组经方差齐性检验（P=0.10），再经单因素方差分析得出各组年龄差异无统计学意义（P=0.50）.

2.1.2 轻、中、重度组肝炎患者与对照组COHb=水平的比较肝炎轻、中、重度组患者与对照组COHb水平经方差齐性检验（P=0.74），单因素方差分析显示，肝炎组各组血中COHb水平与对照组比较，差异均有统计学意义（P=0.00），肝炎各组均较对照组偏低，而肝炎轻、中、重度组各组之间经单向方差分析平均值之间的多重比较（SNK法）差异无统计学意义（各组P＞0.05）.

2.2 不同程度肝炎组COHb与ALT相关性分析肝炎轻、中、重度组患者COHb与ALT经秩和相关分析显示，轻、中度肝炎组COHb与ALT无相关性，仅在重度肝炎组COHb与ALT显示呈正相关性（r=0.62，P=0.00）。

3 讨论

继NO之后，大量证据表明内源性CO是体内广泛分布的多功能气体信号分子，与NO相似，CO也具有扩张血管和抑制血管平滑肌细胞增殖的作用，但CO不是自由基，它具有抗炎症、抗凋亡和免疫调节等细胞保护作用。血红素氧合酶（heme oxygenase，HO）可降解血红素，释放等摩尔的一氧化碳（CO）、胆绿素和亚铁离子。HO在体内广泛存在，已被证实几乎分布于所有的器官和组织，涉及整个生长发育过程。HO是哺乳动物和啮齿动物组织细胞微粒体中的一种蛋白酶，它有3种异构型：HO-1、HO-2和HO-3。HO-1为诱生型，HO-2和HO-3为原生型。HO-1主要分布在脾、肝、骨髓、单核-巨噬细胞系统、平滑肌，主要参与血红素的代谢，以脾脏中活性最高。HO-1可被各种诱导剂激活，如应激、饥饿、缺氧、热休克、内毒素、细胞因子（白细胞介素1、白细胞介素6）、激素（胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素等）、金属离子、氧化反应、氧自由基等等。HO-1与目前所发现的其他酶相比，能对更多种类别和形式的刺激产生反应。其他酶很少有像HO-1一样与多种诱导有关。结合本项研究结果，笔者有理由认为在病毒性肝炎病理状态下，体内COHb水平的变化，提示HO-1活性的改变。但本项结果与文献报道的结果有所不同。文献报道结果表明，在炎症等各种病理状态下释放的各种促炎细胞因子刺激HO-1的表达上调导致CO生成增多。过高水平表达的HO-1通过释放活性铁甚至会增加细胞对氧化应激的敏感性，HO-1基因的转录激活是细胞对氧化应激反应整体中的一部分，它诱导产生的作用似乎既不是绝对的细胞保护也不是绝对的细胞毒性。有关HO-CO系统在肝脏炎症中的作用及临床意义有待进一步研究。

参考文献

［1］ 乐宏元,宋小兴.一氧化碳血红蛋白双波长定量测量［J］.临床检验杂志,1996,14:87-88.

［2］ 蒲丹,唐朝枢.关注生物活性小分子物质的研究［J］.国外医学?生理、病理科学与临床分册,2004,24:393-398.