孕妇产前不规则抗体筛查在新生儿溶血病预防中的意义

【摘要】目的检测孕妇产前IgG抗A/B抗体效价,探讨孕妇产前不规则抗体筛查在新生儿溶血病预防中的意义。方法对317例夫妻血型不合的孕妇进行产前抗A/BIgG抗体效价测定,并对IgG类抗A/B效价≥1:64的孕妇给予临床干预,观察产后婴儿是否发生溶血,溶血出现的时间及程度;同时随机选择317例夫妻血型不合,产前未做不规则抗体筛查的产妇,调查其婴儿是否发生溶血,溶血出现的时间及程度。结果①试验组,新生儿溶血发生13例(4.10%),其中24h内发生者1例,48h发生者3例,72h发生者3例,>72h发生者6例;对照组,新生儿溶血发生49例(15.46%),其中24h内发生者14例,48h发生者17例,72h发生者15例,>72h发生者3例;两组比较有统计学意义(P

【关键词】母婴血型不合;ABO血型抗体;抗体效价;新生儿溶血病

母子血型不合引起的新生儿溶血病(hemolyticdiseaseofthenewborn,HDN)是由于孕妇与胎儿血型不符,母体的抗体与胎儿的红细胞发生反应而引起的同种免疫溶血性疾病,发生新生儿溶血的血型抗原以ABO系统最常见。李锡福等报导ABO血型系统引起的新生儿溶血病发生率为15.96%。笔者对317例夫妻血型不合的孕妇进行产前抗A/BIgG抗体效价测定,并配合临床干预,跟踪观察产后新生儿溶血病发生情况,与未进行产前抗A/BIgG抗体筛查的317例产妇所产新生儿溶血病发生情况进行比较,探讨孕妇产前不规则抗体筛查在新生儿溶血病预防中的意义。

1资料与方法

1.1研究对象624例孕产妇分别来自济宁市第一人民医院,济宁医学院附属医院,梁山县人民医院,皆为夫妻血型不合者。年龄21~38岁,平均27岁;溶血病新生儿纳入标准:①排除药物性和其它疾病所致溶血;②出生后72h内即出现黄疸,并逐渐加重,1~4d内血清胆红素足月产儿>220.6μmol/L,早产儿>256.5μmol/L对,2周后仍持续不退者。

1.2仪器与试剂离心机KA2200型(KUBOTA公司);XW80A漩涡混合器(上海精科实业有限公司)。0.2mol/L羟基乙醇(2Me)应用液;广谱抗人球蛋白、标准红细胞、抗A/B抗体(上海血液生物医药有限公司)

1.3血液标本制备

1.3.1采血夫妻/各采自凝血4ml,抗凝血2ml(与抗凝剂充分混匀)。

1.3.2血清制备子凝血37℃孵育45~60min,离心备用。

1.3.3红细胞制备抗凝血生理盐水洗涤3次,配成3~5%的红细胞悬液

1.4酶处理红细胞(木瓜凝乳蛋白酶)①酶溶液2ml、抑制剂2ml、A细胞悬液1ml、B细胞悬液1ml,37℃孵育10min;②A、B细胞悬液分别加入等量的酶液(1ml),37℃酶处理5min,加抑制剂终止反应;③生理盐水洗涤3遍,制备3~5%酶处理红细胞悬液备用。

1.5ABO血型及Rh血型检测[2]

1.5.1ABO血型定型①纸板法正定型:标记的纸板上分别滴1滴抗A、抗B试剂,各滴加1滴受检者红细胞,把红细胞和试剂充分混合,慢慢倾斜2min。结果分析:凝集则为阳性。(对结果有怀疑,应用试管法重新试验);反定型:标记的纸板上分别滴加2滴A、B细胞,各加入1滴受检者血清,观察凝集情况;②试管法取两只试管并做标记,分别滴加1滴抗A、B试剂,各加入1滴受检者红细胞悬液,3400r/min离心1min,观察凝集。

1.5.2Rh血型定型纸板法:标记的纸板上滴加抗D(IgG/IgM)2滴,加入受检者红细胞悬液1滴,检查凝集情况,凝集则为阳性。

1.6不规则抗体检测应用凝聚胺法(Ploybrene)。取3支试管,分别加2滴孕妇血清,1滴筛选分型细胞(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),然后加入700μml低离子介质,2滴polybrene;3400r/min离心1min,倾去上清,观察都应凝集,分别加入2滴重悬液,轻轻晃动观察结果,若有凝集,则为不规则抗体阳性。如孕妇为Rh阴性血还应用抗人球蛋白检测不规则抗体。

1.7血清中IgG抗A/B效价测定①材料:孕妇血清、2mol/L羟基乙醇应用液、酶处理红细胞、抗人球蛋白;②酶法测定IgG抗A/B效价:50μml孕妇血清+50μml2Me应用液,封口膜封闭,37℃孵育15min;加入700μml生理盐水(1:16稀释);取100μml倍比稀释4管(1:32,64,128,256);加入1滴相应酶处理红细胞A/B,37℃孵育7min;3400r/min离心1min观察结果,以效价≥1:64为阳性。如妻“O”型,夫“AB”型,要做IgG抗A和抗B两个效价测定,夫妻血型相符者不用做IgG抗A/B效价测定。

1.8临床干预措施由各医院相关大夫给予适当的临床干预措施。

1.9新生儿溶血病发生情况由专人调查、记录,包括发病例数、黄疸出现时间、血清总胆红素(BT)浓度。

1.10统计学方法采用SPSS13.0统计软件包处理,采用χ2检验,以P

2结果

2.1两组新生儿溶血病发生率试验组新生儿溶血发生36例(4.10%),对照组新生儿溶血发生67例(15.46%)。两组比较差异有统计学意义(P

2.2两组新生儿黄疸出现时间对照组新生儿黄疸出现平均时间(53.39±26.95)h;试验组(77.54±29.64)h,试验组新生儿黄疸出现时间较对照组晚,结果见表2。

2.3两组患儿血中总胆红素浓度比较,结果见表3。

3讨论

血型不合引起的新生儿溶血病是与血型有关的一种严重病症,高胆红素血症导致核黄疸是对新生儿的主要威胁,如抢救不及时可致永久性脑损伤甚至死亡。本病的预防,只有依赖于血型血清学方法,通过检测孕妇血型抗体效价,可确诊母子ABO血型不合。对新生儿黄疸患者及时做血型血清学检查,早期明确诊断,及时治疗,疗效显著。本研究结果显示:通过孕妇产前不规则抗体筛查,对血型抗体效价异常者及时给予临床干预,新生儿溶血病发生率明显降低,黄疸出现时间延长,黄疸严重程度明显减轻,提示对孕妇进行产前血型不规则抗体筛查,及时给予治疗,有助于预防新生儿溶血病的发生,减轻溶血程度。孕妇产前不规则抗体筛查可作为预防新生儿溶血病发生的诊断指标。对于母婴ABO血型不相容的孕妇,在孕16~20周进行首次血型抗体检查,作为抗体基础水平,在30周左右进行第二次检查观察抗体水平的变化趋势,若上升,以后每3周重复测定一次。同时采取适当的预防与治疗措施,以降低新生儿溶血病的发生。