大豆异黄酮对更年期大鼠抗氧化作用及提高学习记忆能力的研究

【摘要】目的：观察大豆异黄酮对更年期雌性SD大鼠抗氧化作用及学习记忆的影响。方法：选用健康更年期雌性SD大鼠，随机分成空白对照组和低、中、高剂量4组。空白对照组给予蒸馏水，实验组每日分别灌服42、83、249 mg/kg剂量的大豆异黄酮，连续60d。第60d取血测定血清过氧化脂质丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力，用跳台实验方法测定大鼠学习记忆能力。结果：与空白对照组比较，中、高剂量组大鼠血清MDA含量显著降低，低、中、高剂量组血清SOD活力明显升高，中、高剂量组血清GSH-Px活力明显升高。结论：大豆异黄酮具有明显的抗氧化作用，并有效提高更年期雌性SD大鼠的学习记忆能力。

【关键词】大豆异黄酮；更年期大鼠；抗氧化；学习记忆

文章编号：1009-5519（2008）07-0954-03 中图分类号：R33 文献标识码：A

Study of soybean isoflavones on antioxidative effect and improving the ability of study and memory in climacteric rats

WANG Ai-mei1，ZHOU Jian-hui2，OUYANG Jing-ping1

（1.Medical College of Wuhan University，Hubei 430000，China；2.Nanyang Medical College of Henan，Henan 473058，China）

【Abstract】Objective：To investigate the influence of soybean isoflavones on the antioxidative effect and improving the ability of study and memory in climacteric rats.Methods：Forty-eight female SD climacteric rats were randomly divided into 4 groups with one control group and the other low，medium and high dose groups，which were given soybean isoflavones 0 mg/kg.bw，42 mg/kg.bw，83 mg/kg.bw and 249 mg/kg.bw by superalimentation daily for 60 days respectively.The levels of SOD，GSH-Px and MDA in serum were measured，and the ability of study and memory in each group was deterimined by adopting the law of diving platform.Results：The content of serum MDA in medium and high dose groups was lower than that in control group.The activity of serum GSH-Px im medium and high dose groups was significantly increased，so was the activity of serum SOD in low，medium and high dose groups.Conclusion：Soybean isoflavones do have the obvious effect of antioxidation，and improve the ability of study and memory effectively in female SD climacteric rats.

【Key words】Soybean isoflavon；Climacteric rat；Antioxidation；Study and memory

近年来国内外对大豆成分进行了广泛的研究，发现大豆皂甙具有抗氧化、降血脂等作用[1，2]；大豆异黄酮能有效预防癌症、骨质疏松等多种疾病的发生[3]。大豆异黄酮对更年期雌性大鼠抗氧化作用及学习记忆的影响少见报道，本研究采用更年期雌性大鼠，观察大豆异黄酮的抗氧化作用及对学习记忆能力的影响，为进一步开发利用提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 样品：大豆异黄酮由西施兰联合企业有限公司生产、送检，样品为淡黄色粉末，胶囊，铝塑板装0.5 g/粒，每日1粒，按60kg体重计人体推荐量为8. 3 mg/(d・kg)，取胶囊内容物为样品受试物。

1.2 试验动物及饲料：清洁级雌性SD大鼠48只，12月龄，体重300～500 g由河南省实验动物中心提供（合格证号：4104035）；清洁级饲料由河南省实验动物中心提供（合格证号：4104042）。

1.3 主要试剂及仪器：SOD、MDA、GSH-PX试剂盒由南京建成生物工程研究所提供、美国产SPACE全自动生化分析仪、大鼠跳台系中国医学科学院药物研究所研制。

1.4 动物分组及剂量设计

1.4.1 剂量：根据大鼠血清中丙二醛(MDA)的含量的多少随机将更年期雌性SD大鼠分为分成4组，分别为空白对照组，低、中、高剂量3个实验组。低、中、高3个剂量组，分别为人体推荐量的5倍、10倍、30倍，即42 mg/kg、83 mg/kg、249 mg/kg，受试物采用灌胃法给予，分别取样品42 mg、83 mg、249 mg加蒸馏水至100 ml作为低剂量组、中剂量组和高剂量组的灌胃液。另设1个对照组仅给予蒸馏水，连续给予受试物2个月，灌胃量为l0ml/kg。

1.5 实验方法和观察指标：连续给予大鼠受试物2个月后，采血并分离血清，测定MDA含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－PX)的活力。

1.6 大鼠学习记忆能力测定（跳台法）：跳台装置为80 cm×16 cm×40 cm的被动回避反应箱，箱底铺有铜栅作为刺激电极，内设高4.5 cm，直径6.5 cm的橡皮垫作为大鼠回避电击的安全平台。先放入大鼠适应5 min，随后通以36 V交流电，大鼠遭到电击后跳上安全平台，如从台上跳下，双足接触铜栅为错误反应，记录3 min内出现的错误反应数，作为学习测试成绩，24 h后重复上述试验，记录每只大鼠第一次跳下安全区的时间(潜伏期) 和错误次数，作为记忆测试成绩。

1．7 数据处理：实验数据用x±s表示，采用ｔ检验判定组间差别。

2 结果

2.1 大豆异黄酮对大鼠体重的影响，见表1。

由表1可见，各剂量组大鼠在实验初期、中期和最后的体重分别与对照组比较，差异无显著意义(P>0.05)。说明大豆异黄酮在本试验条件下对动物的体重无明显影响。

2.2 大豆异黄酮对大鼠抗氧化作用的影响，见表2。

由表2可见，3个剂量组血清中的MDA含量均低于对照组，低、中、高剂量组与对照组比较差异有显著意义(P

2.3 大豆异黄酮对大鼠学习记忆能力的影响，见表3。

由表3可见，在跳台实验学习记忆测试中，低、中、高剂量组与对照组比较均能使更年期雌性大鼠的潜伏期延长，错误次数减少(Ｐ

3 讨论

自由基是指含有未配对电子的原子、分子或基团，由于自由基中含有未成对电子、具有强烈的配对倾向、高度活跃、很不稳定，具有极强的攻击性和破坏性。在正常情况下，体内不断产生自由基，但并未对身体造成严重后果，原因是机体的氧化和抗氧化系统存在着一种动态平衡。当机体受到损伤时，体内活性氧自由基增多，脂质过氧化反应加剧；当体内抗氧化能力增强，抗氧化酶活性增高时，可阻止脂质过氧化或降低脂质过氧化产物的含量。正常机体抗氧化系统的抗氧化酶类有SOD、GSH-Px等，SOD能将组织细胞中的超氧阴离子自由基歧化生成过氧化氢，从而减少氧自由基对细胞的损伤； GSH-Px是机体存在的一种含硒清除自由基和抑制自由基反应的酶系统，可将过氧化氢分解，并可清除 MDA和其它过氧化产物，阻止体内自由基引起的膜脂质过氧化。体内大量活性氧自由基若不能及时清除，使活性氧水平发生改变，可促发脂质过氧化反应。脂质过氧化产物（如MDA）可损伤组织细胞的膜性结构，影响膜的功能，从而导致组织细胞功能的损伤，作为脂质过氧化反应的产物，MDA能直接反映体内自由基损伤情况[4]。现已明确许多疾病或症状，如肿瘤、炎症、心脑缺血、动脉粥样硬化等，都与自由基有关[5]。

本实验结果显示: 大豆异黄酮明显降低更年期雌性大鼠血清MDA含量，提高血清SOD和GSH－PX活性， 并有效提高更年期雌性大鼠的学习记忆能力。提示大豆异黄酮能促进机体内源性抗氧化物质的产生，抑制MDA生成，具有明显的抗氧化作用。其抗氧化机制主要通过清除活性氧自由基，阻止脂质过氧化物的产生，提高抗氧化酶活性而发挥抗氧化作用。

更年期妇女随着卵巢功能的衰退、促性腺水平紊乱以及雌激素水平下降，导致脂质过氧化作用增强，自由基清除酶活性下降从而引起心血管疾病、老年痴呆等一系列的疾病[6]。更年期女性因雌激素水平低下而引起的一系列症状过去用传统的雌激素替代疗法（ERT）来治疗，但ERT会增加患雌激素相关疾病、特别是乳腺癌的风险[7]。大豆异黄酮是从大豆中提取一种天然植物雌激素，具有天然性和安全性，既可替代合成雌激素，又能避免因长期服用合成雌激素而导致的多种不良作用，因此大豆异黄酮一定具有良好的应用前景。

参考文献：

[1] Aoki H，Otake Y，Igaraquat K，et al.Soy protein reducesparaquat induced oxidative stress in rats[J].J Nutr，2002，132(8): 2258.

[2] Yamakoshi J，Izumi T.Isoflavone aglycone-rich extract withoutsoy protein attenuates atherosclerosis development in cholesterol-fed rab-bits[J].J Nutr，2000，130(8)：1887.

[3] 刘 丽，金 宏.大豆异黄酮抗氧化作用的研究进展[J].中华放射医学与防护杂志，2003，23(2):132.

[4] 李国莉.大豆异黄酮抗氧化效能的研究[J].食品科学，2005，26（10）：211.

[5] 郑灵芝，李素霞，袁勤生.大豆异黄酮抗氧化性质的研究[J].食品与药品，2006，8（2）：48.

[6] 肖 炜.益妇宁软胶囊对去势大鼠血清性激素、自由基及NO水平的影响[J].中药材，2003，26（10）：742.

[7] 钱晓蕾.大豆异黄酮的研究进展及其在妇产科领域的应用[J].现代妇产科进展，2003，12（4）：290.

收稿日期：2007-12-19