中药制剂对大肠杆菌耐药性逆转的作用研究

摘要：目的：探讨中药制剂对大肠杆菌耐药性逆转作用。方法：将标准菌株应用庆大霉素进行耐药菌株培养，使标准大肠杆菌菌株对庆大霉素产生耐药性，三等分后分别放入三黄汤、五味消毒饮以及黄连解毒汤中进行培养，于固体平板培养基上进行涂布使其生长，之后再次进行药敏试验，判断三种中药制剂对大肠杆菌耐药性逆转效果，进行统计学分析，得出结论。结果：五味消毒饮对大肠杆菌标准菌株最低抑菌质量浓度较高，为0.7g/ml，而三黄汤较低，为0.5g/ml，由此可知三黄汤在较低浓度即可起到一定的抑菌效果；三黄汤药敏纸片直径最大，且逆转率最高（80.00%），而五味消毒饮药敏纸片直径最小，且逆转率最低（40.00%）；五味消毒饮最佳逆转时间最长，而黄连解毒汤最佳逆转质量浓度最大，三种药物对比分析结果具有统计学意义（P>0.05）。结论：在今后的研究中，应当以中医辩证论治作理论指导，结合中药四性五味，以现代药物研究方法为手段，抓住治疗耐药细菌感染研究的契机，开拓中药制剂治疗耐药菌感染的领域。

关键词：大肠杆菌；耐药性；逆转率；中药制剂；临床作用

中图分类号：R378.2+1 文献标识码：A 文章编号：1005-0515（2013）9-033-02

本文将对产生抗生素耐药性的大肠杆菌进行临床研究，从而探讨中药制剂对大肠杆菌耐药性逆转作用，为临床改善抗生素耐药性大肠杆菌治疗效果提供可靠依据，提高患者临床疗效及生活质量，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 材料 ①大肠杆菌标准菌株。由省医院检验中心提供，ATCC25922；②蛋白胨水培养基。即普通琼脂培养基，由上海伊华医学科技有限公司提供；③水解酪蛋白琼脂，由杭州微生物试剂厂提供；④药敏纸片。由兰州麦迪生物科技有限公司提供，头孢噻肟30ug、头孢他啶30ug。

1.2 方法

1. 2. 1 中药制剂制备 三种中药制剂方剂组成：①黄连解毒汤，黄连、栀子、黄芩、黄柏；②三黄汤，黄芩、大黄、黄连；③五味消毒饮，野、紫花地丁、金银花、紫背天葵子、蒲公英。取上述三种中药方剂粗粉20g加入蒸馏水，蒸馏水量应恰好没过药材约5cm，室温环境下浸渍30min后使用文火煎煮30min，之后将药液滤出，重复上述过程一次，将两次所得药液混合均匀后调节pH值为7.4-7.6，将其蒸发浓缩至原药材质量与煎液体积比为每毫升1.0g，于4摄氏度保存待用。

1. 2. 2 研究方法 将标准菌株应用庆大霉素进行耐药菌株培养，使标准大肠杆菌菌株对庆大霉素产生耐药性，经美国临床实验室标准化委员会（CLSI/NCCLS）指定抗微生物药敏试验检测获得超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌 [1]。将所得耐药菌株三等分，分别放入三黄汤、五味消毒饮以及黄连解毒汤中进行培养（浓度分别为0.1g/ml、0.2g/ml、0.3g/ml、0.4g/ml、0.5g/ml、0.6g/ml、0.7g/ml、0.8g/ml、0.9g/ml、1g/ml，培养时间分别为12h、24h、36h、48h、60h以及72h），于固体平板培养基上进行涂布使其生长，之后再次进行药敏试验，判断三种中药制剂对大肠杆菌耐药性逆转效果，进行统计学分析，得出结论。

1. 3 统计学方法 所有数据均使用SPSS13.0软件包进行统计学分析，对于计量资料用 ±s表示，采用t检验，计数资料采用X2检验，以P

2 结果

2. 1 MIC 三种中药制剂对大肠杆菌标准菌株MIC对比分析，具体情况见表1。（在标准质控菌株的最低抑菌浓度符合规定范围的前提下，以无菌生长的最低抗菌药物溶液的浓度为最低抑菌浓度，即MIC）

由表1可知，五味消毒饮对大肠杆菌标准菌株最低抑菌质量浓度较高，为0.7g/ml，而三黄汤较低，为0.5g/ml，由此可知三黄汤在较低浓度即可起到一定的抑菌效果。

2. 2 耐药性逆转 五味消毒饮、三黄汤以及黄连解毒汤对耐药性大肠杆菌的逆转率及逆转后药敏纸片直径对比分析，具体情况见表2。

由表2可知，三黄汤药敏纸片直径最大，且逆转率最高（80.00%），而五味消毒饮药敏纸片直径最小，且逆转率最低（40.00%），三种药物对耐药性大肠杆菌逆转效果对比分析结果具有统计学意义（P

2. 3 最佳时间及质量浓度 五味消毒饮、三黄汤以及黄连解毒汤对耐药性大肠杆菌的逆转最佳时间及最佳质量浓度