蔬菜中六六六、滴滴涕检测方法的改进

蔬菜中六六六、滴滴涕检测方法的改进

贺同欣，桑鲁燕，崔瑞丽

菏泽出入境检验检疫局技术中心，山东菏泽 274000

摘要 本文采用气相色谱法毛细管色谱柱分离、电子捕获检测器检测蔬菜中残留的六六六和滴滴涕含量。取适量的蔬菜，用丙酮、石油醚（1：1）高速分散器提取，提取液经层析柱净化后进样测定。当蔬菜样品取样量为20g时，加标回收率在64%～137%之间，RSD为6.1%～15.2%。经改动后的检测方法，缩短了峰保留值，增加了峰分离度值，各峰之间分离度最小值为1.9，且峰形良好对称。

关键词 六六六；滴滴涕；气相色谱；蔬菜

中图分类号X592 文献标识码A 文章编号1674-6708（2012）81-0118-02

有机氯农药在农药史中曾是使用量最大、使用历史最长的一大类农药。随着人们认识程度的深化，其危害性也日益为人们所熟知。自20世纪70年代始，各国政府陆续出台了关于禁止或限制有机氯农药使用的政策，我国也于1983年4月1日起停止了有机氯农药的生产和使用。尽管多年来有机氯农药没有使用，但由于其稳定性好、半衰期长等特点，再加上个别滥用农药的情况，因此在水、土壤、动植物体中仍然可能残留有有机氯农药[1]。GB/T 5009.146-2003提供了植物性食品中六六六、滴滴涕的残留分析方法。该方法规定柱温为180 ℃程升至230 ℃并保持30min，进样口、检测器温度均为250 ℃ ，色谱柱为OV-101，进样量为1ul[2]。我们根据工作实践作了一些改动，经改动后的检测方法，缩短了峰保留值，增加了峰分离度值，各峰之间分离度最小值为1.9，且峰形良好对称。检测限能够满足要求，精密度、回收率都较好。现将结果报告如下。

1 实验部分

1）仪器：GC9790气相色谱仪（浙江温岭）附ECD检测器，旋转蒸发器，均质器，层析柱，布氏漏斗，抽滤瓶，分液漏斗，1?L微量进样器；

2）试剂： 农药标准品， 重蒸后的丙酮、石油醚、乙酸乙酯。无水硫酸镁，用前140 ℃烘干4 h。弗罗里硅土，于620 ℃ 灼烧4小时，用前140 ℃烘干2小时，趁热加5 %水灭活；

3）标准溶液的配制：将100ug/mL的混合标准溶液用重蒸石油醚稀释成1ug/mL的贮备液。然后用重蒸石油醚稀释成0.02ug/mL、0.1ug/mL、0.2ug/mL、0.5ug/mL、1.0ug/mL的标准系列使用液。

4）色谱条件

（1）色谱柱：石英弹性毛细管柱，HP-5柱 0.32mm（内径）×30m×0.50um（膜厚）；

（2）气体流速：氮气：4ml/min ，尾吹气：30ml/min，不分流进样；

（3）温度：柱温自170℃程序升温至238℃，保持10min，检测器温度250℃，进样口温度230℃。

5）实验步骤

（1）提取

称取20g蔬菜试样，置于100mL的烧杯中，加入30mL丙酮和30mL石油醚，于高速分散器提取2min，提取液经抽滤，滤液移入250mL分液漏斗中，加入100mL的硫酸钠溶液（20 g/L），充分摇匀，静置分层，将下层溶液转移到另一250mL分液漏斗中，用20mL、20mL石油醚萃取，合并三次萃取的石油醚层，过无水硫酸镁层，于旋转蒸发仪上浓缩至2mL。

（2）净化

①层析柱的制备：玻璃层析柱中先加入5 cm高的无水硫酸镁，再加入5g 5% 水脱活弗罗里硅土，最后加入1 cm高的无水硫酸镁，轻轻敲实，用20mL石油醚淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。

②净化与浓缩：将浓缩液2mL加入以淋洗过的净化柱中，并用少量石油醚洗茄形瓶，一并转入净化柱中，用100mL石油醚+乙酸乙酯（95+5）洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上浓缩近干，用少量石油醚多次溶解残渣于刻度离心管中，最终定容至1.0mL，供气相色谱分析。

（3）测定

吸取0.5 ul试样液注入气相色谱仪，根据标准曲线用外标法定量。

2 结果和讨论

1）色谱条件选择

进样口230 ℃足以使六六六、滴滴涕瞬间气化，适当降低进样口温度可延长进样垫的寿命。检测器温度高于柱温10 ℃～30 ℃可防止检测器污染。柱温自170 ℃程序升温至238 ℃，保持10 min，缩短了峰保留值，增加了峰分离度值，各峰之间分离度最小值为1.9，且峰形良好对称。

2）用无水硫酸镁替代无水硫酸钠作为脱水剂，实验表明硫酸镁要比硫酸钠脱水效果好

3）最低检测浓度（?g/kg）（见表1）α-666 0.1 p，p'-滴滴伊 0.8

β-666 0.2 o，p'-滴滴涕 1.0

γ-666 0.6 p，p'-滴滴滴 1.0

δ-666 0.6 p，p'-滴滴涕 1.0

表1 最低检测浓度

4）精密度和准确度

经过改进，峰的分离效果比未改进前要好，精密度和准确度较高.取样品20.00 g，前处理定容到1.0mL，稀释倍数K=1，各种农药添加浓度为35?g/kg，RSD在6.1%～15.2%之间；加标回收选择4个添加浓度，1.5?g/kg、10 ?g/kg、25?g/kg、50?g/kg，加标回收率范围为63.70%～137.10%，结果见表2，表3。

5）标准曲线绘制

将混合有机氯标准系列使用液0.02ug/mL、0.1ug/mL、0.2ug/mL、0.5ug/mL、1.0ug/mL，按选定的色谱条件进样，以吸收峰面积对浓度作标准曲线，得8 种农药的线性方程及相关系数。有机氯农药在0.02ug/mL～1.0ug/mL之间线性关系良好。见表4。

平行次数 农药名称及测定浓度

α

-666 β

-666 γ

-666 δ

-666 p，p'-滴滴伊 o，p'-滴滴涕 p，p'-滴滴滴 p，p'-滴滴涕

1 0.6139 0.7439 0.6577 0.7780 0.7061 0.6681 0.6795 0.6536

2 0.5933 0.6941 0.6498 0.6704 0.5763 0.5050 0.5251 0.4806

3 0.6359 0.7296 0.6820 0.7753 0.6201 0.5576 0.6461 0.6371

4 0.6881 0.8466 0.7629 0.7990 0.6699 0.6129 0.6645 0.6217

5 0.5992 0.6626 0.5799 0.6601 0.6662 0.6132 0.6296 0.6202

6 0.6168 0.7198 0.6773 0.7076 0.6939 0.6299 0.6688 0.6380

7 0.6189 0.6505 0.6400 0.6646 0.7139 0.6800 0.6599 0.6999

8 0.7164 0.8709 0.7763 0.9156 0.8473 0.8138 0.8765 0.8758

9 0.6315 0.7883 0.6940 0.7289 0.7487 0.7031 0.7492 0.7363

10 0.6457 0.8857 0.7512 0.7912 0.7871 0.7008 0.7493 0.7228

平均值 0.6360 0.7592 0.6871 0.7491 0.7030 0.6484 0.6849 0.6686

标准偏差 0.0389 0.0850 0.0614 0.0795 0.0786 0.0857 0.0921 0.1019

变异系数RSD 0.0612 0.1119 0.0894 0.1061 0.1118 0.1322 0.1346 0.1524

表2方法精密度测定（每种农药添加量为35?g/kg）

农药名称 α-666 β-666 γ-666 δ-666 p，p'-滴滴伊 o，p'-滴滴涕 p，p'-滴滴滴 p，p'-滴滴涕

添加浓度 1.5ug/kg 1.5ug/kg 1.5ug/kg 1.5ug/kg 1.5ug/kg 1.5ug/kg 1.5ug/kg 1.5ug/kg

回收率1 67.30 110.60 76.60 116.60 83.70 73.30 63.70 110.00

回收率2 86.00 125.30 95.00 126.00 105.00 97.30 79.70 99.70

添加浓度 10ug/kg 10ug/kg 10ug/kg 10ug/kg 10ug/kg 10ug/kg 10ug/kg 10ug/kg

回收率1 120.30 78.20 90.60 95.60 137.10 131.20 86.20 98.90

回收率2 98.70 112.90 102.20 118.80 89.10 88.60 90.05 107.60

添加浓度 25ug/kg 25ug/kg 25ug/kg 25ug/kg 25ug/kg 25ug/kg 25ug/kg 25ug/kg

回收率1 94.50 101.10 100.50 85.90 90.80 102.10 95.40 96.50

回收率2 92.30 92.80 98.30 75.70 100.90 79.90 85.30 71.80

添加浓度 50ug/kg 50ug/kg 50ug/kg 50ug/kg 50ug/kg 50ug/kg 50ug/kg 50ug/kg

回收率1 71.50 88.90 79.40 87.20 79.70 78.80 85.40 88.40

回收率2 80.80 95.00 86.10 100.00 102.82 98.20 105.10 105.70

表3方法回收率实验

组分名称 线性方程y=ax+b 相关系数

α-666 a=2.16E-006 b= -1.49E-001 1.0000

β-666 a=8.14E-006 b= -4.07E-001 0.9993

γ-666 a=2.53E-006 b= -1.74E-001 0.9999

δ-666 a=2.99E-006 b= -4.91E-001 0.9944

p，p'-滴滴伊 a=3.18E-006 b= 1.72E-002 0.9917

o，p'-滴滴涕 a=3.79E-006 b= 1.67E-002 0.9953

p，p'-滴滴滴 a=4.89E-006 b= -1.27E-002 0.9988

p，p'-滴滴涕 a=3.81E-006 b= 4.94E-002 0.9965

表4 组分线性方程及相关系数

参考文献

[1]樊德方.农药残留分析与检测[M].上海科学技术出版社，1982.

[2]国家标准GB/T 5009.146-2003.