浅谈HE染色方法在临床病理诊断中的作用

【摘要】 目的：观察he染色技术在临床病理诊断中的价值。方法：选择本院2012年1-12月各个科室送检的968例石蜡病理切片作为研究对象，进行快速的组织病理染色，其中的510例细胞学染色的切片，经过仪器的检测、分析病理HE染色在临床病理诊断中准确率。结果：其中石蜡切片、快速冰冻切片、脱落细胞学等在HE染色的质量均受到一定因素的影响，通过技术的逐步改进，可以提高HE染色的质量，从而提高临床病理的诊断率。结论：HE染色方法是临床病理诊断中一种经济适用、检测结果可靠的方法，采用不同的方式，提高了切片的质量及病理诊断的准确率，为临床上提供了准确度较高的病理资料，具有重要的临床应用价值。

【关键词】 HE染色； 病理诊断； 石蜡切片； 冰冻切片

中图分类号 R36 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2013）29-0147-02

目前，病理诊断室现代医学界中的一种最为具有权威性的临床病理诊断方法，其诊断结果的准确性，不仅仅只取决于病理医生的技术水平，而且还与组织病理片的处理和染色效果密切相关[1]。随着人们法律意识和自我保护意识的不断提升，病理诊断的风险也有逐年上升的趋势，在现实社会中，病理技术由于种种原因往往得不到足够的重视，为了提高临床病理诊断的准确性，一方面病理医生必须加强检测的责任心，提高诊断水平，另一方面更应该提供优质的组织病理切片，以保证诊断的准确性[2]。病理工作目前普遍存在标本固定时间欠缺、组织脱水进行的不彻底、试剂使用过程中浓度变化，影响了切片的质量，无法提高病理的诊断正确率。因此，本院选择自2012年1-12月的968例石蜡切片、快速冰冻、510例脱落细胞学检查，整理收集检测过程中出现的问题，改进不足，调整病理组织的选材、固定、脱水、切片、HE染色等，以达到较高的诊断准确率，现将改进效果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般材料

选择本院2012年1-12月各个科室送检的968例石蜡病理切片作为研究对象，其中活检组织349例、子宫内膜300例、脂肪组织187例，骨组织98例、快速冰冻80例观察，510例进行细胞学制片结果进行对照、观察。所有的病理切片在环境温度适宜以及试剂浓度相对标准的情况下进行HE染色，均可以获得较为满意的效果。

1.2 方法

1.2.1 采用HE染色，即为苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin stainiing），是石蜡切片技术中最为常用的染色方法。其中苏木精是一种自然的染料[3]，但是本身没有染色的能力，鼻血经过化学氧化后变成苏木红，可以作为染料。苏木精对细胞核亲和力较弱，在助染剂的协同下达到染色的效果，在碱性环境中，苏木红显色呈蓝色；伊红属于酸性染料范围，主要可以使细胞质及细胞外基质中的成为着色显示为红色。一般的病理切片组织变化及组织的产物均可以通过HE染色法显示，在质量好的HE染色板中，组织或者细胞的一般形态均可以通过显微镜观察出。

1.2.2 染色方法 病理科室在选择材料进行病理切片制作中，应该该局不同组织采用不同的固定、脱水时间、不同的制片染色方式。手术室中切除的全部或者部分器官或者采用大块的组织切除标本，各种各样细胞学的标本，特出检查的体液或者血液标本，病理科室医生取材过程中要做到准确、迅速、完整以及具有代表性。HE染色操作的流程主要包括：细胞涂片均潮干后固定在浓度为95%的乙醇中[4]浸泡15 min，显微镜观察后，在之前固定的切片中选定进行免疫染色的区域，在区域的背面载玻片中用签字笔进行标记，标记号需要进行染色的抗体。后将细胞涂片按照顺序经过二甲苯、梯度的乙醇溶液和水，将涂片上的盖玻片及树胶洗脱完全；后加入0.5%盐酸-乙醇中将苏木红的颜色进行清洗，后采用水进行冲洗，加入稀释后的氨水将伊红的颜色脱掉；将载玻片单独拿出后浸泡于水中，多次进行洗涤，采用树胶或者DPX以盖片封片，帖标签；根据镜下观察到的细胞形式进行适当的调整，染色各个步骤所需要的时间，会受到温度、切片厚度等的影响；各种染料试剂一般均以化学纯为主。染色完毕后采用显微镜检查染色的结果，核对标本的种类、号码以及数量，保证切片的质量。

2 结果

病理科室通过将大小标本进行分开固定、脱水、染色等，苏木精将细胞核染成鲜明的蓝色，骨组织呈现深蓝色，骨组织中的黏液质呈灰蓝色。呈现的结果表明，各种组织切片在显微镜下观察，HE染色结果基本达到病理所规定的标准，结果见表1。

3 讨论

资料中表明，病理科室对于组织细胞的取材、脱水、切片的质量对于HE染色的结果具有较大的影响，组织切片染色的质量直接影响着病理切片的诊断结果，对于诊断不明确的结果也会延伸到临床中对疾病的治疗[5]，因此，不同的标本要有不同的取材方式，包括了取材标本的范围，对于标本的取材方法。

HE染色过程中关系染色成败的最关键的因素取决于对细胞核的着色，由物理及化学共同的作用进行这项工作，一方面主要是因为组织内部有许多微小的细孔，染料渗透后与组织进行牢固的结合，组织吸收染料后逐渐扩散、溶解，进而牢牢的固定[6-7]；另一方面在于组织细胞内部含有酸性及碱性的物质，含有的酸性物质可以与染液中的部分阳离子进行结合，生成固定的分子，含有碱性物质的与染液中的阴离子结合，共同起到牢固性的作用。

固定的主要目的在于使组织及细胞保持与活体时相似的成分以及形态，防止制片过程中组织的自溶，组织原有的构造消失或者被破坏而影响了诊断的结果。固定后应该及时的送检，防止组织固定时间过长后导致变脆、变硬而影响了切片的效果[8]，影响诊断结果，导致错误的治疗。HE染色过程中应该注意采用的试剂的浓度变化，控制适当的温度及湿度，保证切片的质量，提高诊断结果的准确率[9]。

综上所述，通过不断提高的HE染色技术，采用不同的固定、脱水、切片，提高了切片的质量，显著性的提高了病理诊断的准确率，由于结果的准确，也大大提高了临床上对针对性疾病的治愈率，为临床上提供了准确率更高的病理资料。因此，HE染色技术是病理诊断、临床治疗过程中不可或缺的重要检测手段，通过诊断结果的准确性，为临床的治疗提供参考依据，具有明显的临床价值。

参考文献

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[8]张敏.HE染色在临床病理诊断中的应用[J].齐齐哈尔医学院学报，2011，32（4）：552-554.

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（收稿日期：2013-05-02） （编辑：连胜利）