非小细胞肺癌患者术前血清中MMP-3和MMP-7检测的意义

[摘要] 目的 应用ELISA法分别检测120例非小细胞肺癌患者和120例正常成人血清中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达，并分析二者的表达与非小细胞肺癌患者的分化程度、淋巴结转移及临床分期的关系，为术前判断肿瘤的生物学行为提供理论帮助。 方法 选取我院确诊的120例非小细胞肺癌需进行手术治疗的术前患者作为观察组，选取120例体检证实为健康的成人血清作为对照组，应用酶联免疫吸附实验检测两组血清中MMP-3和MMP-7的含量，分析其意义及相关性。 结果 观察组患者血清中MMP-3和MMP-7的表达明显高于对照组，术前血清中MMP-3和MMP-7的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及临床分期密切相关。结果显示非小细胞肺癌中MMP-3和MMP-7的表达具有正相关性。 结论 非小细胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的表达升高，MMP-3和MMP-7在肿瘤的进展中具有促进作用，术前联合检测血清中MMP-3和MMP-7的表达可能有助于判断预后。

[关键词] 非小细胞肺癌；基质金属蛋白酶-3；基质金属蛋白酶-7；酶联免疫吸附实验

[中图分类号] R734.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）06-0114-02

Serum expressions and significance of MMP-3 and MMP-7 in non-small cell lung carcinoma before operation

HU Tianjun

Department of Thoracic Surgery, Ningbo No.2 Hospital, Zhejiang Province, Ningbo 315010, China

[Abstract] Objective To investigate the expressions of MMP-3 and MMP-7 in 120 cases with non-small cell lung carcinoma and 120 cases normal adults for observing their clinical significance in neoplasm. Methods We detected the serum expressions of MMP-3 and MMP-7 by ELISA in the non-small cell lung carcinoma before opeartion and normal adults. Their expressions and clinical significance were analyzed in the non-small cell lung carcinoma. Results The serum expressions of MMP-3 and MMP-7 were higher in the neoplasm than in normal adults. Their expressions were correlated with differentiation, clinical stage and lymph node metastasis. Positive correlation between MMP-3 and MMP-7 was found in neoplasm before operation. Conclusion The higher serum expressions of MMP-3 and MMP-7 were found in non-small cell lung carcinoma before operation. The synergistic effect of MMP-3 and MMP-7 may promote the development of neoplasm. The expressions of MMP-3 and MMP-7 may be helpful to judge the prognosis in non-small cell lung carcinoma.

[Key words] Non-small cell lung carcinoma; MMP-3; MMP-7; ELISA

非小细胞肺癌是危害人类健康的重要疾病，近年来患者血清中相关蛋白的表达逐渐引起学者的关注。基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）是基质金属蛋白家族的重要成员，对肿瘤细胞外基质具有较强的降解作用，对肿瘤的进展具有促进作用[1，2]。本实验关注非小细胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的检测情况，探讨二者的表达与肿瘤生物学行为的关系，旨在为术前非小细胞肺癌临床情况提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2009年1月～2010年12月在我院确诊为非小细胞肺癌的术前患者作为观察组。纳入标准：①均经病理学确诊，并符合WHO关于非小细胞肺癌的诊断标准；②术前未进行放化疗；③临床资料完整。本组共观察120例，其中男70例，女50例，患者年龄37～79岁，平均（57.9±7.9）岁。同时选取同期在我院进行体检并证实为健康的成人血清120例作为对照组。其中男69例，女51例，年龄36～78岁，平均（57.3±7.6）岁。两组资料的性别、年龄构成等比较，差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 血清中MMP-3和MMP-7的检测

观察组术前清晨抽取空腹静脉血5 mL，分离血清后，置于-20℃的冰箱中待检。对照组采血及保存方法同上。两组血清标本均在3 d内集中检测，检测方法为酶联免疫吸附实验，操作均由同一主管技师完成，严格操作过程，努力避免误差。

1.3 统计学处理

结果均经SAS 6.12软件进行分析，两组间的比较采用t检验，并应用线性相关分析计算其相关性，P ＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组中MMP-3和MMP-7的表达

两组中观察组患者血清中MMP-3和MMP-7的表达量明显高于对照组，见表1。

2.2 观察组患者不同临床特征中MMP-3和MMP-7的表达比较

MMP-3和MMP-7在低分化组中的表达量明显高于高、中分化组，在有淋巴结转移组中的表达量明显高于无淋巴结转移组，在临床分期Ⅲ、Ⅳ期患者中的表达量明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者。见表2。

2.3 非小细胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7表达的相关性分析

对非小细胞肺癌患者血清中MMP-3和MMP-7的表达进行线性相关分析，结果显示MMP-3和MMP-7的表达呈正相关（r = 0.43，P ＝ 0.03）。

3 讨论

非小细胞肺癌的生长、侵袭、转移是一个复杂的过程[3]。MMPs是一组结构上具有极大同源性蛋白的内肽酶的总和，可降解细胞外基质中的多种成分[4]。MMP-3是基质金属蛋白酶家族的重要成员，主要通过降解绝大多数的细胞外基质，使肿瘤细胞沿受损的基底膜向周围组织浸润和转移。MMP-7属于基质溶解素，其基因定位于11q21-q22，其DNA长1.6 kb，编码267个氨基酸，由于其缺乏与血红素结构蛋白同源序列而成为金属蛋白酶家族的最小成员，具有强大的基质降解活性和广泛的底物特异性[5，6]，包括Ⅳ型胶原、纤维蛋白结合素、层黏连蛋白和可溶性弹性蛋白等底物，同时受基质金属蛋白酶抑制剂的调节较小，而且在研究中显示其能有效地激活MMPs家族的其他成员，对基底膜及相关的屏障有广谱的降解功能。同时也有观点认为其能破坏局部组织结构，增加肿瘤诱导的血管形成[3，7]，而起到促进肿瘤发展的作用。

本实验通过对120例非小细胞肺癌患者术前的血清进行ELISA法检测，结果显示MMP-3和MMP-7高表达，提示MMP-3和MMP-7在血清中的表达与组织中的表达具有一致性，MMP-3和MMP-7在肺癌的进展中具有重要促进作用。实验结果显示，术前血清中MMP-3和MMP-7的含量均与非小细胞肺癌的分化程度、淋巴结转移及临床分期密切相关，提示MMP-3和MMP-7在肿瘤进展中具有直接作用，由于分化程度、淋巴结转移及临床分期均与非小细胞肺癌的预后相关，因此，术前联合检测MMP-3和MMP-7的表达可能对判断患者的预后及指导治疗有一定价值。相关分析显示非小细胞肺癌血清中MMP-3和MMP-7的含量呈正相关，这不仅提示二种蛋白在非小细胞肺癌的发展中起重要作用，又提示MMP-3和MMP-7具有正向协同效应。当MMP-3和MMP-7在细胞外基质发生溶解时，可以引起黏附功能下降，使肿瘤细胞脱离原发灶，进而发生转移[8]。MMP-7还可能通过调节细胞质内NF-κB蛋白的活性，使其与MMP的启动子的结合增强[9]，增加其合成，从而促进肿瘤细胞的机动性、趋化性及侵袭性。非小细胞肺癌术前血清中检测MMP-3和MMP-7的表达，由于血液标本较组织标本取材容易，且检测方法简便可行，对患者的指导意义大，因此，临床诊断和治疗中可以积极应用。

总之，MMP-3和MMP-7在非小细胞肺癌患者血清中高表达，提示二者可能在非小细胞肺癌的发生发展中起重要作用；术前联合检测MMP-3和MMP-7可能对判断患者的预后及指导治疗提供重要价值。

[参考文献]

[1] Kren L，Goncharuk VN，Krenová Z，et al. Expression of matrix metalloproteinases 3, 10 and 11 (stromelysins 1, 2 and 3) and matrix metalloproteinase 7 (matrilysin) by cancer cells in non-small cell lung neoplasms. Clinicopathologic studies[J]. Cesk Patol，2006，42（1）：16-19.

[2] Safranek J，Pesta M，Holubec L，et al. Expression of MMP-7, MMP-9, TIMP-1 and TIMP-2 mRNA in lung tissue of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) and benign pulmonary disease[J]. Anticancer Res，2009，29（7）：2513-2517.

[3] Salgia R. Prognostic significance of angiogenesis and angiogenic growth factors in nonsmall cell lung cancer[J]. Cancer，2011，117（17）：3889-3899.

[4] 宋宝辉，杨清波，张金涛，等. MMP-7和uPAR在非小细胞肺癌的表达及其意义[J]. 临床肿瘤学杂志，2009，14（12）：1069-1072.

[5] Liu H，Zhang T，Li X，et al. Predictive value of MMP-7 expression for response to chemotherapy and survival in patients with non-small cell lung cancer[J]. Cancer Sci，2008，99（11）：2185-2192.

[6] Liu D，Nakano J，Ishikawa S，et al. Overexpression of matrix metalloproteinase-7 (MMP-7) correlates with tumor proliferation, and a poor prognosis in non-small cell lung cancer[J]. Lung Cancer，2007，58（3）：384-391.

[7] 肖敏，黄孙卉. MMP-3和P53蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤转移的关系[J]. 实用肿瘤学杂志，2008，22（6）：514-515.

[8] Safranek J，Holubec L Jr，Topolcan O，et al. Expression of mRNA MMP-7 and mRNA TIMP-1 in non-small cell lung cancer[J]. Anticancer Res，2007，27（4C）：2953-2956.

[9] 曲光瑾，安牧尔，赵璐，等. Survivin与MMP-9、NF-kB65在卵巢上皮性肿瘤中的表达及相关性研究[J]. 中国现代实用医学杂志，2008，7（5）：14-18.

（收稿日期：2011-11-09）