中医药防治肝癌前病变机制研究概况

[关键词] 肝细胞；癌前病变；机制；癌基因；综述

[中图分类号] R273[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）03（b）-025-02

肝癌前病变是指病理上易发生癌变的肝组织异常，一般认为在慢性肝病中出现的肝细胞不典型增生、腺瘤样增生、肝细胞再生结节、肝细胞小管状化生和卵圆细胞增生，与肝细胞癌变发生关系密切，被认为属于肝癌前病变范畴。如能逆转或中断肝癌前病变的病理进程，则可有效预防肝癌发生。近年来，对肝癌前病变的研究显示，西医仍缺乏理想的阻断或逆转病变手段，而中医药的防治作用倍受期待，并成为目前肝癌防治学研究的重点。笔者结合近年来与实验研究有关文献，对中医药防治肝癌的作用机制加以综述。

1中医对肝癌前病变的认识

有关肝癌前病变古代中医尚无特异性病名相对应。因其发病特征多归于积聚、臌胀、胁痛、肝着中论治。中医学认为，湿热、疫毒等邪气侵入人体，多先伤及脾胃，中焦失运，痰湿内生，土壅木郁，肝气不畅，气血失和。情志失调则肝失疏泄、气机不利、终至脏腑失和。病久邪势未衰，正气已伤，瘀毒内盛，积而生变，发为肝癌前病变。在整个发病过程中，脾虚作为病理基础之一始终存在，肝脾不调，痰、瘀、毒互结则为其主要病机。

2中医药逆转肝癌前病变的机制

中医药能有效逆转肝癌前病变，与其抑制癌细胞增殖、诱导癌细胞凋亡、调节机体免疫功能、阻断致癌物质对正常细胞的诱变过程密切相关。近些年国内外研究表明，中医药可以从发生癌变的各个阶段、各个层面对肝癌前病变实施干预，主要涉及抑制癌基因表达，调节和活化被删除的抗癌基因，抑制抗癌基因突变蛋白的高表达和调节抗凋亡基因，进而调节细胞死亡和细胞增殖的平衡。另外中医药还可通过抗氧化和清除自由基来抑制肝细胞癌变，也可对端粒酶活性、DNA水平等进行调整。

2.1细胞生长、增殖调控基因及相关蛋白

研究发现，肝细胞在由正常细胞经不典型增生到癌前病变，最终形成肝癌过程中伴有基因表达的改变[1]。中医药通过调节基因表达抑制异常肝细胞生长、增殖，促进分化。钱妍等[2]应用肝复健冲剂干预二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌过程，结果表明肝复健可能通过抑制c-myc、IGF-Ⅱ的表达，阻断肝细胞失控增殖及癌变，延缓肝癌变发生。YIN 等[3]运用清肝化瘀方、苦参素干预DEN诱发大鼠肝癌形成过程，结果显示清肝化瘀方能阻断DEN致大鼠肝癌前病变和癌变发生，效果优于苦参素，清肝化瘀方能降低MAPKs通路中通路活性，抑制细胞过度增殖。新制抗癌方[4]抗AFB1染毒HBV转基因小鼠肝癌前病变分子机制与该方下调p21ras、PCNA蛋白表达水平有关。

2.2细胞凋亡基因

细胞凋亡是细胞分化与发育过程中受一系列基因调控而发生的主动性死亡。调节凋亡相关基因表达来加速细胞凋亡是抗癌变的重要机制。周振华等[5]发现健脾理气方能诱导HAC肝癌移植瘤的生长，抑瘤率为42.6％，与小剂量化疗43.0％相近。TUNEL法（末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法）检测细胞凋亡，发现中药组的凋亡指数较对照组上升1倍以上，同时，中药能上调肿瘤细胞Bax蛋白表达，从而抑制肝癌发生。杨早等[6]观察番荔枝总提取物对DEN诱发的肝癌前病变影响，结果说明番荔枝总提取物能通过调控Bax 、Bcl-2蛋白表达抑制肝癌前病变。邹菁等[7] 研究补肾方对DEN诱导大鼠肝癌过程中P53蛋白表达的影响，结果表明肝癌模型中p53基因突变可发生于肝癌前病变，参与肝癌的启动过程。补肾方可抑制大鼠肝细胞p53突变，从而延缓肝癌的形成。

2.3细胞周期调控基因

细胞周期是细胞生命活动基本过程，其循环异常与细胞生长失控及恶性增殖密切相关。中医药可通过调节细胞周期基因表达平衡来逆转肝癌前病变。Ahamd等[8]研究发现绿茶及其主要成分茶多酚引起A431细胞G1期阻滞，并且还抑制cyclinE、cyclinD1、CDK2、CDK4 和CDK6蛋白表达，诱导P21WAF/CIPI表达，表明茶多酚能诱导G1期CKIs表达，抑制cyclin-CDK复合物的表达而导致G1期阻滞。贾旭东等[9]采用改良Solt Farber大鼠肝癌前病变模型探讨茶多酚和茶色素对细胞周期因子影响，表明二者显著抑制cyclinD1、CDK4和PCNA表达，诱导P21WAF/CIPI和GADD45蛋白表达，从而诱导细胞周期阻滞，抑制细胞过度增殖。敖有光等[10] 探讨艾灸对HCC癌前病变大鼠的影响，结果示艾灸可能对减缓癌前病变形成有一定作用，此与抑制cyclinD1、CDK4过度表达有关。肝复健冲剂[2]可降低大鼠肝癌发生过程中CDK4、cyclinD1阳性表达，阻断肝细胞癌变。

2.4抗氧化和清除自由基

自由基能氧化细胞膜上脂质成分、组织或酶中的蛋白质以及糖类和DNA，因此自由基可导致过氧化损伤，并在肿瘤发生发展中起重要作用。王学江等[11]采用调肝颗粒干预DEN诱发的肝癌大鼠，结果表明调肝颗粒可通过抗氧化和清除自由基来阻断肝癌前病变的发展。张学武等[12]观察珍珠梅乙酸乙酯提取物对DEN致大鼠肝癌前病变GST P表达的影响，以及SOD、GSH Px活性及MDA含量的变化，结果显示通过清除自由基抑制肿瘤生长可能是珍珠梅抗肝癌的重要机制。

2.5转录因子及相关蛋白基因

转录因子可通过调节多类基因表达间接调控细胞的增殖、分化、凋亡及恶性转化。Zhu等[13]运用新制抗癌方合剂阻断AFB1染毒HBV转基因小鼠肝癌前病变，结果提示新制抗癌方可降低肝组织NF-κB P65、PCNA、P21N-ras蛋白表达，阻止肝细胞癌变。

2.6端粒酶

端粒酶是具有逆转录酶活性的核糖白， 其异常激活与肿瘤发生发展密切相关。抑制端粒酶的活性可能阻断癌前病变发展。孟志强等[14]观察健脾理气方药物血清对肝癌细胞SMMC-7721端粒酶活性影响，健脾理气方药物血清在第4天开始对肿瘤细胞的端粒酶活性有抑制作用，电泳条带光密度明显降低。孟志强等[15]还通过体内外实验观察健脾理气方药对端粒酶活性影响，结果显示健脾理气方在体内体外均可抑制端粒酶的活性。

2.7 DNA水平

细胞核内遗传物质DNA分子出现量和质的异常是肿瘤发生的重要分子基础[16]。因此，若能改变DNA水平则有利于癌变的逆转。王修杰等[17]用丹参酮进行体内抑癌实验，用溴脱氧尿嘧啶（Brdu）体内标记，测定肿瘤细胞增殖动力学，结果表明丹参酮可能参与抑制肿瘤细胞DNA表达、DNA合成达到抗肝癌作用。文朝阳等[18]探讨槲芪散对肝癌前病变影响，应用 FCM检测大鼠肝组织DNA的变化，结果说明槲芪散抗肝癌前病变分子机制与其抑制病变肝细胞DNA合成相关。

3评价和展望

近年来，国内外有关肝癌前病变在实验造模、免疫学、分子生物学等研究水平以及中药复方抑癌方面实验研究均已取得可喜的成果，但中医药防治肝癌前病变研究尚存在一些难题和挑战需要面对：①诊断标准不统一，迄今国内外尚无肝癌前病变的统一诊断标准，从而使用于肝癌前病变的治疗仍多数停留在实验研究阶段；②中药的作用环节，尤其是中药复方尚不完全清楚，许多药物作用机制仍未阐明；③中药本身的问题，如中药剂型、部分药物肝毒性皆影响疗效评价。

综上所述，充分利用现代基因及蛋白质组织学的方法和技术优势，以基因及蛋白质表达为指标，以基因调控改变和功能修饰，蛋白质表达特点为主要研究方向，对中药特别是中药复方进行多环节多靶点调整作用研究，可望对中医药的作用机制研究取得突破性进展。

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(收稿日期：2007-12-17)