湖北省少数民族地区宫颈病变患者hrHPV检测分析

[摘要] 目的 调查湖北省少数民族地区子宫颈病变（CIN）患者高危型人瘤病毒（hrHPV）的感染情况，探讨hrHPV感染与CIN的关系。 方法 采用第二代杂交捕获技术（HC2）和荧光定量PCR方法检测252例不同类型CIN患者的13 种hrHPV感染情况。 结果 252例CIN患者，慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ的hrHPV感染率分别为18.2%、59.4%、80.6%和86.9%。 结论 湖北民族省少数民族地区CIN患者hrHPV感染阳性检出率较高；hrHPV病毒载量与宫颈病变程度呈正相关。

[关键词] 宫颈病变；高危型人瘤病毒；感染；杂交捕获二代

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] C [文章编号] 1674-4721（2012）02（a）-0163-02

Analysis of hrHPV of patients with cervical lesions in ethnic minority areal of Hubei Provincial

TAN Qingling

Affiliated Hospital of Hubei Institute for Nationalities, Enshi 445000， China

[Abstract] Objective To investigate the infection of hrHPV in patients with cervical lesions in ethnic minority areal of Hubei Provincial. Explored the relationship between hrHPV infection and CIN. Methods Thirteen types of hrHPV DNA in 252 cases were detected by Hybrid Capture 2 (HC2) and FQ-PCR assay. Results In 252 cases of CIN patients, chronic cervicitis, CIN Ⅰ, CIN Ⅱ, CIN Ⅲ of hrHPV infection rates were 18.2%, 59.4%, 80.6% and 86.9%. Conclusion The high infection of hrHPV in CIN patients in ethnic minority areal of Hubei Provincial, hrHPV viral load and cervical lesions are positively correlated.

[Key words] CIN; hrHPV; Infection; HC2

宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）属宫颈癌前病变，宫颈癌前病变并不等于宫颈癌，CIN具有可逆性及进展性，大量的流行病学资料[1]显示，人瘤病毒（HPV）感染在CIN的发生、发展过程中具有重要作用，几乎所有宫颈癌的标本中都可以找到高危型人瘤病毒（hrHPV），但HPV通过皮肤接触传播，初期没有任何症状，只能依靠病理检测。近几年来，笔者采用第二代杂交捕获（HC2）技术对湖北省少数民族地区52例CIN患者进行了hrHPV检测，结果表明，湖北省少数民族地区女性hrHPV感染阳性检出率较高，且宫颈病变程度越重，hrHPV病毒载量就越高。现将检测过程和结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2009年1月～2011年6月在本院住院和门诊共收治的CIN患者252例为研究对象，年龄18～38岁，平均（38.24±8.57）岁；孕产次0～9次，平均（3.8±2.3）次。经病理确诊，包括慢性宫颈炎55例，CINⅠ 64例，CINⅡ 72例，CINⅢ 61例。

1.2 检测方法

先以HC2（美国Digene公司生产）系统中宫颈脱落细胞采集器插入检测对象宫颈外口，按顺、逆时针方向各旋转3周后取出，置于缓冲液中保存，封盖并4℃冷藏；再利用免疫化学发光信号对标本中的HPV DNA进行检测，根据发光强度确定标本结合碱性磷酸酶的含量，从而根据HPV DNA检测试剂盒检测样本中hrHPV DNA含量，以HC2系统判读相对发光单位（RLU），并计算标准阳性对照（CO）的比值。

1.3 诊断标准

RLU/CO比值≥1.0（即10 pg/mL）为阳性，比值＜1.0为阴性；RLU/CO比值越大，hrHPV病毒载量越高。

1.4 统计学处理

采用SPSS 17软件进行统计学处理，数据以均数±标准差（x±s）表示，计量资料比较用t检验，组间计数资料比较用χ2检验，分析剂量-效应关系用Mantel趋势分析，P ＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各型CIN患者13种hrHPV感染阳性检出率

hrHPV感染率 252例CIN患者13种hrHPV（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）感染阳性检出率平均为63.1%，慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ和ClNⅢ患者间的比较见表1。

注：与慢性宫颈炎相比，χ2=24.847、χ2=36.547、χ2=39.547，均*P ＜ 0.05；与CINⅠ相比，χ2=12.174、χ2=15.245，均#P ＜ 0.05

2.2各型CIN患者HPV16病毒载量

HPV16的病毒载量 252例CIN患者HPV16的病毒载量平均为4.37×103，慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ患者间HPV16的病毒载量比较见表2。

由表2可知252例受检对象中，HPV16病毒载量以100～1 000 RLU/CO载量等级人数最多，HPV16病毒载量与宫颈病变率曲线分析，R = 0.775，P ＜ 0.05，表明HPV16病毒载量与宫颈病变存在剂量-反应关系。即HPV16病毒载量等级与宫颈病变程度之间呈正相关关系。

3 讨论

宫颈癌居生殖道恶性肿瘤的首位，且35岁以下宫颈癌发生率呈上升趋势[2]。目前，宫颈癌尤其是在晚期很难治愈，但宫颈癌可测可防。宫颈癌癌前病变（CIN）按异型细胞占上皮层的比例和程度，可分为轻度（Ⅰ）、中度（Ⅱ）和重度及原位癌（Ⅲ）3级，随着级数增高病理性核分裂像逐渐增多。研究发现，hrHPV是子宫颈癌发生发展的重要条件， HPV从初次感染到发展为浸润性宫颈癌的时间为10～20年。如果在进展期内早发现、早治疗，提高宫颈局部免疫力，完全能避免宫颈癌的发生，可见检测CIN患者的hrHPV感染情况是防治宫颈癌的重要措施。

笔者用HC2检测子宫颈病变妇女宫颈细胞的13种hrHPV。结果表明，湖北省少数民族地区CIN患者HPV感染阳性检出率为63.1%，高于文献[3]报道的感染率。这与当地土壤、气候及生活习惯无关，主要由于当地，尤其是广大农村经济收入水平低，医疗资源有限，加之受传统观念束缚，宫颈癌的筛查普及率低，巴氏涂片细胞学筛查不具备条件，而以HPV检测女性宫颈癌及癌前病变应用较少。随着hrHPV感染作为宫颈癌重要病因这一认识的提高，应用HPV检测宫颈癌及癌前病变这一有效的初筛手段，应该在偏远的少数民族地区推广普及，同时研制HPV疫苗预防HPV感染而达到防治宫颈癌的目的也变得非常迫切[4]。

本研究中，慢性宫颈炎患者hrHPV的感染率仅为18.1%，而CINⅠ则达到59.4%。CINⅡ和CINⅢ甚至分别高达80.6%和86.9%。提示子宫颈病变的发生、发展与高危型HPV感染有关，随着子宫颈病变程度的加重，其HPV感染率也随之增高，这与其他文献[5]的报道一致。

需要提出的是检测CIN的hrHPV，通用的是检测16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68这13种高危型人瘤病毒，但也有学者[1-2]指出，HPV1是最有可能成为持续性感染的高危型HPV型别之一，而E6和E7为HPV16导致肿瘤发生的两种主要癌基因蛋白。故本研究中笔者也选择HPV16型作为进一步研究的对象，结果表明HPV16病毒载量与宫颈病变存在剂量-反应关系。这也再次证实HPV16为致癌的主要致病型。提示应用HPV初筛宫颈癌及癌前病变，HPV16是重要的检测指标[6-7]。

总之，本次研究表明hrHPV感染高可增加发生宫颈病变的危险性，湖北省少数民族地区CIN患者hrHPV感染率高，说明了应用HPV检测宫颈癌及癌前病变，需要在该地区推广普及。对于不同年龄的CIN患者hrHPV病毒载量是否存在差异，及检测hrHPV感染程度是否能应用到宫颈癌治疗转归效果评估。本研究尚未进行，有待于在今后的研究中进一步深入。

[参考文献]

[1] 蓝莉. TCT结合高危型HPV监测筛查宫颈上皮内瘤变及宫颈癌效果分析[J]. 当代医学，2011，17（24）：156-157.

[2] 田炜，刘芳. 高危型HPV感染病毒负荷量与宫颈病变程度的关系[J]. 医学信息，2011，24（7）：3248.

[3] 岑立青.TCT结合高危型HPV监测筛查宫颈上皮内瘤变及宫颈癌分析评[J]. 中国当代医药，2010，17（13）：175.

[4] 徐翠，黄海涛，金哲. 高危型人瘤病毒感染宫颈病变微观辨证初探[J]. 国际中医中药杂志，2011，33（9）：788-790.

[5] 刘红卫，刘郁明，成艳. 子宫颈病变2015例与高危型HPV感染情况分析[J]. 陕西医学杂志，2010，39（10）：1327-1328.

[6] 关会娟，齐瑞玲，张艳玲. 液基细胞学联合阴道镜检查在宫颈病变筛查中的意义[J].临床误诊误治，2007，20（4）：78-79.

[7] 杨丹球，陈凤坤，唐惠英，等. 广西沿海地区妇女宫颈癌患者HPV感染各亚型分布研究[J]. 临床和实验医学杂志，2011，10（1）：5-7.

（收稿日期：2011-12-13）