时间：2023-10-01 01:27:40
【关键词】载脂蛋白A5；冠心病
【中图分类号】R541 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）01-0025-02
冠心病（coronary artery disease，CAD）是当今威胁人类健康及导致死亡的主要原因之一，其发病率与死亡率已接近发达国家水平。早期筛选和识别冠心病的高危人群并进行针对性的干预，将有助于冠心病的防治并降低冠心病的发病率，具有极高的社会和经济效益。目前已明确冠心病是多种环境和遗传因素相互作用所致的疾病，故筛选和鉴定冠心病的易感基因是识别冠心病高危个体的重要手段之一。
1 ApoA5基因基本结构
2001年发现的ApoA5基因位于人类染色体11q23， 与已研究较为透彻的、能影响血脂浓度的APOA1/ C3/ A4 基因簇相距约30 kb，编码366 个氨基酸，与人ApoA4，鼠ApoA5高度同源[1-3]。人ApoA5是由343个氨基酸残基组成的单链多肽，其相对分子质量约为39000，等电点为5.9，其结构具有多个双性α-螺旋结构，也有β折叠和β转角。与其他载脂蛋白家族成员相似，作为ApoA5活性中心的几个α-螺旋结构由22或11个氨基酸组成的重复短串连接，在疏水性和长度上都存在相当大的差异[4-5]。Brien等［6］用蛋白印迹和酶联免疫吸附法（ELASA）首次证实人血清中存在ApoA5，并测定出正常人ApoA5的浓度仅为24-406μg／L，远远低于其他载脂蛋白（不到ApoA1的0.1%）。对脂蛋白微粒进行检测，发现ApoA5存在于极低密度脂蛋白（VLDL）、高密度脂蛋白（HDL）和乳糜微粒（CM）中。
目前研究认为ApoA5是影响TG新陈代谢的关键因素之一，是提示心脑血管疾病发生发展机制最受关注的课题。采用全基因组分析研究、常规的关联分析研究以及对ApoA5缺陷的家族特征描述显示：ApoA5基因变异与血浆TG水平相关，且ApoA5普通变异与罕见变异共同作用影响血脂水平［7-8］。早期的研究一直认为血浆ApoA5与TG浓度呈负相关，长期累积数据却表明存在正相关［9-10］。一项对香港人口ApoA5基因单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphisms，SNPs）与代谢综合症（metabolic syndrome，MetS）关系的研究及追踪报道中发现，在校正了常见的混杂因素后，SNP rs662799 （1131T>C）与MetS和MetS的组成相关，rs662799较小等位基因与高血浆TG、低HDL、高LDL、高MetS患病率和高MetS组成相关；在校正了血浆TG水平后，rs662799与HDL、LDL的关系消失，与MetS和MetS组成的关系消失或减弱。故我们认为，ApoA5对血脂水平的影响主要是对TG的作用[11]。
2 ApoA5基因多态性与血脂、冠心病
高TG血症是心血管疾病的一个独立的危险因素。最近，在250，000人口中10，000个病例的meta分析显示，除了其他公认的危险因素以外，高TG水平将会增加72%患冠状动脉疾病（CAD）的风险，ApoA5 多态性位点-1131T>C与血浆TG水平存在相关关系，携带等位基因-1131C易罹患高TG血症，增加具有高循环TG水平的CAD风险［12］。
有研究认为ApoA5多态性位点c.553G>T与高TG血症有关，且发现553T等位基因携带者发展为高TG血症的几率是未携带此等位基因的受试者的11.73倍，校正导致心血管疾病的危险因素后，T等位基因明显增加冠状动脉疾病的发病风险 [13]。汉族人口中ApoA5基因-1131T>C多态性与缺血性卒中敏感性的关系研究中， -1131C等位基因携带者比T等位基因携带者TG水平要高，CC纯合子可能对缺血性卒中的发生发展具有促进作用［14］。ApoA5基因中自然的变异（如-1131C， IVS3 + 476A， 1259C和 56G等位基因）与TG浓度升高密切相关，经大量研究证实，上述基因变异能增加了心血管、脑血管疾病发生的风险[15-16]。
对于ApoA5单克隆抗体的研究，国内外学者均已成功克隆到与ApoA5蛋白不同抗原决定簇结合的的单抗，并应用于CAD患者血清ApoA5水平的检测。大量临床研究表明，血清低水平的ApoA5对于长期高血脂导致CAD患者，具有早期预测作用，及早发现，及时干预[17-18]。
3 结语
ApoA5基因上存在很多变异，作用强弱和作用重点各不相同，彼此间相互作用，作用靶点相互交叉，要想进一步的搞清楚其相应的作用，还需进行深入细致的实验研究。在已往的实验研究中发现，同一个SNPs等位基因，在不同的人群中的等位基因频率不同，有的甚至差距很大，这主要是由于基因与环境之间的相互作用造成的，使其具有种族特异性。ApoA5是一个很有潜力的Apo家族成员，对其作用机制和调控机制的深入研究，特别针对ApoA5基因多态性的研究以找到基因突变对ApoA5生物功能的影响，进一步找出与之对应的脂质代谢及脂质代谢相关疾病的作用，反过来可以预防和治疗相关疾病，解决目前存在的治疗难题。广阔的应用前景还需要科研人员的进一步努力。
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[关键词] 银屑病;血小板参数;C反应蛋白;血脂;载脂蛋白
[中图分类号] R758.63[文献标识码] A[文章编号] 1673-9701(2010)10-03-02
Detection and Analysis of Platelet Parameter, C-reactive Protein and Blood Lipids and Apolipoproteins in Psoriasis
MA XiuhuaWANG Yuliang
Clinical Laboratory,Shandong Province Coal Linyi Hot Spring Sanatorium,Linyi 276032,China
[Abstract] Objective To explore the effects of platelet parameter,C-reactive protein(CRP),blood lipids and apolipoprotein in the pathogenesis of psoriasis and clinical application. Methods We detected blood platelet parameter,CRP,serum total cholesterol(TC), triglyceride(TG),high density lipoprotein cholesterol(HDL-c),low density lipoprotein cholesterol(LDH-c) and apolipoprotein A1(ApoA1),apolipoprotein B(ApoB) and lipoprotein a(LPa) and the contrastive analysis was made with the normal control group. Results The blood platelet pressure accumulation(PCT),the average blood platelet volume(MPV) and the blood platelet distribution width(PDW) were obviously elevated in the psoriasis group compared with the control group(P
[Key words] Psoriasis;Blood platelet parameter;C-reactive protein;Blood fats;Apolipoprotein
银屑病是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤病,典型皮损为鳞屑性红斑,其确切病因尚未清楚。目前认为,银屑病是遗传因素因素与环境因素等多种因素相互作用的多基因遗传病,通过免疫介导的共同通路最后引起角质形成细胞发生增殖[1]。有研究报道,银屑病患者血液黏度升高[2],存在内源性甘油三酯水平及其运转升高,易伴发高脂血症、动脉硬化等疾病,在银屑病表皮中脂质代谢不正常等[3]。本文对银屑病患者血小板参数、C反应蛋白与血脂及载脂蛋白进行了检测,并与正常对照组进行对比分析,以进一步探讨其水平变化在银屑病发病中的作用及临床应用价值。
1资料与方法
1.1研究对象
96例寻常型银屑病患者系2009年我院皮肤科住院病人,诊断符合《皮肤性病学》中的有关标准[1]。经检查无其他系统疾病,其中男59例,女37例;年龄19～71岁;病程0.5～36年;其中进行期42例,静止期32例,退行期22例;皮损面积大于体表面积30%者28例,10%～29%者57例,小于10%者11例。对照组50例,均为同期在我院进行健康体检者,男38例,女12例,年龄28～56岁,排除心、脑血管疾病以及高黏滞血症和高脂血症等。
1.2方法
1.2.1标本采集全部病例于入院次日清晨空腹抽取静脉血3~5mL并及时分离血清待检,EDTA-K2抗凝全血检测血小板参数,4h内完成试验。
1.2.2仪器与试剂应用XS-800i 血液分析仪及配套试剂检测血小板参数。血清C反应蛋白(CRP)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白a(LPa)检测采用四川迈克公司提供免疫透射比浊法试剂盒,甘油三酯(TG)与胆固醇检测采用四川迈克公司提供酶比色法试剂盒,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂由温州东欧公司提供,严格按照试剂说明书操作。应用日本奥林巴斯公司产AU400全自动生化分析仪进行检测。
1.3统计学方法
数据均以均数±标准差(χ±s)表示,组间结果比较采用两样本均数t检验。
2结果(表1,2)
3讨论
银屑病是一种常见的易反复发生的慢性皮肤病,银屑病患者存在不同程度的血管内皮损伤及微血管的异常,并且易合并闭塞性血管疾患[4],是导致患者血小板被激活的重要原因。本文检测结果显示,银屑病患者MPV、PCT、PDW均增大,且进行期升高更为显著,说明随着病程发展,血管损伤加重,血小板进一步被激活,TXA2释放增加,加重血小板聚集。TXA2释放增加引起TXA2/PGI2失衡,改变血管内环境,导致血小板聚集,血管痉挛及内皮细胞损伤,而内皮细胞损伤又会使血小板活化,从而形成恶性循环,导致血液黏度升高及微循环障碍,并引起患者微血管病变和炎性反应[5]。
另外已证明血脂及载脂蛋白异常均可导致血小板反应性增高[5],血小板反应性增高引起血小板聚集性增强,使血液黏度升高,导致微循环障碍,造成银屑病患者局部皮肤微血管损害。本研究表明,银屑病患者血清TG、TC、LDL-C及ApoB显著升高,ApoAI、HDL-C显著下降(P
CRP是机体非特异性炎症反应的敏感标志物之一,当机体处于炎症、感染状态或组织损伤时其血中浓度可显著升高。不受常用抗生素或糖皮质激素影响,是临床非常有用的监测疾病进展及治疗效果的指标。最近研究发现,血清CRP浓度与大血管及微血管并发症有关,是细胞因子介导的炎症反应,而感染一直被认为是诱发或加重银屑病的重要因素[1]。本研究结果显示银屑病进行期患者组CRP浓度与正常对照组比较差异具有高度显著性(P
综上所述,银屑病患者血小板参数、C反应蛋白与血脂及载脂蛋白水平均有明显变化,并相互作用,导致血液黏度增高,内皮细胞损伤及微循环障碍,在银屑病发病中可能起重要作用,联合监测对于判断病情转归和指导临床治疗具有重要意义。
[参考文献]
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河北大学临床医学院河北省保定市071000
【摘 要】目的：分析评价血清载脂蛋白A1测定试剂的性能。方法：选择长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1检测试剂盒对其检测中的批内/间精密度、稳定性和回收率、干扰情况等做系统评估。结果：长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1检测试剂盒，低、中、高浓度血清载脂蛋白的批内精准度分别是1.20%、1.63%和2.83%，批间精准度分别是1.13%、1.59%和2.24%。与进口试剂的检测结果进行相关性分析，r=0.994，P＜O.05，有显著相关性。平均回收率为100.1%。在血红蛋白、抗坏血酸以及胆红素、甘油三酯等的水平分别在5.0g/L、4.5mmol/L、540μmol/L、20mmol/L以下的时候，不会对测定结果产生明显干扰。结论：一般国内生产的血清载脂蛋白A1测定试剂均有良好的批内精密度、批间精密度，且干扰小、稳定性好、回收率高，符合临床诊断的要求，在主要检测仪器中也具有较高的适用性。
关键词 血清载脂蛋白A1；测定试剂；性能
目前，国内外生产血清载脂蛋白A1的生物医疗器械公司较多，本文以其中一种血清载脂蛋白A1测定试剂作为研究对象，对其性能进行分析评价。具体报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
随机选取一天内需经血清载脂蛋白A1含量检测的患者作为研究对象，均在空腹条件下采集标本。选择长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1检测试剂盒（批号为：吉食药监械(准)字2013第2400149号）为实验对象。检测时的仪器选择日立7180全自动生化分析仪，选择Randoxwc公司生产的血清载脂蛋白A1试剂为对比试剂。
1.2方法
以试剂盒厂商提供的相关测定参数与方法对检测中的批内/间精密度、稳定性和回收率、干扰情况等做系统评估。其中批内/间精密度的检测是按美国临床实验室标准化委员会制定的评价方案，分别取低、中、高的不同浓度血清载脂蛋白A1样本进行连续检测20次（批内），然后每天检测一次，连续检测20d（批间），进行评估。
对比评估方法是：取50份来源于不同患者的新鲜血液标本（血清载脂蛋白A1浓度在0.4-2.0g/L之间），分别选择本次试验试剂与Randox试剂进行同时测定，按照NCCLS(EP6P)文件对其进行统计，并对其相关性进行分析。
回收率的评估方法是：取新鲜混合血清一份，血清载脂蛋白A1浓度为1.24g/L，平均加入不同试管中，每份0.9m1，然后在试管中分别加入不同浓度的血清载脂蛋白（2.0g/L、1.16g/L、0.82g/L），使用本次试验试剂对不同浓度的样品进行检测，测定5次，计算回收率。
干扰性的评价：取新鲜混合血清一份，血清载脂蛋白A1浓度为1.36g/L，均分为12份，并分别加入不同浓度的血红蛋白、抗坏血酸以及胆红素、甘油三酯，比较血清载脂蛋白的检测浓度。
1.3统计学方法
本次实验数据采用spss17.0软件进行统计学分析。
2结果
长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1检测试剂盒，低、中、高浓度血清载脂蛋白的批内精准度分别是1.20%、1.63%和2.83%，批间精准度分别是1.13%、1.59%和2.24%。与进口试剂的检测结果进行相关性分析，r=0.994，P<0.05，有显著相关性。平均回收率为100.1%。在血红蛋白、抗坏血酸以及胆红素、甘油三酯等的水平分别在5.0g/L、4.5mmol/L、540μmol/L、20mmol/L以下的时候，不会对测定结果产生明显干扰。
3讨论
血清载脂蛋白A1是高密度脂蛋白的重要组成部分之一，可以发挥活化胆固醇、卵磷脂以及酰基转移酶等的的功能，也可以在胆固醇的逆转运中扮演重要角色[2]。研究表明，机体中的血清载脂蛋白A1水平与高密度脂蛋白水平呈显著正相关，而与动脉粥样硬化以及相关的心脑血管疾病病情程度之间呈负相关，在有效反映动脉粥样硬化性心脑血管疾病的发病风险，对疾病的预防有重要意义。临床上检测血清载脂蛋白A1主要是通过抗原抗体的特异性反应所形成的复合物浊度来进行检测，抗体含量一定的情况下，浊度的高低与抗原含量呈正相关，通过与处理后的校准液检测结果比较来对血清载脂蛋白A1含量进行计算，也就是常用的免疫比浊法[3]。
本文对长春迪瑞医疗科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1检测试剂盒在检测时的批间精密度、批内精密度、稳定性、回收率、干扰性等进行了分析，结果显示，其在应用用具有高精密度和良好的重复性、抗干扰能力强，与国外检测试剂的一致性高，是比较理想的检测试剂，且在全自动生化分析仪上使用时简单、快捷，操作方便，符合临床要求，可以应用于临床检测中。
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摘要 :目的 探讨徐州市区不同年龄段中、老年人群血脂和载脂蛋白水平的差异及意义。 方法 采用日本Olympus2700全自动生化分析仪检测中、老年健康人群血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白AⅠ（APOAⅠ）、载脂蛋白B（APOB）的水平。受检者共计800人，按年龄段分4组，每10岁为一个组段。 结果 TC随年龄增大逐渐增高，70～79岁组达到最高。TG、APOB随年龄增长逐渐增高，到60～69岁组达到最高，以后降低;HDL-C、APOAⅠ随着年龄增长逐渐降低。LDL-C各年龄组间无差别。APOA和HDL-C，APOB和LDL-C、TC之间有显著相关性。 结论 徐州地区中、老年健康人群血脂和载脂蛋白水平与年龄有关，载脂蛋白与血脂水平密切相关。血脂分析可为中、老年人的健康检查及预防心血管疾病提供重要帮助。
关键词 :血脂;载脂蛋白;年龄;中年人;老年人
近年来，随着经济发展，生活水平提高，不良的生活方式和习惯的影响，心脑血管疾病的发病率和病死率呈上升趋势。血脂分析在动脉粥样硬化和冠心病的防治中有着重要的意义。而年龄增长也是动脉粥样硬化发生、发展不可缺少的危险因素。徐州地区饮食习惯为喜辣，好烟、酒、肉类。为此，我们测定了本地市区800例健康中、老年人群的血脂、载脂蛋白水平，以了解血脂和载脂蛋白在健康中、老年人群中的分布规律，明确其与年龄的关系。
1 资料和方法
1.1 标本来源 所选受检者为近3年在我院例行健康体检的徐州市区企业、事业单位在职、离退休职工。入选人员经我院体检中心询问病史、体格检查、心电图检查、B超、生化全套、血黏度、乙型肝炎病毒标志物、丙型肝炎病毒抗体、肝功能等检查排除心脑血管疾病、内分泌疾病、严重肝肾疾病等。男500人，女300人，共800人。年龄40～79岁，平均年龄61岁。将受检者按年龄分为4组:40～49岁组300人，男200人，女100人;50～59岁组300人，男186人，女114人;60～69岁组100人，男60人，女40人;70～79岁组100人，男63人，女37人。所有受检人员严格按照采血要求，24h内禁酒、肉类制品。
1.2 试剂和材料 总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白AⅠ（APOAⅠ）、载脂蛋白B（APOB）试剂、标准品及质控品均由日本Olympus公司提供。测试仪器:日本Olympus2700全自动生化分析仪。
1.3 统计学处理 数据统计使用Microsoft Excel2000软件处理，所有数据以ˉx±s表示。多组间比较采用完全随机设计的方差分析及两两比较的q检验，用直线相关分析分析载脂蛋白与血脂水平间的相关性。
2 结果
2.1 不同年龄组血脂、载脂蛋白测定值的比较 由表1可见，TC随年龄增长逐渐增高，70～79岁组与40～49岁组比较有差别（P
表1 不同年龄组间血脂和载脂蛋白测定值的比较（略）
与40～49岁组比较:*P
2.2 载脂蛋白与血脂水平间的相关性 APOAⅠ和HDL-C（r=0.66，P
3 讨论
血清中TC、TG水平升高称为高脂血症。高脂血症是冠心病的主要危险因素之一，也是促使动脉粥样硬化的主要危险因素之一。血脂主要来自于摄入的脂肪，也可由糖类或蛋白质转变而来。随着年龄增长，各系统的生理功能逐渐减退，导致脂代谢紊乱，TC、TG水平逐渐增高。LDL是动脉粥样硬化的主要危险因素，有转运周围组织胆固醇至肝脏进行代谢的功能。LDL是富含胆固醇的脂蛋白，LDL-C浓度取决于体内合成与降解两个方面，而降解又有受体与非受体途径之分，一般以受体途径为主。血浆中LDL的来源主要是由VLDL异化代谢转变而来，其次是肝合成后直接分泌到血液中。本组检测结果中，LDL-C水平与年龄关系不大，这与国内外学者报道不完全一致。HDL是主要由肝和小肠合成的一种脂蛋白，有从末梢组织运送胆固醇到肝内处理的生理功能。本组检测结果表明，HDL-C随年龄增长逐渐降低，到70岁以后达到最低。有人认为可能与卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）的增龄性变化有关。HDL-C是一项具有重要临床意义的检测指标，大量流行病学及临床研究资料充分显示，血浆HDL具有抗动脉粥样硬化作用［1］ ，与冠心病发病呈负相关，低HDL-C血症是冠心病的有效预测指标。本组数据分析表明，TG浓度随年龄增长而缓慢升高，到70岁以后降低。70岁以上老年人TG明显下降，可能与老年人生活形成规律、消化吸收功能减退、进食减少及肝脏合成下降有关［2］ 。有学者认为，血浆TG浓度在整个成年期呈升高趋势，男性50～59岁时开始降低，女性70岁以后方见降低。载脂蛋白是脂蛋白中的蛋白质成分，它们参与脂蛋白的结构，调节脂蛋白转化的关键酶的活性，识别脂蛋白受体，与血脂水平密切相关，近年来已成为脂代谢研究热点。APOAⅠ是APOA族最多的一种组分，大部分分布HDL中，是HDL的主要载脂蛋白，与血液中HDL-C有密切关系。APOB是难溶于水的蛋白质，是LDL的主要结构蛋白质，与LDL-C及TC有重要联系。本组研究表明，APOAⅠ随年龄升高含量逐渐降低，与HDL-C之间有良好的相关性;APOB随年龄增长含量逐渐升高，60～69岁达到高峰，70岁以后下降，与LDL-C、TC之间有良好的相关性。
综上所述，在40岁以上健康中、老年人群中，血脂和载脂蛋白随年龄呈现规律性变化。
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Effect of Rosuvastatin combined with Danshen Compound in the treatment of coronary heart disease with hypercholesterolemia and influence on the levels of ApoA1， ApoB and lipoprotein lipase
LIU Yao LI Junfeng WANG Anwei ZHANG Yaxi GAO Jinquan
Department of Cardiology， Chongzhou Branch of Sichuan Provincial People′s Hospital， Sichuan Province， Chongzhou 611230， China
[Abstract] Objective To explore effect of Rosuvastatin combined with Danshen Compound in the treatment of coronary heart disease with hypercholesterolemia and influence on the levels of ApoA1， ApoB and lipoprotein lipase. Methods 82 cases of coronary heart disease with hypercholesterolemia from March 2011 to June 2015 at Chongzhou Branch of Sichuan Provincial People′s Hospital were selected as research objects. The patients were randomly divided into two groups according to different treatment regimens： Rosuvastatin group （single group） and Danshen Compound plus Rosuvastatin group （combined group）， each group had 41 cases. The cardiac function， blood lipids， oxidative indexes， 6 minutes walk test positive rate， ApoA1， ApoB and lipoprotein lipase levels were compared between two groups. Results After treatment， the serum lipids indicators were significantly decreased in combined group （P < 0.05）， reduction of serum lipids indicators in combined group were more significant than those in single group （P < 0.05）. After treatment， 6 minutes walk test positive rate of combined group was 29.27%， significantly lower than that of single group （48.78%） （P < 0.05）. Angina pectoris occurrence of single group was （3.51±0.76） times， significantly higher than that of combined group [（1.88±0.55） times] （P < 0.01）. There was no significant difference on incidence rate of adverse reaction between two groups （P > 0.05）. After treatment， cardiac output （CO） and left ventricular ejection fraction （LVEF） of two groups were significantly increased （P < 0.05）， while cardiac index （CI） and left ventricular end diastolic diameter （LVEDD） were no significant differences （P > 0.05）. Increase amplitude in combined group after treatment was superior to single group （P < 0.05）. Improvement on the contents of ox-LDL， malondialdehyde （MDA）， superoxide dismutase （SOD）， ApoA1， ApoB and lipoprotein lipase in combined group were more obvious than those in single group （P < 0.05）. Conclusion Rosuvastatin combined with Danshen Compound can enhance clinical efficacy on the treatment of coronary heart disease with hypercholesterolemia， improve heart function of patients， reduce the level of lipids， ApoA1， apoB and lipoprotein lipase.
[Key words] Rosuvastatin； Danshen Compound； Coronary heart disease； Hypercholesterolemia
据世界卫生组织报告显示，我国冠心病死亡人数已高居全球第二位，严重威胁人民身体健康和生活质量[1]。血浆胆固醇水平的增高是诱发冠心病迁延或进展的关键高危因素，且降低血浆胆固醇的含量能够显著降低冠心病的发病率和死亡率[2]。瑞舒伐他汀作为新一代的他汀类药物，是最强效的调脂药物之一[3]。复方丹参则是由丹参、三七、冰片三味中药合成的中成药，具有活血化瘀的功效，对冠心病的临床症状可起到明显的改善作用[4]。据此，本研究拟探讨瑞舒伐他汀联合复方丹参治疗冠心病合并高胆固醇血症的临床效果及其对患者心功能、载脂蛋白A1（ApoA1）、载脂蛋白B（ApoB）和脂蛋白酯酶水平的影响。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2011年3月～2015年6月四川省人民医院崇州分院诊治的82例冠心病合并高胆固醇血症患者为研究对象，其中男44例，女38例；年龄46～72岁，平均（56.34±7.18）岁；根据治疗方案的不同将患者分为瑞舒伐他汀组（单独组）和瑞舒伐他汀+复方丹参组（联合组），每组各41例。所有患者均符合世界卫生组织冠心病诊断标准[5]及高胆固醇血症诊断标准[总胆固醇（TC）≥5.2 mmol/L][6]。纳入标准：①18岁≤年龄≤80岁，确诊罹患冠心病；②非家族性高胆固醇血症患者；③肺、肝和肾功能检查无明显异常；④肌酸磷酸激酶无明显异常，心电图检查未发现严重室性心律失常或QT间期延长；⑤未合并严重感染或其他严重疾病，无瑞舒伐他汀或复方丹参使用禁忌；⑥既往未服用降脂药物、维生素C和维生素E等强效抗氧化药物，或已停药4周以上。
1.2 治疗方法
两组患者均予以常规冠心病治疗方案；单独组患者在此基础上给予口服10 mg瑞舒伐他汀钙（阿斯利康公司，国药准字J20120006），1次/晚；联合组则同时应用口服复方丹参片（广东一力集团制药有限公司，国药准字Z44022225），3次/d，0.9 g/次；两组患者总疗程共持续12周。
1.3 临床生化指标
①采用酶比色法测定TC、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的水平变化；②加入内含抗氧化剂和抗凝剂的氧化型-LDL（ox-LDL）检测试剂，利用上海莱盛生物制剂厂提供的检测试剂盒，以Bio-Rad 580型酶标仪检测吸光度值；③采用南京建成生物工程研究所生产的丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒，运用化学比色法在721型紫外分光光度仪上测定吸光度值。
1.4 六分钟步行试验阳性判断标准及心功能指标
分别于治疗前后进行六分钟步行试验，以
1.5 ApoA1、ApoB和脂蛋白酯酶水平
利用免疫透射比浊法测定ApoA1和ApoB的含量，试剂盒购自温州伊利康生物技术有限公司；同时应用酶联免疫吸附试验测定脂蛋白酯酶的水平，试剂盒由上海亚培生物科技有限公司提供。
1.6 统计学方法
采用SPSS 18.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者治疗前后血脂、ox-LDL和氧化指标比较
联合组患者治疗后的血脂指标均明显降低（P < 0.05）；单独组仅TC和LDL-C下降（P < 0.05），TG和HDL-C比较差异无统计学意义（P > 0.05）；与单独组比较，联合组血脂指标的降低幅度更为显著（P < 0.05）；两组患者治疗后的ox-LDL和MDA含量明显降低，SOD活性显著增加，联合组的改善程度较单独组更明显（P < 0.05）。见表1。
2.2 两组患者治疗前后六分钟步行试验阳性率和心功能指标比较
联合组治疗后六分钟步行试验阳性率低于单独组（P < 0.05）；两组治疗后六分钟步行试验阳性率均显著低于治疗前（P < 0.01）。见表2。两组患者治疗后CO和LVEF明显升高（P < 0.05），而CI和LVEDD比较差异无统计学意义（P > 0.05）；联合组治疗后CO和LVEF的增加幅度明显优于单独组（P < 0.05）。见表3。单独组心绞痛发生次数为（3.51±0.76）次，显著高于联合组的（1.88±0.55）次（t=6.012，P=0.001）。两组患者不良反应发生率分别为7.32%和9.76%，差异无统计学意义（χ2=0.156，P=0.693）。
2.3 两组患者治疗前后ApoA1、ApoB和脂蛋白酯酶水平比较
单独组患者治疗后脂蛋白酯酶水平较治疗前降低（P < 0.05），其余指标与治疗前比较差异无统计学意义（P > 0.05）；联合组患者治疗后ApoA1、ApoB和脂蛋白酯酶水平均明显低于治疗前，且显著低于单独组（P < 0.05）。见表4。
3 讨论
高胆固醇血症一直以来都被认为是诱发冠心病的主要高危因素[7-9]。长期高水平的胆固醇不仅直接损害心脏血管内皮细胞功能，还可促进动脉粥样硬化斑块的形成与发展[10-12]。瑞舒伐他汀作为新一代的强效他汀类药物，具有显著抑制内源性胆固醇合成和增加胆固醇分解代谢的作用[13-16]。本研究结果显示，患者的TC、LDL-C和ox-LDL水平均明显降低，表明瑞舒伐他汀对降低血脂水平有积极的疗效，但单独组患者的HDL-C和TG并没有显著改变，提示瑞舒伐他汀的调脂效果可能存在不足或使用的剂量不够[17]。复方丹参是将丹参、三七采用萃取的方法获得其有效成分丹参素和三七总皂苷，再辅以冰片制成的一种易吸收和分散度大的中成药，对改善冠心病心绞痛和心脑血管并发症有显著的作用[18-19]。本研究结果发现，瑞舒伐他汀联合丹参能够显著降低六分钟步行试验阳性率，促进血脂水平的下降，增强CO和LEVF，进而降低冠心病心绞痛的发作次数，充分表明复方丹参可以协同瑞舒伐他汀共同调节冠心病合并高胆固醇血症患者的血脂水平，增强患者心功能，减轻其临床症状。
ApoA1和ApoB是机体中主要的载脂蛋白，在脂代谢中扮演十分重要的角色[20]。ApoA1和ApoB水平的改变通常较传统血脂指标更灵敏，对早期诊断、治疗和预后判定具有良好的指示作用[21-22]。本研究结果还发现，联合组患者治疗后ApoA1和ApoB水平均显著下降，一方面证实，ApoA1和ApoB较传统血脂指标更敏感，另一方面也印证了复方丹参联合瑞舒伐他汀的协同降脂疗效。脂蛋白酯酶是体内主要脂代谢酶，本研究结果显示，联合组患者治疗后的脂蛋白酯酶水平较治疗前明显降低，且显著低于单独组，提示复方丹参可能协同瑞舒伐他汀通过调节载脂蛋白水平，进而降低血脂指标水平，实现提高对冠心病合并高胆固醇血症患者疗效的作用。
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【摘要】 目的：探讨汉族人群腺苷三磷酸结合盒转运体A1（ABCA1）基因单核苷酸多态性（SNP）与血浆载脂蛋白A1（apoA1）水平的关系. 方法：选取ABCA1基因R219K， V825I， M883I和R1587K等4个编码区SNPs，采用PCR限制性片断长度多态性分析技术确定376名健康个体基因型；用THESIAS程序分析SNPs的连锁不平衡关系及单倍型. 结果：受检人群中，4种SNPs各自不同基因型个体间apoA1水平差异均未见统计学意义（P＞0.05）. R219K与M883I， V825I与M883I以及V825I与R1587K两两间存在连锁不平衡(P
【关键词】 ABCA1基因；载脂蛋白A1；单倍体型；连锁不平衡
0引言
血浆高密度脂蛋白胆固醇（highdensity lipoprotein cholesterol，HDLC）水平降低是冠心病的独立危险因素之一［1］. 腺苷三磷酸结合盒转运体A1（ATPbinding cassette transporter A1，ABCA1）介导胆固醇、磷脂从肝外组织的流出，并通过与载脂蛋白A1（apolipoprotein A1，apoA1）相互作用，在胆固醇逆向转运和高密度脂蛋白（highdensity lipoprotein，HDL）生成的起始阶段发挥着关键的作用，因此，ABCA1被认为是决定HDLC水平的主要因素之一［2］. 群体遗传学研究表明，ABCA1基因的某些单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）可改变ABCA1蛋白活性并由此引起HDLC水平变化，从而影响个体对冠心病的易感性［3-4］. 然而，有关ABCA1基因SNPs对血浆apoA1水平影响的研究报道却相对缺乏.为此我们在本研究中探讨了ABCA1基因4种SNPs及其构成的单倍型与汉族人群apoA1水平变化的关系.
1对象和方法
1.1对象来自四川大学华西医院和成都医学院第一附属医院无血缘关系的四川地区汉族体检个体376（男194，女182）例，年龄(58.4±8.6)岁，apoA1水平（1.324±0.186） g/L，体质量指数（24.62±3.39） kg/m2，总吸烟率为27%，并经询问病史、体检、心电图等检查排除心血管疾病史.
1.2方法
1.2.1标本采集与处理禁食12 h后抽取研究对象外周血5 mL，采用免疫比浊法并按试剂盒（上海荣盛生物技术公司）推荐条件测定血浆apoA1水平；另采集外周血3 mL，1 mL ACD抗凝，盐析法提取DNA，TE缓冲液溶解DNA并置于4 ℃冰箱中备用.
1.2.2多态位点的基因型分型采用PCR限制性片断长度多态性分析法对4个SNPs进行分型. 首先，参照基因组序列（GenBank登录号：NM005502）设计合成相应PCR引物，对受检者ABCA1基因R219K，V825I，M883I和R1587K等4个SNPs位点所包含的DNA序列进行扩增；再取扩增产物15 μL，分别加入4 U限制性内切酶和2 μL 酶切缓冲液，并加超纯水至总体积20 μL，37℃水浴中保温16 h；最后，消化产物经30 g/L琼脂糖凝胶电泳后，用凝胶成像系统分析电泳结果，判定个体基因型. PCR反应条件、限制性内切酶以及各基因型酶切情况见表1.表1ABCA1基因SNPs的基因型分型
统计学处理：每个SNP的HardyWeinberg平衡检验用χ2检验，在HWE软件上进行. 单个SNP位点基因型与apoA1水平的关系分析采用协方差分析（用SPSS10.0软件）. SNPs间配对连锁不平衡估算以及各种单倍型与apoA1水平的关联分析均使用THESIAS程序进行. apoA1水平用x±s表示；除连锁不平衡检验用α=0.001为检验水准外，其余统计学分析均以P≤0.05为差异有统计学意义.
2结果
2.1等位基因和基因型的频率分布经χ2检验，4种SNPs各基因型频率在本研究人群中分布符合HardyWeinberg平衡（P＞0.05），表明本研究样本具有群体代表性. 其中，变异型等位基因K219和I825的频率高于欧美人群（0.452 vs 0.27， 0.323 vs 0.056，P＜0.01）；而I883等位基因在欧美人群则为野生型等位基因［5］ （表2）. 表24种多态位点等位基因和基因型频率
2.24种SNPs不同基因型与apoA1水平的关系分析为准确地反映不同基因型对血浆apoA1水平的影响，我们采用了协方差分析，以排除各种混杂因素对研究结果的影响. 校正协变量（年龄、吸烟和体质量指数）后的结果显示，R219K， V825I， M883I和R1587K多态各自不同基因型个体间apoA1水平差异均无统计学意义（P＞0.05， 表3）. 表34种多态位点不同基因型个体间apoA1水平比较
2.3配对连锁不平衡分析ABCA1基因4个SNPs位点的配对连锁不平衡用统计量D′表示（D′=D/Dmax）. 表4可见，在全部6个配对组合中，V825I分别与M883I和R1587K间存在较强的连锁不平衡（D′>0.7）. 此外，在R219K和M883I间也检测到有统计学意义的连锁不平衡（D′=0.572）. 值得注意的是，在R219K至R1587K位点约1.36 kb范围内，我们未发现2个以上的SNPs位点彼此间的连锁不平衡关系.
2.4ABCA1基因单倍型与apoA1水平的关联分析由于在分析区域内未检测到3或4个SNPs位点彼此间的连锁不平衡，我们仅以具有连锁不平衡关系的SNPs构建两位点单倍型，分析这些单倍型与apoA1水平变化的关系. 表5显示，以V825I 和R1587K构建的单倍型中，IK单倍型携带者其apoA1水平较VR单倍型携带者明显降低［-0.177（-0.269～-0.09），P=0.036］.表4ABCA1基因SNPs间配对连锁不平衡系数和统计学意义表5各种单倍型与apoA1水平的关联分析
3讨论
ApoA1是HDL主要的载脂蛋白，占其整个结构蛋白的70%. 正如HDL水平与冠心病发生呈高度负相关［1］，个体apoA1水平降低，患冠心病风险也将随之增大. 因此，对apoA1代谢调控因素的研究也是冠心病病因学的重要内容. 研究发现，作为一种跨膜转运蛋白，ABCA1在促进胆固醇的细胞流出过程中需借助与apoA1间的相互作用，将先转运出的磷脂结合到apoA1上，形成磷脂apoA1复合物；然后再以该复合物为受体，接受从细胞中流出的胆固醇，进而形成新生的HDL；若转运至胞外的胆固醇量不足，导致磷脂apoA1复合物不能充分与之结合，则多余的apoA1将在肾脏中很快被清除［6］，提示ABCA1活性与血浆apoA1水平可能存在一定的相关性.
本研究结果表明，汉族人群ABCA1基因SNPs与apoA1水平变化的关系明显不同于欧美人群. 本研究中4种SNPs各自不同基因型个体间apoA1水平均未见显著性差异，提示汉族人群apoA1水平不与ABCA1基因上述单个SNP位点直接关联.
此外，这种差异还反映在受检DNA区域单倍型组成及其与apoA1水平的关系上. 欧美人群中，ABCA1基因R219K至M883I间各SNP两两间处于强连锁不平衡状态（D′＞0.9），呈现出典型的单倍型模块（haplotype block）结构；而与之相距较远的R1587K则平衡传递［5］. 然而，本研究人群中对应的各SNP位点间不仅连锁不平衡强度低于欧美人群，也未检测到2个以上位点彼此间的连锁不平衡. 我们基于连锁不平衡关系构建了两位点单倍型， 结果发现，在V825I和R1587K构建的单倍型中，IK单倍型携带者apoA1水平较VR单倍型携带者明显降低，提示由V825I和R1587K构成的单倍型与汉族人群apoA1水平变化具有相关性.
本研究结果与文献［5］报道有较大差异. 我们认为，可能有以下3方面原因：首先，本文的资料来自汉族一般人群， 而Tregouet等的研究对象则是冠心病患者， 二者脂蛋白代谢过程应该有所不同； 其次， 种族间的遗传背景差异也可能使相同的变异产生不同的表型效应； 另外， apoA1水平作为一种受多种因素影响的表型性状， 还可能与不同人群所处的生活环境有关.
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【关键词】 轻度认知障碍；多态性；载脂蛋白E；基因型
【Abstract】 Objective To analyse the association of apolipoprotein E(apoE) genotypes with mild cognitive impairment(MCI).Methods RFLP-PCR technology is applied to analyse the apoE allele frequency of 56 MCI patients and 89 controls.Results Among the 56 cases of MCI，the frequency of apoEε2，ε3，ε4 are 7.14%，71.38%，21.48% respectively，while in the 89 controls they are 7.30%，84.83%，7.87% respectively.The frequencies of the two groups have significant difference(P
【Key words】 mild cognitive impairment;polymorphism;apolipoprotein E;genotypes
轻度认知障碍（mild cognitive impairment，MCI）特指有轻度记忆或认知损害、但无痴呆的老年人，其病因不能由已知的医学或神经精神病状况解释。目前普遍认为MCI是介于年龄相关性记忆损害（age-associated memory impairment，AAMI）和老年性痴呆（Alzheimers disease，AD）之间的一种综合征。许多资料表明：MCI患者进展为AD（主要指散发性AD）的年转化率是同龄认知功能正常老年人的10倍，识别MCI患者将有助于早期干预和治疗，所以MCI相关研究成为近年来国内外的热门话题。
近年来，越来越多的研究发现多个基因，如淀粉样蛋白前体（APP）基因、早老素-1（PS-1）基因、早老素-2（PS-2）基因、载脂蛋白E（apoE）等位基因和低密度脂蛋白受体相关蛋白基因等遗传因子在调控AD病理和生化异常代谢中起着重要作用。其中，位于19号染色体的apoE基因是资料与目前唯一广泛得以认同的与散发性AD和迟发性家族性AD相关的基因。本研究旨在探讨apoE基因多态性与MCI之间的关系，为MCI易进展为AD寻找遗传学依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 研究对象源自武汉市中心医院2002年7月~2003年6月神经内科和干部四科门诊和病房，所有对象的文化程度均在中学及以上，分为MCI组和对照组。MCI组56例，男23例，女33例；年龄61～89岁，平均（70.12±7.24）岁。依据1997年Peterson等确立的诊断依据确定MCI组入选标准如下：（1）有记忆力减退的主诉；（2）检查时证明有轻度记忆损害；（3）没有或很少有其他认知损害；（4）日常生活活动正常（BI指数≥95分）；（5）满足CDR=0.5的标准；（6）MMSE评分≥24分，但≤27分；（7）不够NINDS-ADRDA或DSMⅢ-R对痴呆的标准。排除标准：（1）昏迷；（2）失语和（或）精神异常（如抑郁、谵妄）而不能配合量表检查者。
对照组89例，男46例，女43例；年龄60～88岁，平均（69.47±8.02）岁。均符合下述入选标准：（1）无记忆力减退的主诉；（2）检查时排除认知缺损、CDR=0；（3）日常生活活动正常；（4）MMSE评分＞27分；（5）年龄、性别、受教育程度、既往高血压、糖尿病、心脏病及卒中史均与MCI组匹配。对照组和MCI组在年龄上差异无显著性（P>0.05）。
1.2 研究方法
1.2.1 基因学检查 用PCR-RFLP方法测定apoE基因型。实验步骤如下：（1）空腹12h后，取肘静脉血5ml，EDTANa2抗凝，用酚：氯仿抽提白细胞中的DNA，使纯度达到A280/A260>1.8；（2）PCR扩增目的基因片段：参照文献［1］，引物设计如下：上游引物为5’-TAA GCT TGG CAC GGC TGT CCA AGG A-3’和5’-ACA GAA TTC GCC CCG GCC TGG TAC AC-3’。扩增体系为50μl。PCR的条件为95℃变性5min，之后35次循环（94℃变性1min，62℃退火1min，72℃延伸1min），72℃继续延伸10min后降至4℃，用1.6%琼脂糖凝胶电泳待测扩增产物；（3）限制性片段长度多态性（RFLP）分析：取10μl PCR产物，加10u HhaI内切酶消化，37℃酶切4h，非变性聚丙烯酰胺浓度为0.1g/L，交联度为49∶1，取5μl酶切产物，加等体积的甲酰胺变性液，在电压100～200V，温度20℃条件下，电泳5h左右；（4）银染：电泳结束后，用乙酸固定，纯水洗，银染液染色（1.4g/L，AgNO3和甲醛），纯水洗，加显色液（30g/L，Na2CO3，甲醇400μg/L，Na2S2O3）显色，乙酸终止反应，根据电泳带型确定apoE基因型。拍片。
1.2.2 统计学分析 使用SPSS 10.0处理数据，计算各等位基因和基因型频率的分布，基因频率采用Hardy-Weinberg遗传平衡式计算。两组的apoE基因型或等位基因频率比较采用卡方检验。
2 结果
2.1 PCR扩增产物和HhaI酶切PCR扩增产物电泳结果 ApoE基因的PCR扩增片段大小为244bp，经HhaI酶切后，ε2型酶切产物的主要片段为91bp/83bp；ε3型酶切产物的主要段为91bp/48bp/35bp；ε4型酶切产物的主要段为72bp/48bp/35bp。即可根据apoE PCR产物酶切后的片段长度来判断其等位基因情况（见图1）。
2.2 apoE基因型和等位基因频率分析 MCI组和对照组的基因型和等位基因频率结果，见表1。结果显示MCI组和对照组的纯合子基因型均以ε3/ε3型最多（分别为55.36%和71.91%），ε4/ε4型最少（分别为3.67%和1.12%），未检出ε2/ε2型；MCI组的杂合子基因型以ε3/ε4型最多（26.69%），ε2/ε4型次之（8.92%），ε2/ε3型最少（5.36%）；对照组的杂合子基因型以ε2/ε3型最多（13.48%），ε3/ε4型次之（12.37%），ε2/ε4型最少（1.12%）。等位基因中ε3频率最高（MCI组和对照组分别为71.38%和84.83%），ε4次之（分别为21.48%和7.87%），ε2最少（分别为7.14%和7.30%）。组间比较显示：两组apoE基因型分布总体比较其差异在统计学上差异有非常显著性（χ2=10.52，P
注：*表示任一非ε4的等位基因（如ε2、ε3）
分别对apoE 3种等位基因频率进行组间卡方检验，见表3，结果显示：MCI组的ε4频率较对照组显著升高（P
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3 讨论
人类的apoE由19q11.2所编码，其基因常见有3种表
表3 apoE各等位基因与MCI相关性的卡方检验
注：OR：比值比；CI：可信区间
型，即ε2、ε3和ε4等位基因所编码的3种载脂蛋白E2、E3和E4，构成6种不同的基因型，包括3种纯合子（ε2/ε2、ε3/ε3、ε4/ε4）和3种杂合子（ε2/ε3、ε3/ε4、ε2/ε4）。研究显示：最常见的等位基因是ε3，而ε4作为AD的高危因子和易患基因由Strittimatten等［2］于1993年首先报道。针对MCI患者的多个研究表明ε4携带者进展为AD的危险性增加。其中Peterson［3］认为apoE基因型是MCI转化为AD的最佳预言因子，而Tierney等［4］则认为该预言模式必须结合记忆检测才可靠。
3.1 MCI患者的apoE基因多态性 apoEε4基因型是目前明确的与散发性AD相关的第一个遗传易感因子。鉴于MCI向AD的高转化率，apoE基因多态性成为MCI相关研究的热点之一。在本研究中，与对照组比较，MCI组ε3/ε4型增多，ε3/ε3型减少，在统计学上其差异有非常显著性（χ2=10.52，P
3.2 apoE在MCI中的作用及其可能机制
3.2.1 apoE与β类淀粉样蛋白（Aβ）沉积 Aβ是老年斑（SP）的核心成分，其毒性作用导致神经轴突变性。目前认为Aβ的积聚反应有两个过程：首先是匀速的核反应过程，该过程主要与Aβ42有关；其后是Aβ40和Aβ42共同参与的快速延长反应。利用识别Aβ40、Aβ42的两种抗体进行免疫组化染色研究发现：Aβ40染色在apoEε2、ε3、ε4顺次增强，Aβ42染色则不随之改变，提示apoEε4与Aβ40有密切关联，可促进作为淀粉样蛋白伸长分子的Aβ40在脑内的积聚，也说明了apoEε4只对AD晚期发病有影响，可加快发病的速度［8］。
3.2.2 apoE与神经元纤维缠结（NFT） apoEε3可与tau蛋白结合，apoEε4则不能。对apoE基因敲除小鼠的研究表明：apoEε3或ε2借助自身的半胱氨酸残基与tau结合，防止后者被过度磷酸化而形成双螺旋体（PHF）样结构；而apoEε4的半胱氨酸含量明显低于ε3和ε2，从而使tau易被磷酸化，形成PHF，不能维持正常的微管结构和功能［9］。因此，亦有学者认为：促进NFT形成的因素是apoEε3或ε2的缺失，而不是apoEε4的存在。
3.2.3 apoE与神经突触损伤的修复 中枢神经突触受到损伤后代偿性地出现局部星型胶质细胞合成apoE增加。这时，apoE表达的增加及LDL受体结合力的增高是同步的，损伤区的游离胆固醇通过胆固醇-apoE-LDL受体复合物的形式完成转运和再利用。但因为apoE4与LDL受体结合力强，阻碍了其转运胆固醇的作用。此外，apoE还直接影响神经突起的生长，但不同apoE亚型作用差别很大：apoE3促进神经突起延伸，同时分支减少；apoE4则使突起延伸和分支均减少。apoE的这种作用类似于神经营养因子。而apoE基因敲除小鼠的中枢神经元随鼠龄的增加显现明显的树突内细胞骨架崩解和突触丧失。
3.2.4 apoE与慢性脑缺血 新近研究表明：慢性脑缺血与伴发于包括血管性痴呆、AD等在内的多种以认知功能障碍为早期主要表现的疾病病理过程中，并认为慢性脑缺血是多种类型痴呆的重要危险因子。颈内动脉粥样硬化则是慢性脑缺血的主要原因。apoEε4通过影响脂代谢起着致动脉粥样硬化的作用。与E2相比，E4与LDL受体的结合能力较强，使CM和VLDL残粒代谢加速，IDL向LDL转化增多，致使血浆中CM残粒、VLDL和IDL水平下降，而LDL水平升高；此外，ε4基因还有升高apoB和降低HDL-C的作用。所以ε4基因可通过调节这些脂蛋白和载脂蛋白的水平发挥致动脉粥样硬化的作用［10］。
3.3 ε4基因测定对MCI患者的意义 虽然有众多的资料显示MCI患者具有向AD的高转化率，但并非所有的MCI患者均会转化为AD，这促使人们寻找导致MCI异质性的可能因素，即进展型MCI的最佳预言因子，ε4基因测定可能有助于早期识别进展型MCI患者，并积极治疗干预。当然，apoE基因多态性对认知功能的影响尚不十分清楚，并且PS1、PS2、APP基因、apoE受体蛋白基因以及LDL-R相关蛋白对这一过程亦具有复杂的调节作用，所以过分强调apoEε4的作用并不恰当。
本文结果显示apoEε4等位基因与MCI的发病密切相关。虽然它尚不能作为MCI诊断的特异性生物学指标，但是apoE基因型分析可作为临床医师估计MCI向AD转化的预测因子。当然，为了得到更明确的资料，需要今后进行大样本、多中心的对照研究。
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9 Panl G，Willism T. Correlation between elevated levels of amyloid-peptide in and cognitive declined. JAMA，2000，282：2572-2577.
作者单位：132013吉林医药学院附属医院内分泌科(刘艳杰 贺颖 姚秀宇 赫双令金凤华 侯吉军 苏丽红 白茹雪);吉林市中心医院肾内科(姚秀松)
【Abstract】 Objective To study the relevanceof quantitative change of plasma apolipoprotein and diabetic nephropathy. Provide reliable monitoring method for diabetic nephropathy early prevention.Methods choose no diabetic nephropathy diabetes 300 cases, eliminate the influence of other factorsof kidney, one year later, 3divide into the nephrotic group and without nephrotic group according to urinary protein exclude rate， analysis changes between the two groups lipid index and plasma apolipoprotein A1, B, A1 / B. Results ApoA1 decrease and ApoB increase in diabetic nephropathy group before nephrosis.The data show statistical significance. The changes were more apparent when nephrosis happens. Conclusion There is relativity between diabetes human plasma apolipoprotein quantitative change and diabetic nephropathy，ApoB>1 g / L,ApoA1 / ApoB
糖尿病肾病是糖尿病的常见慢性并发症，是糖尿患者死亡的主要原因之一。预后的关键是早发现，早治疗，我们从2008年开始研究血浆载脂蛋白定量变化与糖尿病肾病相关性。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
我们筛选确诊5年以内的糖尿患者，糖尿病诊断符合1999年WHO的糖尿病诊断标准，均无糖尿病急性并发症，除外影响肾功的其他因素、急慢性肾炎、泌尿系统结石、感染、心功能不全、肾毒性及影响血脂水平用药史，排除原发性高血压、吸烟、高胰岛素血症的影响。
按尿白蛋白排除率（UAER）
1.2 观察方法 入组之初测空腹血糖（FPG）、肾功能、餐后2 h血糖（2 hPG）、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿常规，24 h尿蛋白定量，血三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇（LDL C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL C）、载脂蛋白A1（ApoA1）、载脂蛋白B （ApoB），查眼底、心电图，测血压、体重指数。每半年对上述各指标复查。一年后按尿白蛋白排除率（UAER）分为无肾病组UAER20 μg/min（104例），有6例因血糖明显波动而排除，两组间年龄、性别、体重指数、血糖情况比较差异无显著性。回顾总结分析两组间血脂、血浆载脂蛋白A1、B及A1/B的差异。
1.3 仪器及检测方法 TG、TC、LDL C、HDL C用氧化酶法测定，ApoA1、ApoB采用免疫透射比浊法测定，仪器为荷兰威图SelectraXL全自动生化分析仪，试剂由3V生物工程集团有限公司提供，采用放射免疫法测定尿白蛋白总量，计算出尿白蛋白排出率。
1.4 统计学处理 SPSS13.0统计软件进行统计学分析，所有数据结果采用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验，P
2 结果
表中可以显示，健康对照组、无肾病组、肾病组比较TG、TC、LDL C、ApoB渐增高，HDL C、ApoA1渐减低，肾病组在没有发生肾病时，其血脂即有明显变化，TG、TC较健康对照组及无肾病组增高，但无统计学意义（P>0.05），而ApoA1逐渐减低，ApoB升高，肾病组与无肾病组及健康组比较有统计学意义（P
表1
入组时两组间血脂水平比较
血脂TG（mmol/L）TC（mmol/L）HDL C（mmol/L）LDL C（mmol/L）ApoA1ApoB（g/L）ApoA1/B（g/L）
正常对照组1.25±0.614.38±1.401.53±0.312.52±0.651.61±0.520.66±0.471.5±0.2
无肾病组1.49±0.684.80±1.311.46±0.412.99±0.681.49±0.630.79±0.381.2±0.3
肾病组2.84±0.565.95±1.531.08±0.363.61±1.121.18±0.511.28±0.350.8±0.2
注：与对照组比较P
表2
入组时两组间血脂水平比较
血脂TG（mmol/L）TC（mmol/L）HDL C（mmol/L）LDL C（mmol/L）ApoA1ApoB（g/L）ApoA1/B（g/L）
正常对照组1.25±0.614.38±1.401.53±0.312.52±0.651.61±0.520.66±0.471.5±0.2
无肾病组2.29±0.604.96±1.251.31±0.393.12±0.621.40±0.590.81±0.361.0±0.2
肾病组3.95±0.516.01±1.231.02±0.313.69±1.011.09±0.511.32±0.210.8±0.2
注：与对照组比较P
一年后统计，肾病组与无肾病组比较， TC、LDL C增高，HDL C减低差异无统计学意义，ApoA1减低，TG、ApoB升高，有统计学意义（P
3 讨论
糖尿病肾病是糖尿病三大微血管并发症之一，早期表现为肾小球高滤过状态，继之出现微量蛋白尿，尿中白蛋白量逐渐增高，进入临床肾病期，最后发展为终末期肾病，DN的主要病理变化是肾脏的高灌注、高滤过、肾小球基底膜增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质积累，导致弥漫性或结节性硬化，出现蛋白尿、高血压、肾功能衰竭等变化。影响DN发生的危险因素很多，主要与病程、高血糖、高血压等有关，脂代谢紊乱是糖尿病的独立危险因素，高血脂症可导致肾小球高滤过，加重糖尿病患者的肾损害［1］。血脂异常损伤肾脏的机制与以下因素有关：①肾内脂肪酸结构改变致肾内缩血管活性物质释放增加，致肾小球内压力增高；②高血脂症改变肾小球血液流变学，尤其是氧化的LDL和糖化LDL的作用极大；③血脂可改变肾小球基底膜的磷酸酯成分，或引起基底膜的葡萄糖胺糖化，增加肾小球基底膜通透性，④通过抗纤溶活性及影响前列腺素代谢，改变肾小球的超滤能力，使肾小球呈超滤过状态，尿蛋白排出增加［2］；⑤LDL C与肾小球内膜下基质结合，发生氧化修饰及被巨噬细胞吞噬，引起泡沫细胞形成，脂质沉积［3］。高脂血症对系膜组织的毒性，也主要是LDL的作用；⑥肾小球毛细血管腔内血栓形成，栓塞的主要成分为三酰甘油，使具超滤能力的肾小球毛细血管丧失，还可损伤肾小球滤过膜，从而导致肾小球滤过率下降与蛋白尿产生；⑦肾小球毛细血管内高压和高脂血症的相互作用，加重肾损害；⑧肾动脉硬化;⑨有文献认为，2型糖尿病患者脂代谢紊乱可能通过影响血管内皮细胞功能促进糖尿病肾病的发生。［4］
本组资料显示，在糖尿病早期，无肾病时既有血脂异常，表现为TG、TC、LDL C升高，HDL C减低，但糖尿病肾病组及无肾病组与健康对照组比较均无显著性差异，而ApoA1降低、ApoB升高。糖尿病无肾病组与健康对照组比较无显著差异，而肾病组与无肾病组及健康对照组之间比较差异有统计学意义（P
血浆脂蛋白中的蛋白质部分为载脂蛋白，载脂蛋白是构成脂蛋白的蛋白质组分，是功能上极其活跃的一组血浆蛋白质。ApoA1主要由肝脏合成，小肠也可合成，它是高密度脂蛋白胆固醇（HDL CHOL）的主要构蛋白，占HDL CHOL总蛋白的60 70％，反映HDL合成和分解之间的平衡，它可以直接作用于动脉壁，防止低密度脂蛋白(LDL)氧化和聚集，促进胆固醇从动脉壁流出，防止动脉粥样硬化性心血管疾病。国际化标准以后ApoAl测定的精密度要优于HDL C。ApoB也由肝脏合成，是低密度脂蛋白胆固醇（LDL CHOL）的主要结构蛋白，约占LDL CHOL总蛋白含量的97％，ApoB测定可直接反应LDL CHOL水平，ApoA1、ApoB分别被认为是动脉粥样硬化的保护因素和危险因素。
在病理情况下，HDL及LDL所携带的胆固醇是可变的，且受饮食、药物影响，而ApoA1、ApoB含量稳定，更能反应HDL和LDL水平［5］。近年来许多研究显示ApoA1、ApoB在HDL和LDL代谢中起关键作用［6，7］。在一些有关2型糖尿病大血管病变危险度估价研究中，报道测定血浆ApoAI，ApoB比测定HDL C，IDL C更灵敏可靠。本文的结果也证实了这观点。糖尿病肾病组的血清ApoAl较对照组低，ApoB水平较对照组高，这与一些报道是一致的。而TC、TG，HDL C，LDL C在DM无肾病及肾病组与对照组间差异不明显，由此推测在2型DM ApoAl，ApoB的变化比HDL C.LDL C变化更易检出异常情况。TC，TG水平不是指示2型DM有血管病变及其受损程度的良好指标。血脂代谢异常是As的主要危险因素，DN不仅肾小球有显著微血管病变，而且也有明显的小动脉硬化，故其ApoAl，ApoB浓度的变化可能与合并动脉硬化有关。本文结果显示ApoB与UAE有高度相关性，与一些观察到的结果相同［8］。
本组试验对象选择上排除了高血压、高血糖、病程等方面对糖尿病肾病的影响，从试验结果看，血脂是糖尿病肾病进展的重要因素，在糖尿病肾病出现微白蛋白尿之前，即有变化，ApoA1减低，ApoB增高，其差异有显著性，而ApoA1/ApoB变化更为明显。我们认为，对于糖尿病患者其ApoB>1 g/L，ApoA1/ApoB
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