新型免疫分析技术在药物安全中的应用

摘 要 免疫分析技术具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、检测成本低、安全可靠等优点。本文分别综述了传统免疫分析方法和新型免疫分析新方法，简单介绍了它们的特点及在药物安全检测中的应用。

关键词 免疫分析 药物安全 检测技术 传统方法 新型方法

药物安全问题是关乎人类身体健康重大问题，化学危害中农药残留是影响我国药物安全的重要因素之一。控制农产品中农药残留的关键就是对农产品中农药残留量及时、准确的分析检测，以监控农药的合理使用，防止农药残留超标的产品上市。因此，研究建立新型、快速、高效、灵敏的检测方法是及时发现和防范药物安全问题的必然要求。

免疫检测技术是将免疫反应和现代测试手段相结合而建立的超微量测定技术。免疫分析法就是基于抗原、抗体的特异性识别和结合反应为基础的分析方法，它具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、分析容量大、检测成本低、安全可靠等优点［1］。目前，应用到药物安全检测领域的免疫分析方法包括有传统的放射免疫分析、酶联免疫分析、荧光免疫分析、发光免疫分析、免疫传感器技术外，还出现了新型的免疫分析方法如分子印迹技术、流动注射免疫分析、免疫-PCR技术及多组分免疫分析等新方法。免疫分析技术以其独特的优势处于药物安全检测的前沿，通过查阅相关国内外文献，本文从传统和新型免疫分析技术出发，综述了免疫分析在药物安全中的应用现状。

新型免疫分析法

分子印迹技术：分子印迹技术利用化学手段合成一种高分子聚合物-分子印迹聚合物（MIP），MIP能够特异性吸附作为印迹分子的待测物，在免疫分析中可以取代生物抗体，被科学家誉为“人工抗体”。它有一定的预定性，识别性和实用性特点。近年来，固相萃取（SPE）已成为痕量分析的常用富集技术。免疫亲和柱以抗体为亲和配体能够特异性地捕获相应的农兽药小分子物质，有较好的特异性富集痕量残留的农兽药。但作为生物抗体，获得的周期长，免疫亲和柱造价相对较高且由于对环境的敏感性，其储存和反应条件较为苛刻。与生物抗体比较，MIP有稳定性好、制备周期短、费用低、易于保存和可在粗糙环境中应用等优势。作为一种新型固相萃取填料，MIPs较高的选择性和对目标分子的富集能力，可以大大提高SPE用于痕量分析的准确性，降低检测限，用于替代免疫亲和柱。MIPs的固相萃取（MISPE）技术已被广泛应用于药物、生物、药物、环境样品分析，作为监测药物、生物大分子、烟碱、除草剂、农药等的预富集处理［2～5］。2006年英国Israel等研究了以氨基甲酸甲酯为印迹分子，合成的印迹物制成固相萃取柱，用来富集加标河水中氨基甲酸甲酯。结果表明即使有浓度极高的结构类似物呋喃丹，苯恶威等干扰物存在，检测限能达到1μg/L。Immer等利用分子印迹聚合物固相萃取水样和土壤中氯三嗪农药，回收率80%，最低检测量0.05～0.2μg/L。

流动注射免疫分析：为提高免疫分析的分析速度和自动化程度，自80年代中期以来，国外出现了流动注射免疫分析法（flow-injection immunoassay，FIIA）。FIIA综合了两者的特点且可以计算机控制缓冲液的流速、自动进样、检测器的检测及数据处理的优点，在临床生物样品的检测、低分子药物浓度的临床监测及环境污染物的含量测定等方面具较广的应用前景［6］。该分析方法具有分析时间短、需样品量小和操作简便等特点。

免疫-PCR技术：免疫PCR方法（immuno-PCR）是Sano T，Smith CL和Cantor CR等于1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术，同时具有抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增技术的高效性。它运用PCR强大的扩增能力来放大抗原-抗体特异性反应的信号，使实验中只需数百个抗原分子即可检测，甚至在理论上可检测到1至数个抗原分子。敏感性比现行的ELISA法高102～108倍。目前主要用于检测肿瘤标志物、细胞因子、神经内分泌活性多肽、病毒抗原、细菌、酶、支原体、衣原体等微量抗原。

毛细管电泳免疫分析技术：毛细管电泳免疫分析技术是将毛细管电泳技术（CE）与免疫分析技术（IA）相结合起来的一种新型的免疫分析技术。毛细管电泳免疫分析分为竞争性毛细管电泳免疫分析和非竞争性毛细管电泳免疫分析。毛细管电泳免疫分析的检测器主要有激光诱导荧光和紫外检测器。

多组分免疫分析：多组分免疫分析（MIA）是指在同一份样品中同时测定两种或两种以上的相关分析物的免疫分析技术。这种技术的应用对混配农药接触分析以及对其联合作用及体内代谢动力学的探讨和研究具有重要意义。

由于抗体的特异性，一种抗体一般只能检测一种抗原，当进行多组分分析时，就得同时使用多种抗体。多组分免疫分析技术现在有两种设计方式：①多探针标记法它基于用不同标记物对多种抗原或半抗原标记，用竞争法测定各物质的量；②多组分定位包被空间分辨分析法即利用空间的不同位置标记同种标记物来测定，在不同的固相体系或同一固相载体上的不同反应区带上包被不同抗体，用于固相免疫同时测定［7］。

展 望

药物安全问题已成为21世纪消费者面临的首要问题。为了保证药物的安全，就需要有快速、灵敏的检测技术作支撑和保障。目前免疫检测技术以其明显的优势处于检测技术的前沿，将这几种技术运用到药物安全检测中必将提高药物安全检测的有效性和实用性。

参考文献

1 邵晓龙,李季.免疫分析技术在环境激素检测中的应用［J］.农业环境与发展,2004,22:44-45.

2 房彦军,严守雷,高志贤,等.农药抑芽丹分子印迹聚合物的识别机制与特性［J］.预防医学杂志,2006,24（3）:171-174.

3 王金成,徐青,薛兴亚,等.苯基脲类除草剂分子印迹聚合物的合成和识别性能研究［J］.高等学校化学学报,2006,27（7）:1227-1231.

4 严守雷,高志贤,房彦军.农药久效磷分子印迹聚合物合成及其亲合性评估［J］.高分子学报,2006,1:160-163.

5 Lv Yongqin,Lin Zhixing,Feng Wei,et al.Selective recognition andlarge enrichment of dimethoate from tea leaves by molecularly- imprinted polymers［J］.Biochemical Engineering Journal,2007,36（3）:221-229.

6 邓安平,杨红.流动注射免疫分析法.国外医学・临床生物化学与检脸学分册,1997,18（1）:10-12.

7 焦奎,张书圣.酶联免疫分析技术及应用［M］.北京:化学工业出版社,2004,8.