液相色谱―串联质谱法测定纺织纤维中的分散蓝1和分散黄3

摘 要：建立了同时测定纺织纤维中分散蓝1和分散黄3的高效液相色谱-串联质谱分析方法。纺织品材料经甲醇超声提取后，以C18色谱柱分离，乙腈（A）-5mmol/L乙酸铵（B）作流动相，进行HPLC-MS/MS在MRM模式下的定性及定量分析。分散蓝1和分散黄3在0.1-0.8μg/mL范围内有很好的线性，r2可达0.99，分散蓝1的检出限为5.0μg/mL，分散黄3的检出限为2.5μg/mL。样品加标实验中，分散蓝1和分散黄3的加标回收率为85.9%-103.6%，相对标准偏差（RSD）为1.59%-5.39%。该方法准确、快速、灵敏度高，适用于纺织品中分散蓝1和分散黄3含量的定性、定量测定。

关键词：液相色谱-串联质谱；纺织品；分散蓝1；分散黄3

随着电视、互联网的传播，犯罪分子的反侦查能力越来越强，传统的指纹、足迹的痕迹物证通常会被破坏，而在犯罪案件现场中常常保留有各种纺织纤维的微量物证，而分析检验这些微量物证可以为案件指明方向并提供直接证据。纺织纤维中的分散蓝1和分散黄3是纺织纤维中的致敏染料，常常会引起人体或动物的过敏。染色过程中，染料分子通过吸附、扩散等多重处理，从而使染液转移到被染物上[2]。通过对致敏染料的检验分析，可以为案件侦破提供方向和证据。

对分散蓝1和分散黄3检测的方法有很多种，王明泰[2]等采用了气相色谱-质谱法、陈美娟[3]、胡奇志[4]等采用液相色谱法对分散蓝1和分散黄3进行了测定，但是前处理都相对繁琐，灵敏度不高。文章采用甲醇超声提取后用LC-MS-MS测定，方法简单快速、灵敏度高。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

标准品购置：分散蓝1（99%）和分散黄3（99%），购于美国Dr Ehrenstorser GmbH公司；甲醇、乙腈均为色谱纯。

LC-MS-MS系统：API 4000（ESI）配 LC-30液相系统。

1.2 实验方法

1.2.1 标准储备液配制

标准储备液：准确称取分散蓝1、分散黄3固体标准品各0.01g（精确到0.001g），用甲醇配制成浓度为0.1mg/mL的分散蓝1和分散黄3储备液，4℃冰箱保存备用。

1.2.2 样品的制备

取纺织纤维混合均匀，准确称取纺织纤维1.0g（精确至0.001g）于50mL比色管中，再加入10mL甲醇，放于70℃恒温震荡水浴中20min。然后再70℃恒温超声提取10min。取有机相。残渣中加入10mL甲醇，再次提取2次，合并有机相。有机相吹氮浓缩、用甲醇定容至1mL，最后用0.45μm滤膜过滤，备用。

1.2.3测定条件。

（1）液相色谱条件

色谱柱：ZORBAXExtendC18柱（4.6×150mm×3.5μm）；流动相：乙腈（A）-5mmol/L乙酸铵（B），梯度洗脱（程序见表1）；柱温为40℃；进样量为2μL。

（2）质谱条件

电喷雾离子源，喷雾电压（IS）为5500V，离子源温度（TEM）为600℃；碰撞气为6psi；气帘气为24psi；雾化气为60psi。多反应监测各离子对及各优化参数见表2。

2 结果与讨论

2.1 提取溶剂的选择

分散蓝1和分散黄3较易溶于醇、酮等多种有机溶剂。选取常用有机溶剂乙酸乙酯、甲醇、正己烷和丙酮为提取试剂进行了加标回收率实验。实验表明，用甲醇提取时，分散蓝1和分散黄3的回收率都能达到85%以上，并且提取的干扰杂质少，所以最终选定甲醇作为提取溶剂。

2.2 色谱条件的优化

2.2.1 色谱柱的选择

本实验采用规格为4.6×150mm×3.5μm的AgilentZORBAXExtend色谱柱为分离柱。

采用乙腈和5mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱，2种目标物均分离良好，峰型尖锐对称，且目标峰没有基质干扰，如图1所示。

2.3 质谱条件的选择和优化

首先采用0.8μg/mL分散蓝1和分散黄3标准溶液，采用蠕动泵样方式进样，在ESP+全扫描模式下找出母离子，经确定为分子离子，然后对其子离子进行全扫描，最后选取丰度较强的2个子离子，优化其锥孔电压、碰撞能量等质谱参数。选取丰度较大并且响应稳定的来做定量离子。

2.4 校准曲线、线性范围及检出限

取分散蓝1和分散黄3混合标准溶液进行测定，其浓度分别为：0.0，0.05，0.1，0.2，0.4，0.8，1.2μg/mL，以峰面积（Y）对浓度（X，μg/mL）进行线性回归，得到校准曲线，结果见表3。结果表明：分散蓝1和分散黄在0.1～0.8μg/mL范围内相关系数均可达到0.99以上、线性关系良好。

采用信噪比S/N=3的计算方式测算检出限，分散蓝1的检出限为5.0μg/kg，分散黄3的检出限为2.5μg/kg。

2.5 回收率、变异系数

在纺织纤维样品中添加浓度为0.4μg/mL的分散蓝1和分散黄3混合标液，经上述方法进行测定，样品空白和加标的色谱图和质谱图如图2所示，结果表明：在此色谱条件下能很好的将这2种目标物质分离。

分散蓝1和分散黄3的加标回收率及5次重复测定的变异系数结果见表4。结果表明：分散蓝1和分散黄3的平均回收率在85.9%-103.6%之间，变异系数（RSD）在1.59%-5.39%之间。

3 结束语

采用HPLC-MS/MS同时测定纺织纤维中分散蓝1和分散黄3，方法准确、快速、灵敏度高，适用于纺织品中分散蓝1和分散黄3含量的定性、定量测定。

参考文献

[1]何瑾馨.染料化学[M].北京：中国纺织出版社，2009：11.

[2]王明泰，牟峻，周晓，等.气相色谱/质谱（GC/MS）联用技术在纺织品安全检测中的应用[J].检验检疫科学，2007，17：105-108.

[3]陈美娟，李亚明，张蓉，等.高效液相色谱法测定纺织品上的致敏性分散染料[J].染料与染色，2006，43（4）：51-52.

[4]胡奇志，黎宏彦，李少冥.反相高效液相色谱法测定偶氮分散染料混合物的研究[J].分析化学，1994，22（4）：429.

[5]李懿睿，郭卫荣.液相色谱-质谱法快速测定纺织品中6种致敏性分散染料[J].实验室研究与探索，2010，29（2）：11-13.

[6]马强，白桦，王超，等.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定玩具中的16种致癌和致敏染料[J].分析化学，2010，38（1）：51-56.