蛋白芯片检测肺炎支原体与胶体金法检测肺炎支原体方法的比较

摘 要 目的：探讨蛋白芯片检测肺炎支原体与胶体金法检测肺炎支原体方法的特异性与敏感性。方法：收集疑似肺炎支原体感染的患儿96例进行生物芯片和胶体金法检测肺炎支原体进行比较。结果：两种方法检测96例患儿，临床诊断肺炎支原体感染患者72例，蛋白芯片法49例阳性，阳性率51.0%，诊断符合率68.01%，胶体金法23例阳性，阳性率24.0%，诊断符合率31.9%，蛋白芯片法检测肺炎支原体感染的特异性和敏感性均高于胶体金法，两种方法比较差异有显著性(P＜0.05)。结论：蛋白芯片法检测肺炎支原体感染的特异性和敏感性均高于胶体金法。

关键词 蛋白芯片 胶体金法 肺炎支原体 特异性 敏感性

随着DNA芯片技术的不断成熟，推动了蛋白质功能的研究［1，2］，蛋白芯片技术随之发展壮大。蛋白芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，蛋白质结构和构象变化均能引起活性或功能的改变，肺炎支原体(MP)是呼吸道感染性疾病的重要病原体之一，及时、有效地进行MP的实验室诊断十分重要，为探讨蛋白芯片检测肺炎支原体与胶体金法检测肺炎支原体临床意义，收集疑似MP感染的患儿96例进行生物芯片和胶体金法检测肺炎支原体进行比较，现报告如下。

资料与方法

2010年4月～2011年4月收治疑似肺炎支原体感染患儿96例，男56例，女40例，年龄6天～11岁，临床确诊为肺炎支原体感染的患儿72例。

主要仪器与试剂：生物微矩阵(芯片)分析仪，蛋白芯片技术检测肺炎支原体抗体，肺炎支原体抗体检测试剂盒(胶体金法)。实验原理：①胶体金法：灭活的MP菌体纯化抗原致敏硝酸纤维素膜，同时用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)作为探针，利用免疫层析原理研制MP抗体快速检测胶体金试剂，用于MP肺炎诊断。②蛋白芯片技术的基本原理［3］：是将各种蛋白质有序地固定于固相载体上，这种固相载体常用的材质有云母、硅、以及各种膜片等，有圆形或椭圆形、长条状等不同形状，这样就制成了待检用的芯片，然后，用标记了特定荧光抗生素体的蛋白质与芯片作用，有吸水或疏水物质、抗体或受体、免疫复合物、与某些阴离子或阳离子的化学基因、酶等，然后洗板，再利用激光共聚焦扫描或荧光扫描仪技术，测定芯片上各点的荧光强度，进行测定各种蛋白质功能的目的。

结 果

两种方法检测96例患儿，蛋白质芯片法49例阳性，阳性率51.0%，临床确诊为肺炎支原体感染的患儿72例，诊断符合率68.0%，胶体金法阳性23例，阳性率24.0%，诊断符合率31.9%，蛋白芯片法检测肺炎支原体感染的特异性和敏感性均高于胶体金法，两种方法比较差异有显著性(P＜0.05)。

讨 论

近年来肺炎支原体感染率呈逐年上升趋势，发病年龄趋小，临床表现多种多样，很难与其他病原微生物感染相鉴别。蛋白芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，蛋白质结构和构象变化均能引起活性或功能的改变，肺炎支原体是呼吸道感染性疾病的重要病原体之一，因此，及时、有效地进行肺炎支原体感染的实验室诊断就显得尤为重要。目前MP感染的实验室诊断仍然主要依靠血清学试验，抗MP-IgM是机体受MP感染后最早产生的特异性抗体，于发病后1周左右可检出［4］，2～4周达到高峰，一般12～16周转阴。虽然检测抗MP-IgG双份血清抗体滴度升高4倍，也可以作为临床诊断指标，但临床上取得双份血清进行检测的可能性很小。

本组资料显示，两种方法检测96例患儿，蛋白芯片法49例阳性，阳性率51.0%，诊断符合率68.0%，胶体金法阳性23例，阳性率24.0%，诊断符合率31.9%，蛋白芯片法检测肺炎支原体感染的特异性和敏感性均高于胶体金法，两种方法比较差异有显著性(P＜0.05)。

蛋白芯片法检测肺炎支原体感染具有重复性好、操作简便、快速等优点［5］，但是，利用蛋白芯片技术对于蛋白质功能的研究仍然存在着种种问题，例如目前大多数来自于cD-NA文库的克隆体系不能通过正确的阅读框架编码蛋白质，将直接影响有关蛋白质功能的研究，因此，蛋白质芯片法检测肺炎支原体感染的临床应用价值还需要进一步去探索。

参考文献

1 孙红妹.肺炎支原体感染的实验室诊断［J］.实用儿科临床杂志,2007,22(4):245-248.

2 Martnez M A,Ruiz M,Zunino E,et al.Detection of Mycoplasma pneumoniae incommunity-acquired pneumonia by PCR andserology［J］.J Med Microbiol,2008,57(12):1491-1495.

3 Kashyap B,Kumar S,Sethi G R,et parison of PCR,culture serological tests for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae in community-acquired lower respiratory tract infections in children［J］.Indian J Med Res,2008,128(2):134-139.

4 孙炜,赵勇.四种抗肺炎支原体抗体检测方法应用比较［J］.医学检验与临床,2007,18(5):34-35.

5 夏帮世,吴金华.Kappa一致性检验在检验医学研究中的应用［J］.中华检验医学杂志,2006,29(1):83-84.