糖尿病肾病患者血清胱抑素C的变化及意义

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase s，hdacs) 抑制剂是一类新近发现的可有效抑制hdacs活性的化合物。研究表明hdacs抑制剂不仅有抗肿瘤活性，而且具有放射增敏作用。本文就hdacs抑制剂的放射增敏作用及其机制做一综述。

1hdacs抑制剂的放射增敏作用

早在上世纪80年代人们就发现丁酸钠可增强体外培养的结肠癌细胞的放射敏感性[1]，但是丁酸钠临床价值有限，使得人们没有对其进行进一步研究，而且也没有将其它hdacs抑制剂与放射增敏联系在一起。直到2001年，biade等关于tsa对结肠癌的放射增敏作用的报道[2]，重燃了人们对于hdacs抑制剂与放射增敏的研究兴趣。

研究表明hdacs抑制剂对体外培养肺癌、胶质瘤、黑色素瘤、前列腺癌、鼻咽癌、结肠癌、宫颈癌等细胞系具有放射增敏作用[2，3－9]。camphausen报道，在脑肿瘤细胞u251裸鼠移植瘤实验中，丙戊酸与x线照射联用明显延迟移植瘤生长，联用组和单纯照射组生长延迟时间分别为11天和4.2天[9]。

2hdacs抑制剂的放射增敏机制

hdacs抑制剂能增强射线对体外培养的多种肿瘤细胞系的杀伤，早期研究中，人们猜测其可能机制包括细胞周期阻滞（特别是g1期阻滞），抑制dna合成，诱导凋亡，重塑染色体结构使之对射线更敏感。

但karagiannis报道, 低浓度tsa不引起细胞周期改变和凋亡，仍保持放射增敏作用，高浓度tsa的放射增敏作用更明显，提示除细胞周期阻滞和凋亡以外，还有其他因素参与hdacs抑制剂的放射增敏作用[10]。近年研究提示，hdacs抑制剂可能调节射线引起的dna损伤反应通路，起到放射增敏作用。在射线引起的dna损伤中，dna双链断裂（double strain breaks,dsb）为最致命的损伤。细胞发生dsb后，会产生一系列反应，这些反应包括损伤信号传递，相关基因转录，细胞周期阻滞，dsb修复或细胞凋亡。hdacs抑制剂可影响其中多个环节。

2.1促进p53蛋白的表达和乙酰化：我们知道转录因子p53在放射反应中发挥重要作用。射线可活化p53蛋白，从而引起下游基因转录，细胞周期阻滞或凋亡。hdacs抑制剂可增强p53乙酰化，从而增强其特异性dna结合能力和转录激活能力，并延长其半衰期[11，12]。但是也有报道，hdacs抑制剂的放射增敏作用是非p53依赖性的[13]，提示除p53外，还存在其它hdacs放射增敏靶点。

2.2与dsb的信号启动、传递有关：当dna发生dsb后，局部染色体结构发生变化，53bp1蛋白识别dna双链断裂信号，激活atm蛋白，传递dna损伤信号。kim报道，在人类纤维母细胞中，atm和hdac-1可相互结合，射线可增强atm相关的hdac活性，hdacs抑制剂tsa可抑制atm相关的hdac活性，具有放射增敏作用，提示hdacs抑制剂可能在atm介导的dsb的信号传递中发挥作用[14]。人们用rna干扰技术沉默hdac4蛋白，发现53bp1蛋白表达也发生明显下调[15]。射线诱导dna损伤后，hdac4和53bp1都聚集在dsb部位。hdac4蛋白沉默，消除dna损伤诱导的g2/m期阻滞，有放射增敏作用。

2.3抑制dsb修复蛋白表达：射线可诱导rad51和dna-pksc表达上调，在前列腺癌细胞中，hdacs抑制剂saha可抑制射线诱导的这两种修复蛋白的上调[7]。munshi报道在黑色素瘤细胞系中，丁酸钠下调ku70，ku80，dna-pkcs的mrna和蛋白表达，发挥放射增敏作用[6]。

2.4增加和延长放射后γ-h2ax斑点的形成：dna双链断裂的早期，在断端附近的组蛋白h2ax发生磷酸化，形成γ-h2ax斑点，γ-h2ax分子聚集形成一个斑点即表明有一个dsb产生[16]。放射引起的dsb被修复后，γ-h2ax斑点也随之消失，放射后γ-h2ax斑点消失的时间也成为细胞dsb修复能力的指标。hdacs抑制剂tsa、fk228、cbha可增加射线诱导的γ-h2ax斑点数量[17，18]。hdacs抑制剂ms-275和丁酸钠处理细胞后，延长了射线引起的γ-h2ax斑点的表达，即降低了细胞dsb修复能力[6，19]。hdacs抑制剂增加和延长放射后γ-h2ax斑点的形成，进一步说明hdacs抑制剂可促进射线引起的dsb形成和抑制dsb修复。

2.5增加氧自由基产生：电离辐射可以使细胞产生大量自由基，在放射损伤中，自由基造成的损伤要占到2/3。ungerstedt发现hdac抑制剂（saha和ms-275）可提高转化细胞中活性氧（ros）含量，促进其死亡[20]。

mohamed和roberto也证实hdacs抑制剂（saha,ms-275,丁酸钠）可促进肿瘤细胞产生ros，用抗氧化剂l-nac可对抗hdac抑制剂引起的ros增高和细胞死亡[21，22]。

hdacs抑制剂可增加dna损伤，干扰dsb识别，抑制dna修复，在众多的临床前研究中显示出放射增敏作用。深入了解hdacs抑制剂的放射增敏机制，发掘高效低毒的hdacs抑制剂，都是值得进一步研究的方向。

参考文献

[1]arundel c,glicksman a,leith j.enhancement of radiation injury in human colon tumor cells by the maturational agent sodium butyrate (nab) [j].radiat res,1985,104(3):443-448

[2]biade s,stobbe c,boyd j,et al.chemical agents that promote chromatin compaction radiosensitize tumor cells[j].int j radiat biol,2001,77(10):1033-1042

[3]kim ia,shin jh,kim ih,al.histone deacetylase inhibitor-mediated radiosensitization of human cancer cells:class differences and the potential influence of p53[j].clin cancer res,2006,12(3):940-949

[4]entin-meer m,rephaeli a,yang x,et al.butyric acid prodrugs are histone deacetylase inhibitors that show antineoplastic activity and radiosensitizing capacity in the treatment of malignant gliomas.molecular cancer therapeutics[j]. mol cancer ther,2005,4(12):1952-1961

[5]kim jh,shin jh,kim ih.susceptibility and radiosensitization of human glioblastoma cells to trichostatin a,a histone deacetylase inhibitor[j].int j radiat oncol biol phys,2004,59(4):1174-1180

[6]munshi a,kurland jf,nishikawa t,et al.histone deacetylase inhibitors radiosensitize human melanoma cells by suppressing dna repair activity[j].clin cancer res,2005,11(13):4912-4922

[7]karagiannis tc,el-osta a.modulation of radiation response by histone deacetylase inhibition[j].int j radiat oncol biol phys,2005,62(1):223-229

[8]chung yl,lee yh,yen sh,et al.a novel approach for nasopharyngeal carcinoma treatment uses phenylbutyrate as a protein kinase c modulator: implications for radiosensitization and ebv-targeted therapy[j].clin cancer res,2000,6(4):1452-1458

[9]camphausen k,cerna d,scott t,et al.enhancement of in vitro and in vivo tumor cell radiosensitivity by valproic acid[j]. international journal of cancer,2005,114(3):380-386

[10]karagiannis tc,harikrishnan h,el-osta a.disparity of histone deacetylase inhibition on repair of radiation-induced dna damage on euchromatin and constitutive heterochromatin compartments[j].oncogene,2007,26(27):3963-3971

[11]juan lj,shia wj,chen mh, al.histone deacetylases specifically down-regulate p53-dependent gene activation[j].j biol chem,2000,275(27):20436-20443

[12]luo j,su f,hen d,et al.deacetylation of p53 modulates its effect on cell growth and apoptosis[j].nature,2000,408(6810):377-381

[13]zhang y,adachi m,zhao x,et al.histone deacetylase inhibitors fk228, n-(2-aminophenyl)-4-[n-(pyridin-3-yl-methoxycarbonyl)amino- methyl]benzamide and m-carboxycinnamic acid bis-hydroxamide augment radiation-induced cell death in gastrointestinal adenocarcinoma cells[j].int j cancer,2004,110(2):301-308