微生物降解纺织染料研究进展

时间:2022-06-06 11:04:41

微生物降解纺织染料研究进展

摘要:纺织染料由于具有毒性、致癌性、致突变、致畸性,其释放必然造成水体和土壤的污染,从而对人类健康和生态系统造成威胁。在过去的三十年里,人类已经意识并注意到纺织染料废水对环境和健康的危害,环境法和各国政府立法已经严格要求这些污染物从工业废水中排出。与物理法和化学法相比较,微生物降解纺织染料具有低成本、高效率、生物友好性和环境兼容性等特点,有可能成为处理染料废液去除染料的唯一有效的方法。本文在总结降解染料微生物种类基础上,说明降解染料的影响因素,进而提出展望,为纺织染料的生物降解提供参考。

Abstract: Textile dyes relesed into the environment cause considerable water and soil pollution because they may be toxic, carcinogenic, mutagenic and clastogenic, which is a hazard to human health and ecological system. Over the last three decades, awareness and concern about the environmental and health hazards of textile dyes are increasing in the global community. The environmental and government legislations are becoming more and more tight regarding the removal of these pollutants from industrial wastewaters. Compared with physical and chemical methods, the microbial degradation is a cost-effective, efficient, biofriendly, and enviromentally benign method, and may be emerging as a unique effetctive method to deal with the removal of textile dyes. In this work, based on the summarization of the microbes degrading the textile dyes, the factors affecting biodegradation of dyes was explained, and then the future perspectives was suggested, which provided the reference for the microbial degradation of textile dyes.

关键词:微生物;纺织染料;降解

Key words: microbe;textile dyes;degradation

中图分类号:X791 文献标识码:A 文章编号:1006-4311(2016)18-0217-05

0 引言

在上个世纪,人口的持续增长和工业化发展造成了生物体赖以生存的生态系统多样性的破坏。其中海水和河水的生态系统的污染主要是由没有充分处理的工业废水排放导致的。许多工业,例如染料业、纺织业、塑料制品、造纸、食品、化妆品以及药品等行业广泛使用染料染色同时消耗大量水,结果产生大量染色废液。自1856年开始,世界范围内共有100000多种染料,每年的产量超过7×105t,在纺织染色处理过程中,没有结合到纤维上的染料进入到废水中,据估计,纺织品染色加工过程中5-10%甚至50%的活性染料释放到废水中[1]。染料依据发色基团的化学结构分为偶氮类(azo)、蒽醌类(anthraquinone)、三苯甲烷类(triphenylmethane)、杂环类(heterocyclic)、聚合体类(polymeric),其中偶氮类和三苯甲烷类染料主要应用于纺织业[2]。据估计世界范围内纺织工业每年排放2.8×105t纺织印染废液。许多染料在水中1mg/L浓度时就能看见水体变色,而在纺织染料废水中,偶氮类染料浓度在5-1500mg/L,使水体颜色浓重,造成水体透明度下降,降低光合作用、溶解氧水平和水体质量,对水生动植物造成急性毒性作用,对水体的TOC和COD造成不利影响。同时,许多染料及其代谢产物具有毒性、致癌性和致变性,对人类产生潜在的健康危害并破坏生态系统[1]。因此,纺织染料废水是工业废水治理的重点和难点。

目前处理染料废水的方法有物理法、化学法和生物法。其中物理法包括吸附法、膜分离法和磁分离法等,化学法包括电化学法和氧化法等[3]。物理法和化学法由于成本高昂,使用规模受限同时废液处理不彻底具有污染性和操作上的局限性。与物理法和化学法比较,微生物降解法具有高效、低能耗、投资省、环境友好的特点,可以将染料分子降解或转化成无色、低毒甚至无毒的化合物,受到了学者们的极大关注[4-6]。许多细菌、丝状真菌、酵母菌以及藻类等均具有吸收和(或)降解纺织染料的功能。

1 纺织染料的微生物降解

1.1 丝状真菌对染料的生物降解

丝状真菌通过2种方式进行染料废液的脱色和降解,即生物体的吸附作用和细胞的生物降解作用。利用生物体进行染料废液的吸附有其优势所在,尤其是排放的染料废液具有毒性时以及废液处理条件不利于微生物生长和繁殖的情况下。目前已经用于染料吸附的霉菌有臭曲霉(Aspergillus foetidus)、黑曲霉(Aspergillus niger)[7]、变色栓菌(Trametes versicolor)[8]、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)[9]等。生物吸附是由于真菌菌丝细胞壁的纤维素成分提供了结合位点,例如羟基和羧基基团[10],因此真菌菌丝无论是否具有生命力均能具有生物吸附作用。在黑曲霉吸附去除偶氮类染料废水研究中发现,该霉菌菌丝能够有效地吸附偶氮类染料,去除率高于95%,在pH3-7之间,达到100%的脱色效率,即使在pH12,去除率达到60%,并且对酸性、碱性、直接、活性和分散性染料种类均能够在几小时内吸附去除[11]。然而,生物吸附后的染料结构仍然是完整的没有降解,含有染料的霉菌菌丝仍具有污染性需要进一步处理。可见,生物吸附可能不是一个处理大量染料工业废液的有效方法[12],但菌体的生物吸附机制对于染料的生物降解起到重要作用。此外,有研究者将吸附染料的菌丝一方面采用合适的溶剂洗脱并回收染料[13],一方面进行固体发酵彻底将染料分子分解[14],如果上述方法科学可行,将为染料生物吸附的后处理提供了新的解决方案。

微生物中最有效降解纺织染料的菌是白腐真菌(white-rot fungi),它们在好氧条件下产生能够高效降解染料的酶类,即降解木质素及其相关芳香族化合物的氧化还原酶类。能够裂解木质素的真菌由于分泌的胞外酶具有非底物专一性和非立体结构专一性,因此能够氧化多种有机污染物包括纺织染料,这些酶包括木质素过氧化酶(lignin peroxidases,LiP)、锰过氧化物酶(manganese peroxidases,MnP)和漆酶(laccases)。利用白腐真菌进行染料脱色研究的报道起始于1983年,Glenn and Gold研究测定黄孢原毛平革菌木质素酶活性方法发现的,随后利用白腐真菌进行染料生物降解研究快速发展。1990年文献中第一次报告了利用黄孢原毛平革菌进行磺化类偶氮类染料降解研究同时阐明了该菌株的降解途径,该菌株在染料脱色和降解方面是研究最为广泛的菌种,同时还有变色栓菌、烟管菌(Bjerkandera adusta)、侧耳属(Pleurotus)、脉射菌属(Phlebia)种类进行了广泛研究。除此以外,用于降解纺织染料的真菌还有Acremonium kiliense、黄曲霉(Aspergillus flavus)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、杂色云芝(Coriolus versicolor)、硬毛栓孔菌(Funalia trogii)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani)、耙齿菌(Irpex lacteus)、Lentinus polychrous、赭绿青霉(Penicillium ochrochloron)、血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)、干巴菌(Thelephora)、栓菌(Trametes)等[13]。其中某种菌对某些染料在4-7d内能够100%降解[15]。但是,由于染料分子固有结构的复杂性以及白腐真菌酶类降解机制的繁杂性,关于白腐真菌(除黄孢原毛平革菌外)降解染料途径仍未研究清楚。有研究表明,除了前面涉及的酶类在染料代谢过程中起到关键作用外,还存在其它的染料代谢机制。例如细胞膜氧化还原反应介导机制、多功能过氧化物酶(Versatile peroxidase,VP)、染料脱色过氧化物酶(Dye decolorizing peroxidase,DyP)、酪氨酸酶(Tyrosinases)、RBBR氧化酶(Remazol Brilliant Blue R oxygenase)等[16]。

1.2 细菌类

能够降解纺织染料的细菌有嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、芽孢菌(Bacillus sp.)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter sp.)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、耶尔森菌属(Yersinia)、沙雷氏菌属(Serratia)、鹑鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)、玫瑰考克氏菌(Kocuria rosea)、产谷氨酸小球菌(Micrococcus glutamicus)、珊瑚诺卡氏菌(Nocardia corallina)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、脱色希瓦氏菌(Shewanella decolorationis)、腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)等,其中某些细菌在6-8h内对某些偶氮染料降解率达到100%[17]。与真菌生物降解比较,细菌降解速率快于真菌。细菌在厌氧条件下可将偶氮类染料还原为无色的芳香胺类物质,而偶氮类染料的致癌性是由于偶氮染料本身或者还原过程产生的芳香胺类衍生物导致的,可见,细菌厌氧降解染料产生的芳香胺由于对人类和动物具有毒性、致畸性和致癌性需要进一步降解处理。厌氧形成的芳香胺可以进一步在好氧条件进行降解,因此对于含有偶氮类染料的废水,完全去除偶氮染料,需要将厌氧和好氧处理工艺相结合,厌氧条件下的还原反应将偶氮染料从水相中去除,接着在好氧条件下进行氧化反应降解芳香胺类。

不仅芳香胺类物质能被氧化分解,染料本身也能够被细菌氧化分解。该氧化反应是由能够产生胞外过氧化物酶的放线菌进行的,尤其是链霉菌属种。三个团队首先对放线菌降解纺织染料进行了研究。1989年,Ball et al.团队筛选了20株放线菌,只发现其中3株能够对Poly R多聚染料具有脱色作用,菌株分别为栗褐链霉菌252(Streptomyces badius 252),链霉菌EC22(Streptomyces sp. EC22)和嗜热放线菌 MT800(Thermomonospora fusca MT800.)[18],随后Zhou and Zimmermann扩大了筛选量,研究了159株放线菌脱色能力,该研究的特色在于用实际纺织染料废液进行脱色实验,使用的染料从偶氮类到酞菁染料,其中83株具有脱色效果并且效果显著[19]。最后,Don Crawford团队比较了链霉菌和白腐真菌降解纺织染料的能力,研究表明链霉菌胞外分泌酶类中除了具有底物专一性的过氧化物酶外,还存在其它降解染料的过氧化物酶类[20]。除放线菌外,黄杆菌属(Flavobacterium)菌也能释放降解偶氮类染料的胞外过氧化物酶。此外,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、类鼻疽假单胞菌(Pseudomonas pseudomallei)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、分枝杆菌属(Mycobacterium)和红球菌属( Rhodococcus)的菌种均能降解三苯基甲烷类染料。因此,原则上染料只通过微生物的好氧发酵就能实现降解[21]。

1.3 酵母菌类

目前关于酵母降解染料的研究较少。与细菌和丝状真菌比较,酵母菌具有许多优点,一方面是酵母菌与细菌一样,生长速度较快;一方面是酵母菌能够耐受不良环境。近来,有研究表明酵母菌由于其能够吸收更高浓度的染料有望成为具有发展前景的吸附剂,例如溶磷白地霉(Galactomyces geotrichum)、酿酒酵母( Saccharomyces cerevisiae)、白吉利毛孢子菌(Trichosporon beigelii)等[22]。据报道克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)能够在24h内去除9种染料(包括活性染料和酸性染料),去除率在62-98%之间[23];溶磷白地霉可降解5种染料,对于甲基红(1h)和ScarletRR(18h)降解率高达100%,对Malachite green、Orange HE 4B、Amido black 10B的降解率分别是97%(9h)、75%(18h)、92%(18h)[24]。而Pseudozyma rugulosa和白吉利毛孢子菌可分别降解8中纺织染料,前者对Reactive brilliant red K-2BP、Weak acid brilliant red B、Reactive black KN-B、Acid mordant yellow的降解率均在94%(24h)以上,对Acid mordant red S-80的降解率只有22%[23];后者对Navy blue HER、Malachite green、Red HE7B的降解率达到85%(24h)以上,对Golden yellow 4BD、Green HE 4BD、Orange HE2R、结晶紫、甲基红的降解率在50-73%之间[25]。

1.4 藻类

关于藻类进行染料脱色的研究目前不够全面。例如蓝细菌虽然分别广泛,但是其在生态系统中对染料降解的作用研究较少。近来有研究发现藻类可被诱导产生偶氮还原酶能够降解偶氮类染料,研究认为藻类以还原反应降解染料与染料的分子结构和藻的种类有关。藻类以固有的三种不同的机制脱除降解染料,即同化利用发色基团生成生物量、带色分子的生物转化和藻体对发色基团的吸附。小球藻属和Oscillitoria属的藻类能够分解偶氮类染料生成芳香胺类物质,并能进一步代谢将芳香胺类物质转化为结构更简单的有机化合物或者二氧化碳。目前已经有30多种偶氮类化合物能够被蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、普通小球藻(Chrorella vulgaris)和Oscillateria tenius降解为芳香胺类物质[26]。此外,还有双对栅藻(Scenedesmus bijugatus)、鼓藻 ( Cosmarium sp. )、微小色球藻(Chroococcus minutus)、Gloeocapsa pleurocapsoides、Phormidium ceylanicum等藻类均能够降解纺织染料。鼓藻细胞浓度在4.5×106个/mL时,对Malachite green的去除率明显增加并达到87.1%,可见,藻类对氧化池中偶氮染料和芳香胺类物质的去除起到关键作用,并且由于藻类细胞种类繁多、分布广泛,能够利用阳光和二氧化碳生长繁殖同时具有生物吸附性,因此藻类作为废液脱色处理方法备受关注,并且有可能成为染料废液脱色处理的低成本高效率的方法之一,具有可行性[1]。

对于脱色微生物的应用,除了纯培养体外,还有复合菌群应用。菌株的复合化可以解决单一菌株降解的不彻底性,整合多株菌株的特性能够增加降解效率、对环境的适应能力以及降解染料类型的多样性。可以将细菌和真菌混合培养形成群落,真菌首先降解结构复杂的细菌不能降解的部分,然后细菌彻底降解剩余部分,完成总有机碳的去除。群落内微生物通过利用废水中的碳源、能源以及氮源而相互配合得以生长繁殖,从而使染料废水的处理具有经济上的可操作性。Dafale et al.[27]将假单胞菌、芽孢菌和一些未鉴定的菌种复合用于偶氮类染料脱色研究,接种48h后,该复合体对浓度为100mg/L和1000mg/L的Reactive Black 5的降解率分别为90%和70%,对浓度为100mg/L的Reactive Red 11, Reactive Red 141,Reactive Violet 13, Reactive Orange 16,Direct Green6,Acid Orange 7和Acid Yellow 36的降解率分别为84%, 86%, 90,%,88%, 60%, 65%和41%。此外,采用固定化细胞[28]和微生物燃料细胞[29]进行染料脱色也有研究。

2 影响微生物降解染料的因素

2.1 pH

一般情况下,真菌和酵母菌在酸性或者中性pH条件下具有较好的脱色和降解活性而细菌在中性或碱性pH条件下具有较好的降解效果。微生物在最适pH条件下降解染料活性更高,而在强酸或强碱条件下快速下降。pH可能通过影响染料分子细胞膜运输而影响降解染料的活性,该步骤被认为染料脱色的限速步骤。各类型微生物降解染料的最适pH如表1所示[13]。然而有些微生物可以在广泛的pH范围内进行染料脱色和降解。例如双酶梭状芽孢杆菌(Clostridium bifermentans)在接种48h后可在pH6-12范围内将Reactive Red 3B-A完全脱色去除[30]。柠檬酸杆菌属菌株CK3(Citrobacter sp. CK3)可在强酸性(pH4)和强碱性(pH12)条件下脱色去除Reactive Red 190染料[31]。

2.2 温度

温度是影响微生物脱色降解染料活性的重要因素,因为温度影响微生物的生长繁殖以及相关酶的活性,因此降解染料的最适温度往往是微生物生长的最适生长繁殖温度和降解染料酶的最适作用温度。在最适作用温度范围内,酶活力随温度提高而增加,微生物的降解染料的效率相应地成比例增加[32],但高于最适温度,微生物的生长速度、繁殖速率会下降,降解酶由于变性结构改变而活力降低。各种微生物脱色降解染料的温度如表2所示,通过表2[13]可知,不同类型的微生物降解染料的最适温度范围在25-37℃之间。

2.3 染料浓度

废液中染料浓度对微生物的染料降解率有重要影响,其降解率随染料浓度的增加而降低,这主要是由于高浓度的染料对微生物细胞具有毒性,抑制微生物生长繁殖,微生物生物量降低,进而降低染料的降解率。例如,利用芽孢杆菌处理刚果红染料时,当染料浓度在1500mg/L和2000mg/L时,细菌的生长繁殖明显受到抑制[33];利用肠杆菌进行染料降解研究发现,当Reactive Red 195浓度为50mg/L和100 mg/L时,该浓度下肠杆菌将会死亡[34];珊瑚诺卡氏菌(Nocardia corallina)脱色处理浓度为2.3μmol/L的结晶紫时,能够彻底降解结晶紫,但当浓度升到4.5μmol/L时,降解率下降30%,浓度为7μmol/L时,细胞生长完全受到抑制[35];而嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)在Reactive Red 198浓度为1000-3000mg/L时,细胞最大生物量可达到1.2-1.6g/L,当浓度在4000-8000 mg/L时,生物量下降至0.7-1.0g/L[36]。

除了上述因素外,废液盐度、染料结构、废水中碳氮源平衡、对于好氧性微生物的溶解氧水平和曝气速率以及电子供体和氧化还原介导物质的添加等对微生物高效快速的降解染料也有一定的影响。

3 展望

细菌、酵母菌、丝状真菌(霉菌和蕈菌)和藻类等微生物均能降解染料,有望成为未来染料有效降解、可再生利用以及具有经济性和环境友好性的处理方式,因此对于染料的降解未来发展方向应从以下几个方面开展工作:

3.1 不同微生物种群的整合利用

各类微生物脱色染料废水具有各自的优缺点。细菌具有周期短、效率高、降解种类广泛、降解和矿化程度高、产生污泥少的特点,但不能耐受高浓度染料废水同时需要添加碳源或氮源,增加废水处理的有机负荷;丝状真菌具有耐受高浓度染料废水、具广谱降解特性同时生物体具有生物吸附特性,但是培养周期和代谢周期长、某些降解酶的分泌需在特定条件下产生;酵母菌具有生长速度快、能耐受高浓度染料废水和不良环境的特点,主要作为生物吸附剂,但存在二次处理的问题;藻类将染料分子转化为无色的CO2和H2O,具有寡营养、释放氧气、降解彻底特点,同时藻类生物体具有生物吸附功能,但有些藻类其生长需要光合作用,对于生物吸附的藻类,存在二次污染问题。因此需要整合各类型微生物的优点,建立生物多元化的光能型和化能型、异养型和自养型相结合的菌-藻协同脱色体系,从而达到理想的效果。

3.2 学科交叉性

微生物降解染料的过程需要明确微生物的生物学特性、微生物降解染料的生物途径、染料的物理化学性质以及降解过程染料分子结构的变化、染料的毒性变化以及规模化放大中的工程学问题等,这需要具有化学(有机化学、无机化学)、微生物学、生物化学、化学工程、环境生物学等学科知识才能够完成和解决的,具有高度的学科交叉性。因此无论是现在或将来从事染料降解研究的学者还是团队,都应该积极吸纳交叉学科的知识或者人才,或者与交叉学科的学者相互合作,共同创新,从学科交叉角度思考,开发出经济可行、生态环保的纺织染料微生物处理体系。

3.3 高效降解染料菌株的选育

菌株是染料高效降解的第一要素,染料降解程度和降解条件与菌株的特性相关,应积极开展高效降解染料菌株的选育工作。研究表明高浓度染料逐级驯化培养菌种能够提高微生物的降解能力。微生物对毒性或者难降解复合物的适应性对于选育高效率降解染料微生物菌株具有重要意义,在高浓度染料的驯化过程中,微生物被迫或者间接地演化,从而演化出特殊的降解染料的机制和生物途径。

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