高效液相色谱法测定桂枝茯苓胶囊中丹皮酚的含量

【关键词】 桂枝茯苓胶囊; 丹皮酚; 反相高效液相色谱法

桂枝茯苓胶囊是由牡丹皮、桂枝、茯苓等精制而成的纯中药制剂。本品可降低大鼠血液黏度，抑制家兔血小板聚集，对大鼠子宫平滑肌有一定松弛作用，并对小鼠有镇痛和抗炎作用。桂枝茯苓胶囊能活血化淤，缓消症块。本实验用于 治疗 妇女血淤所致下腹宿有症块，月经量多或漏下不止，血色紫暗，多血块，小腹隐痛或腹痛拒按，舌暗有淤斑，脉涩或细。丹皮酚是其有效成分之一，用反相高效液相法测定桂枝茯苓胶囊中丹皮酚含量。

1 仪器与材料

1.1 仪器ssi公司pc?3000高效液相色谱仪，热电300紫外分光光度计。

1.2 试药丹皮酚标准品( 中国 药品生物制品检定所，批号：110708?2004);桂枝茯苓胶囊(江苏康缘药业股份公司，批号：061107，060916，061228);甲醇(优级醇)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件岛津kromasil c18柱(4 μm，4.6 mm×250 mm)，流动相为甲醇?水(60∶40)，测定波长为274 nm，柱温30℃[1]，流速0.18 ml·min-1，aufs为0.05，进样量10 μl，丹皮酚保留时间为7.84 min，数据处理为外标峰面积法。色谱图见图1。

a?丹皮酚标准色谱图;b?桂枝茯苓胶囊色谱图;c?空白对照品;1?丹皮酚峰

图1 rp?hplc色谱图

2.2 标准曲线的制备精密称取一定量的丹皮酚对照品，用蒸馏水分别制成25.02，50.04，75.06，100.08，150.02，250.2 μg·ml-1标准溶液，各进样10 μl，以峰面积y对浓度x进行回归，得y=378 046.87+121 468.01x，r=0.999 7(n=6)。

2.3 空白试验取处方中除牡丹皮以外的其余药材[2]，按规定工艺制备成胶囊后，依样品溶液制备方法制成空白液，按样品的测定方法和色谱条件进行测定。

2.4 丹皮酚含量的测定

2.4.1 样品溶液制备取桂枝茯苓胶囊内容物0.3 g，加甲醇适量，超声处理30 min，加甲醇稀释至50 ml，再次超声10 min，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.4.2 样品的测定精密吸取样品溶液10 μl，在上述色谱条件下进行分析，测定丹皮酚的峰面积，用外标峰面积法 计算 丹皮酚的含量，每批测定3份。结果见表1。表1 桂枝茯苓胶囊中丹皮酚的含量

2.5 加样回收率实验取同一批号的桂枝茯苓胶囊内容物约0.3 g，准确加入高、中、低3种量的丹皮酚标准贮备液，按制备样品供试溶液的方法，照上述高效液相色谱法测定。结果见表2。表2 样品加样回收率实验结果

桂枝茯灵胶囊批号：061107，丹皮酚的含量为8.197mg/g

2.6 精密度实验吸取对照品标准液10 μl，重复进样5次，测定峰面积，结果rsd=1.86%。

2.7 重复性实验对同一批号样品(060916)重复进行4次测定，结果x=8.362 mg·g-1，rsd=2.16%。

3 讨论

在样品溶液的制备过程中，为了保证样品中丹皮酚充分提取，采用同一批样品分别对提取溶剂、方法、时间进行了试验，结果表明加甲醇适量，超声1h，提取效果最佳。

采用上述方法提取桂枝茯苓胶囊中主要成分丹皮酚，其方法提取完全，简便、快捷、稳定，杂质对分离无干扰，选择性较强，可作为该制剂质量控制的方法。

【 参考 文献 】

[1] 张忠春，王 健，管玉民，等. 高效液相色谱法测定六味地黄胶囊中丹皮酚含量[j]. 时珍国医国药，1999，10(12):900.

[2] 郭晓玲. 桂枝茯苓胶囊中桂皮醛和丹皮酚的含量测定[j]. 中药材，1999，22(2):361.