时间：2023-11-12 11:47:43
教育家胡适在讲课前总会喝几口“茶水”,然后就会精力充沛,不显疲意。他用来泡水的材料并非普通茶叶,而是中药黄芪。
黄芪在古代又称做“黄耆”,李时珍在《本草纲目》中解释道:“耆,长也,黄耆色黄,为补药之长,故名。”《神农本草经》中将其列为上品,清代名医黄宫绣则称其为“补气诸药之最”。
黄芪是豆科植物内蒙古黄芪或膜荚黄芪的根,主产于山西、甘肃、内蒙古、东北三省等北方地区,故有“北芪”之称。尤以沁州绵上(今山西省北部的浑源、繁峙、代县等地区)所产质量最佳,且柔软如绵,又称“绵黄芪”。黄芪味甘,性微温,归脾、肺经,有补气升阳、益卫固表等功效。
【七种功效】
补气升阳黄芪善补脾胃之气,其中炙黄芪补气升阳的功效较强。用于治疗中气下陷所致的脱肛、胃下垂等,常与人参、白术、升麻、柴胡等同用;用于治疗气短等,常与柴胡、升麻、桔梗配伍。
益卫固表黄芪有增强人体防御功能,抵御外界刺激等作用,并能控制汗腺分泌,可用于治疗自汗(即白天不运动而出汗)。体虚易感冒者经常用黄芪煎水代茶饮,也有较好的防治作用。用于治疗气虚引起的自汗时,常与牡蛎、浮小麦、麻黄根等同用。
利水退肿脾气亏虚时易出现浮肿等症状。黄芪(主要是生黄芪)既能补气以治其本,又能利水以治其标,有标本兼治的功效。因其有利尿、消退水肿、减少蛋白尿等功能,故对慢性肾炎有较好的治疗作用。用于治疗气虚引起的水肿时,常与白术、陈皮、茯苓等同用。
保胃护肝黄芪具有明显的保护胃黏膜及促进溃疡愈合的作用,并能够减轻病毒或化学毒素对肝脏的损伤。
改善心脏血流黄芪具有扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、抗心肌缺血及保护心肌等作用,并能增强心脏的收缩功能,特别是对衰竭的心脏有明显的强心及保护作用。
增强免疫及抗衰老黄芪能增加细胞传代次数,延长细胞的存活寿命。它还具有抗自由基及抗脂质过氧化等作用,能提高抗氧化酶的活性,从而延缓老化。黄芪含有丰富的微量元素硒,可提高人体免疫功能和延缓细胞衰老。
其他黄芪还具有增强记忆能力、保护脑组织、促进造血功能、抗肿瘤和减轻放化疗反应等作用。
【验方推荐】
玉屏风散
配方:生黄芪20克,白术10克,防风5克。
服法:将诸药水煎2次,合并药液,每日1剂,分早中晚服用。
功效:益气固表,增强体质。
应用:主治体虚引起的感冒。
黄芪白苓汤
配方:炙黄芪30克,茯苓、白术、白芍各10克,桂枝5克,甘草3克,大枣10枚。
服法:水煎服,每日1剂,分早中晚服。
功效:温中健脾,和胃止痛。
应用:主治慢性萎缩性胃炎。
黄芪海白汤
配方:炙黄芪300克,白术、白芨、海螵蛸各100克,木香、砂仁各50克。
用法:将诸药研为细粉,每次10～15克,分早中晚于餐前半小时用开水冲服。
功效:益气健脾,理气止痛。
应用:主治胃及十二指肠溃疡。
黄芪胡麻汤
配方:炙黄芪30～50克,升麻、柴胡、枳实各10克,大枣10枚。
用法:水煎服。每日1剂,分早中晚服用。
功效:益气补虚,提升脏器。
应用:主治胃下垂、子宫下垂或脱肛。
强心茶
配方:黄芪、附子、麦冬、益母草各150克,茶树根200克。
用法:上药共研为粗末,以纱布包裹(每包约重30克)。每次取1包置保温杯中以沸水冲泡,然后上盖闷15分钟代茶频服。每日服1～2包。
功效:温阳益气,活血强心。
应用:主治心肾阳气虚弱(主要表现为胸闷气急,肢冷畏寒,面目虚浮,舌紫暗,脉搏有间隙)引起的冠心病,心功能不全等。
注意:阴虚火旺者(表现为咽干口燥,心烦易怒,舌质红,脉细数等)忌用。
【选购与保存】
正品黄芪呈圆柱形,长20～120厘米,根部分支少,表皮呈灰黄色或浅棕色,并有不整齐的纵皱纹或纵沟,质地柔韧而有粉性,不易折断,断面呈纤维状,木质部为黄色,有放射状的心,嚼之味微甜,有豆腥味。
假冒黄芪则外形短小,长5～50厘米,根部分支多,表皮深棕色,嚼之无甜味及豆腥味,甚至有黏液。
黄芪中含糖类及淀粉类较多,故应注意防潮、防蛀、防霉并放置于阴凉干燥处。
黄芪分为生黄芪和炙黄芪。前者是将采集的黄芪洗净、晒干、切片而成,多用于固表、去疮、利水等;炙黄芪则是将生黄芪加蜜拌炒晒干而成,多用于补中益气。
黄芪主要用于体质虚弱的人;体质健壮,特别是有外感发热、咳血、便秘等热症的患者忌服。
黄芪适用于脾胃虚弱的食欲不振者,对于因饮食过多而引起食积症的食欲不振者忌用。
关键词：黄芪皂苷；免疫调节；黄芪甲苷；生物活性
中图分类号：R284 文献标识码：A
文章编号：1007-2349（2011）08-0079-03
黄芪为豆科黄芪属植物蒙古黄芪［Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.Var.mongholicus（Bge.）Hsiao］或荚膜黄芪［Astragalus mebranceus（Fisch.）］的干燥根。作为中医临床常用补益中药，具有健脾补中、升阳举陷、益卫固表、利尿、托毒生肌之功效，主要含有三萜皂苷、黄酮类化合物以及多糖，其中皂苷类是黄芪的主要活性成分［1］。随着近年来对黄芪皂苷（astragaloside）研究的不断深入，除具有免疫调节活性外，临床和实验研究还发现黄芪皂苷具有抗肿瘤，抗病毒、抗氧化、降糖和改善心血管疾病等广泛的生物活性，本文将对黄芪皂苷最新生物活性作一综述，冀望有助于黄芪皂苷的进一步研究。
1 免疫调节活性
1.1 对巨噬细胞活化和功能的影响 抗原提呈细胞（antigen presenting cell，APC）包括巨噬细胞活化后产生大量细胞因子参与免疫和炎症过程。另一方面，APC摄取外源性抗原并将其处理成免疫原性多肽，以MHC分子抗原肽复合物的形式表达于APC表面，供T细胞的TCR识别；同时，APC表达的协同刺激分子CD80、CD86与T细胞表面CD28结合，进而激活抗原特异性T细胞。黄芪甲苷是黄芪总苷中的一种皂苷类单体成分，研究结果表明，黄芪甲苷高浓度（100～1000 nM）可以抑制腹腔巨噬细胞（PMΦ）体外分泌IL1和TNFα，而低浓度（1 nM）则可以促进腹腔巨噬细胞体外分泌IL1［1］。然而另有文献报道，从土耳其黄芪（A.melanophrurius）分离得到的黄芪皂苷能增强人巨噬细胞或单核细胞系核转录因子κb（NFκb）活性，同时可增加炎性细胞因子IL1β、TNFα的mRNA的表达［2］。黄芪皂苷对PMΦ有直接激活作用，经黄芪皂苷处理的PMΦ，对H22肿瘤细胞的细胞毒作用明显增强，NO分泌量增加且呈浓度依赖性，同时细胞内Ca2+的浓度升高，并与药物浓度呈正相关，说明黄芪皂苷能增强小鼠腹腔巨噬细胞的免疫作用，细胞内Ca2+浓度的升高可能是黄芪皂苷激活巨噬细胞，发挥免疫调节作用的机理之一［3］。综合上述黄芪皂苷对巨噬细胞作用的结果发现，总皂苷的不同单体组分以及同一组分不同浓度对巨噬细胞的活化具有差异性。
1.2 对特异性免疫功能的影响 IL2是活化的Th1型T细胞分泌的一种重要的细胞因子，具有很强的免疫刺激作用，IL2能引起多种淋巴细胞（如T、B细胞及NK细胞等）的增殖，增强CTL、NK细胞和LAK细胞的杀伤活性，促进B细胞产生相应抗体，并可诱导IFNγ分泌等，是参与免疫应答和免疫调节的重要细胞因子，是衡量机体免疫功能，尤其是细胞免疫水平的一个重要标志［4］。黄芪皂苷具有显著的促进植物血凝素（phytohemagglutinin）诱导外周血IL2的产生，其诱导活性在35.9%～139.6%之间，其中astragaloside VII诱导IL2活性最强。黄芪皂苷显著诱导IL2的产生，可作为其抗肿瘤和免疫促进作用一个重要机制［5］。黄芪甲苷能够促进小鼠T、B淋巴细胞增殖和抗体生成，显示出对细胞免疫和体液免疫较强的促进作用［1］。
1.3 抗风湿 黄芪总皂苷具有抗炎、镇痛和免疫调节作用，实验研究结果表明，黄芪总皂苷对关节炎具有治疗作用，且无明显的毒副作用，可用于类风湿关节炎（RA）的治疗［6］。
2 降糖、改善胰岛素抵抗活性
肝糖原磷酸化酶（Hepatic glycogen phosphorylase，GP）和葡萄糖6磷酸酯酶（glucose6phosphatase，G6Pase）在控制血糖平衡中起着关键作用，因此被作为抗糖尿病药物一个重要的靶点。黄芪甲苷是黄芪根部主要的活性成分，在中国传统医学广泛用于治疗糖尿病和心血管疾病。研究报道，黄芪甲苷在25～50 mg/kg剂量显著降低糖尿病小鼠血糖、TG和胰岛素水平，抑制GP和G6Pase mRNA的表达及该酶活性［7］。另有研究报道，黄芪甲苷剂量依赖性抑制高α葡萄糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖，诱导血管平滑肌细胞凋亡，并伴随典型的细胞形态学变化和线粒体膜电位的丢失，上调αSMA（αsmooth muscle actin）蛋白表达，提示黄芪甲苷能阻止糖尿病患者的血管病变［8］。
黄芪甲苷剂量依赖性抑制TNFα诱导的3T3L1脂肪细胞的脂解作用，同时可抑制ERK1/2的磷酸化，可逆性下调脂滴包被蛋白，减少TNFα诱导脂肪生成的关键酶LPL、FAS和GPAT的表达，从而改善TNFα诱导3T3L1脂肪细胞胰岛素抵抗，增加胰岛素的敏感性和治疗心血管疾病［9］。相似报道，黄芪甲苷也可显著促进胰岛素诱导的前脂肪细胞分化，改善高葡萄糖诱导的胰岛素抵抗，阻止TNFα诱导的凋亡。通过研究黄芪甲苷对内皮细胞作用发现，黄芪甲苷发挥上述作用与激活PPARα的表达和抑制TNFα诱导的内皮细胞胞内Ca2+堆积有关［10］。
3 对心血管系统的作用
3.1 舒张血管、降低血压 黄芪甲苷能降低血压，逆转压力过载引起的血管肥厚和血管内皮舒张功能失调，其作用与其上调eNOS蛋白表达、升高胸主动脉组织NO含量有关［11］。相似的实验结果表明，黄芪甲苷逆转压力过载引起的血管肥厚，改善血管ET1诱导的血管收缩反应性，其作用与其下调ETA受体和ETB受体蛋白水平，使胸主动脉组织ET1含量下降有关［12］。
3.2 强心 黄芪甲苷对正常或心功能受抑制大鼠的左心室表现出正性肌力作用，而且在不增加心肌耗氧量的情况下，对收缩和舒张功能均有改善作用［13］。黄芪皂苷可增强心得安、戊巴比妥钠诱发心衰犬心肌收缩力，改善心脏收缩和舒张功能，提示其对急性心衰有明显的治疗作用［14~15］。黄芪皂苷具有拮抗AngⅡ，减低心肌细胞线粒体膜电位的作用，这可能是黄芪防治心衰机理之一［16］。
3.3 其他 黄芪总皂苷对实验性脑缺血再灌注脑水肿和脂质过氧化具有抑制作用［17］，保护H2O2对心肌细胞的损伤等［18］。
4 抗肿瘤活性
在体外，黄芪皂苷抑制人红白血病细胞株K562细胞增殖，但对人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株HCT116和人肺腺癌细胞株A549细胞的增殖无明显影响，提示黄芪皂苷体外抗肿瘤活性具有一定选择性。体内研究表明，黄芪皂苷50～100 mg/kg灌服，对小鼠肝癌H22、小鼠肉瘤S180均具有抑制作用［19］。黄芪甲苷对乳腺癌细胞株MDAMDB468，MDAMDA231均有抑制增殖作用，其抑制细胞增殖的机理可能与下调Akt的磷酸化水平有关［20］。
5 抗病毒活性
HepG2.2.15细胞是用完整的乙肝基因转染HepG2细胞而来，能稳定的分泌HBsAg，HBeAg，HBV DNA及Dane颗粒，是体外筛选抗HBV药物良好的细胞模型。研究结果表明，不同浓度的黄芪甲苷对HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg，HBeAg和HBV DNA均有不同程度的抑制作用［21］。黄芪甲苷对柯萨奇B3病毒有明显的抑制作用，临床用于治疗病毒性心肌炎［22］。
6 抗氧化活性
体内、体外研究结果均表明，黄芪皂苷具有显著的抗氧化活性，显著降低冲击波诱导的兔肾氧化应激模型MDA水平，抑制SOD活性的降低，显著减少尿中β葡萄糖苷酶水平。组织病理结果显示，黄芪皂苷组组织与病理模型组相比损伤程度更轻。结果提示黄芪皂苷对冲击波诱导的兔肾氧化应激损伤具有保护作用［23］。
7 抗血栓
黄芪总皂苷对电刺激和ADP诱导的血小板聚集具有显著抑制作用，明显降低GMP140的含量，显著降低TXA2/PGI2的比值，其抗血栓作用机制与提高PGI2和NO水平有关［24~25］。
8 结语
黄芪是我国经典传统补益中药，具有健脾补中、升阳举陷、益卫固表、利尿、托毒生肌之功效。《本草纲目》记载“可治一切气衰血虚之症”。现代研究表明，黄芪主要含有三萜皂苷、黄酮类化合物以及多糖等成分，其中黄芪皂苷是黄芪主要活性成分。近年来大量的临床及实验室的研究发现，黄芪皂苷具有十分广泛的生物活性，然而目前对其皂苷类单一组分的研究主要集中在黄芪甲苷，而其他皂苷单体研究相对较少，特别是其免疫调节活性。笔者在深入研究黄芪皂苷的免疫调节活性及作用机制中发现，不同单体组分对淋巴细胞的增殖活性及Th1型细胞因子（IL2、IFNγ）产生水平具有一定的差异性（另文发表）。功能以结构为基础，黄芪皂苷类组分基本苷元为羊毛酯烷型的四环三萜皂苷，各单体组分差异在于取代基不同，因此深入探讨黄芪皂苷免疫调节活性构效关系，从而为进一步结构优化和提高免疫增强作用奠定基础。笔者在实验研究中还发现，黄芪皂苷免疫调节活性的量效关系不明确，低浓度明显促进T淋巴细胞增殖，随着浓度的增加其促增殖活性减弱，甚至出现免疫抑制作用，说明黄芪皂苷对T淋巴细胞的增殖作用具有双向调节作用。提示针对不同的病症，选用适宜的剂量，对于黄芪的临床疗效至关重要。黄芪皂苷免疫调节活性作用确切的作用靶点又在哪？上述这些问题深入探讨，对弘扬祖国传统医学和指导临床用药具有重要意义。
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摘要：上世纪40年代以来，抗生素对畜牧生产做出了巨大贡献。但是，以抗生素为代表的化学药品的大量使用，造成细菌耐药性以及畜产品中兽药残留的问题日趋严重。随着近年来畜牧业规模化和商品化的发展，绿色环保养殖和食品健康安全已经引起人们的广泛关注，人们希望寻求更为安全有效的新型产品替代抗生素。中草药免疫增强剂具有毒性低、副作用小、病原微生物对其不易产生耐药性的优点被认为是最理想的替代物之一。
关键词：多糖药理功效兽医应用
黄芪多糖是中草药黄芪的一种提取物，是许多生物活性多糖中最具代表性的一个，它作为中草药免疫增强剂的典型代表，具有增强机体免疫、抗病毒、抗肿瘤、延缓衰老、抗氧化、抗应激、调节血糖等作用。而且对正常动物以及荷瘤、药物等引起的免疫功能低下动物，均能有效的提高细胞免疫和体液免疫功能。目前，黄芪多糖已开始陆续应用于兽医临床。近年来，人们对黄芪多糖的研究已成为热点，本文仅从黄芪多糖的药理学功效及在兽医临床的应用作一简述，旨在为兽医临床提供参考依据。
一、在养鸡上的应用
黄芪多糖能增强细胞生理代谢作用，促进血液循环，增强动物机体的代谢，起到营养保健作用。研究表明：黄芪多糖可以促进双歧杆菌和乳酸菌的生长，具有益生素的作用。因此，在家禽饲料中适量添加黄芪多糖，可达到保健促生长作用。另外，合理正确利用黄芪多糖的抗病毒、抗细菌作用，能对病毒产生干扰吞噬结合作用，通过多种途径杀灭细菌和病毒，并有清热解毒和调节机体代谢机能紊乱的功效，增强禽类抗病能力及治疗禽类疾病。崔保安等报道，黄芪粉或含有黄芪的复方添加剂能提高雏鸡增重、饲料转化效率和机体的健康状态。刘润珍等报道，黄芪多糖注射液，可大大提高雏鸡的抗病力和成活率，且对雏鸡的增重、生长发育和蛋鸡产蛋无任何不良影响。张德刚等采用以黄芪为主，配合其他中药制成的增蛋宝1号和2号，使产蛋率分别提高了7%和10%，饲料报酬提高了15%和28%。在一周龄雏鸡饲料中添加1%的黄芪干粉，雏鸡食欲旺盛，消化能力增强，抗病能力提高，成活率达到100%。陆纲等（2003）报道用黄芪多糖注射液对患有鸡新城疫的肉鸡和蛋鸡进行治疗性试验，结果对自然感染鸡新城疫的治愈率达到88％，比对照组提高40％，优于鸡新城疫IV系紧急接种。时秀梅等（1996）研究表明，复方黄芪多糖冲剂对鸡传染性法氏囊病毒具有较强的抑制作用。王令等（2004）报道，黄芪多糖注射液对鸡传染性法氏囊病治愈率达98.6%。余建国等（2001）也报道，应用黄芪多糖悬液给3日龄雏鸡注射能显著降低鸡传染性法氏囊病的发病率和死亡率。刘红丽等（2001）报道，黄芪多糖通过增强机体抵抗力，调节自由基反应系统两方面作用防止肿瘤发生，抑制鸡马立克氏病病毒造成的损害。另有报道，黄芪多糖可使鸡马立克氏病的发病率、死亡率下降，并能增强马立克氏病疫苗的血清抗体效价，对疫苗具有很好的保护效果。张靖飞等（2003）采用复方黄芪多糖治疗禽流感，大大降低了鸡的死亡率和产蛋下降幅度，且在产蛋率和蛋壳质量恢复方面明显优于金刚烷胺对照组。
二、在养猪上的应用
黄芪多糖作为猪饲料添加剂可提高断奶仔猪成活率、增重率和断奶重，抑制肠道有害菌群，降低仔猪腹泻发生率及其促生长的作用。断奶仔猪在各种应激的影响下，常常引发免疫功能下降，导致对外界病原微生物抵御能力降低，容易造成消化系统紊乱、严重腹泻、生长停滞，甚至死亡。黄芪多糖具有明显的免疫调节作用，它能提高淋巴细胞的转化率，提高机体对抗原的免疫应答能力，增强巨噬细胞的吞噬能力，对各种药物及不同原因引起的免疫功能降低，均有增强作用。一旦畜禽机体的免疫系统受到抑制或破坏，就会引起畜禽的一系列免疫性疾病的发生，如呼吸系统，消化系统，泌尿生殖系统等疾病，对动物的生长发育产生不良影响。黄芪多糖是动物防病保健的理想选择。曹国文等报道，在断奶仔猪日粮中添加黄芪等中草药混合物的提取物3g/kg，试验组猪肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌数量均比对照组显著提高，而大肠埃希氏菌和肠球菌指数以及腹泻发生率则明显降低。张波等应用黄芪多糖提高哺乳仔猪成活率与断奶重试验测定，应用黄芪多糖可以增强哺乳仔猪的免疫机能，降低发病率，提高成活率，促进哺乳仔猪的生长发育，试验组比对照组获得较好的经济效益。李同洲等（2007）研究显示，添加黄芪多糖可以提高断奶仔猪的日增重，改善饲料增重比，降低腹泻率，同时提高了断奶仔猪对营养物质的消化率。胡仓云等（2007）表明，黄芪多糖既能促进仔猪免疫系统的免疫功能，增强机体抵抗力，降低断奶仔猪腹泻的发病率，提高成活率，又能促进仔猪生长发育。Yuan等研究发现，黄芪多糖能提高断奶仔猪生长性能和免疫力。王树华等（1999）用含黄芪的八味中草药配方测仔猪增重效果，结果发现黄芪对仔猪生长有促进作用。许静波等（2007）试验表明，黄芪多糖能极显著提高仔猪猪瘟疫苗的抗体水平和外周血嗜中性白细胞百分数和淋巴细胞转化率。郭小清等（2004）报道，利用从黄芪中提取的黄芪多糖作为干扰素的诱生剂，具有抗病毒、增强免疫功能的作用，对猪圆环病毒病、猪流感、蓝耳病等病毒性疾病的防治，取得了一定成效。
三、在其他动物上的应用
关键词：黄芪；多糖；皂苷；乙醇
【中图分类号】TQ460.72【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)07-0070-01
黄芪又称作黄耆，是中药材和植物的统称。黄芪这种中药材是豆科草本植物，有利水退肿、补气固表、生肌和托毒排脓等的功效[3]。黄芪药用可以延续到2000多年以前，其含量有皂素、蔗糖、多糖、叶酸或者是多种氨基酸以及多种微量元素。黄芪多糖（Astragalus Polysacharin，APS）是一种干燥的粉末，由干燥的根经浓缩提取得到的。其色泽为黄褐色，味道微甜，可以用作免疫促进剂，同时还具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒和抗氧化的作用。本文所做研究，是为了给黄芪的有效成分进行鉴定，达到可以节约药物用量，得到最大生产率的方法，通过实验证明，研究溶剂的用量、回流次数和时间的不一样对生产率是有影响的。
1一般资料和方法
1.1一般资料:黄芪（开封市医药经营公司）、碱性酒石酸铜、乙醇（95%）、氯仿、丁醇、浓硫酸、试剂（Fchling）以及实验所需要的实验用品。
1.2方法:黄芪皂苷的提取和鉴定：称取10g的药材使用乙醇来提取，然后回收溶剂，而乙醇的含量为95%，通过回流、过滤、滤液蒸出乙醇的步骤，将可以得到浆状物体，接着再蒸干就可以得到乙醇膏。其带有香气并且是黄色。将这得到的产物加入到20ml的水中，分量为4.2488g，如此得到的溶剂颜色比较浑浊且为土黄色，这里还有不溶于水中的生物碱、油脂和甙元。然后改用水饱和的丁醇为溶剂继续对水溶液进行萃取，次数为2次，对所得到的丁醇进行蒸馏，直至蒸干得到黄色有香味的固体。将这些黄色的固体加入到氯仿中，得到浅黄色液体，最后加入浓硫酸并且有规律的摇晃，再静置。此时静置过后的液体，在紫外幻灯下呈现绿色光，证实这是甙类[1]。
黄芪多糖的提取和鉴定：把回流得到的药品，将乙醇挥去，再加入到水中（100ml），进行回流、过滤，蒸馏至适当体积，接着把多余其三倍的无水乙醇加入混合，这时得到沉淀物，呈现为白色，将这些沉淀物过滤、烘干，最后得到乳白色的固体后称重。把这些最后得到的液态药品加入试剂（Fchling），加热沸腾以后，得到沉淀物为橙色即证实为糖类[2]。
2结果
2.1黄芪皂甙:实验的过程中，只是改变回流时间、次数和溶剂的用量来得到最佳提取方法并对结果加以鉴定。在此实验过程中，在溶剂用量考察里，药剂回流的时间都是1个小时，醇（40ml）产率很低，而醇（60ml）和醇（50ml）的产率差不多，区别不大，所以采用药品和溶剂的比例最好为1∶5。在回流时间上，药品和溶剂的比例为1∶5时，为了节约时间，采用回流的时间一般在3小时。回流的次数，在保持前面两点不变的情况下（药品：溶剂=1∶5；回流时间=3h），综合考量过后，采用回流3小时，接着再回流1小时的方法最好。
2.2黄芪多糖:使用药品和溶剂的用量比为1∶10时，其可以刚好融入，糖也能刚好溶解。不过水回流一次以后，就没有产物剩下，也就是说没有第二次回流的需要了。时间越长，所得的产率变得基本一样，所以使用100ml的水所取得的糖，反应3小时就可以了。
3结论
黄芪这种中药材，功效良多，可以用作免疫促进剂，同时还具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒和抗氧化的作用，还有利水退肿、补气固表、生肌和托毒排脓等的功效[3]。通过本文的实验，采用最有效的方法，提取多糖和皂苷这些有效成分，而得到的有效的方法不光可以节约提取时间，还可以节约试剂的用量。黄芪是补气的药物，黄芪多糖可以增强非特异性的免疫功能以及体液免疫功能，其效果显著，促进人体血清溶血素的形成，空斑形成细胞的溶血功能得到提高。
黄芪多糖（Astragalus Polysacharin，APS）是一种干燥的粉末，由干燥的根经浓缩提取得到的。其色泽为黄褐色，味道微甜，可以用作免疫促进剂，同时还具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒和抗氧化的作用。
通过本文对实验的证明，得到的结果为当药品和溶剂的用量比为1∶5时，回流的时间是3小时，再次回流的时间为1小时，这就是提取黄芪苷类最好的组合。而黄芪多糖提取的最佳方法是药品和溶剂的比例为1∶10时，回流1次且为3小时，温度在100摄氏度。这样的研究，可以得到黄芪有效成分提取的最佳方法，为提取黄芪的有效成分提供很好的资料证明。
参考文献
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[文献标识码]B
[文章编号]1672－4208(2010)19－0075－02
黄芪为豆科植物膜荚黄芪、蒙古黄芪的干燥根，主要含黄芪多糖A、B、C、D，黄芪皂苷甲、乙、丙，生物碱和葡萄糖醛酸及微量元素硒等。黄芪始载于《神农本草经》，其味甘、性温，归脾、肺经，具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌的功效。近来广泛应用于慢性肾病、心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病、溃疡、骨质疏松等病症的治疗。现将其药理作用简述如下。
1 对免疫系统的作用
1.1对非特异性免疫功能的影响 黄芪能显著增加血液中的白细胞总数，促进中性粒细胞及巨噬细胞的吞噬和杀菌能力。黄芪多糖(APS)能刺激自然杀伤细胞(NK细胞)的增殖，使其细胞体变大，核质比降低，与白细胞介素－2(IL－2)合用有协同作用。黄芪有促进诱生干扰素、促进小鼠淋巴细胞对羊血球的免疫特异玫瑰花结的形成、增加小鼠和组织内环核苷酸的含量、调节血糖浓度等作用。
1.2对体液免疫的影响 黄芪水提液可使肝炎患者的总补体和各补体含量升高。黄芪对体细胞、自然杀伤细胞释放免疫活性物质。对正常机体的抗体生成有明显的促进作用，能显著提高小鼠脾脏抗体形成细胞数。黄芪多糖能促进B细胞的活化、增值，增强宿主的体液免疫和细胞免疫来保护宿主抵抗胞内菌的感染。黄芪促进免疫功能的有效成分主要为多糖和皂苷，其中黄芪多糖是黄芪中免疫活性较强的有效成分。
2 延缓衰老作用
黄芪具有补虚抗衰的功效。黄芪能延长家蚕和果蝇的平均寿命，增加人胎肾和乳鼠肾细胞与人胎肺二倍体细胞体外培养的传代数，并使每代细胞的存活时间延长；使因衰老致细胞内血清超氧化物歧化酶(sOD)的降低速率及高尔基复合体、线粒体等细胞器的细胞结构的变化速率变缓、程度变轻；显著提高老年大鼠的血浆皮质醇含量，降低动物血清中过氧化脂质和肝脏脂褐素含量。减少自由基的生成，促进其清除。
3 对心血管系统的作用
3.1对心脏的影响 黄芪具有强心作用，黄芪皂苷具有明显的正性肌力作用。通过抑制心肌细胞内钙调蛋白的活性，使磷酸二酯酶活性降低，致使心脏收缩振幅增大，排血量增加，黄芪皂苷高浓度时对离体鼠心呈正性肌力作用，低浓度时则兴奋该酶而呈负性肌力作用。黄芪多糖可明显保护垂体后叶素引起的急性心肌缺血。
3.2对血管的影响 黄芪能扩张外周血管，可改善微循环，增加毛细血管抵抗力，降低动脉压及后负荷，防止理化因素所致的血管脆性和通透性的增加。还可通过抑制内钙释放和增加血浆一氧化氮(NO)的浓度扩张血管。
3.3对血压的影响 黄芪对多种动物均有降压作用，其降压特点是：作用迅速、持续时间短暂。对血压具有一定的双向调节作用。降压成分是黄芪皂苷甲等。黄芪煎剂给自发性高血压大鼠灌胃，可使血压的上升幅度有所控制，改善或逆转大鼠心肌羟脯氨酸、尿激肽释放酶、缓激肽及醛固酮的降低现象，以及纹状体甲脑啡肽、亮脑啡肽的含量及血浆。肾素水平的升高.提示黄芪对于原发性高血压有治疗意义。有研究显示黄芪对正常大鼠血压无明显作用，而且黄芪的控制血压作用与剂量有关，给药剂量越大，血压下降趋势越明显。
4 对血液系统的作用
黄芪通过抑制血小板钙调蛋白而使磷酸二酯酶的活性下降，使血小板内环磷酸腺苷(cAMP)含量增加，能明显抑制血小板的聚集。黄芪能促进骨髓造血，促进各类血细胞的生成、发育和成熟，使大鼠低下的红细胞和白细胞数恢复至正常水平。说明黄芪对造血功能有保护和促进作用。
5 其他作用
黄芪可明显提高机体抗应激能力，具有抗疲劳、耐低温、抗缺氧、抗辐射的作用。黄芪所含生物碱、黄酮和苷类等各部分均有直接抑杀病毒的作用。黄芪通过调节肾小球疾病蛋白质代谢紊乱，降低尿蛋白量，起到保肾作用。黄芪还有保肝、抗溃疡作用。黄芪对物质代谢也有影响，黄芪煎剂对体外培养的肝细胞、骨髓造血细胞DNA的合成均有促进作用；黄芪对糖代谢成双向调节作用。
神威黄芪注射液治疗病毒性心肌炎
病毒性心肌炎是由病毒感染侵犯心脏，产生的局限性或弥漫性心肌病变。其中以引起上呼吸道和肠道感染的各种病毒最为常见。近年来，由于对心肌炎的病原学进一步了解和诊断方法的改进，心肌炎已成为常见的心脏病之一，日益受到重视。胸闷、心悸常可提示心脏受累，心脏扩大、心律失常或心衰等为心脏明显受损的表现，心电图上ST-T改变与异位心律或传导阻滞反映心肌病变的存在。病毒性心肌炎的病变程度不一，所以症状也千差万别。轻度、局限性病变者可毫无症状，心电图无异常表现，血沉、心肌酶也无升高。重者则有明显症状，出现心脏弥漫性扩大，心力衰竭，以致有显著呼吸困难，不能平卧；严重者可伴有恶性心律失常，发生反复晕厥，甚至猝死。
目前西医对心肌炎及心肌病的治疗效果还不理想，对病毒性心肌炎患者来说，没有特效的抗病毒药物，对慢性心肌炎患者的心律失常疗效欠佳。
研究证实，黄芪注射液具有良好的免疫调节和抗病毒作用，对病毒所致的心肌炎性病变有明显保护作用，能增强心肌的抗病毒能力。对提高临床治疗有效率，降低死亡率，减少后遗症，及对患者生活质量的提高均有明显的优势。
陈晓培等的研究入选了48例病毒性心肌炎的患儿，随机分为治疗组和对照组(各24例)，对照组予常规治疗，治疗组在此治疗基础上加用神威黄芪注射液10~20 ml。结果显示，治疗组总有效率(91.7%)与对照组(70.8%)比较，差异具有统计学意义。治疗组治疗后心脏指数、左室射血分数等均较治疗前显著升高。表明黄芪注射液对病毒性心肌炎具有明显的治疗作用。
李克宁研究发现，对病毒性心肌炎组在常规治疗基础上，加用神威黄芪注射液20 ml，1次/日，静滴，15天为1个疗程，治疗2个疗程后，黄芪组总有效率(92%)优于对照组(64%)，差异有统计学意义。所以，在常规治疗基础上，加用黄芪注射液治疗病毒性心肌炎，可收到较好临床疗效，毒副作用小且安全性高。
神威黄芪注射液治疗心力衰竭
目前，心力衰竭(心衰)定义为由任何结构性和功能性心脏疾病导致心室舒张和收缩功能受损而引起的一组临床综合征，强调心衰是一种症状性和进展性的疾病(表1)。心衰以其发病率高、病死率高引起世界范围内的高度重视。
临床中，心衰的治疗遵循：①纠正血液动力学异常，减轻、缓解症状；②提高运动耐量、改善生活质量；③防止心肌进一步损害，延缓心衰进展；④提高生存率，降低发病率、死亡率。治疗上不能仅限于缓解症状，要以抑制左室重构、改善左室功能为主，延缓疾病进展，从而达到提高生活质量和降低死亡率的目的。
目前，西药一般为祛除病因、减轻心脏负荷、增加心肌收缩力着手。而中药主要应用着眼于整体调节，稳定内环境，促进各脏器的功能恢复。
文旺秀等应用黄芪注射液40 ml，1次/日，静滴，2周为1个疗程，中西医结合治疗50例慢性心衰患者，与西药对照组26例比较，黄芪注射液组总有效率明显高于对照组，心功能每搏量、左室射血分数、心输出量、心脏指数等有明显提高。
李绍敏等应用黄芪注射液20 ml配合西药治疗54例严重慢性心衰患者(黄芪组)与单用西药治疗的36例对比，临床心功能疗效黄芪组总有效率(81.5%)显著高于对比组(61.1%)。提示黄芪注射液除有助于改善心功能外，还可缩小QT离散度(QTd)，减少心衰患者心肌复极的差异性。
临床应用策略
神威黄芪注射液具有益气养元、扶正祛邪、养心通脉、健脾利湿的功效，主要用于心气虚损、血脉瘀阻之病毒性心肌炎、心功能不全及脾虚湿困之肝炎等。临床中一般采用肌内注射，2～4 ml/次，1～2次/日；静滴，10～20 ml/次，1次/日，或遵医嘱。需要注意，静滴时，必须稀释以后使用。严格控制滴注速度和用药剂量。建议滴速＜40滴/分，一般控制在15~30滴/分。根据患者年龄、病情、体征等从低剂量开始，缓慢滴入。首次用药，宜选用小剂量，慢速滴注。
关键词黄芪多糖;生物活性;家禽;应用
黄芪多糖(Astragalus Polysaccharide，APS)是中药黄芪的主要活性成分之一，主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成，能够增强巨噬细胞的吞噬与分泌作用，具有调节免疫、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、抗辐射和抗应激等作用。目前作为免疫增强剂和抗病毒药物在畜禽养殖业中已开始应用[1]。该文就黄芪多糖在家禽养殖业中的应用进行综述。
1促进动物生长
黄芪多糖内含氨基酸、维生素、微量元素等多种营养物质和未知生长因子，添加有黄芪多糖的膳食饲料可明显提高回肠氨基酸的消化率[2]，作为饲料添加剂可显著提高家禽的肉蛋奶品质及产量。据报道，星杂蛋雏鸡饲喂黄芪精制多糖后增重较明显，特别是在用药第1周和减少用药次数以后增重效果更加明显[3]。李立顺等[4]在鸡、鸭、鹅的饲料中添加黄芪多糖，料肉比有所降低，生长速度明显加快，产蛋率提高5.20%~7.14%，成活率提高3%～5%，淘汰死亡率降低，蛋黄的颜色和蛋壳的色泽加深。
2增强免疫功能
2.1促进免疫器官的发育
黄芪多糖能够促进动物胸腺、脾脏和法氏囊的生长，抵抗免疫抑制剂对免疫器官的损害或修复受损的免疫器官，维持机体的正常免疫机能。李 诺等[3]研究40只星杂蛋雏鸡饲喂黄芪精制多糖发现，与对照组相比较，鸡的免疫器官重量升高，特别是腔上囊指数最高，49日龄时的胸腺指数是对照组的2倍以上。
2.2促进特异性免疫
黄芪多糖能够加速细胞免疫功能的发育与完善，促进浆细胞增生与机体抗体的形成，从而使抗体形成细胞数和溶血测定值显著提高，血清免疫球蛋白IgG、IgA 和IgM水平以及T、B 淋巴细胞活性增高[5]。王金宝等[6]报道，复方APS可显著提高鸡血液中白细胞、淋巴细胞数量，提高淋巴细胞百分率，并使因环磷酰胺降低的白细胞及淋巴细胞数量、淋巴细胞百分率恢复至正常水平。
2.3促进非特异性免疫
黄芪多糖能显著提高机体的非特异性免疫。单俊杰等[7]研究表明，黄芪多糖能增加小鼠腹腔巨噬细胞数量，显著促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能。另外，翁玲等[8]通过研究黄芪多糖粉针剂(APS—P)对正常及化疗小鼠免疫功能的影响发现，APS—P能够有效地促进化疗后小鼠免疫系统功能的恢复，增进对S180荷瘤小鼠NK细胞的杀伤能力。
3治疗病毒性与肿瘤性疾病
3.1治疗鸡新城疫(NCD)
黄芪多糖对NCD有显著的治疗作用。胡元亮等[9]研究报道，鸡胚成纤维细胞(CEF)培养液中加入5种浓度的APS，再培养12 h后接种NDV Ⅳ系，于接种后72 h测定CEF活性，以此评价APS对细胞增殖及其抵抗病毒感染的影响。测定结果表明，用1 600、1200 μg/mL浓度的APS可显著促进CEF增殖，1 200 μg/mL浓度显著促进CEF抵抗鸡新城疫病毒的感染。
3.2治疗鸡传染性法氏囊病(IBD)
APS注射液(抗病毒Ⅰ号注射液)能诱导机体产生干扰素，调节机体免疫功能，促进抗体形成。施志玉等[10]研究表明，黄芪多糖能显著提高血清中传染性法氏囊病毒抗体效价，促进T淋巴细胞增殖，且低剂量的效果优于高剂量。王 令等[11]报道，APS注射液治疗IBD，治愈率高达98.6%。胡元亮等[12]成功研制出由黄芪等中药组成的“芪蓝抗毒饮”，无论单用或与鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)疫苗合用，均有较好的预防IBD的效果和增强免疫作用，能明显减轻IBDV引起的法氏囊损伤。
3.3治疗鸡马立克氏病(MD)
近年来的研究发现，APS可改善机体因肿瘤而致的免疫功能低下，促进免疫细胞活化释放内源因子，增强动物体内抗氧化酶系统的功能，降低过氧化脂质含量，防止过氧化作用造成对肿瘤细胞的杀伤和抑制，从而降低MD的发病率和死亡率。郝艳红等[13]试验表明，1日龄雏鸡用马立克氏强毒株人工感染并注射APS后，可使MD的发病率和死亡率下降。
3.4治疗禽流感(AI)
黄芪多糖具有抑制流感病毒生长及抑制唾液酸酶活性的能力，黄芪A6组分对流感病毒胞膜功能及影响病毒对敏感细胞的吸附和穿入有明显作用。张靖飞[14]采用复方APS治疗禽流感(H5)，大大降低了鸡的死亡率和产蛋率下降幅度，且在产蛋率和蛋壳质量恢复方面明显优于金刚烷胺对照组。
4展望
APS具有毒副作用小、无残留、生物学作用广泛等特点，具有强大的发展潜能。目前，APS的剂型很多，包括针剂、片剂、散剂、颗粒剂、水剂等，使用时可根据具体临床情况选用不同的剂型。在家禽养殖业中，它作为饲料添加剂、免疫增强剂、疫苗佐剂、以及与其他治疗药物配合使用，是动物防病保健与治疗疾病的理想选择，对保证畜产品的质量与安全具有重要意义。
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【摘要】
目的以微波从黄芪中提取多糖，并测定其含量。方法运用微波技术提取黄芪多糖，采用正交设计法优选苯酚-浓硫酸法显色条件，并测定其多糖含量。结果苯酚-浓硫酸法的最佳显色条件为5%苯酚溶液的用量为1 ml，浓硫酸用量为5 ml，水浴温度为100℃，水浴时间为15 min；微波辅助提取黄芪多糖的最佳功率和时间为900 W和30 min。结论微波辅助提取黄芪多糖，反应速度加快，实验结果令人满意。
【关键词】 黄芪 多糖 苯酚-硫酸法 微波提取
Abstract:ObjectiveTo extract polysaccharides from Radix Astragali. with the microwave technology and determine its content. MethodsThe polysaccharides from Radix Astragali. were obtained by microwave technology. The way of coloration in the process of determining the content of polysaccharides from Radix Astragali was optimized by phenol-sulfuric acid method. ResultsThe optimum way of coloration was obtained as follows：1.0 ml 5%phenol solution was added to 2.0 ml testing solution and mixed. Then 5.0 ml concerntrated sulfuric acid was added quickly drop by drop. After set at ambience for 5 min， heated in boiled water for 15 min， followed by cooling in cold water; the result indicated that the best extraction was carried out under 900W microwave power for 30 min.ConclusionThe polysaccharides can be obtained from Radix Astragali by microwave technology.
Key wordsRadix Astragali; Polysaccharides; Phenol-sulfuric acid method; Microwave
黄芪是豆科植物蒙古黄芪 Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge．var．mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch)Bge．的干燥根，是重要的益气中药，其性甘、温，入肺、脾经，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌的功效［1］。黄芪的化学成分主要为多糖类、皂苷类、黄酮类及氨基酸类，另外还含有单糖、低聚糖、黏液质、苦味素、胆碱、甜菜碱、叶酸等成分［2］。黄芪多糖是黄芪补气的主要活性物质，大量体内外实验及临床研究表明，黄芪多糖具有增强机体免疫功能、强心、降压、降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效［3］。
近年来微波技术在天然产物成分提取领域得到了很大的发展和应用，主要是利用微波的热效应。微波加热具有穿透力强、选择性高、加热效率高、耗能少、成本低、操作简便等特点。微波辅助提取法提取产物的副产品少，易分离提取，且微波加热易使植物细胞壁破裂而有效提高提取率。
目前黄芪多糖的微波辅助提取的有关报道较少，本文采用微波辅助水提醇析法提取黄芪多糖并用苯酚-浓硫酸法测定多糖含量，为以后黄芪多糖微波提取法的开发利用提供依据。
1 仪器与材料
UV-1601型可见紫外分光光度计（日本岛津）。AB-104型电子分析天平（梅特勒-托利多上海仪器有限公司生产）。冷冻干燥机（Edwards）。中空纤维膜（截流 Mr 6 000，天津膜天膜工程技术有限公司）。
黄芪购于天津市中药饮片厂，经天津药物研究院中药现代研究部张铁军研究员鉴定为蒙古黄芪。葡萄糖（分析纯，天津市化学试剂一厂）。苯酚（分析纯，天津市化学试剂一厂）。硫酸（分析纯，天津市化学试剂三厂）。其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 精制黄芪多糖的制备
取黄芪饮片500 g，加入10倍量的蒸馏水70℃浸提2 h，滤过，滤渣加入8倍量水再次提取2 h，滤过。两次滤液合并后浓缩至400 ml，加入2.5倍量95%乙醇，低温静置过夜，离心，沉淀用150 ml蒸馏水溶解后，加入等体积5%三氯乙酸-正丁醇液反复3次除蛋白，离心，上清液用2 mol/L NaOH调pH=7.0，离心，上清液加入2.5倍量95%乙醇4℃静置48 h，离心，沉淀用75 ml蒸馏水溶解，离心，上清液用中空纤维膜超滤，截留分子量6 000以上的药液，浓缩，冷冻干燥得黄芪多糖纯品。
2.2 黄芪多糖的含量测定方法
2.2.1 精制黄芪多糖供试液的制备
精密称定60℃干燥至恒重的黄芪多糖10 mg，加少量蒸馏水，微热使其全部溶解后，定容至250 ml量瓶中。
2.2.2 5%苯酚试剂的配制
取苯酚100 g，加铝片0.1 g和碳酸氢钠0.05 g，蒸馏，收集182℃馏分，称取此馏分5 g，加水定容至100 ml，置棕色瓶中存冰箱备用。
2.2.3 苯酚-浓硫酸法最大吸收波长的确定
精密吸取2 ml精制黄芪多糖供试液，另精密吸取蒸馏水2 ml作空白对照，分别加入5%苯酚溶液1 ml，混合均匀后快速加入浓硫酸5.0 ml，即刻摇匀，室温静置5 min，沸水浴加热20 min，取出，流水冷至室温，用紫外可见分光光度计在190～900 nm范围内扫描，确定最大吸收波长为490 nm。
2.2.4 显色方法的优选
设计5%苯酚溶液的用量（A）、浓硫酸的用量（B）、水浴的温度（C）、水浴的时间（D）4个因素，每个因素取3个水平，选用L9（34）正交表进行实验。每组实验均精密量取精制黄芪多糖供试液2.0 ml，按正交表中方案显色，测定490 nm波长处的吸收度，以吸收值为评价指标，另同时测定2 h内吸收值的稳定性（每间隔30 min测1次），计算吸收值的RSD。见表1～2。表1 因素水平（略）表2 L9（34）正交实验结果（略）
由表2可见，以吸收度为主要考察指标，极差R值大小显示各因素作用主次为D>C>A>B，直观分析其最佳显色条件组合为A1B2C1D1。经过方差分析，以吸收度为主要考察指标，A，B，C，D因素对吸收值大小的影响均无显著意义。综合直观分析和方差分析结果，同时考虑操作的简便和条件的易控性，最终确定最佳显色条件为待测溶液2 ml，加入5%苯酚溶液1 ml，混匀，迅速滴加浓硫酸5 ml，摇匀，室温放置5 min，沸水浴加热15 min，取出，流水冷至室温。
2.2.5 方法学考察
标准葡萄糖溶液的配制：精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100 mg于100 ml量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，取此溶液10 ml置于100 ml量瓶中，定容至刻度，制成浓度为100 μg·ml-1的标准葡萄糖溶液。
样品溶液的制备：精密称取黄芪粉末（过30目筛）适量，置于微波提取器中，加80%乙醇，调节功率为900 W，回流提取20 min，滤过，滤液弃去，残渣挥干乙醇，加入蒸馏水250 ml，称重，于900 W，回流提取20 min，放冷，补足重量。精密量取上述溶液1 ml，置200 ml量瓶中，加蒸馏水定容于刻度，即可用于黄芪多糖的测定。
标准曲线的配制：精密吸取标准葡萄糖溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2 ml于10 ml具塞试管中，补加蒸馏水至2 ml；另精密吸取蒸馏水2 ml作空白对照，分别加入5%苯酚溶液1 ml，混合均匀后快速加入浓硫酸5.0 ml，即刻摇匀，室温静置20min，于分光光度计490 nm处测定吸收度。以吸收度A为纵坐标，葡萄糖浓度C为横坐标绘制标准曲线，可得回归方程：A=0.014 36C + 0.019 73，r=0.999 5。葡萄糖浓度在10～60 μg/ml范围内，与吸光度呈良好的线性关系。
精密度实验：分别量取多糖样品溶液2.0 ml，以“标准曲线”项下的操作，对同一样品液连续测定5次。结果表明：采用苯酚-硫酸法测定样品中多糖含量精密度良好，RSD为0.034%，符合含量测定要求。
重复性实验：精密称取同批黄芪粉末30 g，共6份，按“样品溶液的制备”项下方法操作，制备多糖样品溶液6份，进行含量测定。RSD=0.94%，结果表明本方法重复性良好。
稳定性实验：取同一样品溶液，显色后间隔一定时间，在490 nm波长处分别测定吸光度。实验结果表明，样品溶液显色后在2.0 h内稳定。
回收率实验：精密量取已知含量的同批样品溶液6份，每份各1 ml置10 ml具塞试管中，再精密量取1 ml精制多糖供试液加入其中，以“标准曲线”项下的操作，测定回收率。结果回收率平均值为100.3%，RSD=2.049%（n=6）。
2.2.6 换算因子的测定
分别取0.2 ml黄芪多糖供试液，以“标准曲线”项下操作测定A值，计算供试液中葡萄糖含量，按下式计算换算因子 f=W/CD。
式中：C为供试液中葡萄糖含量（μg/ml）；f为换算因子；
D为供试液的稀释因素；W为样品重量(μg)
测得换算因子f= 1.073 1，RSD=0.720 7%(n=3)。
2.3 微波辅助提取黄芪多糖
2.3.1 微波功率对黄芪多糖提取的影响精密称取黄芪粉末（过30目筛）30 g，置于微波提取器中，加80%乙醇，调节功率为900 W，回流提取20 min，滤过，滤液弃去，残渣挥干乙醇，加入蒸馏水250 ml，称重，分别于200，400，600，900，1 000 W，回流提取20 min，放冷，补足重量。精密量取上述溶液1 ml，置200 ml量瓶中，加蒸馏水定容于刻度，即可用于黄芪多糖的测定。分别精密量取上述黄芪多糖待测液2.0 ml，按照“标准曲线”项下的操作，测定多糖的含量。结果见表3。表3 微波功率对黄芪多糖提取的影响（略）
由表3可以看出，在其它实验条件不变的情况下，提取液中黄芪多糖的含量随着微波功率的增大，在600～900 W时出现一个突跃，之后随着功率的增大，多糖含量虽有增大的趋势，但是较为缓和。因此，考虑使用900 W的功率提取黄芪多糖。
2.3.2 提取时间对黄芪多糖提取的影响精密称取黄芪粉末（过30目筛）30 g，置于微波提取器中，加80%乙醇，调节功率为900 W，回流提取20 min，滤过，滤液弃去，残渣挥干乙醇，加入蒸馏水250 ml，称重，分别于900 W，回流提取5，10，20，30，40 min，放冷，补足重量。精密量取上述溶液1 ml，置200 ml量瓶中，加蒸馏水定容于刻度，即可用于黄芪多糖的测定。分别精密量取上述黄芪多糖待测液2.0 ml，按照“标准曲线”项下的操作，测定多糖的含量。结果见表4。表4 提取时间对黄芪多糖提取的影响（略）
由表4的数据，可以看出提取30 min后黄芪多糖已基本提取完全。
综上所述，可以初步确定在液料比不变的情况下，微波辅助提取黄芪多糖的最佳条件是900 W，提取30 min。
3 讨论
本实验利用低聚糖、单糖在80%乙醇中易溶解而多糖不溶解的特性，设计黄芪多糖的微波提取工艺。乙醇浓度的稍微不同将造成实验结果的显著差异，因此实验中要严格控制乙醇浓度为80%。
在黄芪多糖纯化的过程中，本实验采用了三氯乙酸-正丁醇液除去蛋白质，此法蛋白质去除效率高，同时有脱色的作用，但要在低温条件下操作，否则易造成多糖的降解。
苯酚-硫酸法和蒽醌-浓硫酸法目前被认为是测定糖含量的较理想方法。实验中比较两种方法，结果苯酚-浓硫酸法的准确性较好，灵敏度较高，适用面较广泛，因此选择苯酚-浓硫酸法作为本实验的含量测定方法。其原理为糖类物质在浓硫酸作用下，先水解成单糖分子，并迅速脱水生成糖醛衍生物，糖醛衍生物再与苯酚形成有色化合物，在490 nm处有特征性吸收峰。
目前对黄芪多糖的研究较为充分，黄芪多糖粉针剂已作为抗癌辅助药应用于临床，然而针对黄芪多糖的微波辅助提取研究较少。本实验中比较了加热回流法与微波辅助提取法提取黄芪多糖，发现在黄芪多糖提取率接近的情况下，微波辅助提取法较加热回流提取法的提取时间缩短了将近8倍。实验中使用单因素考察法考察了微波功率与提取时间对黄芪多糖的影响，初步确定了提取工艺的参数。在今后的研究还要使用正交设计法考察各因素协同对黄芪多糖提取的影响，并研究微波辅助提取法对黄芪中其它成分提取的影响。
【参考文献】
［1］陈阿琴，杨志刚，俞颂东，等. 黄芪多糖药理作用研究进展［J］.中国兽药杂志，2005，39(9)：33..
［2］段亚丽，谢梅冬. 黄芪化学成分及其有效成分黄芪甲苷含量测定的研究现状［J］.中国兽药杂志，2005，39(3)：35.