抗癌中药范文

抗癌中药篇1

【关键词】 中药；肝癌；抗癌作用

肿瘤的发生是一个长期的、多阶段的、多基因改变积累的过程，具有多基因控制和多个因素调节的复杂性。因此，药物抗肿瘤作用的机理也是多方面、多层次的。中药作为我国传统防治疾病的武器，因其有多靶点、多效应、不良反应低、能提高机体免疫力、不宜产生耐药性等优点，在肿瘤治疗中占有重要地位。原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤，占各种恶性肿瘤死亡率的第二位。因其起病隐匿，进展迅速，发现时已多属中晚期。故而手术治疗效果差，放化疗又都有明显不良反应，导致肝癌患者生存质量差，生存期短。而以中医药为主的综合治疗对控制肝癌患者病情发展，改善生活质量，延长生存期有着重要意义。近几年来，人们从中药中找到并开发出许多有治疗价值的抗肝癌药物，如紫杉醇、拓扑替康、康莱特等，并对其抗肿瘤活性成分和作用机制进行了深入的研究。本文就中药抗肝癌的作用综述如下。

1抑制肝癌细胞增殖

肿瘤的基本特征之一是增殖失控。司维柯等[1]研究发现，一定浓度苦参碱处理HepG2 细胞后，在代谢水平和基因水平上均抑制了HepG2细胞的恶性增殖。莪术油能抑制小鼠HepA肝癌细胞增殖，免疫组化显示反映细胞增殖活性的细胞增殖核抗原（PCNA）表达受抑制[2]。施公胜等[3]观察了鳖甲煎丸和大黄蛰虫丸联合蟾蜍制剂对大鼠肝癌的抑制作用，发现联合制剂可以降低大鼠死亡率，减少癌结节的形成，降低PCNA 阳性率。

2诱导肝癌细胞分化

分化不足也是肿瘤基本特征之一，细胞分化也是一个多因子参与的、严密调节的程序控制过程。胡兵等[4]发现中药复方龙力胶囊对人肝癌HCC-9204 细胞有诱导分化作用，能改善HCC-9204 细胞的异型性，降低其集落形成能力，降低AFP分泌量及γ-GT活力，提高ALB 分泌量。盼生安对BEL-7402肝癌细胞有诱导分化作用，可使BEL-7402肝癌细胞生长速度显著减慢，细胞及细胞核的面积、等效直径、等效体积、核浆比均随着剂量的增大而减小，同时AgNORs颗粒和面积明显减少，细胞周期出现向G0/G1期移行的特征动力学改变[5]。

3诱导肝癌细胞凋亡

凋亡受阻是肿瘤细胞的另外一个基本特征。诱导肿瘤细胞凋亡是目前肿瘤治疗研究的热点，现已证明有许多中药具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。三氧化二砷可诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡，凋亡基因baxmRNA表达上调[6]。10μg/mL叶酸可诱导SMMC-7721细胞出现凋亡特征性形态改变，其细胞DNA电泳呈现“梯状”断裂现象，S期细胞减少[7]。郑国灿等[8]研究发现丹参酮Ⅰ能抑制HepG2 细胞生长，阻滞HepG2 细胞周期于G0/G1 期并诱导细胞凋亡。

4直接杀伤肝癌细胞作用

近年来研究表明，某些中药成份对肿瘤细胞有直接杀伤能力。陆峰等[9]利用傅立叶变换红外光谱法（FTIR），通过对完整的细胞红外光谱变化分析，观察鱼腥草、柴胡、夏枯草、茵陈4味中药水提液对肝癌细胞SMMC-7721的作用，发现4种抗癌中药都具有对癌细胞中膜结构的破坏作用。张卿等[10]用薤白挥发油处理小鼠肝肿瘤细胞H22，发现在给药后癌细胞胞浆内出现大量空泡，线粒体空泡样变、髓样变，核异染色质边集，核固缩、核碎裂，核仁内有空泡，细胞解体。

5抑制端粒酶活性

端粒酶在肿瘤细胞中起着重要作用，能稳定染色体DNA而使细胞获得永生。抑制端粒酶活性可能会恢复肿瘤细胞的衰老程序，因而可能是肿瘤治疗的靶点之一[11]。楼芳等[12]发现三氧化二砷能显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721和QGY-7703端粒酶活性，并呈现出典型的剂量相关性和时间依赖性。健脾理气中药能抑制H22肝癌荷瘤小鼠及人肝癌细胞株SMMC-7721端粒酶活性，提示这可能是其抗肿瘤作用机制的一部分[13]。

6抑制肿瘤血管形成

肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤血管，破坏或抑制肿瘤血管的生成可以有效地抑制肿瘤的生长和转移。如三氧化二砷可使大鼠肝癌细胞血管内皮生成因子合成减少，微血管密度降低，肿瘤细胞增殖受抑[14]。鲜壁虎冻干粉可降低小鼠H22肝细胞癌组织血管内皮生成因子、碱性成纤维细胞因子蛋白的表达，使肿瘤组织内微血管密度下降，抑制H22小鼠肿瘤生长[15]。

7抑制拓扑异构酶活性

拓扑异构酶(Topo)在DNA复制、转录、重组，以及在形成正确的染色体结构、染色体分离中发挥重要的作用。张军等[16]研究了新一代水溶性、半合成喜树碱类衍生物拓扑替康(TPT)对肝癌细胞株HepG2的作用。TPT能选择性作用于S期的细胞，在S期DNA复制过程中，通过与TopoⅠ-DNA复合物结合，抑制TopoⅠ重新连接DNA单链的活性，导致DNA大量断裂位点的产生，并出现不可逆的DNA损伤，引起细胞死亡，其作用存在明显的剂量、时间依赖关系。吴理茂等[17]用青蒿琥酯作用于肝癌细胞SMMC-7721，结果发现经青蒿琥酯处理的SMMC-7721细胞，拓扑异构酶活性增强，凋亡细胞明显增加，提示青蒿琥酯抗肝癌作用机理与增强拓扑异构酶活性有关。

8 逆转肝癌细胞耐药性

肿瘤多药耐药（MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因。MDR的发生机制很复杂，其中多药耐药基因1(MDR1)编码的p－糖蛋白(P－gp)高表达为其主要机制。李起等[18]发现肝癌－1号可部分抑制HepG2/ADM细胞P－gp合成及MDR1mRNA的表达，可逆转HepG2/ADM的耐药性，对阿霉素、表阿霉素、氟尿嘧啶的逆转倍数分别为3.94、1.72、1.67。朱健强等[19]研究证实，柴胡提取物可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降，细胞内VCR浓度升高。表明柴胡提取物可以部分逆转BEL-7402细胞的多药耐药(MDR)，钙离子通道阻滞作用可能为其作用机制之一。

9对细胞骨架蛋白的影响

紫杉醇类药物能稳定微管动力学，在有丝分裂中后期抑制细胞分裂，从而使肿瘤细胞停止在G2期和M期，导致细胞死亡[20]。何松等[21]观察了紫杉醇对肝癌QGY细胞的作用，发现随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对QGY细胞的增殖抑制作用就越明显，形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞。白锦雯等[22]用二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌动物模型，以青椒碱治疗，结果显示二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌细胞的骨架丝状结构遭到破坏、断裂并聚集成团块，治疗组细胞骨架有明显的恢复，提示青椒碱可通过影响细胞骨架对大鼠实验性肝癌细胞起到治疗作用。

10调节机体免疫力

肿瘤的发生和发展与整个机体的免疫功能密切相关，增强机体的免疫功能可以提高人体的抗瘤能力。中药提取物FAC能使荷H22肝癌实体瘤小鼠存活期明显延长，反映免疫功能的胸腺指数和脾指数显著增加，巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化功能明显增强[23]。黎洪浩等[24]研究了托里消毒散对手术前后肝癌患者细胞免疫功能的影响，与不用药对照组相比，肝癌切除术前和术后服用托里消毒散均可提高患者的细胞免疫功能。孙艳等[25]观察冬虫夏草对H22肝癌小鼠化疗后NK细胞活性、淋巴细胞增殖、IL-2水平的影响，结果发现冬虫夏草可对抗或恢复肿瘤对化疗药导致的免疫抑制或免疫缺损。

11抑制肝癌转移与复发

肝癌的恶性度高表现之一就是转移早，复发率高。研究表明某些天然传统中药或其提取物可抑制肝癌转移与复发。黄芩甙是从黄芩中提取、分离出来的一种黄酮类化合物，研究发现黄芩甙能明显抑制肝癌细胞BEL-7402侵袭力、粘附力及运动能力[26]。华海清等[27]用人肝癌细胞株SMMC-7721和人脐静脉内皮细胞株ECV304作为研究对象，结果发现人参皂苷Rg3具有抗人肝癌细胞侵袭和转移的作用，机制可能与其能够抑制肝癌细胞侵袭活力、调节与肝癌细胞侵袭与转移密切相关的基因表达和抗肿瘤血管形成有关。孙婧璟等[28]研究显示蛇毒可抑制SMMC-7721与SMMC-7721细胞、内皮细胞的粘附，并可防治早期和晚期裸鼠人肝癌转移模型切除术后的肝内和远处转移复发。

12抑制线粒体活性

肖正明等[29]研究显示中药黄芪水提物可降低体外培养的人肝癌细胞的线粒体活性，与对照组相比，7天后降为起始浓度的10.2%，与对照组相差62.9倍。李煜等[30]用透射电镜观察了不同剂量盼生安处理BEL-7402肝癌细胞后对超微结构的影响，结果表明盼生安主要导致显著的线粒体超微结构改变，胞浆空泡化，抑制了肿瘤细胞的能量代谢和蛋白质合成系统而使细胞功能减退，代谢缓慢最终使细胞退变死亡。x

【摘要】 肿瘤的发生是一个多阶段、多因素的过程，药物抗肿瘤也是多方面、多层次的，本文从中药抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、促进细胞分化、增强机体免疫力等14个方面综述了近几年来中药抗肝癌作用及机理。

【关键词】 中药；肝癌；抗癌作用

肿瘤的发生是一个长期的、多阶段的、多基因改变积累的过程，具有多基因控制和多个因素调节的复杂性。因此，药物抗肿瘤作用的机理也是多方面、多层次的。中药作为我国传统防治疾病的武器，因其有多靶点、多效应、不良反应低、能提高机体免疫力、不宜产生耐药性等优点，在肿瘤治疗中占有重要地位。原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤，占各种恶性肿瘤死亡率的第二位。因其起病隐匿，进展迅速，发现时已多属中晚期。故而手术治疗效果差，放化疗又都有明显不良反应，导致肝癌患者生存质量差，生存期短。而以中医药为主的综合治疗对控制肝癌患者病情发展，改善生活质量，延长生存期有着重要意义。近几年来，人们从中药中找到并开发出许多有治疗价值的抗肝癌药物，如紫杉醇、拓扑替康、康莱特等，并对其抗肿瘤活性成分和作用机制进行了深入的研究。本文就中药抗肝癌的作用综述如下。

1抑制肝癌细胞增殖

肿瘤的基本特征之一是增殖失控。司维柯等[1]研究发现，一定浓度苦参碱处理HepG2 细胞后，在代谢水平和基因水平上均抑制了HepG2细胞的恶性增殖。莪术油能抑制小鼠HepA肝癌细胞增殖，免疫组化显示反映细胞增殖活性的细胞增殖核抗原（PCNA）表达受抑制[2]。施公胜等[3]观察了鳖甲煎丸和大黄蛰虫丸联合蟾蜍制剂对大鼠肝癌的抑制作用，发现联合制剂可以降低大鼠死亡率，减少癌结节的形成，降低PCNA 阳性率。

2诱导肝癌细胞分化

分化不足也是肿瘤基本特征之一，细胞分化也是一个多因子参与的、严密调节的程序控制过程。胡兵等[4]发现中药复方龙力胶囊对人肝癌HCC-9204 细胞有诱导分化作用，能改善HCC-9204 细胞的异型性，降低其集落形成能力，降低AFP分泌量及γ-GT活力，提高ALB 分泌量。盼生安对BEL-7402肝癌细胞有诱导分化作用，可使BEL-7402肝癌细胞生长速度显著减慢，细胞及细胞核的面积、等效直径、等效体积、核浆比均随着剂量的增大而减小，同时AgNORs颗粒和面积明显减少，细胞周期出现向G0/G1期移行的特征动力学改变[5]。

3诱导肝癌细胞凋亡

凋亡受阻是肿瘤细胞的另外一个基本特征。诱导肿瘤细胞凋亡是目前肿瘤治疗研究的热点，现已证明有许多中药具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。三氧化二砷可诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡，凋亡基因baxmRNA表达上调[6]。10μg/mL叶酸可诱导SMMC-7721细胞出现凋亡特征性形态改变，其细胞DNA电泳呈现“梯状”断裂现象，S期细胞减少[7]。郑国灿等[8]研究发现丹参酮Ⅰ能抑制HepG2 细胞生长，阻滞HepG2 细胞周期于G0/G1 期并诱导细胞凋亡。

4直接杀伤肝癌细胞作用

近年来研究表明，某些中药成份对肿瘤细胞有直接杀伤能力。陆峰等[9]利用傅立叶变换红外光谱法（FTIR），通过对完整的细胞红外光谱变化分析，观察鱼腥草、柴胡、夏枯草、茵陈4味中药水提液对肝癌细胞SMMC-7721的作用，发现4种抗癌中药都具有对癌细胞中膜结构的破坏作用。张卿等[10]用薤白挥发油处理小鼠肝肿瘤细胞H22，发现在给药后癌细胞胞浆内出现大量空泡，线粒体空泡样变、髓样变，核异染色质边集，核固缩、核碎裂，核仁内有空泡，细胞解体。

5抑制端粒酶活性

端粒酶在肿瘤细胞中起着重要作用，能稳定染色体DNA而使细胞获得永生。抑制端粒酶活性可能会恢复肿瘤细胞的衰老程序，因而可能是肿瘤治疗的靶点之一[11]。楼芳等[12]发现三氧化二砷能显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721和QGY-7703端粒酶活性，并呈现出典型的剂量相关性和时间依赖性。健脾理气中药能抑制H22肝癌荷瘤小鼠及人肝癌细胞株SMMC-7721端粒酶活性，提示这可能是其抗肿瘤作用机制的一部分[13]。

6抑制肿瘤血管形成

肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤血管，破坏或抑制肿瘤血管的生成可以有效地抑制肿瘤的生长和转移。如三氧化二砷可使大鼠肝癌细胞血管内皮生成因子合成减少，微血管密度降低，肿瘤细胞增殖受抑[14]。鲜壁虎冻干粉可降低小鼠H22肝细胞癌组织血管内皮生成因子、碱性成纤维细胞因子蛋白的表达，使肿瘤组织内微血管密度下降，抑制H22小鼠肿瘤生长[15]。

7抑制拓扑异构酶活性

拓扑异构酶(Topo)在DNA复制、转录、重组，以及在形成正确的染色体结构、染色体分离中发挥重要的作用。张军等[16]研究了新一代水溶性、半合成喜树碱类衍生物拓扑替康(TPT)对肝癌细胞株HepG2的作用。TPT能选择性作用于S期的细胞，在S期DNA复制过程中，通过与TopoⅠ-DNA复合物结合，抑制TopoⅠ重新连接DNA单链的活性，导致DNA大量断裂位点的产生，并出现不可逆的DNA损伤，引起细胞死亡，其作用存在明显的剂量、时间依赖关系。吴理茂等[17]用青蒿琥酯作用于肝癌细胞SMMC-7721，结果发现经青蒿琥酯处理的SMMC-7721细胞，拓扑异构酶活性增强，凋亡细胞明显增加，提示青蒿琥酯抗肝癌作用机理与增强拓扑异构酶活性有关。

8 逆转肝癌细胞耐药性

肿瘤多药耐药（MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因。MDR的发生机制很复杂，其中多药耐药基因1(MDR1)编码的p－糖蛋白(P－gp)高表达为其主要机制。李起等[18]发现肝癌－1号可部分抑制HepG2/ADM细胞P－gp合成及MDR1mRNA的表达，可逆转HepG2/ADM的耐药性，对阿霉素、表阿霉素、氟尿嘧啶的逆转倍数分别为3.94、1.72、1.67。朱健强等[19]研究证实，柴胡提取物可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降，细胞内VCR浓度升高。表明柴胡提取物可以部分逆转BEL-7402细胞的多药耐药(MDR)，钙离子通道阻滞作用可能为其作用机制之一。

9对细胞骨架蛋白的影响

紫杉醇类药物能稳定微管动力学，在有丝分裂中后期抑制细胞分裂，从而使肿瘤细胞停止在G2期和M期，导致细胞死亡[20]。何松等[21]观察了紫杉醇对肝癌QGY细胞的作用，发现随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对QGY细胞的增殖抑制作用就越明显，形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞。白锦雯等[22]用二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌动物模型，以青椒碱治疗，结果显示二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌细胞的骨架丝状结构遭到破坏、断裂并聚集成团块，治疗组细胞骨架有明显的恢复，提示青椒碱可通过影响细胞骨架对大鼠实验性肝癌细胞起到治疗作用。

10调节机体免疫力

肿瘤的发生和发展与整个机体的免疫功能密切相关，增强机体的免疫功能可以提高人体的抗瘤能力。中药提取物FAC能使荷H22肝癌实体瘤小鼠存活期明显延长，反映免疫功能的胸腺指数和脾指数显著增加，巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化功能明显增强[23]。黎洪浩等[24]研究了托里消毒散对手术前后肝癌患者细胞免疫功能的影响，与不用药对照组相比，肝癌切除术前和术后服用托里消毒散均可提高患者的细胞免疫功能。孙艳等[25]观察冬虫夏草对H22肝癌小鼠化疗后NK细胞活性、淋巴细胞增殖、IL-2水平的影响，结果发现冬虫夏草可对抗或恢复肿瘤对化疗药导致的免疫抑制或免疫缺损。

11抑制肝癌转移与复发

肝癌的恶性度高表现之一就是转移早，复发率高。研究表明某些天然传统中药或其提取物可抑制肝癌转移与复发。黄芩甙是从黄芩中提取、分离出来的一种黄酮类化合物，研究发现黄芩甙能明显抑制肝癌细胞BEL-7402侵袭力、粘附力及运动能力[26]。华海清等[27]用人肝癌细胞株SMMC-7721和人脐静脉内皮细胞株ECV304作为研究对象，结果发现人参皂苷Rg3具有抗人肝癌细胞侵袭和转移的作用，机制可能与其能够抑制肝癌细胞侵袭活力、调节与肝癌细胞侵袭与转移密切相关的基因表达和抗肿瘤血管形成有关。孙婧璟等[28]研究显示蛇毒可抑制SMMC-7721与SMMC-7721细胞、内皮细胞的粘附，并可防治早期和晚期裸鼠人肝癌转移模型切除术后的肝内和远处转移复发。

12抑制线粒体活性

肖正明等[29]研究显示中药黄芪水提物可降低体外培养的人肝癌细胞的线粒体活性，与对照组相比，7天后降为起始浓度的10.2%，与对照组相差62.9倍。李煜等[30]用透射电镜观察了不同剂量盼生安处理BEL-7402肝癌细胞后对超微结构的影响，结果表明盼生安主要导致显著的线粒体超微结构改变，胞浆空泡化，抑制了肿瘤细胞的能量代谢和蛋白质合成系统而使细胞功能减退，代谢缓慢最终使细胞退变死亡。

13提高放化疗效果降低放化疗不良反应

研究表明，中药与化疗药物联用可以增强化疗效果，并且减轻不良反应。耿长新等[31]研究发现多烯紫杉醇在体内具有较强抗HCC作用和放射增敏作用。刘姣林等[32]探讨了中药扶正抑癌方对中晚期肝癌化疗后减毒增效的临床疗效，显示近期疗效增高，不良反应率下降，对照组和用药组比较差异有显著性(P

14预防肝癌前病变

肝癌是由多种致癌因素经过多阶段所导致的恶性病变，在癌肿的发生与发展过程中，若施加某些有效的干预因子，可望阻断肝癌的发生、发展。钱妍等[33]通过动物实验证实，981208冲剂、三石猫胶囊和复方丹参注射液3种方药均可减轻二乙基亚硝胺致大鼠肝脏细胞毒性损害，抑制癌前变异细胞的增生；对肝癌前GGT阳性灶的个数/cm2和面积比亦有显著的抑制作用(P

肝癌的预防和治疗仍是当前医学界的一大难题，中医药在防治肝癌方面具有广阔的前景。不管是单味中药还是复方中药，其成分都非常复杂，抗肿瘤作用也是多方面、多层次的。例如莪术既有细胞毒作用又有免疫增强作用，人参不仅能抗突变且能增强免疫力、诱导肿瘤细胞分化、还能发挥细胞毒作用。总之，我国的中草药有数千年的理论和实践基础，应结合现代的药物理论和细胞与分子生物学技术，进一步探明其作用机制，研究和开发中草药中有抗癌活性的有效成分，相信中医药对肝癌的预防和治疗将会有新的突破。

参考文献

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抗癌中药篇2

关键词：癌症；中药药性组合；抗肿瘤药；药物筛选

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.08.009

中图分类号：R2-05

文献标识码：A

文章编号：1005-5304(2013)08-0023-04Discovery of Anti-cancer Function of Old Drugs Based on Chinese Herbal Nature Combination CHEN Shan, WANG Yun (Chinese Traditional Medicine Information Engineering Research Center of Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100102, China)

Abstract：Objective To explore the anti-cancer function of old drugs from the perspective of the concept of Chinese herbal nature combination, and provide method and a new thinking style for the new function discovery from old drugs under the guidance of the theory of traditional Chinese medicine (TCM). Methods Using lung cancer with qi and yin deficiency as the example, the therapeutic principles of TCM anti-lung cancer treatment were analyzed and Chinese herbal nature combination patterns (CHNCP) for cancer treatment were extracted based on the relationship between function and Chinese herbal nature combination. The chemical medicines were re-screened with the cancer CHNCP and the candidates were identified. Results The therapeutic principle of TCM anti-lung cancer treatment is invigorating qi and nourishing yin. Fifteen chemical medicines were identified as the anti-cancer candidates, including 2 anti-cancer drugs being used in clinics and 4 drugs having the anti-cancer activity. Conclusion The method for finding the anti-cancer function of old drugs based on the Chinese herbal nature combination is feasiable, which provide new clues for application of old drugs.

Key words：cancer；Chinese herbal nature combination；antineoplastic drugs；drug screening

癌症(恶性肿瘤)是导致人类死亡的重要原因之一,而抗癌新药的研发面临研发周期长、成本大、风险高、成功率低的风险。面对新药研发存在的困难,一些学者提出了“老药新用”的观点,基于药物作用于多个靶点的事实,探索已有药物的新适应症[1]。此方法不但可以为一些疾病提供新的治疗方案,而基金项目：国家自然科学基金(30973946,81173568)通讯作者：王耘,E-mail：且其研发过程可以免除已有的药代动力学和毒理学评价,因此可以缩短药物研发时间,降低研发成本。

“老药新用”早期研究方法主要通过药物对基因表达的影响来发现老药新用途,后来产生了以细胞模型建立的生物信息学高通量筛选技术、以共享分子特性数据库建立的基因活性定位技术、体内动物疾病模型以及化学信息配对技术等方法[2]。但这些方法多从化学结构及生物活性角度出发,未能有效地将临床用药经验应用到新用途发现的过程中,缺乏理论指导。管疾病分册,2003,7(4)：199-205.[5] 王阶,陈可冀.血瘀证诊断标准的研究[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1993：7.[6] .中药新药临床研究指导原则(试行)[S].北京：中国医药科技出版社,2002：383-385.[7] 方永奇,魏刚,李小兵.痰证宏观辨证的计量化研究[J].辽宁中医杂志,1995,22(11)：490-491.[8] 顾衡强,陈美华,林求诚.老年高血压颈动脉硬化血栓前状态与中医证型关系的研究[J].福建中医学院学报,2006,6(12)：4-6.[9] 黄继良,孙文才,张文丽,等.高血压病患者颈动脉内膜中层厚度与血清脂联素水平相关性研究[J].四川医学,2005,26(9)：968-969.(收稿日期：2013-03-01,编辑：陈静)

药性是中医临床对药物作用特征的总结,四气、五味、归经3个元素组成药性组合,具有相同或相近功效的多个药性组合间的配伍特征构成药性组合模式,反映了药物的临床功效[3]。本文基于中医理论对癌症的认识及用药经验提出基于药性组合模式的“老药”抗癌作用的发现方法。其优势在于将中医临床经验应用于抗癌药物的研发中,有助于提高研发的时效性及成功率。1 资料与方法1.1 中医对癌症的认识

抗癌中药篇3

利用小鼠lewis肺癌细胞进行中药抗癌作用的研究,探索中医药对肺癌细胞生长与转移、细胞周期与细胞凋亡等遗传学与免疫学方面的研究,已成为中医药抗肺癌研究的重点领域之一。笔者查阅了1998年1月－2008年1月由国家自然科学基金、国家新药基金及各省市中医药管理局、卫生厅、教育厅等资助的中药抗小鼠lewis肺癌作用研究文献,进行了详细的分析。现报道如下。

1  复方研究

1.1  消积饮

    该项研究为广东省中医药管理局科研基金资助课题(98-335),广州中医药大学第二临床医学院完成。消积饮由黄芪、补骨脂、云芝、大黄、白花蛇舌草、莪术、全蝎、蜈蚣8味中药组成,具有扶正培本、化瘀解毒的功效,经水煮醇沉制备成药液,相当于5 g原药材/ml。分别研究了该方对小鼠lewis肺癌细胞增殖核抗原(pcna)及细胞凋亡的影响、对肺癌细胞周期的影响、对肺癌生长和转移抑制的影响、对肺癌移植瘤抑制的影响。实验结果表明,消积饮能够抑制lewis肺癌的生长,其抑瘤率为43.09%,对lewis肺癌细胞周期入细胞内dna合成有很大的影响,有可能影响lewis肺癌细胞的基因表达,使g1期细胞不能通过细胞周期检测点进入s期而发生g0/g1期阻滞,阻断dna合成,干扰肺癌细胞周期的正常进行,从而抑制肺癌细胞的分裂与增殖。使用该方后,lewis肺癌细胞凋亡指数显著降低,表明消积饮可通过影响肿瘤细胞凋亡而起到抗癌作用。对小鼠lewis肺癌生长和转移的抑制作用研究表明,消积饮能抑制lewis肺癌的生长及发生转移,其效果不仅表现在皮下肿瘤重量减小、肺转移率降低,还表现为肺转移结节数目减少[1-7]。

1.2  长必安胶囊

    该项研究为浙江省中医药管理局新药开发基金资助项目,浙江省中医药研究院基础实验研究所完成。长必安胶囊由龟甲、鳖甲、黄芪、白术等7味药物组成,为棕褐色粉末,含5.54 g原药材/g,具有益气养阴、行气活血、祛瘀生新的功效。戴氏等[8]从扶正和祛邪两个方面观察了本品对lewis肺癌小鼠肺转移及t淋巴细胞转化功能、干扰素γ(ifn-γ)、肿瘤坏死因子α(tnf-α)含量的影响。实验结果表明,本品可明显提高荷瘤机体的细胞免疫功能,增加ifn-γ和tnf-α含量,并具有较好的量效关系；对lewis肺癌有一定的抑制作用,但抑瘤率在30%以下,祛邪作用不强；对lewis肺癌肺转移具有明显的抑制作用,肺转移的抑制率达18.2%,肺转移灶数抑制率达20.7%～56.5%。本品可作为抗肿瘤的辅助治疗药,用于肿瘤患者放化疗后的辅助治疗。

1.3  承气生血方

    该项研究为北京中医药大学课题资助项目(g2002-12),由北京中医药大学基础医学院等完成。承气生血方为民间流传的治疗恶性肿瘤组方,临床用于治疗肿瘤患者气血两虚证取得较为满意的疗效。承气活血方由天花粉、雄黄、大黄、柴胡、牛黄、当归、甘草等组成,具有清热祛痰、活血解毒等功效。唐氏等[9-10]通过流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率,结合荧光显微镜观察凋亡细胞及凋亡小体的形态变化,结果表明,该方是能通过诱导肿瘤细胞凋亡来抑制小鼠lewis肺癌肿瘤细胞的生长。提示承气生血方具有抗肿瘤的作用。对小鼠lewis肺癌肿瘤生长与抑制作用的研究结果表明,其1.2 g/(kg·d)组对肿瘤生长的抑制率为36.12%,1.2 g/(kg·d)与0.6 g/(kg·d)2组的肿瘤转移抑制率分别为60%和62.5%,效果虽然不如西药环磷酰胺(生长抑制率89.20%,转移抑制率90%),但其扶正作用仍值得进一步研究。

1.4  十全大补汤

    该项研究为浙江省中医药管理局资助项目(2002-57),浙江中医学院与浙江省中医院完成。十全大补汤含黄芪、肉桂、红参、茯苓、白术、甘草、熟地黄、白芍、川芎、当归,具有温补气血的功效,临床用于治疗气血两虚证。包氏等[11]研究观察了十全大补汤对小鼠lewis肺癌转移的影响,将十全大补汤分为高、中、低3个剂量组,并与阿霉素组进行比较,结果表明以上4组在抑瘤率实验中差异无统计学意义；对小鼠lewis肺癌肺内转移的抑制作用结果表明,以上4组与生理盐水组比较,均表现为转移瘤结节数减少,结节较小,结节较为孤立。十全大补汤3组虽然结节数量多于阿霉素组,但差异无统计学意义。十全大补汤能显著抑制lewis肺癌肿瘤的生长、抑制肿瘤转移。

1.5  金安粉针剂

    该项目为国家新药基金项目2000(96-905-05-261),北京中医药大学与中国中医科学院广安门医院共同完成。金安粉针剂由苦参、黄芪、川芎等组成(深圳海王制药公司生产),具有扶正培本、益气活血、清热解毒的作用。周氏等[12-13]利用小鼠lewis肺癌细胞造模,研究了肺癌小鼠的体重曲线变化、抑瘤率、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、tunel法观察了肿瘤组织病理学变化。结果表明,lewis肺癌小鼠体重变化曲线本品与环磷酰胺组比较差异有统计学意义,金安粉针组针组体重减轻少,小鼠毛顺光滑有光泽；在c57bl/6j小鼠能显著抑制肿癌的生长,并能提高其生存质量；金安粉针对lewis肺癌细胞周期的影响是使细胞g2-m期细胞减少,并诱导部分细胞凋亡；金安粉针组除肿瘤组织有成片核碎裂外,组织内微血管也非常少,微血管的减少可导致组织缺血缺氧而继发细胞凋亡,或者是通过对病灶内血管生成抑制作用,引起肿瘤细胞凋亡。以顺铂为对照组进行研究,也验证了以上结果。

1.6  益气平悬饮

    该项目为国家中医药管理局基金资助项目(02-03jp30)与湖南省自然科学基金资助项目(01jj2037),由湖南省肿瘤医院与湖南中医学院共同完成。益气平悬饮为清代费伯雄方,由人参、生黄芪、椒目、桑白皮、葶苈子、瓜蒌壳、半夏、黄芩、郁金、茯苓、刺蒺藜、蚤休、甘草等组成,具有益气温阳、利肺泄水的功效,经水煎醇沉法,制成含量为2 g原药材/ml。王氏等[14]观察了本品对小鼠lewis肺癌组织细胞中il-2、tgf-β1 mrna表达的影响。结果表明本品大、小剂量组lewis肺癌组织细胞中的il-2 mrna表达水平明显高于模型组与化疗组,而本品大、小剂量组间差异无统计学意义；本品大、小剂量组tgf-β1 mrna表达水平明显低于模型组与化疗组,大小剂量组间差异无统计学意义。结果表明,益气平悬钦能促进小鼠lewis肺癌细胞中il-2 mrna的表达,抑制tgf-β1 mrna,纠正了th1/th2的漂移,进而纠正免疫微环境的紊乱,是本品抑制lewis肺癌生长的分子学机制之一。

1.7  健脾益肺化淤方

    该项目为广东省中医药管理局资助项目(2040030),暨南大学医学院完成。健脾益肺化淤方由党参、黄芪、仙鹤草、薏苡仁等组成,具有健脾益肺、化瘀解毒的功效。孟氏等[15]观察本方对小鼠lewis肺癌的抑瘤作用与对免疫器官的影响。结果表明,本品高、中剂量组有明显的抑瘤作用,高剂量与顺铂联合应用,抑瘤效果更为显著。本品对小鼠的进食、活动、饮食影响较小,有效剂量下对胸腺有抑制作用,用药后胸腺明显萎缩,而脾脏指数轻度增加。结果表明,本品与化疗药物联合应用,有明显的协同增效作用,在肺癌的临床治疗过程中,灵活应用健脾益肺、培土生金法能有效改善患者症状,提高疗效。

1.8  乌三颗粒

    该项目为重庆市科委(1999)与四川省教委青年基金重点资助项目(2000-a71),由第三军医大学成都军医学院与成都中医药大学共同完成。乌三颗粒为复方三类中药新药,由制何首乌、三七、红参、土鳖虫、大青叶组成,重庆华森制药有限公司生产。该项目在基因组水平上探讨乌三颗粒抗肿瘤的分子生物学机制,抽取经乌三颗粒治疗lewis肺癌组织和未经治疗的对照组瘤组织总rna并纯化mrna,分别反转录并进行荧光标记,制作成cd-na探针,与小鼠mgec-20s型基因芯片杂交,筛选出2组间差异表达基因。结果表明,2组间存在差异性表达基因45条,与对照组比较,本品组与恶性肿瘤浸润、转移相关基因表达下调,与促进细胞凋亡的相关基因表达上调。基因芯片技术能高通量分析中药乌三颗粒防治lewis肺癌的相关靶基因,为进一步揭示中药抗肿瘤机制提供了新的思路和前沿性生物技术手段[16]。

1.9  固本抑瘤ⅱ号

    该项目为北京市科委资助项目(h010910190119),北京市中医研究所等单位完成。固本抑瘤ⅱ号由党参、茯苓、白术、生黄芪、鸡血藤、莪术、川芎、苦参、女贞子、浙贝母等12味药物组成,具有益气活血功效,是北京市中医医院针对肿瘤患者,尤其是气虚血瘀证肿瘤患者研制的中药。张氏等[17]观察了本品对lewis肺癌荷瘤小鼠的免疫功能的影响,结果表明本品可通过提高nk细胞、b淋巴细胞活性,巨噬细胞吞噬功能,升高血色素,改善贫血,提高荷瘤小鼠的特异性免疫功能；且本品具有显著延长荷瘤小鼠生存时间的作用。本实验结果与临床疗效相符。

1.10  肺瘤平膏

    该项目为国家自然科学基金项目(30371821),中国中医科学院广安门医院完成。肺瘤平膏(又称益气活血解毒方)由白花蛇舌草、拳参、败酱草、草河车、败酱草、黄芪、西洋参、沙参、麦冬、桃仁、三七等组成,具有扶正培本、解毒抗癌、活血化瘀的功效。郑氏等[18]观察了肺瘤平膏及其拆方(将本品拆分为解毒方、益气方、益气解毒方)对lewis肺癌移植瘤的抑瘤作用及对s-100蛋白和血管内皮细胞生长因子(vegf)表达的影响。实验结果表明,肺癌组织中的vegf表达与树突浸润(dc)含量成负相关,即随着肺癌组织中vegf表达的增强,其s-100蛋白密度均明显降低。其中益气方组s-100蛋白表达最高,解毒方组vegf表达量最高,而益气解毒活血方组s-100蛋白表达较高,vegf表达较低,表明本品可能一方面抑制血管生成,另一方面促使dc成熟,促进机体对癌细胞产生有效的免疫应答,相关工作有待进一步深入。

1.11  益气活血解毒方药

    辽宁省教育厅资助项目(99152133),辽宁中医学院完成。益气活血解毒方药含红参、黄芪、莪术、桃仁、白花蛇舌草、天花粉、半枝莲、仙鹤草等组成,具有益气活血解毒功效。王氏等[19]观察了益气活血解毒方药对小鼠lewis肺癌微血管密度的影响。结果表明,本方能明显减少肿瘤中微血管数目及癌细胞对血管的侵袭能力,其对肿瘤的抑制作用可能是通过抑制肿瘤间质内毛细血管的生成来抑制肿瘤的生长,同时减少血行扩散的途径来达到抑制肿瘤扩散的目的[19]。

1.12  益肺颗粒

    该项目为杭州市卫生局青年基金资助项目(9803),杭州市中医院与浙江省中医药研究院共同完成。益肺颗粒由南沙参、北沙参、黄芪、炙鳖甲、半边莲、半枝莲、白花蛇舌草等组成,临床用于预防非小细胞肺癌术后转移疗效确切。张氏等[20]采用皮下接种lewis肺癌模型,观察了益肺颗粒对小鼠瘤重及肺转移灶的影响、血白细胞的变化、小鼠免疫器官重量系数及t淋巴细胞亚群的变化,并进行了毒性试验。结果表明,本品对lewis肺癌皮下移植瘤及肺转移灶均有明显的抑制作用,与环磷酰胺合用具有显著抑制作用；可明显升高血白细胞,抑制胸腺增生,cd4明显升高,cd8值下降,cd4/cd8值显著升高。并且本品未出现明显的不良反应,最大耐受量相当于成人用量的112倍。本品对lewis肺癌有抑制作用,并有增效减毒和免疫调节作用。

1.13  益肺抗瘤饮

    该项目为上海市“八五”攻关项目(859190102),上海中医药大学附属龙华医院完成。益肺抗瘤饮由黄芪、北沙参、天冬、女贞子、七叶一枝花等药物组成,具有扶正祛邪作用。朱氏等[21]观察了本品对lewis肺癌荷瘤小鼠神经内分泌免疫的实验研究。结果表明,本品能抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,增加体重,提高自然杀伤细胞、lak细胞、il-2水平,降低β-内啡肽、雌二醇水平,其抑瘤作用机理除与提高细胞免疫功能外,还与降低β-内啡肽、雌二醇的水平有关。

1.14  异功化瘤颗粒

    该项目为四川省科技厅资助课题,成都中医药大学基础医学院完成。异功化瘤颗粒由养阴扶正的药物组成。肖氏等[22]观察了本品对lewis肺癌的抑制作用,结果表明,大剂量(21.6 g/kg)和中剂量(10.8 g/kg)有明显抑瘤作用。

2  中药化学成分研究

2.1  紫杉醇

    该项目为湖北省自然科学基金(94j080)与湖北省科委重点科研课题资助项目(962p1106),湖北医科大学完成。紫杉醇是一种从太平洋紫杉属短叶紫杉茎皮中提取的抗肿瘤药物,属于细胞周期g2/m期阻滞剂,并能诱导肿瘤细胞凋亡。本项研究探讨了紫杉醇对lewis肺癌的抑制作用机理,对lewis肺癌细胞增殖、对细胞核形态dna含量及核仁组成区嗜银蛋白(agnors)的影响。实验结果证实了紫杉醇可明显抑制小鼠对lewis肺癌的生长和转移,并诱导肿瘤细胞凋亡；紫杉醇对lewis肺癌细胸增殖有抑制作用,并且疗效优于il-4,但紫杉醇单用毒性较大,与il-4合用,可减轻毒性,增加疗效[23-25]。辽宁中医药大学[(国家自然科学基金资助项目(30572415)]进行了针刺联合紫杉醇对lewis肺癌一般状态及抑瘤率影响的实验研究,分别采用针刺、药物及针药结合对lewis肺癌小鼠模型进行治疗,观察小鼠的生存状态、肿瘤体积的动态变化、瘤重及抑瘤率。结果表明,针刺联合紫杉醇具有良好的抑瘤作用,并能改善动物的生存状态,其作用优于单用紫杉醇或单用针刺[26-27]。

2.2  康莱特注射液

    该项目为浙江省中医药管理局基金资助项目(2004c065)。探讨了本品对lewis肺癌小鼠血管内皮细胞生长因子(vegf-c)蛋白及mrna表达的影响,对lewis肺癌小鼠免疫功能的影响。vegf-c蛋白的阳性表达和血管形成正相关,血管形成和肿瘤复发转移具有一致性。实验结果表明,该药高、中、低剂量组的vegf-c蛋白阳性细胞数降低,以高剂量组最为明显,提示本品可降低vegf-c蛋白的阳性表达,减少肿瘤血管形成及肿瘤营养供应,对防止肿瘤复发转移有积极的意义,是防止肿瘤复发转移的可能机制靶点。免疫功能结果表明,本品可明显提高lewis肺癌小鼠的脾、胸腺指数,高剂量组能明显降低tnf-α、il-1、il-6在外周血中的含量,在杀灭肿瘤细胞的同时,对机体免疫器官及免疫功能有保护作用[28]。

2.3  金荞麦

    金荞麦为蓼科植物天荞麦的根状茎,主要含有羟基蒽醌类、野荞麦苷、双聚原矢车菊苷元等。北京中医药大学基础医学院与中国中医科学院广安门医院(国家中医药管理局资助项目2000-j-b-02)采用流式细胞术分析、免疫组化法检测、观察了咸麦宁(金荞麦干燥根茎提取的单宁类化合物)对小鼠lewis肺癌细胞周期及cyclin d1表达的影响,结果表明,咸麦宁可能过降低肿瘤细胞cyclin d1的表达,将肿瘤细胞阻止于g0-g1期,使细胞不能进入s期进行dna复制,从而抑制肿瘤的生长[29]。浙江温州医学院等(香港百草堂有限公司、香港保健协会研究项目)进行了金荞麦fr4(金荞麦抗癌作用有效部分之一)对小鼠lewis肺癌细胞组织基质金属蛋白酶-9(mmp-9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(timp-1)蛋白表达的影响,结果表明,金荞麦fr4在400 mg/kg剂量时可明显抑制小鼠lewis肺癌生长,可下调mmp-9的表达,但不影响timp-1活性,其抗肿瘤的分子机制可能与下调mmp-9表达有关[30]。

2.4  槲皮素

    中南大学湘雅三医院(湖南省卫生厅科研基金资助项目c2005033)与南京医科大学公共卫生学院(江苏省高校省级重点实验室基金资助项目)分别进行了槲皮素、槲皮素与川芎嗪合用对小鼠lewis肺癌生长的抑制作用。实验结果表明,槲皮素与川芎嗪合用可明显抑制lewis肺癌移植瘤的生长,其作用机制与抑制血管生成、抑制细胞增殖和促进细胞凋亡有关,槲皮素与顺铂联合应用也可提高抑瘤疗效[31-32]。

2.5  魟鱼软骨多糖

    魟鱼软骨多糖是魟鱼软骨经盐酸胍抽提、膜超滤、丙酮分级沉淀、sephadex凝胶柱层析分离纯化获得的单一多糖,辽宁医学院附属第一医院[辽宁省教育厅资助项目(202173371)]探讨了魟鱼软骨多糖对小鼠lewis肺癌作用的分子机制,用环磷酰胺作对比,计算原发瘤抑制率及肿瘤转移数,采用rt-pcr和westem blot检测原发瘤组织vegf、bfgfmrna和蛋白表达。结果表明,魟鱼软骨多糖能明显抑制小鼠lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤vegf、bfgfmrna和蛋白表达有关[33]。

2.6  金针菇多糖

    金针菇多糖由金针菇子实体中提取,经分离和纯化而得,其多糖含量为68.67%,含葡萄糖、半乳糖、甘露糖和木糖。浙江省中医院[国家中医药管理局资助项目(93c022)]观察了本品对lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫功能,结果本品大、中、小3个剂量的平均抑瘤率为35.65%、39.88%、31.51%,平均抗转移率为45.03%、57.80%、36.85%,并能明显提高lewis肺癌小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能,对lewis肺癌小鼠脾细胞il-2的产生有不同程度的促进作用[34]。

2.7  青蒿素

    青蒿素是1972年从中药青蒿中分离得到的具有抗疟作用的单体成分,多项研究表明青蒿素及其衍生物对多种肿瘤的生长具有抑制作用。第三军医大学新桥医院[国家自然科学基金资助项目(30371586)]探讨了青蒿素对小鼠lewis肺癌移植瘤生长和淋巴管生成的影响。结果表明,青蒿素组瘤内微淋巴管密度、肺湿重、肺转移发生率、肺转移结节均较低,存活率明显增加,表明青蒿素可有效抑制lewis肺癌淋巴管生成和肺转移,提高小鼠存活率[35]。

2.8  川芎嗪

    重庆医科大学中医药学院[国家自然科学基金资助项目(300070915)],研究了川芎嗪注射液与丹参注射液对小鼠lewis肺癌生长抑制作用与抑制血管生成的关系,检测了小鼠lewis肺癌移植瘤体积、质量、肺转移灶数、肺瘤微血管密度(mvd)和vegf的表达。结果川芎嗪组肺癌移植瘤体积、质量、肺转移灶数、mvd和vegf的表达均显著降低,表明川芎嗪能明显抑制小鼠lewis肺癌移植瘤的生长和转移,其作用机制与抑制vegf的表达、抑制血管生成有关,而丹参注射液无明显作用[36]。

2.9  黄芪注射液

    武汉大学与武汉武警湖北总队医院[湖北省自然科学基金资助(94j080)与湖北省科委重点科研课题资助(962p1106)]研究了黄芪注射液对lewis肺癌细胞核形态、dna含量及agnors计数的影响。利用图像分析仪对肿瘤细胞核形态、dna含量及agnors计数进行测量,结果表明,使用本品后肿瘤细胞体积缩小,生长受抑制,核dna含量降低,肿瘤增殖能力减弱；agnors颗粒增大,计数减少,颗粒混合型和单一型增多。细胞核形态参数据反映了细胞核的大小,dna含量的agnors反映了肿瘤细胞增殖的特点,分别从静态和动态功能两个方面对lewis肺癌的生长与分化提供了信息,并具有良好的相关性,黄芪注射液对lewis肺癌具有抑制作用[37]。

3  小结

    本研究分析结果表明,中医药治疗肺癌越来越受到国家的重视,资助项目逐年递增,“十一五”期间也将中医药防治肺癌列为重大疾病项目,给予了大量资金资助。对以上复方进行统计,共使用的药味为57味,使用较多的药味为21味,其频次由高至低依次为黄芪、白花蛇舌草、茯苓、白术、川芎、莪术、甘草、红参、苦参、仙鹤草、女贞子、三七、当归、大黄、桃仁、鳖甲、北沙参、半枝莲、败酱草、天花粉、党参,治则功效主要为(频次由高到低)扶正培本、解毒、活血、益气、祛瘀、清热。中药抑制lewis肺癌的作用主要机理：抑制肿瘤细胞周期的dna合成,影响lewis肺癌细胞的基因表达,从而达到抑制肺癌细胞的分裂与增殖；促进肿瘤细胞中il-2 mrna的表达,抑制tgf-β1 mrna,纠正th1/th2的漂移,纠正免疫微循环紊乱；降低lewis肺癌细胞凋亡指数,影响肿瘤细胞凋亡而起到抑制肿瘤作用；抑制lewis肺癌毛细血管生成,降低血管内皮细胞生长因子的表达,促使树突浸润成熟,微血管减少可导致肿瘤组织内缺血缺氧引起肿瘤细胞凋亡,由此减少由血行扩散而导致的肿瘤转移。提高小鼠lewis肺癌细胞免疫功能：增加tfn-r、il-1、il-2、il-6含量和tnf含量；增加脾脏指数,抑制胸腺增生,提高nk细胞、b淋巴细胞活性,提高巨噬细胞吞噬功能,升高cd4含量；升高血色素及白血胞数,改善贫血状态；降低β-内啡肽、雌二醇水平。同时,中药具有增效减毒作用,与化疗药物合用,可提高疗效,并降低化疗药的毒性。

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抗癌中药篇4

关键词：结直肠癌；中医药；侵袭转移；综述

中图分类号：R735.3文献标志码：A文章编号：1007-2349（2016）05-0081-02

结直肠癌是现今最常见的恶性肿瘤之一，根据世界卫生组织的统计[1]，截止至2012年，每年全球有约140万名新发的结直肠癌患者，而有超过60万名患者直接或间接死于该病。在美国，相关文献指出[2]，预计2016年结直肠癌新发率和死亡率均将占常见肿瘤的第3位。而在我国，2000年―2011年之间，结直肠癌发病率在男性中排名第五，女性中排名第三[3]，且有逐年增高的趋势。手术、放化疗和靶向治疗仍然是结直肠癌的主要治疗手段[4-5]。结直肠癌的侵袭性是治疗不理想的主要因素之一[6]。因此，寻找安全有效的药物来抑制肿瘤的侵袭能力是目前研究的热点和难点。中医药治疗结直肠癌具有多靶点、多层次、多环节、整体调节的特性，其在肿瘤治疗中发挥着越来越重要的作用，成为抗肿瘤药物筛选的热点领域。本文就中医药抗结直肠癌侵袭转移的基础研究和临床研究现状综述如下。

1基础研究

1.1健脾益气法郭刚等[7]发现使用十全大补汤能抑制结直肠癌侵袭转移，主要表现为触发细胞凋亡，抑制结肠癌转移瘤的生长，其机制可能与其能降低Ki67和VEGF表达有关；而王宁[8]通过负瘤鼠实验进一步研究发现，肠恶性肿瘤可导致脾虚证，对脾胃消化吸收功能的影响显著；而六君子汤可以改善荷瘤裸鼠一般状态，减轻肠癌脾虚引起的体重下降，同时还可以增强胃肠动力，改善脾胃运化功能。六君子汤对HT-29人肠癌裸鼠移植瘤有明显抑制作用，其抑制肿瘤生长的作用机制可能是通过诱导细胞凋亡及下调肿瘤表皮生长因子EGF、血管内皮生长因子VEGF的表达实现的；此外，秦伟夫等[9]还通过体外实验证明益气复元汤能下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白的表达，并以此诱导大肠癌Lovo细胞凋亡。刘静等[10]采用大肠癌移植瘤小鼠研究健脾复方，表明健脾复方能抑制大肠癌瘤块VEGF mRNA和MVD（微血管密度）的表达，从而抑制肿瘤生长、复发、转移的潜能。

1.2辛开苦降法半夏泻心汤是辛开苦降法的代表方剂，具有调和肝脾，寒热平调，消痞散结之功效。李凯[11]研究发现，半夏泻心汤能抑制人结肠癌HCT116细胞增殖，其联合5-Fu可以明显抑制HCT116细胞增殖；同时半夏泻心汤含药血清可以诱导HCT116细胞凋亡，其联合5-Fu诱导细胞凋亡率达到最高。半夏泻心汤组可以抑制BCL-2蛋白表达，其联合5-Fu显示了协同作用，可以提高BAX蛋白表达，其联合5-Fu亦显示了最佳的效果。

1.3清热利湿法积雪草为伞形科积雪草属植物，是中国药典收载的常用中药，其性寒、味苦、辛，具有解毒消肿、清热利湿的功效。近期研究表明[12]，积雪草中含有有效的抗肿瘤活性成分羟基积雪草酸，羟基积雪草酸可以在体外诱导肿瘤细胞凋亡，体内促进裸鼠移植瘤消退；其抗肿瘤机制是通过免疫调节和NF-κB信号通路介导的，提示在使用有抗肿瘤作用的中草药时，可从免疫调节和信号通路两方面辅助治疗肿瘤，以期在临床上取得更好的效果。Johnson等[13]发现雷公藤甲素能抑制结肠癌细胞的增殖和移动能力，其主要作用机制为：雷公藤甲素能下调c-myc和cyclin A-D 的表达，同时抑制VEGF、COX-2、CXCR4、TNF-β等受体表达。此外，赵颖等[14]发现消痰通腑方（制半夏、制南星、制大黄、陈皮、鸡内金等）可以通过下调结肠癌肝转移组织中IGF-I/IGF-IR蛋白及mRNA的表达来抑制结肠癌肝转移。

1.4活血化瘀法红细胞的免疫黏附功能下降是结直肠癌生长和转移的重要原因之一[15]，而活血化瘀药物具有调节红细胞免疫的作用[16]，这可能是其抑制肿瘤转移的主要机制。杨运高等[17～18]发现活血化瘀方药桂枝茯苓丸、抵当汤、丹参饮能抑制结直肠癌肝转移，其作用机制与红细胞表面存在具有细胞免疫黏附功能的补体C3b（CR1）有关，还与抑制PCNA 表达有关[18]。李志询等[19]通过实验发现，具有活血化瘀功效的川芎嗪可以通过下调 P-170、MRP 增加耐药直肠癌细胞对化疗药物的敏感性。

2临床研究

2.1正虚与大肠癌复发转移中医认为肿瘤是一种全身属虚、局部属实的疾病。其本在于虚，正所谓“正气存内，邪不可干”，“邪之所凑，其气必虚”。《外证医编》有云：“正气虚则成岩”。大肠癌的发病及传变亦因于气虚，尤与脾、胃、肝、肾密切相关。许春妮等[20]通过自拟益气健脾中药方剂联合mFOLFOX6方案治疗结肠癌术后患者，发现可改善患者生存质量、降低化疗对患者的毒副反应。朱方勇等[21]使用健脾益气解毒方联合m FOLFOX6方案治疗晚期大肠癌，发现该治疗方案可以增加近期疗效，提高生活质量，减少不良反应。

2.2血瘀与大肠癌复发转移瘀即血行失度，它既指一种病理状态，也指瘀血这一致病因素。清代的高秉钧在《疡科心得集》中指出：“瘿瘤者……乃五脏血瘀而成。”《医林改错》言：“肚腹结块，必有形之血”，王清任认为气属无形，不可成结块，而血本有形，“血受寒则凝结成块，血受热则煎熬成块”。在现代临床应用中，国医大师何任曾以行气活血化瘀药为主的组方论治肠癌，有效延长患者的生存期，提高生存质量[22]。国医大师徐景藩亦将化瘀作为治疗结直肠癌的重要手段之一[23]。

3小结

中医药以其毒副作用小、安全有效、靶点多等优势，在治疗结直肠癌的研究中受到越来越多的关注。虽然对于结直肠癌的复发转移机制尚未完全明确，但根据各位大家、学者各自的临床经验提出相关看法并通过实验研究予以佐证，为中医药治疗结直肠癌提供了新思路，同时也在药理学领域为中医药治疗结直肠癌提供了可靠的依据。就目前而言，健脾益气、活血化瘀、辛开苦降和清热利湿在细胞与动物相关模型中显示了不俗的抗癌潜力。通过中医药干预，结直肠癌的转移、黏附、移动和侵袭等特性受到抑制。中药的成分复杂，作用靶点多，如何从整体上全面把握中药复方中各成分及组方的作用机制，有待更深层次的研究。

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抗癌中药篇5

【摘要】 目的 探讨大肠癌中增殖细胞核抗原(Ki-67)和胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-Pi)、拓扑异构酶-Ⅱ(TOPO-Ⅱ)及P-糖蛋白(Pgp)耐药基因的表达及临床意义。方法 采用即用型免疫组化微波加热法，对170例大肠癌中Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp耐药基因的检测分析。结果 (1)170例大肠癌中Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp的阳性表达率分别为56.47%和67.05%、44.11%、19.41%。(2)大肠癌中Ki-67的阳生率与GST-Pi、TOPO-Ⅱ阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论 部分大肠癌患者的体内存在多向耐药基因，或增殖活性高的大肠癌具有介导癌细胞内原发存在对GST-Pi、TOPO-Ⅱ和Pgp所介导的抗癌药物的耐药基因。因此，在化疗前对大肠癌中进行Ki-67与耐药基因的检测，有助于预后判断与选择合理联合用药，提高疗效与存活率，延长生存期，具有临床实际意义。

【关键词】 大肠癌；增殖细胞核抗原；耐药基因；免疫组化

【Abstract】 Objective To probe into the expression and clinical significance of nucleus antigen in proliferation cell (Ki-67) and drug resistance gene as glutathione-s-transferase-pi (Gst-Pi)，topoisomerase Ⅱ(TOPO-Ⅱ，P-glycoprotein(Pgp) in large bowel carcinoma.Methods To test and analyze the ki-67 and drug resistance gene as GsT-pi、Topo Ⅱ，Pgp in 170 cases of large bowel carcinoma by instant microwave heat-immunohistochemistry.Results (1)Positive expression rates of Ki67，GST-Pi，Topo-Ⅱ，Pgp in 170 cases of large bowel carcinoma were 56.47%，67.05%，44.11% and 19.41%，respectively.(2)There were some correlations among the positive expression of Ki-67，GsT-Pi，and Topo-Ⅱ in large bowel carcinoma (P<0.05).Conclusion There are presence of multidrug resistance genes in some patients of large bowel carcinoma or resistance to GsT-Pi，Topo-Ⅱ，PgP existed in the fast proliferation cancer cell primarily.So before starting the chemotherapy，determination of Ki-67 and the above resistance gene may be helpful for clinicians to select a rational regime and dosage to impove the curative effect and prolong the life span.

【Key words】 large bowel carcinoma；necleus antigen in proliferation cell；resistame gane；immunohistochemistry

大肠癌具有较高的发病率和死亡率，在上海地区的发病率呈上升趋势，我国大肠癌占恶性肿瘤中的第四或第五位［1］。目前，对大肠癌的治疗主要是手术与化疗，临床医生多采用联合方案或凭主观判断进行用药。最近有研究发现，肿瘤细胞内耐药蛋白往往是导致临床化疗失败的主要原因之一［2］。本文研究通过检测大肠癌化疗前肿瘤细胞的增殖活性与耐药性，旨在判断预后与为防止多种耐药性的诱导方面提供一定的临床病理依据。

1 材料与方法

1.1 材料 收集我院病理科2003年1月～2004年12月外科手术切除的大肠癌标本170例，术前均未做过化疗，男83例，女87例，年龄29～88岁，平均62.85岁。均经HE病理诊断明确。大肠癌的分化程度：高分化管状腺癌42例，中分化管状腺癌70例，低分化管状腺癌29例，粘液腺癌26例，印戒细胞癌3例。大肠癌的临床分期：A期25例，B期55例，C期82例，D期8例。

1.2 方法 标本石蜡连续切片4张，厚3μm，分别免疫组织化学即用型二步染色。检测药盒购自上海长岛抗体诊断试剂有限公司，单克隆抗体。Ki-67阳性者提示肿瘤细胞的增殖活性增强，恶性程度高，预后差；GST-Pi阳性者提示肿瘤细胞对GST-Pi所介导的抗癌药物顺铂有耐药倾向；TOPO-Ⅱ阳性患者提示肿瘤细胞对拓扑异构酶抑制剂有耐药倾向；多药耐药(MDR)基因产物P-糖蛋白(Pgp)的阳性者提示肿瘤细胞对长春新碱类和阿霉素有耐药倾向。并用胃癌肿瘤细胞对Ki-67与GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp标记阳性表达作为阳性的对照组。

1.3 结果判断 在光镜观察阳性细胞呈棕褐色细胞颗粒状。Ki-67定位于细胞核内(图1)，GST-Pi定位于细胞核或细胞质内(图2)，TOPO-Ⅱ定位于细胞核内(图3)，MDR定位于细胞质和细胞膜上(图4)。根据肿瘤细胞的阳性数及其染色反应的深浅进行判定，采用高倍视野随机计数500个肿瘤细胞所占的比例，定位3级，未见阳性表达或阳性细胞数<5%为阴性(-)，5%≤阳性细胞<30%为阳性(+)，30%≤阳性细胞<60%为中度阳性(++)，≥60%的为强度(+++)。

1.4 统计学处理 采用卡方检验，P<0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 Ki-67与3种(GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp)耐药基因在大肠癌中检测结果 本组大肠癌标本中，Ki-67的阳性表达率为56.47%(96/170)，其表达增殖状态以阳性居多；GST-Pi的阳性表达率为67.06%(114/170)，以强阳性表达居多；TOPO-Ⅱ阳性表达率为44.12%(75/170)，以强阳性表达居多；但Pgp的阳性表达只有19.41%(33/170)，并以弱阳性居多。说明大肠癌中Ki-67阳性表达与GST-Pi、TOPO-Ⅱ的阳性表达呈正相关(r值分别是0.974，0.980，P<0.05)；但Ki-67的阳性表达与Pgp的阳性表达不相关(r值为0.784，P＞0.05)，提示大肠癌中Ki-67高表达阳性率的细胞肿瘤易对GST-Pi和TOPO-Ⅱ产生耐药性。见表1。

表1 大肠癌中Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ及Pgp的阳性检测结果

2.2 Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ及Pgp的表达在组织学类型中关系 本组大肠癌中以中高分化的管状腺癌多见。大肠癌对Ki-67和3种(GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp)耐药基因均有不同程度的阳性表达，与不同组织类型大肠癌的阳性表达呈正相关(r值分别为0.988、0.993、0.984、0.958，P<0.05)。见表2。

表2 Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp表达与组织类型关系

2.3 大肠癌患者年龄构成分布与Ki-67和3种(GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp)耐药表达关系 本组大肠癌中80～89岁12例(7.06%)；以70～79岁病例数最多，为58例(34.11%)；60～69岁45例(26.47%)；50～59岁30例(17.65%)；40～49岁20例(11.76%)；29～39岁5例(2.94%)。文献报道中在我国大肠癌的发病年龄高峰期为30～50岁，国外为50～60岁［3］。本组60～79岁的病例占66.47%(113/170)。大肠癌患者各年龄段对Ki-67和3种(GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp)耐药基因均呈不同程度的阳性表达。年龄与Ki-67、GST-Pi、TOPO-Ⅱ的阳性表达呈正相关(r值分别为0.944、0.936和0.926，P<0.05)；耐药与Pgp的阳性表达不相关(r值为0.350，P<0.05)。见表3。

表3 年龄分布与Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp表达的关系

2.4 大肠癌的Dukes分期［4］与Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp表达的关系 本组大肠癌的临床分期与Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ的阳性表达呈正相关(r值分别为0.975、0.990、0.982，P<0.05)；但与Pgp的阳性表达不相关(r值为0.724，P＞0.05)。见表4。

表4 大肠癌的临床分期与Ki-67和GST-Pi、TOPO-Ⅱ、Pgp表达关系

3 讨论

许多肿瘤产生耐药的生物学基础取决于肿瘤多药基因的扩增，在肿瘤组织中产生GST-Pi、TOPO-Ⅱ和Pgp的含量升高，则对抗癌药物产生耐药性［5，6］。而影响化疗的主要因素是细胞内耐药、抗肿瘤药的药代动力学/药效学、肿瘤血供、药物扩散PgpMDR及肿瘤细胞增殖生长相关。细胞耐药包括MDR、DNA修复和铂类耐药等，其中MDR的关注点是mdri/Pgp、MDR、LRP、拓扑异构酶-Ⅱ、谷胱甘肽代谢和凋亡，或肿瘤细胞增殖活性介导细胞内多向耐药基因的扩增。

增殖细胞核抗原(Ki-67)对于研究肿瘤细胞的生物化学特性、恶性程度及预后判断等具有一定的价值［7］。Ki-67是真核细胞G1和S期合成的一种36kD的白，是DNA聚合酶辅助蛋白，直接参与细胞增殖过程中DNA的复制。在静止期的细胞内含量很少，从G1晚期开始增加，S期达到高峰，G2期和M期呈明显下降［8］，其表达程度能客观反映肿瘤细胞增殖活性［9］。本组大肠癌中Ki-67的阳性表达率为56.47%，提示肿瘤细胞增殖状态强的大肠癌易产生对GST-Pi、TOPO-Ⅱ所介导的主要抗癌药物顺铂和拓扑异构酶抑制剂发生耐药性倾向的可能性。但许多肿瘤在化疗前即有耐药基因MDR1、mRNA的水平增高，在治疗后更高［10］。因此，对化疗前筛选出肿瘤细胞无明显耐药性的抗癌药物进行化疗，可进一步提高治疗效果。本组大肠癌中GST-Pi的阳性表达率为67.06%，强阳性高达51.75%；TOPO-Ⅱ的阳性表达率为44.12%，强阳性高达48.00%。说明近一半的大肠癌对GST-Pi、TOPO-Ⅱ所介导的抗癌药物顺铂和拓扑异构酶抑制剂产生耐药倾向，并大多呈强耐药性，且提示大肠癌联合用药化疗时，对顺铂和拓扑异构酶抑制剂的选择应慎重考虑。同时对Pgp的阳性表达率19.41%，表明部分大肠癌对Pgp所介导的主要抗癌药长春新碱、阿霉素等有耐药性倾向。有研究报道，大肠癌在抗癌药物治疗前肿瘤细胞内可原发存在对抗上述抗癌药物的耐药倾向，或部分大肠癌患者体内存在多向耐药基因被激活，这是化疗有时难以达到预期效果的主要因素之一［11，12］。研究结果显示，本组大肠癌对GST-Pi、TOPO-Ⅱ和Pgp均有不同程度的阳性表达，不同组织类型的大肠癌与GST-Pi、TOPO-Ⅱ和Pgp的阳性表达相关，表明采用相同的用药方案治疗不同组织类型的大肠癌，其效果不尽相同，可能存在一定的差异。同时表明，大肠癌中Ki-67与GST-Pi、TOPO-Ⅱ的阳性表达有显著正相关，提示是否有相互介导作用的生物学行为可能性，其发生机理有待进一步研究与探讨。

(本文图片见封三)

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7 Fontanini G，Pingitore R，Bigini D，et al.Growth fraction in non-small cell lung cancer estimated by proliferating cell antigen and comparison with ki-67 labelling and DNA flow cytometry date.Am J Pathol，1992，141：1285.

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9 Mc Conmick D，Hall PA.The complexities of proliferating cell nuclear antigen.Histopathology，1992，21：591-594.

10 胡兵.肿瘤化疗的多药耐药问题.国外医学·耳鼻咽喉科学分册，1996，20：20-24.

11 许良忠.实用肿瘤病理方法学.上海：上海医科大学出版社，1997，453-455.

抗癌中药篇6

随着我国癌症发病率上升，抗癌药物的社会需求持续增大，越来越多的不法分子将目光转向价格高昂的抗癌药物，通过制假售假谋取“胜似贩毒”的暴利。

制售假药触目惊心

对于抗癌药物的真假，患者通常只能通过外包装上的相关批准文号，并在药监部门的官方网站上进行核实，但对抗癌药品本身，甚至连医生都难以辨别真伪，不法分子由此觊觎到其中的巨大“商机”。于是――

据某国际知名抗癌药物生产企业品牌保护经理透露，该公司曾经查获某号称可用于治疗乳腺癌的假冒针剂，每盒的零售价为8500元，但其实就是自来水，加上包装、人工，成本不过5元1盒。

广州市公安局曾在去年破获一起生产、销售假抗癌疫苗案件，主犯在看守所供称，自己将假“加德士”抗癌疫苗以每盒约4000元的价格卖给商，商再以1万元左右的价格销售给美容院，最终美容院以23800元卖给顾客。

而此前在一起由海归博士后组织的特大制售抗癌假药案中，用于生产抗癌假药的原料竟是来自上海的一家化工厂生产的化工原料，这种化工原料的进货价格远低于正常制药的原料价格。业内人士透露，现在有许多化工厂为假药生产商提供化学中间体作为原料，不法分子只需要通过简单提纯，就能得到原料药，再对药品进行压片、分装、包装，生产上几乎毫无门槛。

空药盒竟卖到700元

本应按照医疗垃圾处理的抗癌药空盒瓶，却被不法分子以最高700元一套从医院护工处回收，往里面灌进一些“不治病也吃不死人”的生理盐水或淀粉丸子，欺骗患者，延误治疗。

曾是广州南方医院肿瘤科护理员的李某，因捡卖抗癌药品包装被判决生产销售假药罪。据其供述，“不同药物、不同新旧程度药盒卖的价格也不一样。全新美罗华药盒最高卖到700元一套，包括药盒、药品和说明书，一样都不能少。最便宜的爱必拓也要30元一套。”这些参与捡卖药盒的医院护工、保洁员多是来自农村的异地务工人员，面对“上线”的“高价”诱惑，他们往往难以抵挡。“平时会挂个背包到各大医院，找到在医院工作的清洁工、护工，告诉他们可以高价收购一些药盒，并留给他们纸条。纸条中有药盒的名称及收购价格，让他们在工作中留意，有没有病人留下比较完整及干净的药盒、药瓶。”

利润胜过贩毒，风险小过偷抢

据了解，治疗肺癌的常用正品药易瑞沙每瓶5000多元，单月药费高达1.5万余元。而另一种用于治疗乳腺癌的药品赫赛汀正品药单价达到1.5万～2万元。一些患者及家属惮于进口药过高的价格，从正规渠道买不起药，转而购买熟人介绍的“回收药”、“走私药”，甚至迷信网上一些虚假宣传，从而给犯罪嫌疑人可乘之机。

目前制售抗癌假药活动主要分为仿制现有抗癌药品，冒充正品进行销售；制造所谓特殊药品或保健品，宣传治癌效果诱骗患者；走私贩卖印度、南美一些国家生产的、未经我药监部门核批的抗癌药品等。通过百度搜索，可以发现有不少患者在四处询问哪里才能买到印度产的抗癌药，而愿意提供“代购”服务的商家比比皆是。

利润胜过贩毒，风险小过偷抢。一些基层公安干警对犯罪嫌疑人隐蔽操作、不易侦查深感苦恼：抗癌假药数量小“价值大”，易运输好存储，交易时单线联系不易被发现，和患者约定时间地点交易，轻轻松松一瓶就可能赚上万元，比偷摸抢劫的风险还小。

监管应从源头入手

公安、药监等部门业界人士认为，打击制售抗癌假药是一项社会系统工程，应多部门协作、多地区联动，从源头入手实施链条监管，通过立体打击不断压缩制假售假生存空间。同时，引导病患群体及其家属树立“通过正规渠道买放心药”的科学用药理念；充分利用媒体平台，及时通报典型案件查处情况，购药警示，试行有奖举报制度，推动全民抵制，铲除抗癌假药的“社会土壤”。

进口药价格过高，是人们转向非正规渠道求药的根本原因，一些医药行业人士因此还建议，应从战略高度重视并加大国产抗癌药品的研发生产，通过设立专项基金、鼓励产研结合等方式，推出一批疗效较好、价格较低的国产抗癌药品。只有这样才能减少一些贫困家庭对抗癌假药的“无奈购买”。

编后语

抗癌中药篇7

[关键词] 活血；功效网络；肝癌

[收稿日期] 2013-11-27

[基金项目] 国家自然科学基金项目（81373985，81173568）；教育部新世纪优秀人才支持项目（NECT-11-0605）；国家科技支撑计划项目（2008BAI51B01）；北京中医药大学科研创新团队支持项目（2011-CXTD-11）；北京中医药大学校级课题（2013-JYBZZ-XS-110）

[通信作者] 王耘，教授，博士生导师，Tel： （010）84738620，E-mail：；乔延江，教授，博士生导师，Tel：（010）84738620，E-mail：

原发性肝癌（以下简称肝癌）多表现为胁下积块，刺痛，痛处不移，拒按，面色晦暗，红丝赤缕，青筋暴露，舌色青紫?痕斑，脉弦涩等血瘀表现?通过近十年中医药治疗肝癌的文献研究，总结发现气滞血瘀证是肝癌最常见的证型，瘀血贯穿于病程始终，血瘀证多见于病理分型中的巨块型肝癌[1]?实验研究也发现， 肝癌患者常伴有微循环障碍，血液黏度增高及血液高凝状态，故活血化瘀是临床治疗原发性肝癌的重要治疗方法[2]，临床疗效确切[3]?但是其作用机制至今仍不明确?

中药是通过多成分的药物复杂系统对人体疾病系统的作用而产生治疗效应的?中医药整体观和辨证论治的理念体现在中医药多成分?多靶点系统调控的思想上，与网络药理学的研究思路存在一定的共性?中药功效网络是揭示中药功效作用机制和功效间关系的复杂网络[4]?中药功效网络不仅可以解析中药功效的作用机制，还可以在网络基础上辨识中药有效成分群?由于实验方法难以全面筛选中药多成分的多靶点多途径作用机制，因此利用信息学方法构建的功效网络，反筛中药有效成分群具有快速全面的特点，可以为中药的二次开发提供理论依据?因此，本文尝试利用功效网络解释活血化瘀治疗肝癌的分子机制，同时示范性的应用功效网络筛选中药抗肝癌的有效成分群?

但是在功效网络构建的思路上，按照预期的中药-化学成分-作用靶点构建功效网络[5]思路，在操作过程中存在着实际困难?首先，很多中药化学成分的作用靶点不清楚；其次，通过统计的方法判断功效相关靶点缺乏理论依据?药性犹如中药“药理"，功效表达中药药效?由于同一药效可以通过不同药性途径实现，因此根据功效-药性相关关系构建活血功效网络，更具有针对性和特异性?药性?药理都是对药物作用途径和作用特征的描述，具有天然的联系?而且中药药理作用的研究成果丰富，以药理作用为桥梁可以将具有药性分类特征的功效网络引入分子层面，是沟通传统中医药理念与现代研究成果，将分子生物学的研究成果融入到中药功效和药性的机制研究去?

因此，本文以活血功效为例，利用功效-药性相关关系构建功效网络，以药性的药理作用特征为切入点，从分子网络层面阐释活血法治疗肝癌的原理?红花作为典型的活血化瘀药，其几种成分对肝癌的治疗作用已见报道[6]，为系统发现红花抗肝癌的有效成分群，本文利用活血网络中抗肝癌相关靶点，筛选了红花中抗肝癌活性成分群，通过文献验证结果基本可靠?从而证明功效网络不仅能够解析中医药治疗疾病的机制，也为基于靶点组合的药物设计奠定基础，为中药成分组合的药物开发提供理论依据?

1 数据来源与方法

1.1 数据来源 功效-药性组合关系结果引用自课题前期工作发表的中药功效-药性组合相关关系研究一文[7]，结果显示活血功效最相关的药性组合是温-辛-肝，本文以温-辛-肝中药的活血功效为研究对象，缩小功效的含义和范围，为构建更有针对性的活血功效网络做准备?

药理作用相关靶点数据来源于Drugbank数据库，本文拟构建的蛋白质相互作用网络，背景数据来源于Reactome人类化学反应数据库和HPRD人类蛋白质相互作用关系数据库?肝癌相关基因编码的蛋白质数据由GeneCards数据库获得?Stitch数据库中记载了化学成分与相关靶点之间的相互作用，结果主要来源于文献挖掘?中药红花的化学成分数据参考了《中药活性成分分析手册》一书[8]?

1.2 药性组合-药理作用的数据挖掘 2010年版药典记载的具有温-辛-肝药性的活血中药有9味，其相关的药理作用利用“中国期刊全文数据库"（CNKI）检索，收集1980年以来国内公开发表的有关这些中药药理研究的全部文献，并参考《中药学》[9]?《临床中药学》[10]对其药理信息进行补充?利用SAS8.2（Statistics Analysis System）中的Enterprise Miner模块对温-辛-肝中药的药理作用进行关联规则分析，结果可以发现与温-辛-肝药性组合最相关的2个或2个以上药理作用?

1.3 活血功效网络构建方法 采用实体语法系统的形式化语言[11]，建立分子间关系模型，借鉴文献的定性推理方法[12]，可以根据活血药理作用相关靶点在蛋白-蛋白相互作用关系网络背景下，推导下游效应网络，即为活血功效分子网络?以活血法治疗肝癌的作用机制解析为目标，在活血功效网络中标记肝癌相关蛋白，通过网络传递，分析活血功效网络与抗肝癌作用之间的内在关系?通过靶点功能分析，深入探讨活血化瘀法治疗血瘀型肝癌的作用机制?最后，应用活血网络中的肝癌相关靶点，筛选红花中可能与之相互作用的化学成分，即红花中潜在的抗肝癌相关活性成分?

2 结果与讨论

2.1 活血功效网络 本文药性组合-药理作用关联运算选择最小支持度50%作为阈值，本文选取关联度最大的规则作为网络构建的基础，见表1?为评价药性组合与药理作用关系的可靠性，本文对温辛肝药性中药和非温辛肝药性中药与镇痛药理作用关系进行了卡方检验，P

利用实体语法推理规则，以活血靶点为初始节点，推断下游相关的蛋白，从而构建活血功效网络，由于整个网络过于复杂，在正文中只展示局部网络，包括两步蛋白相互作用的关系，见图2?

2.2 活血与肝癌的关系 本文以肝癌相关蛋白为目标，搜索活血功效网络对疾病相关蛋白的影响，在图中标记，见图2?图中红色靶点为活血功效，其余所有节点都为活血相关蛋白?活血相关蛋白中，粉色点代表活血靶点，深绿色代表既是活血靶点又是肝癌相关蛋白的节点，浅绿的点为肝癌相关蛋白?从功效网络标记可见，活血功效是通过特定蛋白影响肝癌的分子机制?图2中活血和肝癌相关蛋白的详细分类和关系见表3?活血靶点和活血相关蛋白中都有肝癌相关蛋白，活血靶点本身就是肝癌相关蛋白的在表3中“关系"栏用“直接"关系表示，活血靶点通过蛋白相互作用影响到肝癌相关蛋白的在表3中“关系"栏用“间接"关系表示?

结果表明，活血可以通过直接作用和间接作用的方式抗肝癌?直接抗癌作用就是直接抑制细胞增殖?作用于原癌基因和抑癌基因?促进细胞凋亡，直接抗肿瘤?例如，图2中标明的活血功效网络中的抑癌基因TP53 和趋化因子受体CXCR4都是细胞增殖的关键分子[14]，与肝癌的发生发展密切相关，这也阐明了活血法抗癌的原理?而许多实验都证明一些活血化瘀中药本身就有抗肿瘤作用如丹参?川芍?赤芍?莪术?郁金?乳香?三棱?红花?没药?全蝎?土鳖虫?当归?水蛙等对肿瘤都有直接抑制作用，这与活血功效网络的发现相一致?

间接抗癌作用，包括改善微循环和预防肝癌肿瘤转移等预防癌症发生发展的相关作用?肝癌常伴有血液黏度增高及血液高凝状态，而活血功效网络中的过氧化物酶体增殖激活性受体 （PPARD）等靶点就是与调节血脂密切相关[15]，另外活血相关蛋白凝血酶F2关系也到抗凝血，因此调节上述靶点都可达到缓解血液高黏和高凝的作用?肝癌患者血液中过多的纤维蛋白?血小板会造成高凝?高黏状态，他们能包裹原发灶脱落的癌细胞，形成瘤栓，使癌细胞易于躲避血液剪切力及免疫监视， 增加肿瘤转移的机率?故缓解血液高黏和高凝状态，成为治疗和预防肝癌的重要机制?

活血作用对局部血液循环的调节，使局部血流量增加， 血液流速增加， 血管痉挛解除， 减轻代谢障碍，提高肿瘤局部的血供和血内含氧量，从而提高肿瘤组织对放射线和化疗药物的敏感性，也可以间接抗癌?实验[16]和meta分析[17]都表明，活血化瘀中药联合肝动脉栓塞化疗更有助于抑制肝癌生长?

2.3 基于功效网络的红花抗肝癌有效成分群筛选 红花是温辛归肝经的活血药，符合活血网络的应用范围，因此本文选取红花作为应用对象?根据两步推断构建的活血功效网络中所有与肝癌相关的活血靶点为目标，通过Stitch数据库收集的红花化学成分与相关靶点的对应关系，筛选红花中与肝癌相关的有效成分群，见表4?

其中，槲皮素抗肝癌的作用已见报道[18]，本研究结果发现，槲皮素作用于肾上腺素H合成酶（PTG2）发挥抗炎作用，通过MKO3靶点作用于TP53和CXCR4而抑制肿瘤增殖，槲皮素不仅能抗肝癌，而且能够抑制炎症反应，因此对于肝癌的发生发展有治疗作用，与文献报道结果一致[19]?有文献报道，木犀草素除可抗肝癌外，还可以增强机体对其他抗癌药物的敏感性，从而增强抗癌效果[20]，其原因在于它作用于一氧化氮合酶NOS2，它是唯一能合成内皮源性舒张因子一氧化氮的限速酶，与血管扩张密切相关，通过调节局部血液循环增强机体对其他抗癌药物的敏感性，达到协同抗癌作用?亚油酸作用于PPARD，与降血脂作用相关?总的来说，红花抗肝癌机制主要表现在抑制癌细胞增殖?抗炎?调节局部血液循环?降血脂等方面?

3 结论

本文通过活血功效网络的构建，初步阐明了活血治疗肝癌的原理，并说明了红花抗肝癌的主要作用机制，为基于靶点组合的分子复方开发奠定基础，为中药的组分复方设计提供理论支持?结果表明，功效网络不仅能够解释其治疗疾病的作用机制，还可以根据疾病相关靶点，从中医辩证的角度反向筛选相关中药有效成分群，揭示其多成分多靶点多途径的治疗机制?

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Analysis on anti-hepatoma effect of medicine invigorating blood circulation and

eliminating blood stasis based on warm-pungent-liver efficiency network

GU Hao， MA Li， YUAN Bin， ZHANG Yan-ling， WANG Yun， QIAO Yan-jiang

（Information Engineering Research Center for Traditional Chinese Medicines， Beijing University of

Chinese Medicine， Beijing 100102， China）

[Abstract] Objective： The efficiency network is a complicated network for revealing the efficient mechanism of traditional Chinese medicines（TCMs） and relations among efficiencies. The efficiency-property relations were used to establish a warm-pungent-liver efficiency network to explain the principle of treating hepatoma with medicines invigorating blood circulation and eliminating blood stasis. Safflower， a warm-pungent medicine distributing along the live meridian， was taken for example to discuss the efficiency network′s application in the identification of active ingredients of TCMs and the combination. Method： In the early stage of this study， combined warm-pungent-liver medicines distributed along the liver meridian and invigorating blood circulation and eliminating blood stasis were taken as the study objects to collect the pharmacological effect data of warm-pungent-liver medicines and obtain the pharmacological effect combinations with the highest blood circulation-invigorating association by the association rules and the chi-square test. The pharmacological target data recorded in the DrugBank database is used to establish the warm-pungent-liver efficiency network according to the principle line of ″efficiency-property-pharmacology-target-protein interaction″ under the background of the protein interaction network. Result： The blood circulation-invigorating medicines could directly treat hepatoma by impacting protooncogene， cancer suppressor gene， cell apoptosis and anti-inflammation， and indirectly treat hepatoma by resisting coagulation and adhesion， regulating local blood circulation， preventing cancer cell metastasis and enhancing the tissues′ sensitivity to the anticancer drugs. Among the active ingredients of safflower screened based on the blood circulation-invigorating network targets， carthamin yellow， quercetin and luteolin have been proved to have the anti-hepatoma effect in literatures， which indicated the reliability of this study′s results and the purpose of the efficiency network. Conclusion： The efficiency network is an effective method for revealing the TCM′s mechanism， and lays a foundation for discovering key active ingredients of TCMs for treating specific diseases.

[Key words] invigorate blood circulation； efficiency network； hepatoma

抗癌中药篇8

【摘要】 癌症严重威胁人类的生命，科学家们不断地研究探索抑癌抗瘤的方法。早在几千年前，我国就有用昆虫治疗肿瘤的案例。近些年来由于研究手段的深入和改进，我国研究人员发现一部分药用昆虫对恶性肿瘤的生长和增殖有明显的抑制作用。文章即对研究较热的几种抗癌药用昆虫的抗癌机理进行简要的介绍，为药用昆虫成功地应用于抗癌治癌领域奠定理论基础。

【关键词】 药用昆虫 抗癌 治癌

近年来，随着抗肿瘤药物和其他治疗技术的研究逐渐深入，人们发现抗癌药用昆虫具有综合调理功能、毒副作用少等优点，是抗癌治癌的重要手段之一。因此，国内外很多学者都致力于抗癌药用昆虫的药理学研究中，并且有一些种类已被开发运用于药物疗法或作为其他疗法的辅助药物（见表1）。现将几种主要的抗肿瘤药用昆虫的抗癌作用研究进展作一介绍。

表1 几种主要的抗癌药用昆虫（略）

1 几种主要的抗肿瘤药用昆虫

1.1 芫菁类芫菁类是鞘翅目芫菁科的昆虫，入药的主要是南方大斑蝥Mylabris phalerata Pallas和黄黑小斑蝥Mylabris cichorii Linnaeus等种类的干燥体。临床上用于抗肿瘤的芫菁类药物的主要成分是斑蝥素和斑蝥素衍生物。它们对白血病、肝癌、胆囊癌、肺癌、食道癌、胃癌、乳腺癌及子宫颈癌细胞都具有一定的抑制作用。

1.1.1 斑蝥素斑蝥素是一种半帖烯毒素，可通过活体取毒或试剂提取法从虫体提取以及人工合成的方法获得。最早的研究认为斑蝥素的抗肿瘤作用首先是抑制癌细胞RNA 和DNA合成，继而影响蛋白质的合成，最终抑制癌细胞的分裂。史清华等［1］认为斑蝥素对比于其他抗癌药物可以更好地刺激骨髓的活性，从而提高了生物体自身的免疫力。

近年来，人们对斑蝥素抗肿瘤作用的研究更加深入。2000年孙震晓等［2］发现斑蝥素可通过作用于细胞周期的M期从而诱导人红白血病K562细胞的凋亡，张卫东等［3］则通过实验观察得出斑蝥素可相对特异性地引起肺癌A549细胞周期阻滞的结论。另外，何太平等［4］认为斑蝥素可抑制卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭、运动和粘附能力。这些研究有力证明了斑蝥素对多种癌细胞具有抑制作用，且主要通过诱导肿瘤细胞凋亡或抑制肿瘤细胞分裂和增殖实现的。

1.1.2 斑蝥素衍生物随着对斑蝥素的深入研究，人们相继研制了多种斑蝥素的衍生物运用于临床治疗。主要包括去甲斑蝥素、斑蝥酸钠、去甲斑蝥酸钠及其他一些衍生物，它们的抗癌机制与斑蝥素相同，也是通过诱导肿瘤细胞的凋亡或抑制肿瘤细胞的分裂和增殖从而具有抗癌功效的［5～7］。

去甲斑蝥素是由呋喃及顺丁烯二酸酐通过Diles-Alder反应经催化加氢合成制得，临床用于治疗肝癌、食管癌、胃及贲门癌等以及白细胞低下症。一些研究［8］认为去甲斑蝥素可能是作用于肿瘤细胞的核酸代谢，从而抑制肿瘤细胞的增殖，并可用于多种癌症的治疗当中。例如，赵聚山等［9］通过实验证明去甲斑蝥素较为适于肝癌细胞SMMC-7721的治疗，去甲斑蝥素进入人体后在胆囊、肾脏、子宫等组织中的分布也较广，可用于治疗这些组织中的癌细胞。另外，一些研究发现去甲斑蝥素具有诱导人乳腺癌细胞系MCF-7等凋亡［10］的功效。

与去甲斑蝥素不同，斑蝥酸钠不是人工合成的，而是由斑蝥素直接经过氢氧化钠水解生成，一般用于治疗原发性的肝癌。桂尤胜等［11］通过斑蝥酸钠对肝癌细胞系Bel-7402作用的研究发现，斑蝥酸钠体外可将肝癌细胞的生长阻断在细胞间期，致使细胞凋亡。而在对其他肿瘤的影响方面，有研究［12，13］证明斑蝥酸钠不仅可诱导肝癌细胞的凋亡，对胃癌BGC823及食道癌细胞的扩散也有一定的抑制作用。

上述研究表明斑蝥素的衍生物对多种肿瘤都有抑制效果，且这些化合物产生的毒副作用比斑蝥素小，价格也更为低廉。因而斑蝥素的衍生物对于治疗各种肿瘤具有更高的应用价值，且更适合于临床应用。

1.2 虫草类 虫草是一类十分重要的中药材，是寄生于昆虫体上的真菌与其寄主昆虫形成的虫菌复合体，寄生的昆虫为鳞翅目蝙蝠蛾科的幼虫。现在药用的虫草种类主要有冬虫夏草Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.和蛹虫草Cordyceps militaris（L.）Link.。虫草类一般具有抵抗白血病及乳腺癌的功能。

1.2.1 冬虫夏草冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌寄生在蝙蝠娥科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。对于冬虫夏草的研究已较为深入，其中具有抗癌作用的主要是其生理活性成分虫草多糖，对于多种肿瘤具有抑制肿瘤细胞增殖生长的功能［14］，也有研究认为其可诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子TNF-α，从而抑制肿瘤［15］。

冬虫夏草对白血病和骨髓瘤均有较好的抑制作用，如冬虫夏草的水提取物可通过促使细胞凋亡的方式抑制人白血病U937细胞的增殖，进一步的研究表明它可成为潜在的治疗人白血病的药物［16］。刘彦威等［17］经过观察分析则提出冬虫夏草菌丝水提液对小鼠骨髓瘤细胞SP2/ 0的增殖具有抑制作用。

另外，在与性激素相关的动物肿瘤中， 冬虫夏草的抑癌或促癌活性可能受到性别差异的影响。刘名光等［18］的研究表明冬虫夏草对于雌鼠具有明显的抑制腹水型肝癌皮下移植瘤效果，而对于雄鼠则有促癌效果，因而在冬虫夏草对抗与性激素相关的动物肿瘤方面还需要更加深入的研究。

1.2.2 蛹虫草蛹虫草（北虫草）的子实体及虫体与冬虫夏草一样可入药，且功能与冬虫夏草相似。但蛹虫草的主要活性成分不是虫草多糖，而是蛹虫草凝集素即虫草素［19］，人工可以培育蛹虫草，实验证明人工蛹虫草子实体不仅能有效抑制肿瘤细胞的扩增，而且可以使宿主特异性免疫功能增强，从而保护自身［20］。至于蛹虫草的抗癌作用机理，主要集中在两方面，一是蛹虫草子实体对S180荷瘤小鼠的肿瘤免疫活性因子TNF-β和IL-2有明显的促进作用，有效抑制了瘤肿块的生长，明显延长小鼠的存活率［21］。另一方面，是与上文中提到的冬虫夏草的抗白血病细胞U937的作用机理相同［22］，即通过促使细胞凋亡抑制人白血病细胞U937的增殖。

1.3 蜂类蜂类是指膜翅目蜜蜂科、胡蜂科等种类的昆虫，其体内的蜂毒及体外分泌物蜂胶均可入药，且对于白血病和肝癌细胞的增殖具有一定的抑制效果。

蜂毒是工蜂毒腺和副腺分泌出的具有芳香气味的一种透明液体，贮存在毒囊中，蛰刺时由蛰针排出。蜂毒的主要成分是蜂毒素(Melittin)，占蜂毒含量的40%～50%，具有较强的抗肿瘤生物活性，而且凌昌全等［23］对3种肿瘤细胞系SMMC-7721、Bel-7402 和Hep-3B的抑制实验研究也证实了蜂毒素具有明显的体外抑瘤作用。这种作用因其剂量的不同而有所差异，高剂量有杀伤肝癌细胞系Bel-7402肿瘤细胞的作用，低剂量可诱导其凋亡［24］。当然，蜂毒对其他肿瘤也有较好的抑制作用，如伤骨肉瘤细胞、T淋巴细胞白血病细胞株等。

蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂（树胶），与蜜蜂口器中腺体的分泌物混在一起，再和花粉、蜂蜡加工制成的一种胶状物质。蜂胶中包括3，5-异戊二烯、4-羟基桂皮酸等成分，具有细胞毒素和化学防治作用，可用于预防乳房、肾和结肠肿瘤的发生［25］。如果用适量的蜂胶饲养小鼠，小鼠的移植瘤细胞株S180的内核分裂明显减少，而周围的淋巴细胞则呈反应性增生，说明蜂胶对肿瘤的生长有一定的抑制作用［26］。

1.4 其他药用昆虫除了芫菁、虫草和蜂类外，还有一些药用昆虫也具有抗癌活性，如家蚕、金龟甲幼虫和家蝇幼虫等对肿瘤细胞均有一定的抑制作用。

1.4.1 家蚕家蚕Bombyx mori属鳞翅目蚕蛾科的昆虫，具有入药价值的是家蚕的蛹。家蚕抗菌肽就是从家蚕免疫蛹血淋巴中提取出来的。对于家蚕抗菌肽的抗肿瘤研究不多，主要集中在其抗白血病方面。赵东红等［27］通过观察研究发现天然家蚕抗菌肽CM4可以使离体巨噬细胞淋巴瘤细胞U937的癌细胞骨架断裂，部分凝聚成团，结构不完整；而重组家蚕抗菌肽CM4对离体巨噬细胞淋巴瘤细胞U937和人宫颈癌上皮细胞Hela癌细胞骨架也具有相同的作用。这说明天然抗菌肽与重组抗菌肽均具有较好的抵抗白血病、人宫颈癌等肿瘤的作用。另外，家蚕抗菌肽还可以使癌瘤组织大面积坏死，具有明显的抑瘤效果。

1.4.2 金龟甲幼虫金龟甲幼虫，俗称蛴螬，是鞘翅目金龟总科幼虫的总称，用以入药的一般是朝鲜金龟甲(Holotrichia diomphalia Bates)或铜绿金龟甲(Anomala carpulenta Motsch)的幼虫体，且对女性特有的恶性肿瘤、胃癌和肝癌方面有很好的抑制作用。例如宋莲莲等［28］指出：蛴螬粗提物对人宫颈癌细胞株具有抑制增殖及诱导凋亡作用，特别是以石油醚粗提物抑制增殖作用效果最佳。至于蛴螬的抗肿瘤机制可能与其在体外可下调凋亡相关基因Bcl-2的表达， 上调凋亡相关蛋白Bax、caspase-8 和caspase-3的表达有关［29］。

1.4.3 家蝇幼虫家蝇Musca domestica L.属于双翅目蝇科的昆虫，其幼虫的血淋巴以及其产生的抗菌蛋白，对肝癌、黑色素瘤、子宫内膜癌等均有很高的药用价值。

贺莉芳等［30］对家蝇幼虫血淋巴中的抗菌蛋白研究发现，通过阻滞肿瘤的细胞周期以及诱导肿瘤细胞凋亡，家蝇幼虫抗菌蛋白对黑色素瘤A375细胞有明显的抑杀作用，且对正常人体细胞基本无抑制作用。同时对子宫内膜癌细胞、人食管癌细胞以及人髓样白血病细胞有较明显的杀伤效果。

2 结语

药用昆虫对多种肿瘤细胞均具有明显的抑制功效，其抗癌作用机制也多种多样，如阻滞肿瘤细胞的细胞周期、调控肿瘤细胞凋亡相关基因以及增强肿瘤免疫活性因子等等。抗癌机制的多样有利于人们从多个角度对药用昆虫进行开发和利用，而且减小了肿瘤细胞对药用昆虫产生抗药性的几率。另外，部分药用昆虫还可以用于其他抗癌疗法的辅助药物，或与其他药物配伍使用，所以药用昆虫运用于抗癌领域将成为未来的热点之一。

当然，要实现药用昆虫的广泛应用还需要解决目前存在的一些问题：一是药用昆虫本身的成分复杂，一部分具有抗癌效果的药用昆虫尚处于实验阶段，其作用机制尚不清楚；二是药用昆虫的药效缓慢，需要研究其活性成分，进行新药研发；三是我国现阶段入药的昆虫大部分是从野外采集的，药用昆虫养殖业还处于起步阶段。

但是，随着我国政府对中医药重视程度的提高，免疫学、分子生物学技术和中药药理学的不断发展以及中药提取技术的日益成熟，我国研究人员必将会把药用昆虫及其有效成分更好地应用于抑癌和治疗癌症，从而得到国际社会的广泛认同。

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