血细胞分析仪范文

时间:2023-12-04 01:48:39

血细胞分析仪

血细胞分析仪篇1

血小板计数是血液常规检验的重要项目之一,在临床检验工作中,常发现少数病人经全自动血细胞分析仪进行血小板检测时,血小板测定值常不准确,血小板数值与临床症状不相符,为探讨其发生原因,本文对120例健康人血标本进行重复监测,寻找血细胞分析仪计数血小板的准确性及重复测定的可比性及影响因素。

1.材料与方法

1.1仪器

深圳迈瑞公司生产的BC-5500血液分析仪。

1.2试剂

BC-5500专用配套试剂(溶血剂、稀释液、清洗液)。

1.3其他

校准物与质控液,全血校准液(由深圳迈瑞公司提供),全血质控物(由青海省临检中心提供)。

1.4方法

1.4.1按仪器维护保养要求,对仪器进行全面的维护,经常保持微孔的清洁,以保证BC-500在正常条件下批内重复测定变异数(RCV)在规定范围内,每次实验前血液分析仪用全血校准物校准仪器后,严格按仪器操作步骤进行测试。

1.4.2用含EDTA-K抗凝管,采集120例健康人静脉血2ml,轻轻混匀后,立即在血液分析仪BC-500上测定3次,然后分别于5、10、20、30、60min各测3次,并用全血质控物质同步监测仪器,分别计算其均值,按时间分组,分别利用多样本均数间显著性检验与配对t检验进行统计学分析。

2.结果

2.1标本自身因素的影响

由于采血过程不顺利,过分挤压或未充分与抗凝剂混匀等因素人为造成血小板的凝集,是造成血小板计数不准确的首要原因。

2.2标本放置时间的影响

WBC在采血后0―30min内随时间延长其数量不规则递减,组与组之间差异有显著性(P

2.3血小板聚集分可逆聚集和不可逆聚集

当新鲜静脉血加入EDTA―K2:抗凝瓶混匀后血小板即发生聚集反应,此时立即进行全血细胞测定,可逆聚集的血小板还没有解聚,会造成全血细胞分析结果误差。白细胞不同程度假性升高,直方图的小细胞群会出现一个很高的截距,血小板不同程度的假性降低,直方图就会出现锯齿波或尾部抬高。但抗凝血静置30min后,再进行测定,即可消除上述假性结果。100例静脉血放置不同时间各参数的均值比较可看出60min与30min测定值差异无显著性(P>0.05),30min与20min测定值差异有显著性(P

3.讨论

BC-5500型血细胞分析仪计数血小板的原理是直接计数2―20fl范围内的血小板,根据正态分布理论,用电子拟合线拟合0―70fl范围内的血小板数量作最终报告结果,具有双曲线的血小板直方图是它的标准结果,只具有单曲线的血小板直方图,只要成正态对数分布,曲线在20fl范围内有明显的主峰,其仪器计数法与显微镜计数法较一致,与临床基本吻合[1]。血小板膜分内膜和外膜,外膜围绕胞质形成浆膜,并延伸到胞质内部并折叠形成开放微小管系统,它是血小板摄取和释放的通道。质膜内侧附着许多微丝,其主要成分为肌动蛋白的肌凝蛋白,与微管环周束共同支持伪足的形成。当新鲜静脉血离体加入EDTA―K抗凝瓶内,管壁周围的全血外环境及温度发生改变,使血小板形态发生变化[2]。由于血小板发生聚集,在阻抗法做血小板计数时,聚集体所产生的脉冲大于仪器预设的单一血小板脉冲值,因而就不会计数血小板结果内,从而使血小板数量减少。

故血小板聚集的原因可能有:

(1)抗凝剂EDTA―K2:能使血小板形态发生改变。由盘状变成球状,从而使可逆聚集血小板的伪足回缩到血小板胞质内,血小板相互缠绕的伪足就可解除。

(2)可逆聚集的血小板由于形态有所改变及伪足的形成,增大了血小板表面积,其表面负电荷相应增大,同性电荷的排斥力也就相应增强。

(3)温度升高,分子运动速度越快,温度对可逆聚集血小板解聚的影响尤其在用预稀释方法作全血细胞测定中更为明显。

(4)溶血剂的加入量、溶血时间和仪器检测的清洁度有关,因此必须保持微孔的清洁,才能保证仪器测定的可靠性。原因:经EDTA―K2抗凝的全血标本,在采血30min后进行全血细胞分析,可提高结果的准确性。但需排除化疗、血小板减少性紫癜、白血病及造血系统异常等疾病。血小板形态不规则且细小,任何灰尘和斑点都会影响计数。反复使用的测定管极易引起杂质吸附,造成残余溶血素污染,从而引起PLT计数偏高。血细胞分析仪检测血小板的准确性取决于很多因素,环境、温度、抗凝剂混合情况以及所有影响电脉冲大小及数目的因素都会影响正确计数。因此,只有正确操作,排除各种干扰,才能使血小板的计数结果准确靠。

参考文献:

[1]毛赛锦.血细胞分析仪测血小板结果偏低的原因分析[J].实用中西医结合临床,2007,7(1):64-65.

血细胞分析仪篇2

血小板假性减低的因素

采血不顺利:此种情况多发生在老人,儿童及体质较差的的患者身上,因采血不顺引起组织损伤,凝血因子混入血标本造成血小板集聚[1],产生微小的目测不到的凝块。这是引起血小板假性减低最常见的原因。这些标本涂片镜检时可见大量的血小板凝聚成团。

标本放置时间:用EDTAK2作为抗凝剂已被国际血液学标本委员会认定并广泛应用。EDTAK2会使血小板形态发生变化,其外膜形成微小管。游离端向外伸展形成伪足,这些伪足缠绕在一起形成血小板可逆聚集体若在。此时测定血小板会假性减低,直方图呈锯齿状异常。但随着时间延长可逆性聚集体会破坏[2]。因此采取室温放置30分钟可以避免这种情况的血小板假性减少[3]。

血小板EDTA依赖性聚集:一些患者血标本与EDTA抗凝剂混合后其血小板会发生EDTA依赖性聚集,有报道认为血小板EDTA依赖性聚集与血小板表面抗原(IGA、TGG、IGM)的自身抗体以及患者血清中抗心磷脂抗体有关由于全细胞分析仪对凝集体的结构不能识别,一些血小板未被计数导致血小板假性减低[4],这种凝集可见血小板直方图异常,涂片镜检可见大量血小板凝集成团。

巨大血小板导致血小板计数假性降低:病人由于某些疾病血小板体积较大,超出了血细胞分析仪测定血小板的阈值,使血小板计数假性降低。在此种情况可见血小板直方图底部分布较宽,MPV值较高。血涂片瑞氏染色后可见血小板体积较大。

血小板卫星现象:血小板卫星现象是指EDTA抗凝血中血小板黏附于白细胞周围,这是由于白细胞表面的IGG或FC片断与血小板表面的GPⅡB/ⅢA结合所致。由于一些血小板黏附于白细胞上,细胞分析仪计数血小板时未被计入导致血小板假性减少[5]。通过血涂片镜检可见大量血小板围绕在多形核白细胞的周围,形状很象卫星。这种情况较少见,有报道称加入枸橼酸盐可消除此现象。

血小板假性增高

溶血:标本溶血后红细胞和白细胞受到破坏,破碎的红白细胞碎片体积和血小板相近,都可被细胞分析仪误计为血小板,使血小板计数假性增高。

小红细胞:如果红细胞体积过小,接近血小板体积的测定范围,由于仪器只识别颗粒大小,不识别颗粒性质,误将小红细胞计成血小板,导致血小板假性升高,此种情况可见血小板直方图尾部异常,涂片镜检可见红细胞体积较小。

总之,造成血小板误差的原因很多。这要求在实际工作中不仅要严格按照操作规程操作,还要仔细审核结果,如果发现血小板数目过高或过低、直方图分布异常、计数与临床不符时都应涂片镜检并重新计数。

参考文献

1 李永红,钟步云.血液分析仪测定血小板结果偏低的原因及纠正方法[J].临床检验杂志,2001,19(2):112.

2 丛玉隆.当代血液分析仪与临床[M].北京:人民卫生出版社,1997:34.

3 李胜发,程大林.血小板可逆性聚集在全血细胞分析仪中的影响[J].临床检验杂志,2003,21(1):37.

4 李莉玲.探讨血细胞分析仪测量瓶小板异常的因素[J].实用医技杂志,2008,15(18):2370-2371.

血细胞分析仪篇3

【关键词】血细胞分析仪;校准;误差

全自动血细胞分析仪快速、方便、精确度高,是人工无法替代的阻抗法三分群。血液分析原理是溶血素破坏RBC后,根据白细胞体积大小通过计数通道时所产生的脉冲大小来对WBC进行分类计数。显微镜下计数WBC是在油镜下通过观察细胞大小、形态、染色质的结构特点,胞浆的着色特点,有无核仁等对白细胞进行分类。不同的仪器直方图是不同的,但只要是白细胞直方图出现R1、R2、R3报警,都要进行形态学复检。异常白细胞直方图只是让检验者粗略判别各类白细胞比例或有无明显异常细胞,进而进行形态学复查时注意这些变化的真正意义,而不能仅凭白细胞直方图的变化来进行诊断。血液分析仪只对典型的血液病做出提示性诊断,以便作进一步检查。如果使用不配套的试剂导致直方图不典型或对报警掌握不够,就会忽视血涂片造成漏检甚至误检。

1资料与方法

1.1样本来源:健康人及临床患者新鲜抗凝全血(EDTA-K2,抗凝真空负压采血管采集)。

1.2方法:仪器校准:用校准参考仪器MEK7222-K型血细胞分析仪之进口原装配套校准品对其进行校准,再在该仪器上将健康人新鲜抗凝全血连续测定11次,弃去第1次结果,计算其余10次各指标之均值作为新鲜血参考定值。用此定值新鲜血代替校准品对BC-5500及ABX-60两台血细胞分析仪进行校准(样本采集到校准完成4小时内结束)。

1.3比对试验:选取临床患者高、中、低值5份新鲜抗凝全血在上述校准后的各台仪器上与其他样本一同测定(测平行样取均值)。以MEK7222-K型血细胞分析仪所测结果为标准,分别计算BC-5500及ABX-60两台血细胞分析仪所测结果之偏差(CV%)。

2结果

用新鲜血校准的BC-5500、ABX-60两台血细胞分析仪之检测结果与校准参考仪器MEK7222-K分析仪之检测结果配对比较t检验,均为P>0.05,表明差别无显著性意义;RDW最大CV值为3.8%,PLT最大CV值为6.9%,MPV最大CV值为14.6%,其余各项指标CV值均<3.0%,五项基础指标之偏差均小于卫生部临检中心允许的可接受范围:WBC<2.8%、RBC<2.5%、HGB<2.0%、HCT<2.6%、PLT<6.9%。

3讨论

血细胞分析是临床最常用的实验室检测指标,其结果的准确与否直接影响到多种疾病的诊疗。全自动血细胞分析仪由于计数准确,精密度高,操作简便、快速,因而发展迅速,已逐渐取代传统手工方法,成为临床实验室的主要检测手段。但由于生产血细胞分析仪的厂家多,各自使用的测定原理和方法不尽相同,导致其测定结果及参考范围有所差异。国内各医院使用不同厂家和型号的血细胞分析仪已成为普遍现象,致使分析结果呈现不同程度的差异,给临床跟踪观察与对比带来困难。

血细胞分析结果只有直接或间接地溯源至参考方法,才能保证检测结果的正确性和不同仪器间结果的可比性。血细胞分析仪校准品是权威部门认可的标准物质,只能用于与之配套的同一品牌型号的仪器,由于其价格昂贵、有效期短、进口入关手续复杂而不能及时获得等问题,使其难以在实验室推广。

所谓自动血细胞分析仪实际上就是一台比较器,它将实测数据与校准数据进行比较,继而得出检测标本的分析结果。由此可见,校准物在仪器测定结果的准确是否上起到决定性作用。最好的校准品是经ICSH推荐的参考方法定值的新鲜人体血液:①氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白(HGB)。②微量红细胞压积法测定红细胞比容(HCT)。微量计数板手工计数RBC和WBC。③相差显微镜计数血小板,该新鲜血适用于各种型号仪器的校准。有报道可购买一台性能最佳血细胞分析仪之配套校准品校准该仪器,再以该仪器作为校准参考仪器取得新鲜血各项参数用于其他多台仪器的校准。上述比对结果显示:用新鲜血校准的BC-5500及ABX-60两台血细胞分析仪与校准参考仪器MEK7222-K分析仪各参数间进行配对资料t检验,均为P>0.05,表明差别无显著性意义;五项基础指标之CV值均小于卫生部临检中心允许的可接受范围:尤以WBC、RBC、HGB、HCT四项指标的符合性最好。因EDTA-K 2抗凝血中,血小板体积不稳定,随时间延长而增大,可能是导致PLT、MPV偏差较大的主要原因。

实验结果证明,用配套校准品校准一台性能最佳血细胞分析仪,再用新鲜血在该仪器上取得参数后去校准其他多台分析仪可取得满意结果,该方法既简便易行又经济实用。

参考文献

[1]彭明婷,谷小林,等.不同方法校准血液分析仪结果比较.中华检验医学杂志,2000,23(1):35-37.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜,等.全国临床检验操作规程.南京:东南出版社,2006:47-81.

[3]顾可梁,陈军浩,谷俊侠,等.医学实验诊断学进展.南京:东南大学出版社,2000:47-53.

[4]展风霞,王谦,杨晓静,等.新鲜全血代替效准物在多系列血液分析仪上的应用.临床检验杂志,2003,21(3):167.

血细胞分析仪篇4

关键词:血液细胞分析仪 计量检定 影响因素

在二十世纪五十年代,美国库尔特发明血细胞分析仪,且发展较快,在医院得到了大范围的推广应用,为医护人员的诊断提供了科学的数据支持,因此血液细胞分析仪在我国疾病诊断中占据非常重要的位置[1]。目前我国血液细胞分析仪计量检定所使用的标准是我国1990年颁布的《血细胞分析仪》,以作为血液细胞分析仪计量检定的性能指标。但是在实际操作过程中,血液细胞分析仪常出现细胞计数不正确的现象,笔者对血液细胞分析仪计量检定影响因素进行分析,希望对其他工作人员有所帮助。

1血液细胞分析仪计量检定的必要性

血液细胞分析仪在正常操作的过程中,会受到多种因素的影响,影响血液细胞分析仪监测结果的准确性,因此在血液细胞分析仪使用的过程中,要对血液细胞分析仪计量检定,以保证检测结果的准确性与可靠性,从而提高相关工作的有效性,不同型号的血液细胞分析仪有其相对应的检定指标存在,综合我国存在的多个血液细胞分析仪检定指标,现总结如下:①红细胞(RBC)计数的准确性在±6%之间;②白细胞(WBC)计数的准确性在±10%之间;③血红蛋白(Hb)计数的准确性在±(3+3%×C)g/L之间;④血小板(PLT)计数的准确性在±10%之间;⑤上述四种血液细胞的重复性低于3%[2]。

2血液细胞分析仪计量检定的影响因素

2.1血液细胞分析仪检测技术的限制

一般情况下,血液细胞分析仪有以下几部分组成:电学细胞、计算机控制系统、机械系统以及细胞检测系统[3],最重要的是细胞检测系统,严重影响细胞技术结果的准确性,而我国现阶段使用的血液细胞分析仪检测技术主要是光散射检测与电阻抗检测。由于两种检测技术的限制,不能很好的分辨各种细胞,因此会影响血液细胞分析仪的检测结果,影响白细胞的检测或者是血小板,且随着科学技术的不断进步,阻抗技术的不足日渐明显。而光散射检测技术对细胞的分类更为仔细,还可以与比色法[4]进行综合,有效提高了血液细胞分析仪检测结果的准确性,但是费用较高。

2.2血液细胞分析仪试剂的不良影响

血液细胞分析仪在使用过程中,主要会用到清洗剂、溶血素和稀释液三种试剂,其中清洗剂主要是对血液细胞分析仪进行清洗,以清除污染,由于不同血液细胞分析仪设计理念的区别,因此清洗剂的使用并不是一成不变,需要工作人员根据血液细胞分析仪的具体情况,选择使用清洗剂的最佳时机。通常情况,清洗剂中存在着活性酶,能够去除血液细胞分析仪管道与计数池中存在的污染物,且效果明显,但是清洗剂的保质期较短,如果工作人员为了节省资金成本投入,一味的选用质量较差的清洗剂的话,会促使血液细胞分析仪中的管道向着硬、变色以及堵塞的方向发展,导致检测结果的变化,且误差较为明显[5];溶血素主要是针对血液中的红细胞来说的,将红细胞逐渐溶解,为白细胞的计数提供便利,但可以导致白细胞膜出现穿孔,白细胞中的胞浆流失,而溶血素主要是通过空白值、吸光度、吸收峰波长以及PH值来体现。吸光度、吸收峰波长会影响比色法的使用效果,最后影响血红蛋白的检测结果出现误差,一旦溶血素的使用效果不彻底,就会导致部分的红细胞被当做是白细胞来使用,导致白细胞的计数结果出现极大的误差,也就是说溶血素的使用会严重影响白细胞与血红蛋白的计数结果;稀释液主要是对血液细胞来稀释,以降低血液细胞出现粘连与聚集的几率,稳定血液细胞的理化指标,但是稀释液的理化指标受到血液细胞分析仪型号的影响,从而严重影响血液细胞分析仪的检测结果。在稀释液使用的过程中,如果稀释后的血液细胞长时间的放置后,会产生较为明显的分层,影响溶液的稳定性。

2.3标准物质的影响

在血液细胞分析仪计量检定工作开展的过程中,可以通过红细胞的微粒标准物质来实现红细胞的检定,白细胞的微粒标准物质来实现白细胞的检定,都是以电阻法原理为基础。如果血液细胞分析仪中的计数结果显示是0的话,则说明没有通用性,而血红蛋白的微粒标准物质已经停止生产。但是目前我国所使用的血液细胞溶液标准物质需要严格按照规定的要求进行,以避免对标准物质的损伤,从而导致血液细胞分析仪检测结果存在误差。

标准物质在运输过程中会受到多种因素的影响,例如震荡明显对挤压红细胞,导致红细胞出现破裂或者是变性,从而导致血红蛋白的释放,而运输时间过程的话,温度又无法受到保障,一般情况下,运输温度需要保持在2―8℃,且需要使用运血箱,能将血液维持2天2夜,一旦温度高了,就会造成溶血现象的出现。而标准物质在使用过程中,工作人员在取出后,应立即盖上盖,并将温度控制在2―8℃之间[6],工作人员可以连续使用10d,将标准物质对血液细胞分析仪计量检定结果的影响控制在最小化,以减小误差的存在。

2.4计量检定操作

在血液细胞分析仪计量检定的过程中,工作人员最好选择使用全血模式,以有效降低血液细胞的重复性,以确定稀释液与样品量之间的关系。而在标准物质的测量之前,需要血液细胞分析仪对细胞的基数进行检测。而血液细胞分析仪在安装与使用的过程中,会出现地线安装不当、接头松动的现象,会对血液细胞的计数结果产生影响,尤其是地线连接问题尤为明显,工作人员需要及时的查清原因,并对血液细胞分析仪进行清洗与调整,重新进行地线的安装,以保证血液细胞分析仪符合规定的要求。

而在使用环境中,温度会直接影响血液细胞分析仪计量检定的结果,特别是温度较低的话,会导致血液细胞发生异变,出现凝聚的现象,因此为了降低温度对血液细胞分析仪计量检定结果的影响,将环境温度控制在15―35℃的范围内。灰尘也会严重影响血液细胞分析仪计量检定的结果,尤其是在血小板计数中,容易将灰尘当成是血小板来看待,导致血小板的计数结果偏高。因此血液细胞分析仪在存储过程中要保证环境的清洁性,并定期进行打扫,以保证探头的清洁性,降低对血液细胞分析仪计量检定结果的影响程度。工作人员还要注意电信号、噪音、磁场以及电压等对血液细胞分析仪的影响,提高血液细胞分析仪计量检定结果的准确性。

结语:

综上所述,血液细胞分析仪在计量检定的过程中,受到多种因素的影响,因此工作人员要严格按照规定的要求执行和操作,以有效降低影响因素的影响力,提高血液细胞分析仪计量检定的准确性。

参考文献:

[1]吴津婷.血细胞自动分析中血液质量与环境因素影响探讨[J].内蒙古医学杂志,2011,05(10):1159-1162.

[2]夏寿扬,钱芳.血液细胞分析仪结果比对与一致性评价方法探讨[J].检验医学与临床,2012,07(13):1602-1603.

[3]郭奉洁,赵利,佟爱华,匡铁吉.脂肪乳对Sysmex XE-2100血液细胞分析仪网织红细胞检测的影响[J].临床军医杂志,2012,02(04):944-945.

[4]马俊萍.血液细胞分析仪与目视显微镜检测对白细胞分类结果的比较[J].山西职工医学院学报,2008,02(03):35-36.

[5]郭利利,顾平.LH750血液分析仪的干扰因素分析及处理[J].山西医药杂志,2013,04(07):775-776.

血细胞分析仪篇5

[关键词]血细胞;SysmexXE-5000;评价

[中图分类号] R466.11[文献标识码]B[文章编号] 1673-9701(2011)19-99-03

Performance Evaluation of Sysmex XE-5000 Automated Hematology

LIU WenZHENG XinLIU Xiaomin

Department of Clinical Laboratory,Cancer Center,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510060,China

[Abstract] ObjectiveTo evaluate the function of the Sysmex XE-5000 automatic hematology analyzer. MethodsPrecision, linearity, carrier rate and blank test were analyzed to evaluate the performance of XE-5000 according to the requirements of NCCLS and ICSH. Results The result of blank test, precision, linearity, carrier rate were well. Comparing with the reference analyzer, the index of XE-5000 showed the percentage of differences is<3%.There is excellent correlation with those by microscope(R2>0.8).ConclusionThe performance of Sysmex XE-5000 was all in the allowable range(supplied by factory authorities).It is satisfied the demands on different hospitals.

[Key words] Hematology;Sysmex XE-5000;Evaluate

血液分析仪是医学实验室重要仪器之一,它的性能直接关系到检验报告的准确性。Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪是一台五分类全自动血液分析仪,除采用传统的电阻抗法和射频法外,还用流式细胞技术,结合特殊化学试剂及荧光染料作外周血白细胞的分类。我们参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)和国际血液学标准化委员会(ICSH)有关文件对临床应用的Sysmex XE-5000血液分析仪的性能进行评价。

1材料与方法

1.1 仪器

Sysmex公司生产的XE-5000全自动血细胞分析仪(序列号A1636);LH750(序列号AS23099)。日本OlympusCX31光学显微镜;EDTA- K2真空抗凝管(2mL)由阳普公司生产。

1.2试剂

XE-5000质控物为Sysmex原厂质控,批号为QC-10300810、QC-10300811、QC-10300812;LH750质控物为BECKMAN原厂质控,批号为QC-860300、QC-870700、QC-880600。仪器试剂均为SYSMEX和BECKMAN原厂试剂。

1.3 标本

2011年2月本院的住院和门诊病人或健康体检者。

1.4 方法

1.4.1 仪器校准及质控首先对Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪用其配套校准品(LOT:0320525)按校准程序校准,结果与靶值比较后根据需求对仪器参数进行修正,验证结果各参数与靶值偏差在可允许范围内,表明校准合格。LH750血液分析仪使用期间均用配套的校准品(LOT:4790)按要求校准合格。仪器每日测试前均做本底及质控,检测指标在控后进行标本测试。

1.4.2空白实验使用稀释液为样本测定三次,测定结果为空白实验结果。

1.4.3精密度 (1)批内精密度:使用原装配套高、中、低值3份定值质控品,每份连续重复测定11次,第一次结果去掉,统计后10次CBC(全血细胞计数)各项目的CV(变异系数)值。(2)批间精密度:使用原装配套高、中、低值3份定值质控品,每份连续测定20d,计算CBC各项目的CV值[6]。

1.4.4线性范围(1)高值标本的准备:①RBC、HGB、HCT:取新鲜全血,室温下倾斜45°放置2h,分离血浆,此为高值标本[3],将其加入稀释液稀释成5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%的浓度;②WBC:取新鲜全血,800r/min,离心20min,弃血浆,剩余部分3000r/min离心10min,收取白膜移至另一试管,如此反复收集直至足够量的WBC,此为高值标本,将其加入稀释液稀释成5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%的浓度;③PLT:取抗凝血,800r/min,离心5min,取血浆3000r/min离心10min,弃去上清液,如此反复收集直至足够量的PLT,此为高值标本,将其加入稀释液稀释成5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%的浓度。(2)低值标本的准备:再取一份WBC、RBC、HGB、HCT、 PLT均正常的标本,将其加入稀释液稀释成0%、5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%的浓度。(3)标本的检测将上述标本混匀后,每个浓度测定3次,取平均值[4]。(4)数据统计:用SPSS1.6对不同稀释度的实测值与预测值进行线性回归分析 [4]。

1.4.5 污染携带率采用ICSH制定的程序[7],先取一份高值标本,连续测定3次,随后取一份低值标本连续测定3次,按以下公式计算:携带污染率=(低1-低3)/(高3-低3)×100%[1]。

1.4.6 仪器可比性测量一份新鲜血标本,在室温下分别用Sysmex XE-5000和Coulter LH750连续测定五次结果的均值定为靶值,计算两值之间的差异百分率[5]。

1.4.7与显微镜人工分类结果比较 取48份住院患者的抗凝血在Sysmex XE-5000上测定,每份样本连续测3次取均值。同时每份血推3张符合质控要求的血片,染色后由3位有经验的检验技师用单盲法在体尾交界处进行白细胞分类,每张血片油镜分类计数200个白细胞,分为中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、单核细胞(M)、嗜酸性粒细胞(E)和嗜碱性粒细胞(B)(如一人结果比其他二人明显高或低, 则剔除过高或过低数据),再与Sysmex XE-5000仪器的白细胞分类值进行比较。

2结果

2.1 空白试验

由表1可见,空白试验结果良好,各指标小于仪器限值。

2.2精密度试验

仪器精密度评价依据CLIA’88规定的室间质量评价标准允许误差的1/4作为判定规则,即CV值满足:WBC≤3.75%,RBC≤1.5%,Hb≤1.75%,HCT≤1.5%,PLT≤6.25%;由表2可知,Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪精密度良好,均小于CLIA’88规定的室间质量评价标准允许误差的1/4。

2.3线性试验

由表3可知,Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪的线性良好(a值在1±0.05范围内,相关系数R2≥0.975),线性范围宽,基本达到厂家说明书的线性范围;由于实验条件的限制,WBC与PLT项目没有做到厂家说明书的线性范围,但已经能够覆盖实验室日常标本线性范围。

2.4携带污染率

由表4可知,Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪的携带污染率低,符合标准。

2.5仪器可比性

不同血细胞分析仪之间各指标的评价依据CLIA’88规定的允许误差的1/3作为判定规则,即差异百分率满足:WBC≤5.0%,RBC≤2.0%,Hb≤2.33%,HCT≤2.0%,PLT≤8.33%。由表5可知,Sysmex XE-5000与实验室现有仪器之间有较好的可比性。

2.6与显微镜人工分类比较

由表6可知,Sysmex XE-5000的白细胞分类与人工显微镜镜检分类相比,相关性良好(R2>0.8)。

3讨论

对新安装的仪器在没用于检测临床患者标本前都应该要做性能评价,其性能达到实验室要求方可使用。作为希森美康公司X系列全自动五分类血液分析仪最新和最高端的产品,XE-5000血液分析仪的检测功能、检测参数都有了极大的扩展和提高。第一,在白细胞计数方面:采用核酸荧光染色技术和激光流式细胞技术双方法检测白细胞总数,参数分别为WBC-D和WBC-C,XE-5000自动在这两种方法的检测结果中选择一个最准确的结果报告为白细胞总数,因此能有效排除电阻抗法或单纯光学法不能解决的难溶红细胞、巨大血小板、血小板聚集和细胞碎片等对白细胞计数的干扰;第二,在白细胞分类方面:XE-5000在三个通道中进行白细胞的分类,分别是DIFF通道、WBC/BASO通道和IMI通道,从而达到对白细胞精准分类的要求;第三,在红细胞和血小板计数方面:XE-5000在红细胞/血小板检测通道采用鞘流电阻抗、在网织红细胞检测通道采用激光流式法两种方法计数红细胞和血小板,分别表示为RBC-I、RBC-O和PLT-I和PLT-O。鞘流电阻抗法能有效避免细胞重叠、侧向或返流通过检测部产生的脉冲误差,使检测结果更准确。在网织红细胞检测通道的激光流式法因采用了DNA/RNA核酸荧光染色,因此对一些临床特殊样本如高白细胞、巨大血小板增多症细胞碎片、小红细胞时有较强的抗干扰能力。

通过对XE-5000全自动血细胞分析仪的性能评价发现,该仪器全血细胞计数(CBC)各参数空白试验良好;批内和批间精密度均小于CLIA’88规定的室间质量评价标准允许误差的1/4,精密度试验表明仪器有较高重复性,能满足临床应用的要求;线性良好、白细胞和血小板由于试验条件限制,线性范围略低于仪器技术指标,五个参数线性范围基本能覆盖临床样本浓度范围;携带污染率低,各指标均低于0.3%达到仪器技术指标;与现有仪器检测结果可比性强,各参数偏差均小于CLIA’88规定的允许误差的1/3;与人工显微镜镜检分类相比,相关性良好(R2>0.8)。

总而言之,通过对XE-5000血细胞分析仪的性能评价,结果显示该仪器测定速度快、检测参数多、精密度高,线性范围宽、携带污染率低,与已知性能的血细胞分析仪可比性强,是一种性能优良的全血细胞分析仪,是临床实验室较理想仪器。

[参考文献]

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(收稿日期:2011-03-31)

血细胞分析仪篇6

关键词 KX—21血细胞分析仪中间细胞增高原因

近年来,随着科学技术的突飞猛进,临床医学检验学科也在迅速的发展壮大,先进的电子技术、流式细胞术、激光技术、单克隆技术和计算机等高科技在血细胞分析仪上得到应用,现在的血细胞分析仪无论在自动化阶段、先进功能和完善设计方面均提高到一个崭新阶段。Sysmex KX—21是一台三分类全自动血细胞分析仪,即把白细胞按体积大小和内部结构分为三类:大细胞类为粒细胞群,体积大于160fl细胞,主要包括中性分叶核粒细胞及中性杆状粒细胞两种;中间细胞类为中间细胞群,细胞体积90~160fl大小,此类细胞包括单核细胞、酸性粒细胞、碱性粒细胞、未成熟的幼稚细胞和异常淋巴细胞等;小细胞群为淋巴细胞群,细胞体积35~90fl大小,主要包括小淋巴细胞及少数的大淋巴细胞等,根据多年的临床经验,总结了关于Sysmex KX—21全自动血细胞分析仪在检测血常规时中间细胞增高的原因,并对其进行了探讨。现报告如下。

资料与方法

标本来源:门诊患者及住院患者。

仪器与试剂:①仪器:Sysmex KX—21全自动血细胞分析仪。②试剂:Sysmex公司原装进口试剂;瑞氏姬姆萨复合染色液。

方法:严格按操作规程采血,手工法将末梢血与稀释液1:20稀释,并严格按照仪器说明书进行上机操作,1小时内完成计数,采血的同时推一张血涂片。将血常规结果中中间细胞>15%的标本,同时将血涂片进行瑞氏姬姆萨复合染色后镜检,按常规方法分类计数100个白细胞,看中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及异常的幼稚细胞和异型淋巴细胞各占多少,用百分比报告。

结果

从日常检测的标本中,随机抽取50例中间细胞增高的标本,其中中间细胞实际增高20例(40%),假阳性中间细胞增高30例(60%)。

20例阳性结果分类:中间细胞增高3例,为血液病患者,其中包括急性白血病、慢性白血病及各种类型贫血引起的感染,其中的14例以单核细胞及异型淋巴细胞增多为主;主要为各种癌症患者化疗后细胞变异及肝硬化患者和原因不明感染患者;另外有3例为过敏性反应、哮喘及寄生虫患者并以嗜酸性粒细胞为主。

讨论

三分类血细胞分析仪是应用电阻抗原理对细胞进行计数和分类的[1]。根据细胞的大小把35~90fl的细胞作为小细胞群,一般为淋巴细胞;160~350fl的细胞作为大细胞群,一般为中性粒细胞;在两者之间的90~160fl的细胞为中间细胞。一般情况下,中间细胞应包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、异常淋巴细胞等,一般以单核细胞为主。

由于高科技的应用,使血细胞分析仪更迅速精确,为临床诊断和治疗提供了重要依据,从而提高了实验室工作效率,但是,高性能的血细胞分析仪虽然具有良好的技术性能,检测的灵敏度也很高,计数血细胞的大小体积是利用光散射计数、计数板扫描及电阻变化产生脉冲电流而计数,但无论采用阻抗法、激光法还是其他技术,都不能对每个细胞完全识别,特别是白血病细胞、正常单核细胞和非典型淋巴细胞[2],都存在假阳性结果。故血细胞分析仪还不能完全代替传统的显微镜检查,对于已诊断为血液病的患者或怀疑存在异常细胞的标本,即使仪器结果正常也应做显微镜检查,以免漏诊。

对于假阳性结果的出现,认为是由于少部分中性分叶核细胞体积过大或大淋巴细胞体积过大,仪器误将此类细胞计数为中间细胞造成的假阳性中间细胞增高,此种原因多见。其次,由于试剂清洗液杂质多、温度、湿度、环境等因素的改变,亦会使测定的结果产生飘移,仪器管道老化或突发的电压不稳定造成的干扰亦会使中间细胞增高。再者,由于室内温度过低造成的红细胞聚集及红细胞碎片和冷蛋白的干扰,如巨球蛋白血症,自身免疫性疾病。某些感染时血中含有冷球蛋白或血栓疾病、糖尿病等血中存在冷纤维蛋白,使血中晶体物质发生聚集,从而导致细胞计数偏高,亦可能会导致中间细胞假阳性增高。

以上是我们的点滴经验和探讨,我们认为每个检验工作者在日常工作中要注意在检测血常规时,如发现中间细胞偏高,一定要将血涂片进行瑞氏染色后,用显微镜计数分类后再报告,尤其要避免白血病患者以及流行性出血热患者的误诊和漏诊,从而为临床提供准确无误的检验报告单。

参考文献

1叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].南京:东南大学出版社,2006:123—124.

血细胞分析仪篇7

【关键词】 血细胞分析仪; 血涂片; 临床对比

Clinical Comparative Study on Abnormal Analysis Results of Blood Cell Analyzer and Blood Smear/YU Wen-hui,LIU Feng-ling,XIA Jun.//Medical Innovation of China,2016,13(18):058-061

【Abstract】 Objective:The specimen smears were stained by the blood cell analyzer,and the number,form and classification of blood cells were compared to those results of blood cell analyzer to verify if the results of the blood cell analyzer are reliable and accurate.Method:Two thousand specimens of patients showing abnormal blood cell analysis results via the blood cell analyzer admitted from June 2013 to June 2015 were subjected to research and analysis,and such results were subject to analysis and comparison to results determined via blood smear microscope.Result:The number of platelets of patients were higher than that of normal specimen smears,being the same to results of the blood cell analyzer,but the number of partial platelets didn’t coincided with normally lower part,pseudo thrombocytopenia resulted from the aggregation of platelets must be subjected to blood smear detection.The results of RBC volume tested via blood smear microscope were the same to those via blood cell analyzer.Abnormal WBC specimens classified or unclassified were required to subject to blood smear microscopy.Conclusion:Testing results by using of blood cell analyzer are abnormal and not completely reliable,only the comparison of smear staining microscope test results can the disadvantage of the blood cell analyzer failing to correctly identify abnormal cell compositions,accurate and scientific results are obtained finally,decreasing the misdiagnosis probability of patients.

【Key words】 Blood cell analyzer; Blood smear; Clinical comparison

First-author’s address:Liujiang County People’s Hospital,Liujiang 545100,China

doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2016.18.017

随着医院血细胞分析的标本逐渐增多,与传统手工检测方法比较,血细胞分析仪由于其操作方便、高效、提供参数较多及准确,并能够对某些血液性疾病诊断与临床疗效提供依据,因此被临床广泛应用。最后出现检验人员对血细胞分析仪太过依赖,从而对血涂片镜检测的忽视,发生误诊、漏诊的现象,对患者诊断治疗造成了延误[1-4]。笔者为探究血细胞分析仪分析结果异常和血涂片进行对比血涂片镜检测的重要性,选取本院2000例涂片标本作为研究资料,取得较好效果,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将本院2013年6月-2015年6月接收的通过血细胞分析仪实施血细胞分析结果出现异常的患者标本2000例进行研究分析,其中男性标本1100例,女性标本900例,年龄6~67岁,平均(42.62±1.64)岁。贫血标本1200例,即女性血红蛋白不超过110 g/L,男性不超过120g/L,白细胞总数异常、散点图异常、仪器不分类、分类显著异常标本350例,血小板的数量有异标本450例。

1.2 检测仪器 仪器:希森美康XN-1000,试剂:XN-1000配套原装试剂,质控品:烟台卓越,显微镜:OLYMPUS(型号:BX51)。

1.3 方法 血细胞分析仪检测出现结果异常的标本均与将其血涂片镜检测结果选出两组进行对比分析[5]。其中血细胞涂片制定严格按《全国临床检验操作规程》中相关操作规程实行。

2 结果

2.1 贫血患者标本 其中大细胞性贫血150例,小细胞低色素性贫血600例,正细胞性贫血450例。大细胞性贫血:红细胞的总数与正常值相比明显较低,其体积大部分在105~130 fL;其中男女比例无差异,部分患者的血小板数量比正常值较低,其白细胞总数正常或者较低,在分类之中,其中性分叶核分叶较多。小细胞低色素性贫血:红细胞体积为55~75 fL与正常值82~95 fL比较明显较低,其红细胞数量正常。小细胞低色素性贫血主要的人群多为幼儿与中青年,其中幼儿330例,中青年男性150例,女性120例。白细胞分类与总数不定,血小板的数量未减少,大部分有增高。大细胞性贫血150例与小细胞低色素性贫血,其红细胞体积与其血涂片镜下检查的红细胞体积均无明显差异,可不进行涂片镜下检测。正细胞性贫血:450例正细胞性贫血患者标本中,其红细胞的数量均较少,体积正常,白细胞分类与总数正常,但血小板的数量未定,涂片染色镜检测发现,红细胞3例缗钱状排列,通过临床医师实施骨髓穿刺检测明确诊断为多发性骨髓瘤。因此对未明原因的贫血标本需通过血涂片镜下检测,对其红细胞形态镜下观察。

2.2 白细胞分类、总数异常 在2000例标本中,其中350例白细胞分类、总数异常。白细胞总计数

6岁患儿1例:其临床主要表现为上呼吸道感染、发热、肺炎支原体检测呈阳性,红细胞体积较小、数量正常,Hb 100 g/L,血小板100×109/L,淋巴比例约占89%左右,白细胞总数处于正常值,通过血涂片检测大部分是幼稚细胞,经骨髓穿刺诊断为急性淋巴白血病;1例为中年女性:其血小板数量较低,有轻度贫血,白细胞的总数分类正常,单核细胞有42%,骨髓穿刺明确诊断为急性骨髓白血病;其中6例血细胞分析仪未分类,白细胞总数降低,有轻度的贫血出现,其血小板的数量明显减少,经骨髓穿刺检测,明确诊断为白血病。

2.3 血小板异常 450例血小板数量异常标本中,血细胞仪器分析显示,血小板的总数均低于80×109/L,其中直方图有所异常为300例,血涂片镜检测的结果显示有50例血小板聚集,散点图表现为聚集者43例,散点图7例表现正常,患者均采集末梢血,利用血小板稀释液进行稀释,与显微镜给予计数,显示血小板数量正常。因此应用血细胞分析仪分析结果即使散点图正常、血小板数量与正常值对比较低,血涂片镜下检测也显示有聚集标本,无论散点图正常与否,只要血小板数量偏低,则需要给予涂片镜检。剩余的标本涂片镜检显示结果均为血小板减少,与血细胞分析仪分析的结果一致。血细胞分析显示血小板总数>500×109/L有150例,与涂片镜检显示结果符合,可不实施血涂片镜检分析。

3 讨论

随着近年来医疗技术的不断发展,在血液检测中血细胞分析仪已经成为常规且必不可少的检测方法,但由于很多疾病在发生与发展的过程中会造成白细胞数量与形态的改善,因此自动化分析技术在白细胞数据计算中,其准确性相对较差,并且血细胞分析仪对异常细胞的形态无法进行判断,如核左移、核右移、中毒颗粒等,且对异常细胞、周期细胞也无法进行判断,如幼稚白细胞等[6-12]。在血小板的检测中,血细胞分析仪还会被血小板自身功能状况所影响,对血小板凝聚出现时,血细胞分析仪还会将血小板判断成其他的细胞种类,影响正确的检验结果[12-14]。所以,临床检验工作中,血细胞分析仪并不能将血涂片镜检测全部代替,少数血液标本通过血细胞分析仪的检测后,再次给予血涂片分析十分必要[15-17]。

通过以上对比分析显示,在贫血标本中大细胞性贫血、小细胞低色素性贫血,通过血涂片镜检后其结果与血细胞分析仪分析的结果相同,其中大细胞性贫血150例,小细胞低色素性贫血600例(主要的人群多为幼儿与中青年,其中幼儿330例,中青年男性150例,女性120例),正细胞性贫血450例。未有不相符的情况发生,贫血标本中均属于良性贫血,可将血涂片镜下检测省略[17]。其正细胞性贫血,涂片镜检显示可见红细胞3例缗钱状排列,合并有不同程度的血小板减少,通过骨髓穿刺明确确诊多发性骨髓瘤,因此正细胞性贫血需进行血涂片镜检测,对红细胞的排列与形态进行观察。关于血小板数量减少,450例血小板数量异常标本中,血细胞仪器分析显示,血小板的总数均低于80×109/L,其中直方图有所异常为300例,血涂片镜检测的结果显示有50例血小板聚集,散点图表现为聚集者43例,散点图7例表现正常。少数血小板减少是假性减少,应用血涂片镜检可发现血小板聚集的现象,将末梢血重新采集实施血小板计数,最后结果显示正常,散点图显示正常血小板数量比正常值较低,但血涂片镜检测也能够发现存在聚集的情况,因此不论散点图正常与否只要血小板数量低,均必须给予血涂片镜检测。导致假性血小板的减少原因较多,其中包括抗凝剂量与质,混匀充分与否、采血通畅与否、采血的量等,造成聚集情况占一定的比例,因此在血小板比正常值低的情况下必须给予血涂片镜检测。对于白细胞总数不高、或低于正常值或明显高于正常值的标本,本次研究中,2000例标本中,其中350例白细胞分类、总数异常。白细胞计数

综上所述,应用血细胞分析仪对标本进行分析,虽然能够准确而又快速地对细胞进行计数,但其检测结果在异常情况下并不完全可靠,需要给予血涂片复检,与其比较分析,结合患者具体的临床表现,再参照复检血涂片的结果进行准确分析。通过血涂片镜检可对血细胞分析仪分析的结果是否可靠、准确进行验证,可避免不必要的误诊、漏诊等情况,确保为医师提供更准确、安全的分析结果。

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血细胞分析仪篇8

【关键词】 血细胞计数;自动分析;偏差;对比研究

本所检验科于2007年1月购入1台XS21000i血细胞分析仪,与原有的迈瑞BC3000和贝克曼COULT同时使用,为了保证3种仪器测定结果的准确性和可比性,本文参照斯德哥尔摩协议的EP29A文件]要求,以参加卫生部临床检验中心室间质评成绩合格的贝克曼COULT血细胞分析仪为实现准确度溯源和可比性的目标,即参比仪器,以BC23000和XS21000i为比较检测仪器,即测定仪器,在3种仪器上同时检测患者新鲜标本。通过F检验和线性回归分析,计算参比仪器和测定仪器之间的偏差来判断结果是否准确,报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 取健康检查者乙二胺四乙酸二钾抗凝全血,白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)4个项目分别为高、中、低值标本40份,每天选取8份。

1.2 仪器与试剂 贝克曼COULT血细胞分析仪、希森美康XS21000i血细胞分析仪、迈瑞BC3000血细胞分析仪,3种仪器所用试剂均为各公司原装配套试剂。

1.3 实验条件 各仪器均按使用说明定期维护、保养,每天开机后进行空白允许值及各自质控检测,保证3种仪器均在控。

1.4 实验方法 由技术熟练者分5 d,每天8份标本,每份标本在每台仪器上检测2次,取值为测定结果。2种仪器的检测模式均为全血模式。

1.5 统计学方法 采用F检验,数据以均数±标准差(x±s)表示,直线回归分析,统计软件用SPSS13.0和Excel。

2 结果

3种仪器4项血细胞检测结果及不同仪器间检测结果的相关分析及偏差评估如下。

2.1 4 个项目3 种仪器测定结果比较

2.2 COUL T 和BC3000 的相关关系(r 表示相关系数)

3 讨论

医院检验科一般都同时使用多台不同型号的血细胞分析仪进行标本检测分析,各仪器都有各自独立的试剂系统和质控系统,以质控物对血细胞分析仪进行测定只是了解单台仪器,测定结果,而各自专用的全血定值质控物不能相互使用,无法反映各仪器检测结果的一致性。本文参照NCCLS2EP9A方案,以参加卫生部临床检验中心室间质评成绩合格的COULT为参比仪器,以BC23000和XS21000i为测定仪器进行比对测试。

根据测试结果,以COULT的结果为自变量X,分别以BC23000和XS21000i的结果为因变量Y,计算每台仪器4个项目的相关系数(r)和回归方程,以r2>0.95为相关性良好。本实验数据的可接受性判断可通过r或r2作粗略估计,如r和r2均>0.95,说明实验数据分布范围合适,直线回归统计的斜率和截距可靠,实验方法精密度较好。本实验3种仪器

作者单位:721000西安铁路疾病预防控制所宝鸡分所

检测的40份标本WBC、RBC、Hb3个项目结果相关性密切(r>0.976),PLT欠佳,但差异无统计学意义,可同时或交替使用,与文献报道相符[1,2]。根据回归方程计算各参数在给定医学决定水平(Xc)处的预期偏差和相对偏差,以不同Xc允许误差的限值与预期偏差值判断各项目的偏差是否可以接受。参照卫生部临床检验中心推荐采用的参考方法的允许偏差范围,WBC、RBC、Hb、PLT分别为靶值±15%、±6%、±7%、±25%[1],表明BC23000和XS21000i4个项目检测结果的偏差均在允许范围,检测结果是一致的,具有可比性,完全符合临床需要。

根据国际血液标准化委员会文件要求,血细胞分析仪的检测结果必须直接或间接溯源至参考方法[2]才能保证结果的准确性和不同实验室检测结果的可比性。本研究用作比对的参比仪器是参加卫生部临床检验中心室间质评合格的COULT,由于卫生部临床检验中心为国家实验室认可委员会认可的校准实验室,因此,本文的检测结果间接地溯源至参考方法。

参 考 文 献

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