高效液相色谱法测定盐酸溴己新注射液的含量

[摘要] 目的:建立高效液相色谱法测定盐酸溴己新注射液的含量。方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为水-甲醇-三乙胺(含5 mmol庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至3.5)(30∶70∶0.3),检测波长249 nm,流速为1.0 ml/min。结果:盐酸溴己新浓度在4.0～80.0 μg/ml范围内与峰面积有良好的线性关系,高、中、低3种浓度的平均加样回收率为99.1%(RSD=0.33%,n=6)。结论:高效液相色谱法方法简便,结果可靠,专属性强,可用于盐酸溴己新注射液的质量控制。

[关键词] 高效液相色谱法;盐酸溴己新;含量测定

[中图分类号] R927.2 [文献标识码]C [文章编号]1674-4721(2010)03(b)-112-01

盐酸溴己新注射液的现行质量标准用紫外分光光度法测定含量,专属性不强,易受辅料干扰[1-3]。笔者改用高效液相色谱法测定含量,研究结果报道如下:

1 仪器与试药

SP 8810高效液相色谱仪,包括SP 100紫外检测器,N 2010色谱工作站;盐酸溴己新对照品(批号:100427-200301,中国药品生物制品检定所);盐酸溴己新注射液(泗水希尔康制药有限公司,批号:090107,090201,081208);甲醇,色谱纯;磷酸、三乙胺、庚烷磺酸钠,分析纯;水,重蒸馏水。

2 实验方法学考察

2.1 色谱条件

色谱柱:Kromasil C18(4.6 mm×200 mm, 5 μm);流动相:水-甲醇-三乙胺(含5 mmol庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至3.5)(30∶70∶0.3);流速:1.0 ml/min;柱温:室温;检测波长:249 nm;进样体积为20 μl;理论塔板数以盐酸溴己新计不低于5 000。

2.2溶液制备[4-5]

精密称取对照品20.00 mg,置100 ml容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液;精密量取储备溶液5 ml,置50 ml容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液;精密量取供试品溶液适量,用流动相稀释成每毫升含盐酸溴己新20 μg的溶液,作为供试品溶液。

2.3 专属性试验

取供试品溶液4份,经酸、碱、光照及强热破坏,将其破坏产物照供试品溶液制备,依法进样。结果:在该法色谱条件下盐酸溴己新与各降解产物能很好地分离。

2.4线性关系考察

精密量取对照品储备液1、2、5、10、15、20 ml,置50 ml容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,进样20 μl,测定峰面积。以峰面积(A)对其浓度(C)作线性回归,回归方程为Y=394.85+5 223.31X,r=0.999 9(n=6)。结果:盐酸溴己新检测浓度的线性范围为4.0～80.0 μg/ml。

2.5精密度试验

取对照品溶液,连续重复进样6次,测得的平均峰面积为104 761,RSD=0.45%(n=6)。表明仪器精密度良好。

2.6稳定性试验

取同一批供试品溶液,在室温条件下放置,分别在0、4、8、12、24 h测定,平均峰面积为104 978,RSD值为0.40%(n=5)。表明供试品溶液在24 h内基本稳定。

2.7重现性试验

取同一批号样品6份,依法测定含量。结果:平均含量为99.4%,RSD值为0.38%(n=6),表明方法重现性良好。

2.8加样回收率测定

精密量取已知含量的盐酸溴己新注射液(含量99.7%)适量(相当于盐酸溴己新10 mg)6份,分为3组,每组分别精密加入对照品适量,配成低、中、高3个质量浓度,按供试品溶液制备,测定回收率。结果见表1。

2.9样品测定

取对照品溶液、供试品溶液各20 μl,进样测定,按外标法计算含量。结果:3批供试品含量分别为99.4%、99.1%、98.6%。

3讨论

紫外扫描发现,以流动相为溶剂,盐酸溴己新的紫外光谱在249 nm波长处有最大吸收峰,故在此波长处测定含量[6]。

经破坏试验验证,在高效液相色谱法色谱条件下主峰与降解产物能达到良好的分离,能够排除降解产物的干扰,专属性较强,可用于盐酸溴己新注射液的质量控制[7]。

[参考文献]

[1]陈睿,田兰,刘惠军,等.高效液相色谱法测定盐酸溴己新及其片剂的含量和有关物质[J].药物分析杂志,2007,27(1):132.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京:化学工业出版社,2005:585-586.

[3]国家药典委员会.化学药品地方标准上升国家药品标准:第三册[M].北京:化学工业出版社,2002:222.

[4]叶隽,陈斌.HPLC法测定盐酸溴己新片的含量及溶出度[J].药学服务与研究,2006,6(2):148-149.

[5]陈乃江. 高效液相色谱法测定茶新那敏片中盐酸溴己新含量[J].中国药业, 2009,18(8):35-36.

[6]刘素英,冯素香,黄国稠,等.高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量[J].广东药学院学报,2007,23(2):162.

[7]王烽,方东伟,谢展鹏.高效液相色谱法测定盐酸溴己新片的含量[J].中国药业, 2007,16(19):19.

(收稿日期:2010-02-01)