血清HBsAg的研究概述

摘要：乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）是诊断乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染稳定、可靠的标志物。HBsAg检测技术的发展，为我们能够更好的认识HBsAg提供了依据。HBsAg水平能够反应HBV共价闭合环状DNA（covalently closed circular DNA，cccDNA）数目、预测发生肝癌的风险及预测干扰素治疗的疗效。本文对HBsAg的基础及临床应用方面作一概述。

关键词：肝炎表面抗原；乙型；肝炎病毒；乙型；预测价值

HBV感染呈世界性流行，2006年我国乙型肝炎血清流行病毒调查表明，1～59岁人群的HBsAg携带率为7.18%，据此估计我国有9300万HBV携带者，其中约2000万为慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者[1]。1965年Blumberg初次找到HBV相关病毒成分[2]“澳大利亚抗原”。因受检验方法的限制，HBsAg长久以来仅用于HBV感染的诊断。随着血清HBsAg定量检测试剂盒的推广，HBsAg在临床运用上也挥发了其更大的用途。

1 HBsAg对于HBV感染的诊断

1.1 HBsAg的检测方法的发展 血清HBsAg是R床常规的检查项目，对乙型肝炎的诊断、疗效的评估和阻断传播有着相当重要的意义。自1972年第一批HBsAg 检测试剂盒问世至今，HBsAg的实验室检测经历了从定性、半定量到高定量的发展过程。

因受检测方法的限制，2004年以前只能对HBsAg进行定性检测，常用的有胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附法、时间分辨荧光免疫法等方法。胶体金免疫层析法法检测乙肝五项，因其快速便捷、可单人份检测、便于保存等优点，在一些初级实验室广泛采用，但对一些抗原、抗体滴度不高的标本易造漏检[3]。酶联免疫吸附法虽然较其更灵敏，但对低水平HBV感染标志物的漏检率仍较高，对高水平的HBsAg可由于发生钩状效应而误读检测结果[4]。因其影响因素较多，所以无法使HBsAg阴阳性的正确度得到全面的体现。时间分辨荧光免疫法的灵敏度和特异度均高于前两者，目前较常用于急诊或术前检查[5]。随着新技术被用于检验学科中，国内传统的检验医学也逐渐与国际医学检验技术相接轨。血清HBsAg定量检测试剂盒现已在临床上普及，目前有商品化试剂盒的HBsAg定量检验系统主要包括雅培公司的Architect系统和罗氏公司的Elecsys系统，两者检测范围分别是0～250IU/ml和0.05～52000IU/ml，两者均能较好满足临床检测需求。

1.2 HBsAg阴性的HBV感染 检出HBsAg阳性诊断为HBV感染，然而因窗口期和隐匿性感染的存在，因此HBsAg阴性的肝炎无法排除HBV感染的可能性存在，所以不可以将HBsAg作为HBV唯一的病原诊断。HBsAg颗粒有高度免疫原性，“a”为共同抗原决定簇，亚型决定簇“d”、“y”，“w”、“r”因互相排斥而组合成不同的亚型[6]。HBV作为一种高变异病毒，接种乙型肝炎疫苗、使用乙型肝炎免疫球蛋白或是抗病毒治疗，都可以影响S蛋白表达水平或抗原性质，尤其是使“a”决定簇的序列发生改变，从而诱发病毒发生变异，出现HBsAg阴性的检测结果。

通过对我国乙肝疫苗免疫后和未进行免疫的乙肝携带者HBsAg基因变异的流行状况调查发现：“a”抗原决定簇氨基酸的置换导致S基因区变异的病毒无法被抗-HBs完全中和，所以在乙肝疫苗接种后仍可出现HBV感染的现象[7]。房勇[8]纳入393份受试者血清，检测发现隐源性肝炎占215例、HBsAg阴性肝癌占178例，结果显示隐匿性HBV感染率占有很大部分比重，是不可忽视的一个问题。何水珍[9]检测4437例受试者的血清，结果显示隐匿性HBV感染率为0.68%。病毒变异、免疫功能低下、免疫耐受状态等因素，即多重变异的累加导致部分HBV感染的患者出现HBsAg阴性的检测结果。

2 HBsAg对临床医学的价值

2.1 HBsAg水平能较好反应HBV cccDNA的活性 HBV为嗜肝DNA病毒科，是包膜病毒，侵入肝细胞后首先在在细胞质中脱去外膜蛋白，释放出松弛环状DNA从胞浆内进入细胞核，进一步发育形成HBV cccDNA[10]。HBsAg的形成途径有两条：HBsAg除了由转录活性HBV cccDNA的信使核糖核酸翻译外，与宿主DNA发生整合的HBV DNA也可以合成HBsAg。李伟杰[11]和陈嵬[12]的研究均表明，血清HBsAg水平与肝组织HBV cccDNA水平呈高度正相关。与HBV DNA对比，HBsAg定量反应出了HBV cccDNA转录的活性，补充了HBV DNA只能反映病毒复制活性的不足，可以更好的观察患者的感染状况[13]。

2.2 HBsAg水平与肝癌的相关性 流行病学资料显示，因HBV感染而发生肝癌的比例为45%，在我国这个比例更是高达80%[14]。高载量的HBV DNA已明确为疾病进展的危险因素之一，HBsAg水平在低滴度HBV DNA的患者中更有预测价值。较低的HBsAg水平常反应宿主对HBV复制和感染具有较好的免疫控制，2015年版的《慢性乙型肝炎防治指南》中依然将停用抗病毒药后获得持久的HBsAg清除或发生血清学转换作为理想的治疗终点[16]。Sliva[17]发现在HBsAg

然而尽管HBsAg低水平，甚至被清除，疾病仍有可能进一步进展。陈丽萍[19]发现1例血清HBsAg及HBV DNA阴性的患者，但肝组织中乙肝核心抗原阳性，病理提示高分化肝癌。目前尚未明确HBV感染导致肝癌发病的具体机制，可能是在肝癌发生的早期阶段，HBV已将自身DNA整合至宿主的肝细胞基因内了，从而在癌变中起关键作用[20]。

2.3 HBsAg水平对干扰素疗效的预测价值 美国肝病学会、欧洲肝病学会、亚太肝病学会以及中国CHB防治指南均提出CHB治疗的最高目标是血清HBsAg消失甚至HBsAg的血清学转换。如何实现更高的乙型肝炎e抗原（hepatitis B eantigen，HBeAg）、HBsAg的阴转或血清学转换，这一问题困扰着临床医生。探索核苷（酸）类似物和干扰素的联合或序贯治疗逐渐成了追求更高HBeAg和HBsAg血清学转换率的热门话题，近年来专家们的对此的研究也取得了一定的结果。宁琴[21]开展的OSST研究收集200例HBeAg阳性的恩替卡韦经治患者，经治9～36个月后达到HBeAg

3 总结与展望

HBV cccDNA难以清除是HBV感染慢性化和抗病毒治疗停用后病情复发的重要原因，因此目前迫切需要可用于评估抗病毒疗效及预测治疗终点的指标。HBsAg水平可以较好反映病毒复制活跃程度，但因多种因素的影响而导致无法检测HBsAg定量或出现假阴性的结果，并且HBsAg定量可作为预测应答的指标仍需更多临床验证。

参考文献：

[1]胡晓丽，赵宏伟，吴晓岩，等.乙型肝炎病毒感染的流行现状[J].临床肝胆病杂志，2012，28（6）：413-416.

[2]郭晓强.乙肝澳抗发现者--巴鲁克・塞缪尔・布伦博格[J].自然杂志，2012，34（5）：308-310.

[3]周积满.金标快速法与ELISA法检测HBV的对比分析[J].中外医疗，2012，1（1）：174-175.

[4]魏来.乙型肝炎与丙型肝炎病毒感染临床检测进展[J].中华检验医学杂志，2011，28（16）：658-659.

[5]余树荣.微生物学和微生物学检验[M].第2版.北京：人民卫生出版社，2009：379-380.

[6]田晓晨，闻玉梅.剖析乙肝病毒的包膜--乙肝表面抗原的生物学功能及其致病机制[J].自然杂志，2010，32（6）：314-318.

[7]白玉，夏国良，贾志远，等.常见乙型肝炎病毒表面抗原突变体的抗原性分析[J].中华实验和临床病毒学杂志，2003，17（1）：31-34.

[8]房勇，梁爽，陈思佳，等.中国北方地区隐源性肝炎及乙型肝炎表面抗原阴性肝癌患者中隐匿性HBV感染流行状况分析[J].国际免疫学杂志，2013，36（6）：472-475.

[9]何水珍，苏成豪，沈理通，等.厦门市自然人群中乙型肝炎病毒隐匿性感染状况调查[J].中华预防医学杂志，2015，49（2）：132-136.

[10]骆抗先，李平.乙型肝炎基础与临床[M].北京：人民卫生出版社，2012：10.

[11]李韦杰，李伯安，赵景民，等.54例慢性乙型肝炎患者肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与血清HBsAg定量检测结果分析[J].中华肝脏病杂志，2011，19（11）：815-817.

[12]陈嵬，吴峰，窦晓光，等.慢性HBV感染者肝脏HBV cccDNA含量相关因素分析[J].临床肝胆病杂志，2013，29（6）：434-437.

[13]胡晨波，陆培瑜，陈晓蓉，等.HBsAg定量在慢性乙型肝炎自然史及干扰素治疗中的临床意义[J].肝脏，2014，19（1）：74-76.

[14]Wang FS，Fan JG，Zhang Z，et al.The global burden of liver disease：The major impact of China [J].Hepatology，2014，60（6）：2099-2108.

[16]中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南（2015更新版）[J].中华肝脏病杂志，2015，23（12）：888-905.

[17]Sliva MA，Richards DA，Bramhall SR，et al.A study of A the metabolites of ischemia-reperfusion injury and selected amino acids in the liver using micro dialysis during transplantation [J].Transplantation，2005，78：828-835.

[18]Tseng TC，Liu CJ，Yang HC，et al.High levels of hepatitis B surface antigen increase risk of hepatocellular carcinoma in patients with low HBV load [J].Gastroenterology，2012，142（5）：1140-1149.

[19]陈丽萍，赵红，吕蓓，等.HBsAg阴性的HBV感染与肝癌[J].肝脏，2015，05：408-409，428.

[20]Kuang SY，Jackson PE，Wang JB，et al.Specific mutations of hepatitis B virus in plasma predict liver cancer development [J].Proc Natl AcadSci USA，2004，101（10）：3575-3580.

[21]Ning Q，Han M，Sun Y，et al.Switching from entecavir to PegIFN alfa-2a in patients with HBeAg-positive chronic hepatitis B： a randomised open-label trial （OSST trial）[J].J Hepatol，2014，61（4）：777-784.

[22]Ren H，Hu P，Jia S，et al.A multi-center randomized study on the efficacy and safety of switching to peginterferon a-2a（40KD）for 48 or 96 weeks in HBeAg positive CHB patients with a prior NUC history for 1-3 years： an interim analysis of NEW SWITCH study.2014 AASLD. LB10.

辑/赵恒德