血清白蛋白范文

时间:2023-11-28 12:16:45

血清白蛋白

血清白蛋白篇1

1 分类

根据重链的氨基酸组成不同,免疫球蛋白可分为分五类:免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。

1.1 IgG

IgG是人体的主要免疫球蛋白,也是唯一能通达胎盘的免疫球蛋白。根据IgG的重链氨基酸顺序的差别,可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4各亚类。IgG是主要抗感染抗体,对各种细菌、病毒有抗体活性,并有激活补体的作用。

1.2 IgA

IgA是分泌液中主要抗体,可分为IgA1和IgA2两个亚类。存在于血清中的称血清型IgA,存在于泪液、乳汁、胃肠道、呼吸道和泌尿生殖道分泌液中的称分泌型IgA,对局部粘膜有抗菌和抗病毒作用。

1.3 IgM

IgM可分为IgM1和IgM2两个亚类。是抗原刺激最先产生的免疫球蛋白,有较强的固定补体、溶解细菌及细胞的能力。IgM是抗革兰氏阴性菌和异体红细胞的主要抗体,也是存在于B淋巴细胞表面的主要免疫球蛋白。

1.4 IgD

其作用与过敏反应有关。据报道,IgD可对某些抗原起反应,如青霉素、胰岛素、核抗原、甲状腺抗原等。它存在于B淋巴细胞表面,构成早期的膜受体,具有识别抗原,制动B淋巴细胞的分化作用。

1.5 IgE

与I型变态反应有关,具有亲细胞特性。IgE通过Fc段与肥大细胞、嗜碱粒细胞上的Fc受体结合,故属亲同种细胞性抗体。当机体再次接触同种抗原后,过敏原即与结合在细胞表面的IgE作用,使细胞释放介质,引起平滑肌痉挛,血管通透性增加等过敏反应,还具有抗寄生虫感染作用。

2 正常参考值

IgG:8~16g/L,IgA:1~4g/L,IgM:0.5~1.9g/L,IgD:0.01~0.4g/L,IgE:0.001~0.009g/L。

3 临床意义

3.1血清免疫球蛋白降低

血清免疫球蛋白水平取决于免疫球蛋白合成和分解代谢的速率以及由体内丢失的程度。血清免疫球蛋白降低可由于合成不足,丢失增多和分解加快引起。合成不足:血清免疫球蛋白降低可由于原发性或继发性合成缺陷所致。原发性免疫缺陷病有性联先天性丙种球蛋白缺乏症、婴儿暂时性丙种球蛋白低下症、伴IgM升高的性联低丙种球蛋白血症、选择性IgA缺乏症、选择性IgM缺乏症、选择性IgG亚类缺乏症等。继发性免疫缺陷病有慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症和恶性肿瘤等。丢失增多:从胃肠道丢失的见于溃疡性结肠炎、消化道癌肿、吸收不良综合征、淋巴瘤、肠淋巴管扩张症。从皮肤丢失的有急性灼伤、特异反应性皮炎。从浆膜腔丢失的有胸膜炎、腹膜炎、反复抽胸腹水。从肾脏丢失的有肾小球肾炎(微小病变型、膜性、增殖性)、肾静脉血栓形成、SLE和淋巴瘤。主要是由于蛋白从尿中丢失或毒素抑制免疫球蛋白合成,后者首先影响IgM,其次影响IgA,然后再影响IgG。分解加快:见于湿疹-血小板减少-反复感染综合征、肌强直性营养不良和共济失调毛细血管扩张症。此外,毒性甲状腺肿和库兴氏综合征的免疫球蛋白降低,可能与分解加快有关。

3.2血清免疫球蛋白增加

血清白蛋白篇2

关键词 血清-腹水白蛋白梯度 门脉高压 腹水

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.01.127

资料与方法

2007年9月~2009年6月收治腹水患者60例,随机分为两组,A组为门脉高压组40例,B组为非门脉高压组20例。

方法:血清和腹水白蛋白均采用溴甲酚绿法检测,仪器为HITACHI7080全自动生化分析仪。SAAG=血清白蛋白浓度-腹水白蛋白浓度。A/S=腹水白蛋白浓度/腹水总蛋白浓度。根据文献报道,SAAG≥11g/L诊断为门脉高压性腹水[1]。根据传统的传统的渗漏出液分类方法,腹水总蛋白≥25g/L,腹水白蛋白≥20g/L,A/S≥0.5,腹水LDH≥200U/L诊断为渗出液,反之为漏出液。

结 果

SAAG≥11g/L诊断门脉高压腹水的敏感性93.18%,特异性94.44%,准确率93.55%,均高于传统诊断漏出液方法的各项指标。见表1。

讨 论

腹水是一种可以由多种病因引起的临床常见病征,传统的鉴别方法是将腹水分为渗出性和漏出性两大类,但其鉴别腹水来源的准确率较低。近年来血清-腹水白蛋白梯度(SAAG)这一概念的引入提高了腹水病因诊断的准确性[2]。

临床引起腹水的病因很多,腹水检测是明确腹水病因的最直接的方法。传统的检查方法是根据腹水总蛋白等指标将腹水分为渗出性或漏出性。由于腹水总蛋白受个体差异和治疗等多种因素的影响,变化较大,其准确性不高。根据Starling的理论,门脉高压所形成的血管内外静水压需要靠胶体渗透压压差来平衡,而白蛋白是形成体液胶体渗透压的最主要成分,因此,血管内外的白蛋白梯度(SAAG)可以反映门脉压力。本研究通过对60例腹水患者观察,SAAG诊断门脉高压性腹水的敏感性91%,特异性93%,准确率94%,与近年来文献报道结果类似[3,4],明显高于传统的鉴别渗漏出液的方法。

早在1978年Hoefs就提出了SAAG的概念,在国内特别是基层医院近年来才引起重视。检测SAAG仅需在抽取腹水当天加抽静脉血,而检查白蛋白的仪器及试剂在最基层的一级医院也具备。腹水患者检测SAAG需要在广大基层医院的医师和检验师中宣传和推广。

参考文献

1 Runyon B A.Management ofpatients with ascite caused by chrbosis.N Eng J Med,1994,330:337.

2 Hoefs J C.Serum protein concentration and portal pressure determine the ascites fluid protein concentration in patients with chronic liver disease.J Lab Clin Med,1983,102:260.

3 刘方旭,谢鹏雁.血清腹水白蛋白梯度与渗漏出液概念临床价值比较,中华消化杂志,2002,22(3):175.

血清白蛋白篇3

[关键词]血清胱抑素c;血清肌酐;尿β2-微球蛋白;高尿酸血症

高尿酸血症又叫痛风,是由嘌呤代谢紊乱引起的,临床主要表现为高尿酸血症、痛风性急慢性关节炎、痛风性石沉积、关节畸形等,严重会导致肾损害。近年来,随着生活水平的提高,人们的饮食结构也逐渐发生变化,高尿酸血症肾损害的发病率在不断提高,如果不及时诊断及治疗,高尿酸血症肾损害会发展成尿毒症,给人们的身体健康甚至生命安全造成威胁。为了探讨血清胱抑素C、血清肌酐和尿β2-微球蛋白检测在高尿酸血症诊断中的应用价值,为尿酸血症肾损害的诊断及治疗提供参考,本研究对我院2014年1月~2015年7月收治的63例高尿酸血症肾损害患者的临床资料进行回顾性分析,现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

我院在2014年1月~2015年7月期间共收治63例高尿酸血症肾损害患者,其中男37例,女26例;年龄为30~64岁,平均年龄为(45.9±4.2)岁。所有患者均符合美国风湿病学会1977年制定的相关诊断标准,并经x线检查、高尿酸血症检查确诊。

诊断标准:(1)急性关节炎仅局限于个别关节;(2)急性关节炎发作次数≥1次,且在1d内达到高峰;(3)关节为暗红色;(4)第一跖趾关节肿痛;(5)存在确实或可疑痛风石;(6)单侧跗关节急性发作;(7)非对称关节肿痛;(8)高尿酸血症;(9)发作能够自行停止。符合以上任意3条标准即可诊断为痛风。

纳入标准:(1)符合相关诊断标准;(2)年龄为18~65岁。

排除标准:(1)继发性痛风患者;(2)合并有泌尿系统感染、糖尿病、近期采用肾毒性药物治疗及其他肾脏疾病患者;(3)既往有肾脏疾病史者。

以同期在我院进行体检的50例健康志愿者作为对照组,其中男29例,女21例;年龄为28~61岁,平均年龄为(42.8±3.9)岁。两组研究对象的性别、年龄等基本资料无统计学差异(P>0.05),有可比性。

1.2检查方法

血清胱抑素C以免疫比浊法检测,仪器为DIRUI CS-1300A型全自动生化分析仪,试剂由北京利德曼生化股份有限公司提供,以054~1.15mg/L为正常。血清肌酐采用酶法进行检测,仪器为DIRUICS-1300A型全自动生化分析仪,试剂由北京利德曼生化股份有限公司提供,以44~106μmol/L为正常参考值。尿β2-微球蛋白以胶乳增强免疫比浊法进行检测,仪器为DIRUI CS-1300A型全自动生化分析仪检测,试剂由希科玛生物公司提供。

1.3观察指标

对比两组研究对象的血清胱抑素C、血清肌酐及尿β2-微球蛋白值,并探讨观察组患者的指标相关性。

1.4统计学处理

将所得数据录入SPSS22.0软件包处理分析,对计数资料以x2检验,以例数百分比的形式表示,对计量资料以t检验,以(x±s)的形式表示,当P

2结果

2.1两组检测指标比较

观察组的血清胱抑素C为(1 09±0.26)mg/L、血清肌酐为(98.61±10.77)μmol/L、尿β2-微球蛋白为(0.22±0.14)mg/L,对照组分别为(0.62±0.11)mg/L、(84.14±7.75)μmol/L、(0.09±0.02)mg/L,观察组的检测指标显著高于对照组(P0.05),结果如表1所示。

2.2观察组患者临床指标相关性分析

观察组患者血清胱抑素C与尿β2-微球蛋白指标之间呈正相关关系(r=0.923,P

3讨论

高尿酸血症肾损害是因尿酸过多产生,或排泄减少引发高尿酸血症引起的肾损害,一般为尿酸盐结晶在肾髓质沉积形成的间质性肾炎,多由高尿酸血症促进血管平滑肌的细胞增生及炎症反应损害内皮功能引发高血压等因素引起。该病的临床症状主要有肾小球硬化、间质性肾炎及间质纤维化等。早期肾损害的临床症状不明显,通过常规检查等方式无法及时诊断,容易错过了最佳的治疗机会。对高尿酸血症肾损害及早进行诊断,对于预防并降低该病的发生率具有重要价值。所以,寻找一种可行、敏感、有效的诊断方式对于高尿酸血症肾损害的诊断与治疗具有重要意义。血肌酐水平及肌酐清除率为肾功能重要评价指标,近年来,随着β2-微球蛋白在肾小管功能监测中的应用越来越广泛,血清肌酐、血清胱抑素及尿β2-微球蛋白水平已经成为糖尿病肾病的常用肾功能标志物。

血清胱抑素为半胱氨酸蛋白酶抑制剂的主要成员,核细胞能够稳定产生,速率稳定,且不容易受到药物影响,能够经机体的小球滤出,同肾小球过滤功能相关,因此,血清胱抑素C能够作为高尿酸血症肾损害的早期诊断指标。本研究结果显示,观察组的血清胱抑素c为(1.09±0.26)mg/L,对照组为(0 62±0.11)mg/L,观察组血清胱抑素C水平明显高于对照组(P

患者出现肾损伤之后,机体内的的血清胱抑素C、血清肌酐及尿β2-微球蛋白会出现升高,从而影响肾小球滤过功能。本研究结果表明,观察组患者的血清胱抑素C、血清肌酐及尿β2-微球蛋白均显著高于对照组(P

血清白蛋白篇4

【关键词】 高血压病; 肾损害; 尿微量白蛋白; 血β2-微球蛋白; 血清胱抑素C

高血压病的早期肾损害是可逆的,既在肾损害的早期及时治疗,可能会使肾功完全恢复。选择灵敏的指标诊断高血压病早期肾损害意义重大。笔者用免疫浊法检测103例高血压患者的尿微量白蛋白、血清胱抑素C、血清β2-微球蛋白水平,以探讨三者对高血压病早期肾损害的诊断价值,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 按照1999年WHO/ISH第四次修订的高血压诊断标准,筛选2010年3月-2011年12月本院门诊及住院患者103例,其中排除高血压、肝硬化和慢性肾炎者。男82例,女21例,年龄33~82岁。对照组为126例正常健康体检者。

1.2 检测方法 血β2-微球蛋白、血清胱抑素C检测:受检者静脉采血离心分离血清,血清胱抑素C采用增强免疫比浊法,β2-微球蛋白采用免疫比浊法。尿微量白蛋白检测:留取晨尿,采用免疫透射比浊法测定,试剂都是使用广东标佳公司,检验仪器为日立的7600-110。严格按照操作说明书进行。以Cysc、β2-MG、UmALB的测定结果上限为阳性界值。Cysc>1.12 mg/L为阳性,β2-MG>1.58 mg/L为阳性,UmALB> 30mg/L为阳性。

1.3 观察指标 比较尿微量白蛋白、血β2-微球蛋白、血清胱抑素C,以诊断灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、诊断符合率、Youden指数为评价指标。a代表真阳性,b代表假阴性,c代表假阳性,d代表真阴性。患病实验者的阳性百分率:灵敏度(%)=a/(a+b)×100%;无病实验者的阴性百分率:特异度(%)=d/(c+d)×100%;试验诊断结果与金标准结果相比,两者相同的百分率:诊断符合率(%)=(a+d)/(a+b+c+d)×100%;无病被误判有病的百分率:假阳性率(%)=c/(c+d);有病被误判无病的百分率:假阴性率(%)=b/(a+b)%;Youden指数=1-(假阳性率+假阴性率)=灵敏度+特异度-1,即诊断方法真实性程度,其值越大越好。

1.4 统计学处理 采用SPSS13.0软件对数据进行统计学处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用t检验,以P

2 结果

2.1 高血压早期肾损害的尿微量白蛋白、血β2-微球蛋白、血清胱抑素C水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。

2.2 从表3可以看出,尿微量白蛋白、血β2-微球蛋白、血清胱抑素C三者联合检测高血压早期肾损害,灵敏度为99.02%,特异性为97.92%,有极高的临床价值。

3 讨论

肾脏既是血压调节的重要器官,同时又是高血压损害的主要靶器官之一。肾功能一旦受损,将使高血压加重,高血压又进一步加重肾损害。如此形成恶性循环,最终导致肾功能不全以及心、脑等重要脏器损害[1]。高血压病的早期肾损害是可逆,即在肾损害的早期及时治疗和控制,可能会得到能完全恢复。因此,早期发现高血压肾损伤对高血压的治疗和预后有重要的意义。

β2微球蛋白是体内有核细胞合成的一种低分子量蛋白质,正常人β2-MG的合成和释放速度非常恒定,全部由肾小球滤过,99.9%经肾近曲小管重吸收。正常情况下在血清中浓度很低。β2-MG是肾小球滤过率下降,肾功能损害的重要指标之一。高血压肾病导致肾小球滤过功能下降,血清β2-MG浓度也会增高[2-3]。高血压肾病患者病情越重,β2-MG检出率越高。

胱抑素C广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,其在血中的浓度不受性别、身高、年龄、体重、肌肉质量、饮食、炎症及大多数药物的影响,可经过肾脏排泄,是一种较理想的评价肾小球滤过率的指标,其优越性超过了以往使用最广泛的血肌酐,它的敏感性和稳定性使它在评价肾移植患者的肾功能应用中有很大的前景[4]。在一些代表性的研究中证实,血CyscC的优越性在于比血清肌酐更早地发现肾脏肾小球滤过率的衰减,CyscC比肌酐和肌酐清除率对反映肾小球滤过功能的变化有更高的敏感性和特异性,能够替代肌酐清除率和肌酐作为GFR变化的指标[5]。

高血压常累及肾血管,使肾小球滤过膜损害,造成尿mAlb排出量增加。尿微量白蛋白作为高血压肾病的早期诊断窗口,UmALB的检测成为诊断肾脏早期损害的灵敏指标[6]。近年来,UmALB已明确作为包括高血压、高血压病及其他慢性肾脏病患者甚至普通人群的心血管疾病并发症、肾脏病预后及死亡的独立预测因子。尿mA1B的检出对高血压肾损害引起的肾小球的早期损伤有重要的诊断价值。

综上所述,建议高血压患者常规联合检测CysC、β2-MG和UmALB,尽可能早的为临床诊断找到依据,提高治疗质量。

参 考 文 献

[1] 王力宁,姚丽.高血压肾损害[J].中华肾脏病杂志,2005,21(10):569-571.

[2] 陈爱珍,孙秀丽.CystatinC和微球蛋白检测在肾脏病中的应用[J].医学综述,2009,15(17):2583-2586.

[3] 林善锬.当代肾脏病学[M].上海:科技教育出版社,2001:446-477.

[4] 彭国进,朱华强.胱抑素C研究进展[J].现代医药卫生,2004,20(11):972.

[5] 蔡钢强,垢敬.胱抑素C的生物学特性及临床应用评价[J].国际检验医学杂志,2006,27(5):457-460.

血清白蛋白篇5

关键词:阿司匹林;人血清白蛋白;相互作用

蛋白质属于生物大分子,生命现象以此为物质基础。在血浆中血清白蛋白含量最为丰富,属于拥有重要地位的载体蛋白[1]。当前临床药理学与药代动力学获得快速发展,也有诸多学者开始对药物-蛋白质会如何影响药代动力学进行了研究。二者结合后,留在血浆中的药物会对药物作用进行削弱,避免出现波动现象,同时可增加药物作用时间。阿司匹林可用于诸多疾病的治疗中,具有优良的止痛、消炎以及退热功效[2]。本文主要使用荧光光度法,对在特定pH环境下阿司匹林与HSA(人血清白蛋白)会如何相互作用进行研究,现分述如下。

1 材料与方法

1.1 一般材料

主要药品为阿司匹林对照品、人血清白蛋白以及色氨酸对照品,试剂则主要使用分析纯。选用荧光分光光度计(型号为CRT-9700,产自上海第三光学)和酸度计(型号为Phs-3C,产自上海雷磁)以及超纯水系统(型号为PWUV,产自力康生物)。

1.2 一般方法

1.2.1 溶液制备方法 在制备阿司匹林溶液时,首先称取0.1125g的阿司匹林,而后在其中添加硼砂缓冲溶液,pH值为9.18,且其中含有KCL,剂量约为0.01mol・L-1,在溶解后将其放入量瓶中,容量为25ml即可,而后定容,浓度为2.5×10-2mol・L-1。制备人血清白蛋白溶液时,选用0.0691g的人血清白蛋白,同样加入硼砂缓冲溶液,pH值为9.18,且其中含有KCL,剂量约为0.01mol・L-1,溶解后定容至10ml的量瓶中。而后制备色氨酸溶液,称取0.1062g的色氨酸定容至量瓶中,容量为50ml。而后精密称取25μl并将其转移至25ml容器中,溶解后便会得到色氨酸溶液,浓度为1.041 mol・L-1。

1.2.2 测定法 将浓度为4.0×10-5mol・L-1、剂量为2ml的人血清白蛋白溶液放至石英比色池中,容量为1cm,而后再在其中添加阿司匹林溶液,剂量为16μl,浓度2.5×10-2mol・L-1,在添加时主要使用微量注射器,而后再开展荧光测定。每次混入溶液后均使其均匀,而后分别放置于25℃与37℃的环境中,放置5min,直到平衡结合后将激发波长设定为282mm,再使用荧光分光光度计对波长范围在300nm至500nm之间的发射光谱予以准确记录。

2 结果

2.1 人血清白蛋白溶液发色图位置 蛋白质内源性荧光发色图主要构成为Tyr(酪氨酸)、Phe(苯丙氨酸)以及Try(色氨酸)等残基,上述残基各具特征荧光光谱。若测定条件为Eex=280mm,则人血清白蛋白一旦出现内源发光主要贡献为色氨酸。分别测定人血清白蛋白与色氨酸后发现,两者Eex分别为330mm与350mm。

2.2 荧光给体-受体间存在能量转移现象 阿司匹林混合于人血清白蛋白后,测定其荧光光谱发现一旦添加药物会降低人血清白蛋白荧光强度,这代表二者可相互作用,并且会产生能量转移。但是人血清白蛋白不能增强阿司匹林荧光度,这代表二者之间虽然存在能量转移,但是为非辐射性。

2.3 阿司匹林与人血清白蛋白之间存在的猝灭效应 在人血清白蛋白溶液中滴入阿司匹林溶液时,前者荧光在335mm处会被猝灭,但是在403mm处又会产生一个发射峰。而通过研究后发现荧光猝灭并非受到动态碰撞的影响。

2.4 阿司匹林与人血清白蛋白的作用力 生物大分子与药物之间存在作用力,例如静电引力、范德华力、氢键以及疏水作用力等。由于药物不一样,当其与蛋白质产生作用时也不会产生同样的类型。通过研究后发现,范德华力为阿司匹林与人血清白蛋白的主要作用力。

3 讨论

药物与蛋白质的相互作用是研究生命现象和物质作用机理的一个基本问题,已经引起了各国科学家的普遍重视。随着高科技含量仪器的出现,研究药物与蛋白质 的方法不断推陈出新,研究内容、研究手段等不断深入和完善,将会有数量越来越多、 成果越来越明显、信息越来越全面的科研报道涌现出来。药物与蛋白质的结合程度直接影响到药物储存于血浆中的含量,从而决定了 药物的最大作用强度和作用时间。生物体内,药物与蛋白质的相互作用可能会受到食物 或医药制剂中的其它物质成分的影响, 单纯针对小分子配体与蛋白质二元体系开展研究 具有一定的局限性。实验研究主要采用荧光光谱法,对阿司匹林与人血清白蛋白二者之间的相互作用进行测定,同时探讨二者之间的主要作用力,对临床上用药剂量的控制及了解药物的代谢过程具有重要的意义。通过使用荧光光谱对人血清白蛋白与色氨酸溶液进行测定后若发现二者存在相同的最大吸收光谱,说明人血清白蛋白荧光发色图的主要贡献为色氨酸;反之若不同,则代表在蛋白质疏水腔中可能存在色氨酸残基。在阿司匹林中存在水杨酸羧基,引导乙酰基团进入其中会使得苯环之间相互连接而后在共轭作用下均匀分布电荷,为药物进入疏水腔中创造了条件,而后药物与人血清白蛋白进行进一步结合,产生结合体后会对溶液中人血清白蛋白的构象进行改变。这说明蛋白质存在多种构象或者变构,且密切关联于微环境[3]。

在本研究中发现人血清白蛋白出现猝灭效应主要是因为乙酰水杨酸,同时猝灭具有静态性,受到化合物形成的影响。通过研究人血清白蛋白与阿司匹林的热力学参数后发现二者之间的作用力主要为范德华力。此外,还发现若人血清白蛋白中没有药物则其荧光强度要高于有药物的人血清白蛋白荧光强度,这说明乙酰水杨酸与存在于人血清白蛋白中的色氨酸残基之间有能量转移现象,只是为非辐射性[4]。

药物结合于血浆蛋白可对药物分布与作用起重要影响。二者相互结合后存在较大的D-H分子量,无法开展代谢活动,若药物有较高的HSA结合率则在人体内具有极其缓慢的消除速度,可延长其存在时间。范德华力作为一种引力具有非特异性,主要由存在于分子中的原子通过振动后在相互靠近的过程中引发的极化作用,继而产生瞬息偶极吸引力。当两个原子相距约50nm才会产生范德华力。范德华相较于共价键长而言,前者半径更长,因此药物在与人血清白蛋白结合时若主要通过范德华力则具有易解离性,作用不会持久,因此阿司匹林在人体内部具有较快的代谢速度。

参考文献:

[1]吕茜茜. 荧光光谱法研究几种药物小分子与人血清白蛋白的相互作用[D].西北大学,2011.

[2]黄芸,崔力剑,窦玉红,王永利. 阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用研究[J]. 中国药理学通报,2008,09:1192-1195.

[3]谢兵,万邦江,秦宗会. 荧光猝灭法研究刚果红与人血清白蛋白的相互作用[J]. 光谱实验室,2011,02:764-769.

血清白蛋白篇6

关键词:糖化血清白蛋白;糖尿病;临床价值

糖尿病在临床中是一种患病率较高的疾病,并且病程时间过长,治疗存在一定的困难且并发症发生率较高,因此对患者的身心造成了严重的影响[1]。因为患者血糖水平呈现上升趋势,所以会对患者的眼部、心脑血管以及肾脏位置造成一定的损伤,致使患者最终出现内分泌紊乱现象。就目前而言,临床中均选择空腹血糖对患者进行诊断,但是因为相关因素导致最终检测结果不正确。

1 资料与方法

1.1一般资料 纳入此研究中的50例研究对象均为我院于2014年8月~2015年6月收治的糖尿病患者,同时将其设为观察组,其中男35例,女15例,年龄为41~75岁,平均年龄为(53.7±8.4)岁;并选择同期到我院体检的健康人群50例,将其设为对照组,其中男32例,女18例,年龄为40~76岁,,平均年龄为(54.9±9.5)岁。两组受检人员的一般资料通过统计学软件进行计算,差异性并未加大,统计学意义未产生,临床研究性逐渐加强。

1.2方法 两组受检人员均在晨间且空腹情况下实行静脉血抽取,其抽取的静脉血量大致为4ml。随后在其中抽取2ml通过肝素予以抗凝,通过糖化血红蛋白相关仪器以及相关试剂对受检人员进行检验。随后通过酮胺氧化酶对受检人员中血液的血清白蛋白水平予以检测。随后选择葡萄糖糖化酶法对剩余的2ml血液进行空腹血糖检测。

1.3观察指标[2] 两组受检人员经检验后,对其糖化血清白蛋白、空腹血糖以及餐后2h血糖进行观察并详细记录。

1.4统计学处理 观察组以及对照组中所能够涉及到的相关数据均选择SPSS21.0统计学软件进行计算以及整理,而最终计算结果则通过计量资料或者计数资料予以表示,两组间数据检验方法为t值以及χ2值,其数据经比对后如P

2 结果

观察组经糖化血清白蛋白检验后,其糖化血红蛋白含量为(9.45±1.33)%,对照组经糖化血清白蛋白检验后,其糖化血红蛋白含量为(5.25±1.18)%,经过比对后,t=16.7032,P=0.0000;观察组经糖化血清白蛋白检验后,其空腹血糖水平为(9.86±1.82)mmol/L;对照组经糖化血清白蛋白检验后,其空腹血糖水平为(4.15±1.32)mmol/L,通过对比分析t=17.9584,P=0.0000;观察组餐后2h血糖为(16.21±1.58)mmol/L;对照组餐后2h血糖为(5.58±1.79)mmol/L,通过对比分析后可知,t=31.4819,P=0.0000,通过上述数据可知,比对两组受检人员的糖化血红蛋白含量、空腹血糖水平以及餐后2h血糖水平,差异性有所加强,统计学意义存在。

3 讨论

由于我国逐渐步入老龄化社会,以及人们饮食结构的变化,糖尿病的患病率逐年呈现上升趋势,进而因为糖尿病所产生的并发症也有所提升[3]。因此,及时对糖尿病患者进行诊断并对其进行相应的治疗,有助于患者对糖尿病进行控制。然而糖尿病为一种内分泌代谢疾病,此病的发生机制并未确定,因此临床中诊断此病均以空腹血糖为准。

然而临床中对患者进行空腹血糖检测存在一定的劣势,例如空腹血糖仅仅只能够对患者当时的血糖水平予以呈现,而对患者进行空腹血糖检测后,其最终结果会受到饮食、服用药物以及抽血时间等相关因素的影响,因此检测结果会存在偏差。由此能够看出,单纯选择空腹血糖对患者进行检测其最终结果会出现偏差现象。

近年来研究发现,糖尿病和环境因素以及遗传因素存在一定的关系。而将心脑血管疾病排除后,此病的多发人群为老年患者[4]。同时糖尿病患者的发病因素主要呈现为胰岛素抵抗,大大削弱了胰岛细胞的敏感程度。此外,糖尿病会引发相应的并发症,大大降低了患者的生活质量。

而空腹血浆葡萄糖测定在临床中通常选择氧化酶予以检测,患者无热卡摄入的时间在8h以上,利用血液中的葡萄糖、氧气以及水在氧化酶的效果之下,会形成过氧化氢。高血糖症则是静脉血浆葡萄糖的浓度在7.0mmo/L以上,当产生高血糖,使得患者体中的水分逐渐缺少,并且血渗透压逐年呈现上升趋势,口渴中枢神经会产生相应的刺激性,同时产生口渴以及多饮症状。由于患者体中胰岛素逐渐减少,因此葡萄糖并不能够进行有效的吸收,与此同时,大量蛋白质以及脂肪量逐渐增加,随后患者会出现体重减轻以及乏力现象。

肌体中的葡萄糖以及血清蛋白N极易产生糖基化现象,大部分会和清蛋白链中的赖氨酸189位产生相应的现象并进行相互结合,最终组成酮氨结构,因此出现糖化血清白蛋白,而糖化血清白蛋白的比例在90%以上。所以,糖化血清白蛋白在某种程度上可称为一种代表。

而患者进行糖化血清白蛋白检验的过程中,能够对患者糖代谢紊乱进行正确的判定。在临床治疗时,患者的主治医生可按照此检验结果对患者实际病情予以判定,从而制定符合患者病情的治疗方案[5]。由此能够看出,糖尿病患者在临床诊断中选择糖化血清白蛋白检验,能够有效对其进行区分,有助于临床诊断。如果患者糖化血清白蛋白水平呈现持续上升趋势,其自身的肾脏会受到严重的伤害,从而产生相关疾病。与此同时,经过大量的临床研究证实,糖化血清白蛋白是冠状动脉粥样硬化心脏病的主要引发因素。而糖化血清白蛋白对患者进行检验能够对孕期糖尿病以及糖尿病妊娠进行有效的区别。患者在就诊时选择糖化血清白蛋白检测,不会受到患者进食、尿酸、肌酐或者血红白蛋白的相关影响,与相关指标最终的检测结果相比较而言,此检测结果具有一定的准确性,并对临床诊断糖尿病具有重要的意义。

然而人体血液中的葡萄糖以及血红蛋白共同组成了糖化血红蛋白。由于随葡萄糖浓度的不断提升,其糖化血红蛋白的浓度同样会呈现上升趋势,然而会因为红细胞的衰亡现象而产生变化。然而糖化血红蛋白的含量可以持续120d左右。说明患者血糖在3个月中可以通过此检验方法进行检测。在此研究中,观察组患者经过检测后,其血红蛋白、空腹血糖以及餐后2h血糖和对照组相比较而言,明显呈现上升趋势,经过数据比对后可知,差异性逐渐加强,统计学意义产生。

综上,糖尿病患者在临床诊断中采用糖化血清白蛋白检验具有重要的临床意义,同时提升了临床诊断的正确率,并为患者的后续治疗以及诊断提供了科学依据,同时还能够对患者的病情予以评估。

参考文献:

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血清白蛋白篇7

【关键词】 血清腹水白蛋白梯度;腹水;门脉高压

[abstract] objective: to study the value of serumascitic albumin gradient (saag) in the diagnosis of ascitic etiologies. methods: 89 patients with ascites were reviewed retrospectively.the patients were divided into 2 groups: the group associated with portal hypertension (47 patients)and the group without portal hypertension (42 patients). tested the total protein in and albumin in serum and ascitesd and analyze these parameters.results:the mean level and standard deviation in saag of the group with portal hypertension and the group without portal hypertension was18.42±5.48 g/l, and 8.07±3.25 g/l, respectively (p<0.001). the sensitivity, specificity, accuracy, positive predictive value and negative predictive value of ascitic diagnosis by saag in portal hypertension group were 93.6% (44/47),97.6%(41/42),95.5%(85/89),97.8%(44/45),93.2%(41/44)respectively. all these indexes were significant higher than the results by diagnosing exudates and transndates with ascites fluid total protein (aftp) (p<0.05).conclusion: there is significant clinical value for saag in identifying ascites fluid of portal hypertension from non portal hypertension. high saag is related to portal hypertension, so the patients with low saag need further investigation to find the presence of probable malignant tumor、tuberculous peritonitis and autoimmune disease.

[key words] serumascitic albumin gradient; ascites; portal hypertension

腹水是常见的临床体征,可由多种病因引起,预后差异很大,常见病因为肝实质性病变、恶性肿瘤转移、结核性腹膜炎、自身免疫性疾病、心功能不全等,且小部分病例为多种病因混合(混合性腹水)所致,故对腹水病因的诊断十分重要。wwW.133229.COm传统的检查方法是以腹水总蛋白(aftp)作为主要判断指标,将腹水分为渗出性及漏出性两大类,但其准确率往往无法令人满意[1]。近年来各国学者研究表明血清腹水白蛋白梯度(saag)和门脉高压的关系密切,saag≥11 g/l为门脉高压相关性腹水, saag<11 g/l诊断为非门脉高压相关性腹水[2],与传统的检查方法:以aftp作为主要判断指标的渗、漏出液概念相比较,其准确性大大提高。本文旨在进一步探讨saag在腹水病因诊断中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择以腹水原因待查入院,最后诊断明确(经血清学检查、b 超、ct、病理学及剖腹探查、腹腔镜检查确诊)的腹水患者89例,男性51 例,女性38 例,年龄17~75 岁,平均年龄(44 ±5.1)岁,其中门脉高压组47 例, 为肝硬化33例、原发性肝癌11例、肝硬化并自发性细菌性腹膜炎2例、缩窄性心包炎1例 ;非门脉高压组42例为:腹腔恶性肿瘤25例、结核性腹膜炎14例、系统性红斑狼疮3例 。

1.2 方法

所有患者腹水标本均为入院后第1次腹腔穿刺抽液所得标本。同1 d的血清和腹水标本送常规和生化指标检查。全部生化指标采用全自动生化检测仪进行检测。血清—腹水白蛋白梯度(saag) = 血清白蛋白浓度—腹水白蛋白浓度。传统的检查方法:以腹水总蛋白(aftp)作为主要判断指标,将腹水分为渗出液及漏出液两大类, aftp≥30 g/l,为渗出液,aftp<25 g/l,为漏出液[2]。

1.3 统计学处理

采用t检验及χ2检验, 数据均以均数±标准差(±s)表示, p<0.05 为差异有统计学意义;并计算出其对门脉高压相关性腹水的敏感性,特异性,准确性,阳性预测值和阴性预测值。

2 结果

2.1 两组患者saag的结果比较

门脉高压组的saag 均值[(18. 42±5.48) g/l]明显高于非门脉高压组[(8.07±3.25) g/l], (t=10.67,p<0.001),saag≥11 g/l 的比例(93.6%,44/47)明显高于非门脉高压组(2.4%,1/42), (χ2 = 73.60, p<0.05)。

2.2 两种方法各指标结果比较

saag≥11g/l、aftp<25 g/l检测的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值分别为93.6%(44/47)、78.7%(37/47),97.6%(41/42)、83.3%(35/42),95.5%(85/89)、80.9%(72/89),97.8%(44/45)、84.1%(37/44),93.2%(41/44)、77.8%(35/45),saag检测门脉高压相关性腹水的敏感性、 特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值均明显高于传统的检查方法(p均<0.05)。

3 讨论

腹水是常见的临床体征,可由多种病因引起,腹水检查是确定腹水病因最有效的方法。通过大量临床观察发现, 单纯依据aftp区别渗、漏出液, 对腹水进行病因诊断,其准确率往往不能令人满意[1] 。这是由于aftp受多种因素影响。血清白蛋白、血清球蛋白、及门脉高压任何一个因素均可影响aftp。这些使得在部分漏出性腹水患者中会出现相对高的aftp 。如血清白蛋白不低的肝硬化、右心功能不全、缩窄性心包炎等患者。反之,渗出性腹水患者如合并严重的低蛋白血症,则会出现相对低的aftp 。如许多感染性、癌性患者的腹水总蛋白浓度在漏出液范围内。另外, 由2 种或2 种以上病因导致的混合性腹水,也无法通过aftp进行正确划分。且aftp受治疗影响很大,输注白蛋白和使用利尿剂均可使aftp 升高[3]。因此,腹水的病因诊断一直是临床上的难题。

1978 年hoefs[4]提出了saag 的概念,认为该指标能较真实的反映门静脉压力,提高诊断腹水的准确性。同时hoefs 的研究发现saag 与门脉压成正相关(r=0.73, p<0.000 1) 。saag≥11 g/l提示为门脉高压所致( 包括肝硬化、酒精性肝炎、心源性腹水等), saag<11 g/l 则为非门脉高压所致(包括腹腔恶性肿瘤、结核性腹膜炎、肾病综合征等) 。20 世纪90 年代runyon[5]提出采用saag≥11 g/l、<11 g/l 为高、低saag 腹水的分类, 代替传统的漏出液和渗出液分类概念, 已引起临床医师的重视[6,7] 。pare 等[6]认为,saag 是鉴别肝病腹水和恶性肿瘤腹水的有用指标, 但文献中对saag 在腹水病因诊断中的价值有不同的评价[8]。

依starling 的理论, 在所有漏出性腹水中门静脉与腹腔毛细血管之间的静水压梯度均增高,故血清与腹水之间的渗透压差也相应升高,而白蛋白是构成血清及腹水渗透压的最主要成分,通过saag 可间接反映门静脉压力[9]。由于saag 反映的是门静脉压力的绝对值,而不是其与门静脉压力差。同一患者的门脉压力是保持相对稳定的。故在患者摄入含盐食物、输注白蛋白及使用利尿剂或治疗性腹腔穿刺前后, saag 没有或仅有极细微的改变。

梁奕志等.血清腹水白蛋白梯度在腹水病因诊断中的意义 本文研究发现,门脉高压组saag 显著高于非门脉高压组(p<0.001),以saag≥11 g/l 为标准,其对门脉高压相关性腹水的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值,均高于传统的以aftp作为主要判断指标的渗、漏出液方法,与近年文献报道结果相似[7]。

在门脉高压相关性腹水病因中, 肝硬化最常见。肝硬化门脉高压引起门静脉与腹水间静水压梯度,故血管内和腹水的胶体渗透压也有一定的压力梯度,白蛋白是形成胶体渗透压的主要因素,血清和腹水的白蛋白浓度差与门脉压力直接相关。肝硬化患者,以saag≥11 g/l 预测门脉压力增高的准确性很高。肝硬化出现腹水, 如saag<11 g/l(本文3例),则主要是血清白蛋白浓度较低(<20 g/l),或有高球蛋白血症(>50 g/l),球蛋白亦产生渗透压,致saag 数值减少,故根据saag 能对腹水病因诊断提供初步的指导。原发性肝癌多数是在肝炎后肝硬化基础上发生的, 虽然属恶性肿瘤, 仍有高saag 性腹水, 与文献资料一致[8]。肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎仍存在门脉高压,尽管其腹水呈渗出性, 其saag仍高于11 g/l , 利用这个指标能为自发性细菌性腹膜炎与结核性腹膜炎的鉴别诊断提供很好的依据。

据文献报道, 腹腔恶性肿瘤患者(若无肝脏大块转移)的腹水是低saag的[10], 其原因是因为肿瘤细胞释放增加通透性的物质, 使腹腔表面血管通透性提高,较多量的蛋白进入腹腔间隙, 使血管内外的蛋白梯度下降。恶性肿瘤在低saag 腹水的病因中占很大比例。其病因是异质性的。腹水中可找到肿瘤细胞, 若高度怀疑本病, 需多次腹水查找癌细胞, 以提高其检出率,必要时进一步行剖腹探查、腹腔镜检查,有可能会发现腹膜间皮瘤和假性黏液瘤等少见疾病。在我国低saag中,结核性腹膜炎相对常见,也可发生于肝硬化患者,但对本病的诊断须谨慎,在确立诊断之前尤应注意排查恶性肿瘤,亦可通过诊断性治疗密切观察[1114]。在自身免疫性疾病中亦是低saag的,本文3例系统性红斑狼疮患者,结合临床、血清ana、dsdna、ena 检查,诊断明确,应加强对本病的认识与排查。

综上所述,saag在鉴别门脉高压相关性腹水和非门脉高压相关性腹水中具有重要的临床意义。saag虽不能直接对腹水的病因做出诊断, 但却能为腹水病因的诊断提供线索。高saag 腹水大多与门脉高压有关, 而低saag 腹水患者, 应努力寻找恶性肿瘤、结核性腹膜炎和自身免疫性疾病等诊断证据。

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血清白蛋白篇8

河北省张北县医院,河北张家口076450

[摘要]目的探讨对各种肝病患者检测血清前白蛋白(PA)的临床意义。方法对我院2011年6月—2013年10月收治的100例门诊和住院各种肝病患者进行PA及血清总蛋白(TP)进行测定,在组间进行对比的同时与同期50例健康者进行以上指标的比较。结果与健康者比较,所有肝病患者PA均有所下降(P<0.05),肝癌及肝硬化PA降低率最高。肝癌及肝硬化的TP与健康组比较有明显下降(P<0.05),急性和慢性肝炎患者TP与健康组无明显差异(P>0.05)。结论PA的水平是显示肝功能的重要及敏感指标,对诊断和预后有指导意义。

[

关键词 ]肝病;血清前白蛋白;血清总蛋白

[中图分类号]R446 [文献标识码]A [文章编号]1672-5654(2014)06(b)-0001-02

Analysisofserumprealbumindetectionandclinicalsignificance

LIJinchun

ZhangbeiHospitalofHebeiprovince,Hebei076450,China

[Abstract]ObjectiveStudyonpatientswithvariousliverdiseasesdetectionofserumprealbumin(PA)anditsclinicalsignificance.MethodsIn200patientswithvariousliverdiseasesinourhospitalfrom2011Juneto2013OctoberwerePAandserumtotalprotein(TP)weremeasured,comparingtheaboveindexeswerecomparedwiththesameperiodingroupand50healthysubjects.ResultsComparedwithhealthysubjects,allpatientswithliverdiseasePAdecreased(P<0.05),HepatocellularcarcinomaandlivercirrhosisPAdecreasewiththehighestrate.TPandthehealthycomparisongroupofhepatocellularcarcinomaandcirrhosispatientsdecreasedsignificantly(P<0.05),acuteandchronichepatitisTPpatientsandhealthygroupshadnosignificantdifference(P>0.05).ConclusionPAlevelistoshowanimportantandsensitiveindexofliverfunction,hastheguidingsignificanceforthediagnosisandprognosis.

[Keywords]Liverdisease;Serumprealbumin;Serumtotalprotein

肝脏是人体内最大的消化腺,是体内物质能量代谢的中心站,在人的生命中具有重要作用,一旦发生病变,将严重影响人体健康。对于肝病患者,主要是通过肝功能的各种指标进行诊断、治疗及判断预后。在诸多指标中,由于血清前白蛋白(PA)是肝脏合成的一种糖蛋白,对其的测定可反映肝脏合成和分泌蛋白质的功能,可作为肝功能损害的早期指标以及提示一些疾病的变化及预后,已被临床广泛应用[1]。笔者通过对比各种肝病及健康者的PA,旨在进一步规范PA在临床中的价值,现总结报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

200例病例为我院2011年6月—2013年10月收治的各种肝病患者,男60例,女40例,年龄17~74岁,平均(45±12)岁,均符合2000年西安第六次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案的诊断标准[2]。其中急性肝炎27例,慢性肝炎26例,肝癌24例,肝硬化23例。健康组50例为同期在我院进行体检者,并证实肝功能正常,男28例,女22例,年龄16~75岁,平均(44±13)岁。两组性别、年龄无差异(P>0.05),具有可比性。

1.2仪器和试剂

仪器:东芝120FR全自动生化分析仪。试剂:PA试剂盒由上海华氏亚太生物制药有限公司提供。TP由北京希克玛生物技术公司提供。

1.3检测操作

所有的患者及体检者取空腹静脉血3~5mL,并进行离心,取血清按操作说明进行检测。

1.4检测方法

PA采用免疫比浊法检测,正常参考值为200~400mg/L。TP采用双缩脲法,正常参考值为60-80g/L。

1.5统计数据处理

本组数据采用spss13.0软件处理,计量数据用平均数表示,通过t和χ2检验,P<0.05为有统计学差异。

2结果

2.1肝病患者与健康者PA与TP水平比较

与健康者比较,所有肝病患者PA均有所下降(P<0.05),肝癌及肝硬化的TP与健康组比较有明显下降(P<0.05),急性和慢性肝炎患者TP与健康组无明显差异(P>0.05),如表1。

表1肝病患者与健康者PA与TP水平比较

注:*P<0.05;#P>0.05;﹠P<0.05。

2.2不同肝病患者PA阳性率比较

阳性率以健康者为参照,PA低于180mg/L为阳性。肝病组中肝癌及肝硬化PA降低率最高,其次分别为慢性肝炎,急性肝炎,具体分布如表2。

表2不同肝病患者PA阳性率比较

注:组间比较,*P<0.05。

3讨论

肝脏是人体最重要的器官之一,它可分泌胆汁,帮助消化饮食,它把吸收的氨基酸合成蛋白质供给机体能量,让人们能够精力充沛地完成一天的工作和学习;它能贮藏和燃烧体内的脂肪,控制体重,保持人体健康;它是脂溶性维生素的贮存器官;它还能够氧化、还原、分解体内的毒素,吞噬体内的细菌,是人体最大的解毒器官[3]。常见的肝病有肝炎、肝硬化、肝脓肿、肝癌等,肝病的发病初期比较隐晦,未有明显的临床症状,最突出的表现为疲倦和厌食,这两种表现常容易被人们误认为工作或学习忙所致,因而容易忽视。随着病情的发展,会逐步出现“三黄”、头昏耳鸣等症状,若发展到肝硬化,会有腹水、水肿、尿少、蜘蛛痣,严重者还可能大出血。危害越来越严重,治疗也越来越困难,因此笔者建议一旦发现有所不适,应立即入院检查。

对于肝病患者来说,各项指标的检查尤为关键,通过相关指标可掌握肝脏功能,了解肝脏损伤程度,并指导临床制定科学合理的治疗方案。虽然肝脏功能反应的指标诸多,但能特异灵敏、早期反映肝脏功能的指标并不多。作为机体蛋白主要合成场所的肝脏,无论是何种原因导致的肝功能损伤均可影响蛋白质的合成,导致血清中蛋白浓度变化。血清前白蛋白(PA)全部在肝脏合成,其半衰期仅2d,明显短于白蛋白(ALB,其平均半衰期为21d),因而可反映近期肝脏合成白蛋白的能力[4]。同时PA在血清中含量少,在体内转化率快,在肝脏合成降低后可迅速在外周血肿检测出来。此外,它由于是肝脏直接合成,可有效显示肝脏损伤程度。通常其值越低,表明肝功能损伤越严重,若持续降低,说明肝功能已丧失一定的蛋白合成功能。因此,临床常将其作为反应肝功能的一个重要指标。

从表1、表2中可以看出,肝病患者的PA明显低于健康者,而在肝病组中其降低顺序是肝硬化、肝癌、慢性肝炎、急性肝炎,这与前面所述PA下降水平的高低与肝细胞的受损伤的严重程度相一致,与以往的报道也相符。PA阳性率也是肝癌和肝硬化位居前一、二位。出现如此的特点笔者认为可能是由于急性肝炎的肝细胞损伤以水肿为主,损伤的程度和数量较其他肝病轻,因而其PA水平较其他肝病高。慢性肝炎以点状坏死、碎片状死为主,因此PA水平较急性肝炎低。肝癌及肝硬化时肝细胞以大片坏死为主,因而PA降低较为明显。有学者提出ALB也是反映肝功能的重要指标,但ALB由于半衰期长,即使肝脏不再合成ALB,8d后仍能在外周血中检测出ALB,且浓度仅降低20%左右[5],而只有肝脏损伤到较为严重的程度ALB才会出现明显的改变,因而ALB无法如PA及时、有效的反映病情。因此本组研究未将该指标列入其中。

TP也是体现肝功能的重要指标,多种病变均可引发TP改变。但该指标和ALB一样需待肝脏损伤到一定程度才能较为客观的反映肝功能变化情况,在急性和慢性病变时,其水平接近正常值,与本组研究结果一致。

综上所述,PA在肝病患者中变化较为明显,更能动态的、灵敏的反映肝功能情况,治疗前后均能作为判断的重要指标。

[

参考文献]

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