热休克蛋白27及ER在子宫内膜腺癌中的表达及意义

[摘要] 目的:检测热休克蛋白(HSP)27及ER在正常子宫内膜、增生过长子宫内膜、非典型增生和子宫内膜腺癌中的表达情况,探讨其临床病理学意义及其与子宫内膜腺癌发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测16例正常子宫内膜、8例增生过长子宫内膜、8例非典型增生子宫内膜、45例子宫内膜腺癌中HSP27和ER的分布及表达。结果:HSP27在子宫内膜腺癌组织中的表达低于前三种状态的子宫内膜,差异均有统计学意义(P

[关键词] 子宫内膜腺癌;热休克蛋白;免疫组织化学

[中图分类号] R737.33[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2010)05(c)-025-03

Expression and significance of heat shock protein 27 and ER in endometrial adenocarcinoma

CHEN Haiying*, ZHONG Ni'nan

(Department of Obstetrics and Gynecology, Yiyang Central Hospital of Hu'nan Province, Yiyang 413000, China)

[Abstract] Objective: To explore the expression and clin-pathologic significance of heat shock protein (HSP) 27 and ER in endometrial adenocarcinoma. Methods: Expressions of HSP27 and ER in 16 normal endometrium, 8 hyperplastic endometrium, 8 atypical hyperplastic endometrium and 45 endometrial adenocarcinoma were detected by immunohistochemical staining SP method. Results: The expression of HSP27 in endometrial adenocarcinoma was significantly lower than that in normal endometrium, hyperplastic endometrium and atypical hyperplasia endometrium (P

[Key words] Endometrial adenocarcinoma; Heat shock protein; Immunohistochemistry

热休克蛋白(HSP)是一组具有重要生理功能、高度保守的蛋白质分子,普遍存在于生物细胞中,应激状态下可被诱导表达,故又称为应激蛋白。近年来研究发现,HSP与肿瘤的发生、发展、肿瘤免疫、机体肿瘤治疗药物耐药性的发生和肿瘤预后都有密切关系[1]。HSP27在人类子宫内膜中均有表达,受甾体激素调节,与甾体激素受体如雌激素受体(ER)表达有关。本研究拟通过免疫组织化学方法检测HSP27及ER在45例子宫内膜腺癌组织中的表达,探讨HSP27在子宫内膜腺癌发生、发展中的作用及与ER表达的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集我院病理科2002年1月～2005年12月子宫切除和内膜刮除的16例正常子宫内膜、8例增生过长子宫内膜、8例非典型增生子宫内膜和45例子宫内膜腺癌标本资料,连续切片4 μm厚。所有内膜癌患者手术前均未行放疗及化疗。按1988年FIGO手术-病理分期标准,45例子宫内膜腺癌中:G1级24例,G2级10例,G3级11例;肌层浸润深度:深肌层浸润者22例,浅肌层浸润者23例;Ⅰ期23例,Ⅱ期13例,Ⅲ期9例,其中,Ⅲ期患者包括只侵及淋巴结者1例,只侵及宫旁者6例,侵及宫旁+淋巴结者1例,腹水含癌细胞者1例。

1.2 主要试剂

山羊抗人HSP27多克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品,小鼠抗人ER单克隆抗体为美国Maxin Biotech公司产品,即用型SP免疫组化染色试剂盒为美国ZYMED公司产品,均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 检测方法

石蜡切片经二甲苯脱蜡,梯度酒精至水,后用0.01 mol/L PBS(pH 7.4)缓冲液洗;用高压锅行高温高压抗原修复;3% H2O2室温15 min,阻断内源性过氧化物酶活性;兔血清封闭非特异性反应,37℃ 20 min,甩干;滴加1∶100倍比稀释的羊抗人HSP27抗体及小鼠抗人ER抗体(一抗),于湿盒中4℃冰箱过夜;滴加生物素标记二抗,37℃ 20 min;滴加辣根酶标记链霉卵白素,37℃ 20 min;DAB显色,苏木素复染、脱水、透明、树脂封片。用已知阳性结果的乳腺癌切片作阳性对照,PBS代替一抗作阴性对照。

1.4 结果判断

各随机计数10个高倍视野内的阳性细胞,阳性细胞数70%计为3分;对阳性细胞染色强度评分,无着色计为0分,淡黄色计为1分,棕黄色计为2分,棕褐色计为3分;结果取两者评分之和,0～1分为阴性(-),2分为弱阳性(+),3～4分为阳性(++),5～6分为强阳性(+++)。

1.5 统计学分析

采用SPSS 13.0统计软件对结果进行χ2检验。各组间率的比较采用χ2检验或确切概率法,相关性分析采用秩相关分析,P

2 结果

2.1 HSP27和ER的分布形式

HSP27的阳性表达为上皮和基质细胞的胞浆和(或)胞核内出现棕黄色颗粒,片状或弥漫状分布。ER阳性信号为上皮和(或)基质细胞的胞核内出现棕黄色颗粒,阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布。

2.2 HSP27和ER在不同组织类型中的表达情况

HSP27在正常子宫内膜、增生过长子宫内膜、非典型增生子宫内膜和子宫内膜腺癌中的阳性表达率分别为50.0%(8/16)、62.5%(5/8)、100.0%(8/8)、20.0%(9/45)。HSP27在子宫内膜腺癌组织中的表达低于正常子宫内膜、增生过长子宫内膜、非典型增生子宫内膜,差异有统计学意义(P

2.3 HSP27表达与临床特征的关系

子宫内膜腺癌中HSP27的表达随着病理分级升高而表达减弱(P0.05)。见表1。

2.4 子宫内膜中HSP27表达与ER表达的秩相关分析

经统计学处理,HSP27与ER的等级相关系数rs=0.956,差异有高度统计学意义(P

3 讨论

HSP是机体细胞在受到各种刺激时产生的一类高度保守的蛋白,能与具有不同功能的多种蛋白质在细胞中形成复合物,并通过其形成和解离而参与有关蛋白的折叠、亚基的组成、细胞内运输及降解等过程,从而调节靶蛋白的活性和功能,但不参与靶蛋白的组成,因而HSP被认为是“分子伴侣”(MC)[2]。近来研究发现,HSP与肿瘤的发生及肿瘤细胞的增殖、凋亡有关[3]。

HSP与细胞的转化和恶变过程密切相关,通常在恶性肿瘤细胞中,HSP呈持续性的高诱导表达[4]。对不同的肿瘤,不同的HSP表达的情况也不一样。HSP27在乳腺癌[5]、卵巢癌[6]、前列腺癌[7]以及食管腺癌[8]等腺体组织中高表达是预后不良的标志,然而在食管鳞癌组织[9]和口腔鳞癌组织[10]中HSP27蛋白水平表达高是预后好的标志。

子宫内膜癌是严重危害女性健康的一种妇科肿瘤,有关子宫内膜癌中HSP表达及其与ER的关系的研究,国内外报道均不多。本研究发现,非典型增生内膜中HSP27表达较正常内膜显著升高(P

子宫内膜腺癌中HSP27表达与肿瘤病理学分级显著相关(P0.05),提示HSP仅反映肿瘤生物学行为的一个方面,能否指导肿瘤的预后尚需进一步研究。

对77例子宫内膜中HSP27表达与ER表达的相关性分析表明,HSP27表达与ER表达呈正相关。子宫内膜增生过长和内膜癌的发生与雌激素作用和ER的功能调节是分不开的,内分泌治疗效果与组织中甾体激素受体表达有关,子宫内膜中HSP27表达受甾体激素调节,与甾体激素受体表达有关,故研究子宫内膜中HSP表达对探讨内膜生长规律、病变机制、改善治疗措施等方面有很大的指导意义。

总之,HSP与子宫内膜腺癌关系密切,研究不同子宫内膜中HSP表达及与ER表达的关系将有助于进一步了解人子宫内膜组织生理及病理调节机制,同时对指导子宫内膜癌的治疗有深远意义。

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(收稿日期:2010-04-09)