药物制剂杂质研究概述

摘 要：目的 对药物制剂杂质研究方法进行归纳和总结，对杂质的分析方法和标准建立做相关探讨 方法 通过查阅杂质分析研究方面的文献资料 结果 总结梳理了杂质的研究分析过程 结论 色谱条件、波长等关键因素的确认应合理。

关键词：制剂 杂质 色谱

中图分类号：R283 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2014）01（c）-0253-01

药物杂质是指在药品生产、运输、储存过程中产生的或引入的影响药物纯度的物质，主要包括有机杂质、无机杂质、残留溶剂等；有机杂质主要是通过药物本身降解、缔合或药物之间的反应产生的；无机杂质主要是原料药制备过程中加入的一些如催化剂、无机盐、配位体等；残留溶剂主要是反应试剂的残留。药物杂质直接关系到临床用药的安全性，因为某些杂质过量可能会使人体产生过敏反应[1]，甚至危及病人生命，因此建立一个专属性强、灵敏度高的的杂质分析方法并得到科学的方法学验证是在药品研发评价及生产过程中质量控制必不可少的有效手段。

1 杂质分析

杂质分析主要是通过高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、薄层色谱法（TLC）等分析方法进行检测，目前较常用高效液相色谱法（HPLC），且多使用梯度洗脱。为了准确的检出药物中存在的杂质，在初步确定色谱条件后，首先需利用破坏性试验确认各杂质的分离度、峰纯度以及波长的选择是否合理，在确定上述条件后，可根据ICH关于方法学的要求进行方法学验证，并完成相关杂质的结构确认工作。

破坏性试验：破坏性试验是指在酸、碱、氧化、高温、高湿、光照等相对剧烈的条件下，对药品进行破坏，从而产生较多的降解产物，模拟货架期内药品降解产生杂质，以验证在当前色谱条件下，各降解杂质峰与主峰，以及各降解杂质峰之间的分离度是否符合要求。

破坏条件：如酸破坏（0.05M盐酸8 h）；碱破坏（0.02M氢氧化钠溶液8 h）；氧化破坏（0.15%双氧水1.5小时）；高温破坏（100 ℃5个小时）；光照破坏（4500LX15 d）等，具体破坏条件的制定因药物化学性质不同而不同，具体指标为主峰降解10%～15%，可参照峰高。

峰纯度测试：在经过破坏性试验后，降解产生较多杂质，采用高效液相色谱法进行分离时，不仅需要考虑各杂质峰之间，杂质峰与主峰之间的分离度，还应考察各峰的峰纯度[2]，因为分离度不能够说明主峰或者各杂质峰中没有包含其他峰，峰纯度测试主要采用DAD检测器，且峰纯度一般不应小于950。

波长的确定：波长的选择时可采用DAD检测器，样品溶液在经过合理的破坏后，在同一色谱条件下，使用多波长扫描各破坏条件下样品溶液，可以有效检出已知杂质，并且检出杂质数量较多者为最终确定波长。

方法学验证及已知杂质的分析：在方法确认过程中，需要进行定量限、检测限、专属性、线性（0.05%～2倍质量标准）、范围、精密度等项目测试[3]。

定量限：指在既定的试验条件下，样品中被测物可以被定量测定的最低浓度，并且结果应经过精密度和准确度的确认，指标为信噪比S/N=10∶1；

检测限：指在既定试验条件下，样品中被测物能够被检测到的最低浓度，但不必准确定量，因此确认检测限只是证实被分析物的含量高于或低于某个水平，指标为信噪比S/N=3∶1；

线性：选择0.5%～2倍质量标准范围内选择五个浓度，用峰面积建立回归曲线，计算相关系数，结果应符合要求；

精密度：包括重复性―同一浓度杂质对照品连续进样6针，计算峰面积RSD值；中间精密度―通过变换时间、操作人员、检验仪器等因素考察检验结果的差异；重现性―同一样品不同实验室之间的检验数据的比较工作；

准确度：至少应涵盖所属范围内浓度，最少用3个浓度，并测定9次，计算各杂质的回收率；

专属性：通过破坏性试验实现。

耐用性：在药典要求范围内，通过调整流动相比例、色谱柱品牌、柱温、进样体积等因素考察上述因素的微调对检验结果的影响程度，进一步评价检验方法的适用性；

稳定性：在一定温度下，将样品溶解一段时间后，考察各杂质含量的变化情况，为样品检验时提供依据。

当杂质与主成分的相对相应因子在0.9～1.1之间时[4]，可采用主成分的自身对照法，当超出此范围时应采用标准品对照法，杂质标准品较难采购或因成本较高时，可采用加校正因子的自身对照法。

结构确证：对正常样品进行检测，计算各杂质的含量，并根据药品的最大日剂量，确定杂质的鉴别限度，当检测值大于杂质的鉴别限度时，且为未知杂质时，需要对该杂质进行结构确认，通常采用LC-MS进行结构确认[5]。一般当最大日剂量不超过2g时，鉴定阈值为0.2%，最大日剂量超过2g时，鉴定阈值为0.1%。

2 结语

色谱条件应能保证分离各杂质及各杂质与主峰的分离度，以及各峰的峰纯度；

波长的选择应该合理，色谱分离条件的基础上，可以全部检出降解杂质，从而达到降解产物回收率的要求：约90%，主要方法是多波长检测；

对已知杂质的分析应该合理，需要定量时应验证方法的线性范围等，杂质标准品采购较困难时，可以计算响应因子，利用自身对照法计算杂质含量；

超出鉴定阈值的杂质应做结构确证。

参考文献

[1] 霍秀敏.抗生素高分子杂质与过敏反应[J].国家食品药品监督管理局药品审评中心，2005（9）.

[2] 成海平.杂质检查分析方法建立过程中破坏性试验的意义和存在的问题分析[J].国家食品药品监督管理局药品审评中心，2007（11）.

[3] 张哲峰，成海平，宁黎丽，等.CTD申报资料中杂质研究的几个问题[J].国家食品药品监督管理局药品审评中心，2012（12）.

[4] 王巍，高鹏来，何红梅，等.中华人民共和国药典[M].中国医药科技出版社，2010.

[5] 于红.杂质谱的分析[J].国家食品药品监督管理局药品审评中心，2007（6）.