高效液相色谱法测定脂肝康合剂中大黄酚含量

时间:2022-09-13 08:44:53

【摘要】 目的 建立脂肝康合剂质量控制方法。方法 采用液相色谱法测定大黄酚含量。 结果 经方法学考察,各项指标均符合规定,方法回收率为97.2%,RSD为1.80%。结论 为该制剂质量分析提供了可行的分析方法。

【关键词】脂肝康合剂;大黄酚;高效液相

脂肝康合剂由决明子、丹参、芍药等十余味中药经提取加工制成,具有活血化瘀,软坚散结之功效。临床用于脂肪肝治疗,取得了满意的疗效。为确保其制剂质量,我们采用HPLC法测定决明子大黄酚含量,方法与条件如下。

1 仪器与试剂

岛津LC-6A液相色谱仪,中北工作站。大黄酚对照品购于中国药品生物制品检定所,所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱shim-packCLC-ODS(6.0 mm×150 mm)流动相为甲醇-0.025 mol/L磷酸(9∶1)检测波长 428 nm。

2.2 线性范围考察 精密称取大黄酚对照品5.01 mg 置50 ml容量瓶中,加甲醇溶解定容至刻度。精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10 μl,测定色谱峰面积,以进样量为横坐标,以色谱峰面积为纵坐标,经线性回归,回归方程为 Y=1 653 272.1x-7231.4r=0.999 9 进样量在0.1~0.5μg范围内线性关系良好。

2.3 供试品溶液制备

精密吸取本品10 ml,加水10 ml,混匀,加2.5 mol/L硫酸溶液15 ml,沸水浴缓缓回流1 h,放冷,加氯仿30 ml,水浴回流提取0.5 h,放冷,分取氯仿液,水层加氯仿萃取3次(30,30,20 ml),合并,水浴蒸干,残渣加甲醇溶解,定容至25 ml量瓶中,经微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得。

2.4 阴性干扰试验考察 按处方去除其它药味按供试品制成阴性液,分别吸取供试液,阴性液与对照液各10 μl,分别进样。测定结果提示,供试品具有与对照品相同保留的色谱峰,阴性液无干扰。附图见1、2、3。

2.5 稳定性试验考察 精密吸取供试液10 μl,进样分析,分别在0、2、4、6、8 h分别进样,测定结果见表1,测定结果提示,8 h内色谱峰面积无明显变化,RSD%为1.08%,在此时间内测定,其化学成分化学性质稳定。

2.6 精密度试验考察 分别吸取供试品溶液10 μl,连续进样5次,测定色谱峰面积。测定结果见表2,精密度试验良好。

2.7 重复性试验 取同一批号样品5份,每份各10 ml,按供试品溶液制备方法制成供试液,按前述色谱条件测定,结果见表3。

2.8 回收率试验

精密吸取样品5 ml,加入大黄酚对照液(0.24 ml/ml)5 ml,按样品含量测定项下制备样品液并进行测定,测定结果见表4。

3 讨论

3.1 大黄酚分别在224 nm、428 nm下有最大吸收峰,采用紫外224 nm下测定供试液干扰组分较多,在428 nm下测定,在选定的色谱条件下,供试品溶液与相邻组分分离度良好。

3.2 经对酸水解时间考察,水解时间为1 h,样品中大黄酚已基本提取完全,故选择水解1 h。

参考文献

[1] 季芳,阙瑞艳,周小军.高效液相色谱法测定苦黄颗粒中大黄素和大黄酚的含量.陕西中医学院学报, 2005,28(6):49.

[2] 刘晋华,屈梅芳,尤光甫.RP-HPLC测定消炎止血颗粒中大黄素和大黄酚的含量.中国药事, 2006,20(7):421-422.

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