实验室对艾滋病检测样品采集\运送和保存的要求

【中图分类号】R194【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2012)05－0307－01

【关键词】 获得性免疫缺陷综合征HIV 实验室技术和方法

艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病1［1］。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分，建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查，控制艾滋病的流行显得尤为重要. 

艾滋病筛查实验室检测最常用的样品室血液，包括血清、血浆、全血和用全血制备的细胞、干血斑。唾液或尿液虽然有时也可作为检测样品，但目前极少使用。样品采集、运送和保存涉及面较广，与检测结果有一定关系，所以制定规范管理要求是非常必要。

一、血清样品采集和处理：

对于艾滋病和HIV感染的诊断，主要采用血清样品检测HIV抗体。可用真空采血管采血5—10ml（根据需要确定采样量）静脉血，室温下自然放置1—2h，待血液凝固后用3000rpm，离心15分钟，吸取血清进行HIV抗体检测。血清样品置2—8℃冰箱保存7天。

若用快速检测试剂检测HIV抗体，也可用末梢全血，成人、儿童或幼儿可选择中指、无名指采集、足跟部位采血。采血部位用75%酒精或碘伏认真消毒皮肤，用EDTA毛细管吸取血样。采血结束后，彻底止血，完成后的穿刺针头丢弃于耐穿透的容器内，妥善处理，严防职业暴露损伤。

采集血浆或全血应根据实验项目要求选用适当的抗凝剂，CD4/CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA或肝素。本实验室完成的实验尽早完成，不能完成检测项目，采集后在规定限时内及时送到，避免采集不当、暂存环境与时间的延误等因素而影响检测结果，如要检测CD4/CD8+T淋巴细胞测定的样品应选择合适的抗凝剂， 血样检测抗凝剂用EDTA（5 ml）若用EDTA钾盐血样品应在30h以内，尽早（8h以内）处理;用ACD或肝素抗凝，血样收集在48h以内，尽早（8h）处理。静脉采集收集血样应用EDTA钾盐真空管，采集后立即颠倒混匀8--10次，使血液与抗凝剂充分混匀，对所有样品进行编号、日期、采集时间。

二、样品的保存：

用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放在-20℃以下，短期在一周内进行检测的样品可存放于2-8℃。HIV检测阳性血清样品可保存至少十年。艾滋病筛查实验室不能存放阳性血清，阳性血清必须具备有资质的实验室可存放（确认艾滋病实验室）用于CD4/CD8+T淋巴细胞测定样品采集时间超过48小时则不可检测。由于HIV检测阳性反应血清样品均保存在艾滋病检测确认实验室，因此，在HIV阳性反应血清样品较多的地区，艾滋病检测确认实验室应根据需要配置-20℃以下的低温冰箱和-80℃的超低温冰箱保存。

三、样品的运送：

需要确认阳性反应的血清或血浆，应采用WHO提出的三级包装系统。第一层容器：装样品、防渗漏。样品应置于戴盖的试管内，试管上有明确的标记、受检者的姓名、种类和采集时间。在试管周围应垫有缓冲吸水材料，以防碰碎。随样品应附有送检单。必须要填写送检单种类信息，分开放置。第二层容器：要求耐受性好的、防渗漏、容纳保护第一层容器，将第一层装入第二层容器内，容器材料便于消毒处理。第三层容器：是运输用于外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴有标签（注明数量、收样单位等内容）血清或血浆样品应在2--8℃条件下专人运送。

检测检测CD4/CD8+T淋巴细胞测定的清或血浆温样品应在室温下（18--23℃）运送。但必须按照三级包装要求将盛样品的试管放好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和渗漏。运送感染材料要有记录。

四、样品的接收

必须在具备有出来感染源设备的实验室内由经过培训、则在生物安全柜中戴手套、口罩、戴防护衣、带防护眼镜、 的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。认真核对样品盒送检单、检查样品有无破损和渗漏，如发现渗漏立即将存留的样品移出，对样品管和渗漏消毒，检查样品状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过高及黄疸等情况，如果污染严重或严重溶血等情况视为样品不能被接受，则应将样品安全废弃，并要将样品情况立即通知送样人或单位。打开标本容器时要特别小心，以防皮肤或粘膜污染，以防内容物泼溅。

作者单位：836000新疆北屯农十师疾控中心