两种方法检测降钙素原的比较分析

【前言】两种方法检测降钙素原的比较分析由文秘帮小编整理而成，但愿对你的学习工作带来帮助。1.1 仪器与试剂 Roche Cobas E601发光仪及配套试剂；广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪及配套试剂。 1.2 标本来源 收集笔者所在医院ICU病房、新生儿科、儿科、呼吸内科、心内科、外科等相关临床科室120例不同浓度的PCT进行同时检测。 1.3 方法 利用笔...

【摘要】 目的：比较分析电化学发光法和免疫荧光层析法检测降钙素原（PCT）结果。方法：采用Roche Cobas E601电化学发光仪及广州万孚对120例不同浓度的PCT进行同时检测并对所有数据进行统计学分析。结果：两种方法的阴性组、低风险组、轻度升高组浓度值比较差异无统计学意义（P>0.05）；中度及高度升高组浓度值比较差异有统计学意义（P0.05）。结论：免疫荧光层析法操作简便，实时性优于电化学发光法。

【关键词】 降钙素原； 电化学发光法； 免疫层析法； Roche Cobas E601发光仪

中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2014）30-0044-02

降钙素原（PCT）即降钙素前体，由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，生理情况下，血液中检测不到。它是一种脓毒诱导蛋白，作为新的炎症指标，广泛地应用于感染性疾病的诊断、鉴别诊断、病情监测及抗生素应用指导等[1]。随科学技术发展，检测降钙素原的方法有许多，如电化学发光免疫法、胶体金免疫荧光层析定量法、酶联免疫法等[2-3]。本文就前两种方法的降钙素原结果进行比较，旨在分析这两种方法的相关性。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Roche Cobas E601发光仪及配套试剂；广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪及配套试剂。

1.2 标本来源

收集笔者所在医院ICU病房、新生儿科、儿科、呼吸内科、心内科、外科等相关临床科室120例不同浓度的PCT进行同时检测。

1.3 方法

利用笔者所在医院现有两种仪器，一种是广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪（免疫层析法原理），一种是Roche Cobas E601发光仪（电化学发光原理）；将120例标本离心沉淀，每份标本分成两份，一份用广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪做PCT测定；一份用Roche Cobas E601发光仪做PCT测定；两种仪器各测得120份数据进行统计学处理。

1.4 统计学处理

采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料比较采用字2检验。P

2 结果

2.1 分组

将120例标本按如下浓度进行分组统计分析：A组（阴性组）：PCT

0.5 ng/ml，17例；C组（轻度升高组）：0.51 ng/ml≤PCT

2.2 两组检测方法不同组别浓度值比较

A、B、C三组在低浓度时差异无统计学意义（P>0.05），D、E两组在高浓度时比较差异有统计学意义（P0.05），见表1。

2.3 两种方法总阳性率比较

以PCT>0.1 ng/ml为阳性，免疫荧光层析法组阳性率为46.66%，电化学发光法组阳性率为44.16%，两者比较差异无统计学意义（字2=0.151，P=0.697>0.05），见表2。

表2 两种方法总阳性率比较 %

方法 0.1 g/ml

免疫荧光层析法（n=120） 53.34（64/120） 46.66（56/120）

电化学发光法（n=120） 55.84（67/120） 44.16（53/120）

字2值 0.151

P值 0.697

3 讨论

Roche Cobas E601电化学发光法检测PCT是采用双抗体夹心二步法。其原理利用待检样本与生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记单克隆PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。加入包被链霉亲和素的磁珠微粒，复合物与磁珠通过生物素和链霉亲和素的作用结合，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面，给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增测量发光强度[4]。这种方法线性范围为0.039～63.25 ng/ml[5-6]，且具有快速、所受干扰因素少、与国外最先进的仪器具有良好的相关性[4]等优点。

免疫层析法原理是利用高度特异性的抗原抗体反应，标本中的降钙素原与预先包被在聚酯膜上的金标记的降钙素原单克隆抗体结合，结合物在毛细效应下向上层析，随后会被固定在膜上的降钙素原单克隆抗体结合捕获，标本中的降钙素原的含量与被捕获的结合物含量呈正相关，通过免疫定量分析仪扫描检测区，获得相应的光学信号，然后通过内置的标准曲线将信号转换为降钙素原的浓度。免疫定量分析仪是融合了胶体金免疫层析技术的定量检测方法，具有操作简便、精密度高、线性范围宽、重复性好等优点广泛应用于各种实验室[7]。但由于方法学的局限性，会出现假阳性及假阴性结果[3]，同时免疫荧光层析法与国外先进仪器的相关性未见文献报道。

本次实验研究两种方法检测降钙素原相关性良好，与文献报道一致[2]。但PCT检测目前尚无公认的参考方法，各检测方法的溯源性也不一样[8]。在本文研究中发现中、高浓度值（PCT≥2.0 ng/ml）两种检测方法存在一定的差异，是否与此有关，有待进一步研究。

PCT作为急诊项目，临床医生往往根据结果来诊断脓毒血症和指导临床及时用药[9-12]。出于成本和工作人员安排，多数医院检验科电化学分析仪不可能24 h待机状态；相比较而言免疫荧光层析法操作简便、实时性强受到检验医生及临床医生的青睐。

综上所述，两种方法检测降钙素原各有其特点，笔者认为急诊检测PCT采用免疫荧光层析法，能及时提供检测结果，于临床诊断疾病及指导抗生素的应用具有重要意义；对于PCT高浓度的的监测，建议使用电化学发光法或者经电化学发光法校正后的免疫荧光层析法。

参考文献

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[4]范华杰，张鹏，唐古生，等.Roche降钙素原电化学发光法定量检测试剂盒的临床性能评价[J].检验医学，2010，25（8）：654-658.

[5]肖倩，陈茶，丁海明.Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原的方法学评价[J].实用医学杂志，2012，28（21）：3638-3640.

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[9]夏振雄，高春娜，曾沛丰，等.探讨不同病原体致小儿肺炎中的降钙素原改变[J].中国医学创新，2014，11（3）：67-69.

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[11]李辉，卞文安，汪露.降钙素原检测对感染性疾病诊断的临床价值[J].中外医学研究， 2012，10（17）：74-75.

[12]夏献颗，郭佐华，章伟，等.血清降钙素原和C-反应蛋白联合检测在ICU重症感染患者诊断与病情判断上的价值[J].中国医学创新，2012，9（17）：82-83.

（收稿日期：2014-06-15） （编辑：金燕）