中医临证学的传承与创新

摘要：“十一五”国家重点图书《中国现代百名中医临床家丛书――郭振球》，是湖南中医药大学郭振球教授，从业中医临床、论疾诊病的传承创新，宗《伤寒杂病论》，谨守病机，辨病脉证并治，是理法方药的临床经验纪要。主要讨论肺、脾、胰、肝、心、脑、肾脏等常见病、多发病，医案举隅，专病论治。继承发掘，整理提高，以期培养后继科技人才，建立科学诚信，实现中医药现代化。为了探索中医药微观辨证学的发展趋势，在邪气、脏腑、病形理论及四诊辨证的引导下，结合运用现代科学检测，创立了脏腑、神经、免疫、激素和代谢调节病机链，以阐明疾病证候的实质变化。完成了微观辨证学及其学科群崛起，为新世纪中医药学的和谐发展开辟了新的途径。

关键词：原始科学；微观辨证学；中医药现代化；脏腑；神经；激素；免疫；代谢调节；病机链

中图分类号：11285.5　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2008)11-2213-03

中国医药学是一个伟大的宝库。医易同源，医食同源。医以文载道，民以食为天。医文历史悠久，医文典籍浩瀚，代有传人，开生命科学的先河，促进中华民族的繁衍昌盛，巍然屹立于东方，遍及全球，历5000年灿烂文明而不衰。面对新世纪高新科技迅速发展，人们对医疗保健需求不断提高，崇尚自然、崇尚科学，倡导回归自然，世界各国人士都把目光投向拥有巨大优势的中国传统医药学。

人类离不开中医。在现代(或西方)医学占主导地位的国家，传统医学曾被称为替代医学(alternative.medicine)或补充医学(complementary medicine)。由于近些年传统医学应用的迅速增加，世界卫生组织(WHO)理事机构年会(2002年5月15日，日内瓦)制订了第一个有关传统医学的全球性行动计划。希望通过加强对传统医学的管理和合理应用、疗效和安全性的深入研究，使传统医学登入大雅之堂，纳入各国的正规医疗保健体系。制订该行动计划的另一目的是，防止传统疗法被大的商业企业申请专利的剽窃，以及防止药用植物因过度开采而绝迹。

2007年2月17日，美国食品药品管理局(FDA)新发对小鼠急性损伤的影响，为进一步研究抗乙肝病毒药物和其临床应用提供实验依据。现将实验报道如下。

1　材料与方法

1.1　材料

1.1.1　动物SPF级ICR小鼠，体重(20±2)g，雌雄各半，广西药品检验所实验动物中心提供，许可证号：SCXK桂2003-0001。

1.1.2　药品与试剂复方黄根由黄根、黄芪等药物组成，经水提(分2次提，第1次10倍量水，第2次8倍量水，合并提液，浓缩至比重约1.05)，醇沉(水提液：95％乙醇=1:2，醇沉24h，弃去沉淀，回收乙醇)，残液浓缩成浸膏(相当生药材7.3g／mL)，低温储藏，用时用纯净水稀释；CCl4，天津市博迪化工有限公司，分析纯，批号：20041201；食用纯花生油，青岛长生集团股份有限公司生产；联苯双酯，广州星群(药业)股份有限公司生产，批号：CF40033；丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.1.3　主要仪器CHEM300半自动生化分析仪，德国豪迈克公司产；LGl6-w离心机，北京医用离心机厂；JY92―2D超声波细胞粉碎机，宁波新芝科器研究院产；Agi-lent8453紫外可见分光光度计，美国Agilent产；高速低温离心机，德国Biofuge Stoucctos产。

1.2　方法

1.2.1　动物分组与处理取ICR种小鼠60只，随机分组，设空白组(A)、模型组(B)、阳性对照组即联苯双酯组(0.6g／kg水溶混悬液)(C)、复方黄根高剂量(26.0／kg)(D)、复方黄根中剂量(13.Og／kg)(E)、复方黄根低剂量组(F)(6.5g／kg)共6个组，每组lO只。按体重20mL／kg用联苯双酯和不同剂量的复方黄根分别给C、D、E、F组灌胃，每天1次，正常组与模型组每天灌服等体积的纯净水，连续12天。

1.2.2　四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤动物模型的建立最后一次用药1h后造摸，除空白对照组外，其余5组小鼠均腹腔注射0.08％CC14花生油溶液，剂量为10mL／kg，空白对照组同法腹腔注射等量的花生油，禁食(自由饮水)，16h后各组经眼球后静脉丛取血，处死小鼠后，取肝脏作有关检测。

1.2.3　D-氨基半乳糖盐酸盐诱导小鼠急性肝损伤动物模型的建立，最后一次用药1h后造摸，除空白对照组外，其余5组小鼠均腹腔注射0.5g／kgD-氨基半乳糖盐酸盐生理盐水溶液(1mol／L NaOH调pH为7)，剂量为10mL／kg，空白对照组同时腹腔注射等量的生理盐水，禁食(自由饮水)，24h后各组经眼球后静脉丛取血，处死小鼠后.取肝脏作有关检测。

1.2.4　检测指标及方法常规分离血清，按试剂盒所述方法测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)(赖氏法)。取肝脏约0.5g，用冰冷的生理盐水漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，在冰浴的平皿上剪碎，用生理盐水配10％肝组织，用超声波细胞粉碎机匀浆，低温离心，按试剂盒说明书所述方法测定肝匀浆中SOD、MDA、GSH－PX活性。另取肝左叶同一部位组织，10％甲醛固定，按常规方法制备切片，在光镜下进行病理学检查。

1.2.5　统计学处理各项数据均以x±s表示，组间差异用t检验

2　实验结果

2.1 复方黄根对CCl4急性肝损伤小鼠的保护作用

2.1.1　复方黄根对CCl4急性肝损伤小鼠血清转氨酶的影响模型组血清ALT、AST水平升高，与空白组相比较，P

2.1.2　对CCl4急性肝损伤小鼠肝匀浆SOD MDA GSH-PX水平的影响模型组肝匀浆MDA水平升高，同时SOD、GSH-PX活性降低，与空白组比较，p

浆MDA含量，并能使降低的肝匀浆SOD、GSH-PX活性升高，复方黄根有很好的抗脂质氧化作用，其护肝作用与抗脂质氧化有关。见表2。

2.2　复方黄根对D-氨基半乳糖盐酸盐急性肝损伤小鼠的保护作用

2.2.1　复方黄根对D-GaIN急性肝损伤小鼠血清转氨酶的影响模型组血清ALT、AST水平升高，与空白组相比较，P

2.2.2　对D－GaIN急性肝损伤小鼠肝匀浆SOD MDAGSH―PX水平的影响模型组肝匀浆MDA水平升高，同时SOD、GSH―PX活性降低，与空白组比较，P

3　讨论

四氯化碳引起肝损伤模型是传统的肝毒模型，ccl4对肝损伤的毒性作用是通过脂质过氧化作用进行的，CCl4在肝微粒体细胞色素P450酶激活下产生活性自由基CCl3，ccl3可进一步与氧反应，形成具有更强反应活性自由基CCl3O，这些自由基可与肝细胞内大分子发生共价结合，也可与肝细胞膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，损伤肝细胞膜的结构和功能，使膜通透性升高，导致细胞肿胀坏死；D－GaIN肝损伤是筛选护肝药，研究药物作用原理最常用的肝损伤模型，D―GaIN经不同途径导致膜结构破坏，引起细胞内钙离子增加，抑制线粒体呼吸功能，产生氧自由基，过多的氧自由基一方面导致肝细胞内SOD过度消耗致使SOD活性下降，另一方面，氧自由基的积累更加剧了肝细胞和线粒体的损伤，肝细胞和线粒体破损后释放ALT、AsT，因而AST、ALT、SOD的活性变化成为最常用的判定药物护肝作用及药物抗氧化作用的重要指标。

复方黄根是具有广西特色中草药组成的抗慢性HBV复方，其君药黄根[prismatomer tetrandra(Roxb)K Schum]为茜草科植物三角瓣花[Pdsmatomcris Connata Y.z.Ruan]的根，具有祛瘀生新、强壮筋骨、利湿退黄等功效，用于治疗肝炎、风湿骨痛、跌打损伤、白血病、再生障碍性贫血、地中海贫血、矽肺等症，笔者实验结果显示：四氯化碳、D-GaIN可引起小鼠血清中ALT、AST明显升高，说明本实验所建立的急性肝损伤模型成功；该模型肝细胞浆脂质过氧化产物MDA明显升高，表明肝细胞内脂质过氧化是四氯化碳、D－GalN所致急性肝损伤模型的重要终末肝损伤机制，复方黄根各剂量组能使血清中ALT、AST活性向正常水平恢复，其中高剂量作用较佳，其效果与联苯双酯作用相当；能降低肝细胞浆MDA，升高肝损伤小鼠肝细胞浆内SOD、GSH－px的活性，可见抗肝细胞内脂质过氧化是其抗急肝损伤的重要机制之一。