控制食品细菌检验箱的使用误差

摘要：在食品检验过程中，应严格从检验流程的各个环节加以控制，从样品抽取、制备、校准仪器设备、配制试剂、选择检验方法、控制实验室环境、操作人员的熟练程度及对相关检验项目的检查等几方面，确保获得准确的检验结果。

关键词：食品细菌误差细菌检验箱

【中图分类号】R-1【文献标识码】B【文章编号】1008-1879（2012）11-0467-01

食品细菌检验箱作为卫生装备用于食品卫生监督及食品检验，是基层单位卫生防疫工作的重要工具之一。我中心近几年开展对此箱使用的培训工作。针对检验结果常常出现的误差，我们反复进行总结和验证，收到了一些效果，现报告如下：

1资料与方法

1.1一般资料。检验标本为随机抽取的食品样品3份。使用营养琼脂作为培养基。检验仪器为磁力搅拌器，无菌培养皿，细菌检验箱，振荡器。

1.2方法。各个样品称取10g，放入无菌锥形瓶内，加入90mL无离子水，磁力搅拌分别为40min。并稀释成10-1-10-7的不同稀释度的样品溶液。倾注平板法检测菌含量：用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取1mL，每个样品稀释液3个重复，待培养基表面干燥后，将平板倒置于35-37℃培养箱中培养24h。平板涂布法检测菌含量：用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取200uL涂布平板，每个样品稀释液3个重复；将平板倒置于35～37℃培养箱中培养24h。

2结果

采用不同的检测方法，对合生素中芽孢杆菌检出量的结果见表1。从表1可见：不同方法获得的细菌菌落数量有差别，倾注平板法相较平板涂布法检测的菌含量多，但基本在20%的误差范围内。平板计数法操作相对简单、快捷且影响因素较少。倾注法培养基营养分布较均匀，对部分蔓延菌落能控制，但对操作人员熟练程度要求相对较高。

3讨论

为了解决检验结果存在较大误差这一难题，首先要考虑如何准确选择样品稀释度。如果对样品污染程度估计过高而选择较高的稀释倍数，可能导致生长的菌落过少而失去计数意义；相反，如果对样品污染程度估计不足而选择较低的稀释倍数，菌落数过多呈叠加或融合生长而导致无法计数。如果是针对食物中毒的回顾性微生物检验，则会带来一定的影响和损失[1]。正确的做法是：遵照食品卫生标准要求以及对标本种类、污染情况的估计来选择适宜的稀释度，结合检验目的来确定。如果只需检验该食品细菌数是否超标，只须做一个稀释度即可；如需得出具体数目则须做3个稀释度（以10倍递增），对于污染食品至少要选择3个以上的稀释倍数（以10倍递增），以保障检验结果的准确性。掌握培养基煮沸时间检验箱大多检验方法在常规的实验室检验方法上进行了改良。正确的操作是将已加入琼脂培养基的试管放入水中煮沸15min。一定要守时，不要提前中止。在此期间，沸腾的琼脂随时会因内部压力增大而从试管内喷发出来，造成人员伤害。因此，用于煮沸试管的器皿（本箱提供的是电热杯）一定要加盖，并要等到沸腾停止后再开盖取出试管。做大肠菌群测定时，检验箱将传统的试管法改良为新发酵盒法，待检样品不用再进行稀释，操作简便、易行。但因煮沸蒸发水分而导致培养基容量减少达不到发酵盒刻度，需在煮沸前适量增加水量以补充不足。准确控制加样时琼脂温度加待检样品（以下简称加样）时琼脂温度的掌握和加样动作的速度都是影响试管斜面质量的重要因素，也是影响最后细菌计数能否准确的一个关键阶段[2]。多数致病菌生长的最适宜温度是35℃，高温对细菌有明显的致死作用，多数细菌在55-60℃经30-60min后死亡，而琼脂在45℃以下时凝固成胶冻状[3]。因此，加样时培养基温度既不能高于55℃又不能低于45℃，而此时培养基的温度无法靠温度计来准确测量，只有通过手测法来估计，一般以手握试管感到热但不烫手为宜，此时温度约在45℃左右。人体对温度的感觉有一定的差异，可事先对已知水温进行反复训练、体会后，才能准确把握加样时温度。切忌在50℃以上加样。如试管内琼脂温度未达到45℃时加入待检样品，会导致琼脂很快凝固，来不及制成斜面。经验及技巧为了减少检验结果的误差，提高检验结果的准确性和可信度，除了以上影响因素外，还要注意以下3方面：一是培养基的浓度一定要够，在具体要求的误差内，宁多不少，否则会因营养不够细菌生长不良或不生长；二是煮沸时间一定要达到15min，以便各种成分能够充分混匀溶解，并达到灭菌效果，否则也会影响待检细菌的生长；三是加样时要使样品与培养基充分混合均匀，以保证细菌能分散生长，既要混合均匀，又要速度快，而且还不能出现气泡。可以匀速上下颠倒试管3-4次，切忌用力摇晃。总之，只有严格按照要求规范操作，减少使用误差，提高其准确性，才能使细菌检验箱发挥其应有的作用。在对食品微生物检验时要注意各个环节来确保微生物检验数据的准确性，为食品卫生和安全提供可靠的依据。今后食品微生物检验技术的发展方向会是：①采用快速和大批量的检验方法，来提高检验效率；②形成标准化的实验条件；③提高和保证检验的精度和灵敏度。

参考文献

[1]舒柏华，孙丹陵，王胜利.肉类食品细菌污染生物发光快速分析技术研究[J].中国公共卫生，2003，19，（4）：483-484

[2]张洁梅.食品微生物检验技术的研究进展[J].现代食品科技，2005，21，（2）：221-222

[3]陈丽华，李光宇，王世琨.我国的食品质量安全现状分析[J].东北农业大学学报：社会科学版，2007，5（1）：47-49