色谱柱范文

色谱柱篇1

关键词：色谱柱 维护与保养 高压液相色谱 应用 

        0 引言

        色谱作为一种分离技术与方法，自本世纪初起已经有100多年的历史了，现在已经成为分析化学学科中的一个重要的分支。在人类进入新时代之际，人们面临着在信息科学、生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速发展的挑战，在这些领域人才的需求成为国家高度发展的至关重要的因素。而色谱技术是生命科学、材料科学、环境科学必不可少的手段和工具。根据最近的统计在全世界各类分析仪器中气象色谱仪和液相色谱仪的营销总额占25%-30%。

        科学技术的发展，使得色谱技术也得到进一步的发展，不断有新的联用的技术得到应用。生物医学的发展，也不断要求高灵敏和高选择性的方法对研究的对象进行定性和定量的研究。

        1 色谱柱的相关性质

        1.1 色谱柱的定义：装填有固定相用以分离混合组分的柱管。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。

        1.2 分类：色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相，以及色谱柱的制备和操作条件。简单而言：常见的分配住填料：碳十八柱（ODS/C18)、碳八柱（Octy了/C8）、碳六柱（Hexyl/C6）、碳四柱（Butyl/C4）、碳一注（Methyl/C1）、阴离子交换柱（SAX)、阳离子交换柱（SCX）、苯基柱（Phenyl）、氨基柱（Amino/NH2）、氰基柱（Cyano/CN/Nitrile）。常见的吸附柱填料：硅胶柱

        色谱柱的选择会直接影响混合物中组分的分离。举例来讲：对于填充柱而言，可选择的固定相较多，柱容量较大，但是受柱长的限制，分离能力有限，主要应用于简单化合物的分离。

        2 色谱柱的维护与保养

        2.1 色谱柱的维护。我们在使用新的色谱柱应该在我们自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。而且在使用的过程中常常有堵塞的现象，造成这种现象的主要原因是①溶剂中的不溶物②样品中的不溶物③泵进样器等中的不溶物④柱内不溶物的形成等。如果当色谱柱堵塞以后我们可以对色谱柱进行修复，首先，使用含盐缓冲液后（如离子对试剂）应用溶解性强的溶剂（如水）进行冲洗。其次，先断开检测器，然后用对来自样品中的物质有强溶解性的溶剂进行冲洗，对于反相色谱柱，可使用甲醇、乙睛、四氢呋喃、氯仿、庚烷等，在此条件下，应避免溶剂的pH低于2或高于8。最后如果经过上述还是没有修复，色谱柱压力还是没有下降，则要断开检测器，将色谱柱反方向放置，然后检查柱压，若压力稳定下降，则保持色谱柱反方向连接，用低于0.5 ml/min 流速冲洗一小时。如果压力不下降，则要看内置过滤器是否被堵塞，如果被堵塞应冲洗或更换，若进口端的填料发生堵塞，柱子将不可能被彻底恢复，只能通过去掉进口端的部分填料，重新填充进行有限的柱效恢复。而且修复的厚度是2-5mm。

        2.2 色谱柱的保养。色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。我们在对色谱柱使用前进行测试以后，我们要根据不同的情况对色谱柱进行保养：①反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。

  概括起来就是：①柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；②当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净；③要注意流动相的脱气；④避免使用高粘度的溶剂作为流动相；⑤进样样品要提纯；⑥严格控制进样量；⑦每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；⑧每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；⑨若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。

        3 色谱柱的维护与保养在高压液相色谱中的应用

        高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生，不同的色谱柱清洗方法各不相同比如：

        3.1 反相柱 分别用甲醇:水=90:10，纯甲醇（HPLC级），异丙醇（HPLC级），二氯甲烷（HPLC级）等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。

色谱柱篇2

【摘要】 建立了柱前衍生高效液相色谱质谱联用(HPLCMS)测定水稻中尼克烟酰胺含量的方法。样品中尼克烟酰胺经水提取后，与9芴甲基氯甲酸酯（FMOCCl）衍生，采用液相色谱质谱联用仪测定。系统研究了衍生剂浓度和衍生介质等条件对衍生效率的影响。通过优化流动相酸度和梯度洗脱等条件，提高了方法灵敏度。尼克烟酰胺在0.1～5.0 mg/L范围内呈良好的线性关系（r=0.9983），对水稻的根、茎、叶及大米的标准加入实验表明，方法的添加回收率在72.0%～89.2%之间； 相对标准偏差为2.3%～9.6%； 方法检出限为0.05 mg/kg。方法简便、准确可靠，可以满足水稻中生理水平尼克烟酰胺的定性定量分析。

【关键词】 尼克烟酰胺，水稻，柱前衍生，高效液相色谱，质谱

Determination of Nicotinamide in Rice by Precolumn

Derivatization and High Performance Liquid　ChromatographyMass Spectrometry

CAO ZhaoYun， MOU RenXiang，CHEN MingXue

(Rice Product Quality Inspection and Supervision Center， Ministry of Agriculture，China National Rice Research Institute， Hangzhou 310006)

Abstract A method was developed for the determination of nicotinamide(NA) in rice by precolumn derivatization and high performance liquid chromatography/electrospray ionization mass spectrometry(HPLC/ESIMS). After extraction with water， NA was derivatized by 9fluorenylmethoxycarbonyl(FMOCCl). In order to enhance the sensitivity， the derivatization was optimized regarding organic solvent content and amount of FMOCCl. The best HPLC conditions for the separation of NA in real samples were achieved using a C18 column and mobile phase which contained 0.1% formic acid. The MS experiments were performed in selected ion monitoring mode(SIM). The method shows good linearity over the range of 0.1－5 mg/L for NA with a correlation coefficient of 0.9983. The limit of determination(LOD) was 0.05 mg/kg. Precision and recovery studies were evaluated at three concentration levels for rice root， stem， leaf and unpolished rice. The recovery(n=5) ranged from 72.0% to 89.2% with relative standard deviations from 2.3% to 9.6%. The method is simple， highly selective and reliable， and can be used to determine NA in rice at physiological level.

Keywords Nicotinamide， rice， precolumn derivatization， liquid chromatographymass spectrometry

1 引 言

尼克烟酰胺（nicotianamine，NA），是植物体内的一种天然金属螯合剂[1]，在金属矿质元素由根系向地上部的长距离运输中发挥重要作用，同时也是调节植物对重金属元素吸收的关键物质[2]。已有研究表明，NA可参与Fe、Cu、Zn等多种金属元素的运输[3]，尤其是使植株对Cd、Ni等重金属的吸收有明显的抑制作用[4，5]。近年来，有关Cd在土壤食物中的迁移已成为Cd污染研究的热点[6]，而水稻是对Cd吸收较强的谷类作物[7]。因此，对水稻中NA进行快速、准确的测定，将为探明水稻中NA在提升稻米营养价值、降低重金属污染方面的作用提供重要的技术手段。

有关NA的测定方法，目前仅有少量报道，其主要是高效液相色谱法，测定样品也大多是NA含量较高的烟草等植物[8～11]。如Wada等[8]采用离子交换柱分离，柱后衍生荧光法；Jean等[9]采用离子交换柱净化，柱前衍生荧光法，并采用飞行时间质谱法分别测定了烟草等植物中NA含量［11］。本实验中，样品通过水提取，将 NA与9芴甲基氯甲酸酯（FMOCCl）衍生化，生成可被反相柱保留的FMOCNA复合物，利用高效液相色谱单四极杆质谱联用技术（HPLCMS），解决了常规液相色谱测定NA时灵敏度低的问题，能满足水稻（根、茎、叶、籽粒）中生理水平尼克烟酰胺含量的测定。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

1100高效液相色谱仪，1956B 四级杆质谱仪附电喷雾离子源(美国Agilent公司)；高速分散机（德国IKA公司）； R215旋转蒸发仪（瑞士Buchi公司）。

乙腈（色谱纯，德国 Merck公司）；甲酸（色谱纯，美国Tedia公司）；0.2 mol/L硼酸盐缓冲液（分析纯，pH 9.0，Sigma公司）；实验室用水为MilliQ高纯水。衍生剂：9芴甲基氯甲酸酯（FMOCCl，分析纯，Sigma 公司），用乙腈将FMOCCl 配成0.6 g/L的衍生液；尼克烟酰胺标准品（加拿大TRC公司，纯度99%），用水配制成100 mg/L的标准储备液，使用前再配制为所需浓度。

2.2 实验方法

2.2.1 样品制备

本实验所用样品，均由中国水稻研究所培育。于分蘖盛期时采集水稻植株样品，用高纯水冲洗干净，并用纱布擦去表面水分，于4 ℃下封存，15 d内测定。于收获期采集水稻籽粒，脱壳后糙米置于干燥器中备用。水稻植株样品：将水稻植株按根、茎、叶分割为3部分，剪碎，再研磨捣细，称取2 g于50 mL塑料离心管中，加入20 mL水，在高速分散机中(10000 r/min)匀浆2 min后，以5000 r/min离心10 min，收集上清液，重复3 次。合并提取液于100 mL烧瓶中，置于旋转蒸发仪上，在40 ℃左右浓缩近干，用水定容至10 mL后待衍生化。稻米样品：将糙米粉碎，过粒径为0.18 mm (80目)筛，称取0.5 g于50 mL塑料离心管中，加入10 mL水，以下操作同于水稻植株样品。

2.2.2 衍生化反应

分别吸取100 μL提取液（或标准工作液）和200 μL硼酸盐缓冲液于2 mL离心管中，再加入200 μL 0.6 g/L FMOCCl溶液，立即旋涡振荡1 min，在20～30 ℃下静置1 h。过0.22 μm滤膜后供LC/MS分析。

2.2.3 色谱和质谱条件

ZORBAX Eclipse XDBC18色谱柱（150 mm × 2.1 mm， 3.5 μm）；流动相 A为0.1%甲酸水溶液; 流动相B为0.1%甲酸乙腈溶液；梯度洗脱：0～5 min，95% A；5～25 min，5%～100% B。流速：0.3 mL/min。柱温25 ℃，进样量2 μL。

电喷雾离子源(ESI)，毛细管电压3.5 kV；氮气(N2 )流速 10 L/min；雾化气压力241.2 kPa；去溶剂温度350 ℃；正离子模式采集，碎片电压225 V；选择离子监测（SIM），定量离子m/z 748.2（[M+H]+），定性离子（同位素离子）m/z 749.2。

3 结果与讨论

3.1 衍生化条件优化

在碱性环境中，NA和过量的FMOCCl 反应后，形成稳定的衍生产物FMOCNA[8]。其反应式如下：

COOHNCOOHNHCOOHNH2＋OOC〗pH 9.0COOHNCOOHNRCOOHNHR R=FMOC

通过对衍生产物进行全扫描图分析，可以看到在选定的质谱条件下，很容易获得衍生产物的准分子离子峰（[M+H]+），m/z 748.2。考虑到灵敏度和选择性要求，方法选择m/z 748.2为定量离子，衍生产物的同位素离子m/z 749.2为定性离子，两者丰度比为100∶48.5。衍生产物的选择离子流图和质谱图见图1。

实验发现，衍生剂浓度和衍生体系的水含量对分析灵敏度将产生明显影响。NA溶于水而不溶于乙腈，FMOCCl则反之，水含量过低则NA析出;而过高的水含量除FMOCCl结晶析出外，还会形成FMOCOH[12]，进而降低衍生效率。因此，本实验考察了衍生剂浓度和衍生介质对NA的衍生效率的影响（见图2）。

从图2的曲线1可以看出，随着衍生剂浓度增加，分析灵敏度也随之增加，当浓度达到0.6 g/L时趋于平缓，但过多的衍生剂将增加色谱柱负荷；而从曲线2可见，在相同的衍生剂浓度下，含水量低的体系，灵敏度明显低。因此，为获得较高的衍生效率，本实验选择衍生剂浓度为0.6 g/L，水含量为60%的衍生体系为衍生条件，即V(样液)∶V(缓冲液)∶V(FMOCCl)＝1∶2∶2。此外，在碱性条件下pH对衍生效率无明显影响（本方法取pH=9.0），衍生反应在20～30 ℃下进行1 h即可完成，其衍生产物较为稳定，可在0～5 ℃下存放1个月。

3.2 色谱条件的优化

本实验采用二元梯度洗脱，进样后的5 min内用95%水相洗脱出样液中的大量的盐以及缓冲试剂，而后逐渐增大乙腈比例，洗脱目标物。另外，通过向流动相中添加甲酸，使衍生产物预先形成[M+H]+而提高分析灵敏度。对流动相中含0～0.5%甲酸进行了比较，发现0.1%甲酸较为适合。

3.3 方法线性关系和检出限

分别将当日配制好的0.1、0.25、0.5、1.0和5.0 mg/L NA标准系列溶液衍生后测定，用定量离子峰面积和浓度做校正曲线。结果表明：在0.1～5.0 mg/L范围内，NA的质量浓度和定量离子峰面积呈良好的线性关系，其中线性回归方程y=240386.05x+12540.21；相关系数r=0.9983。检出限为0.05 mg/kg（S/N=3）。

3.4 实际样品分析和标准加入的回收率

向稻根、茎、叶和糙米样品中加入NA标准溶液进行标准加入回收实验，加标水平见表1。每个浓度重复5次（n=5），按上述实验步骤进行样品的提取、衍生化分析，测定结果列于表1。结果表明，本方法测定水稻中的NA含量的回收率在72.0%～89.2%之间，各添加水平的精密度均小于10％，能满足测定要求。表1 水稻中NA的含量、加标回收率和精密度（略）

分别对水稻根、茎、叶和糙米提取液以及标准液进行测定，其中两种样品总离子流图见图3。结果表明，在水稻样品中均能检到NA的存在，以水稻根部（鲜重）含量最高，为8.64 mg/kg；茎、叶和糙米中

图3 水稻样品中根(A)和茎(B)提取液的总离子流图

Fig.3 Total ion chromatograms for extraction of root (A) and stem (B) in rice含量分别为4.36、1.32和14.6 mg/kg，数据表明，本方法能满足水稻中生理水平NA测定的灵敏度要求。

4 结论

本研究提供了一种用LC/ESIMS测定水稻中NA 的检测方法。通过柱前衍生手段，降低被测物的极性，改善在反相C18柱上的保留。与以往的HPLC方法相比，本方法的样品处理过程大为简化，方法选择性明显改善。另外，LCMS同时采用保留时间和离子丰度比进行定性，提高测定数据的可靠性；通过对稻根、茎、叶和糙米的测定（其相对标准偏差均小于10%，回收率在72.0%～89.2%之间）表明，本方法具有灵敏度高，操作简单等优点，能满足水稻中NA含量测定的要求。

参考文献

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8 Wada Y， Kobayashi T， Takahashi M， Nakanishi H， Mori S， Nishizawa N K. Biosci. Biotech. Bioch.， 2006， 70(6): 1408～1415

9 Jean M L， Schikora A， Mari S， Briat J F， Curie C. Plant J.， 2005， 44(5): 769～782

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11 Wada Y， Yamaguchi I， Takahashi M， Nakanishi H， MoRi S， Nishizawa N K. Biosci. Biotech. Bioch.， 2007， 71(2）: 435～441

色谱柱篇3

[关键词]毛细管气相色谱法 填充柱 乙烯 烃类 含量 测定

中图分类号：IDl63 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）13-0327-02

1.引言

乙烯中的烃类杂质是聚乙烯生产中影响乙烯聚合的重要因素。采用填充柱气相色谱法国标GB/T 3991-91 [1]测定乙烯中的烃类杂质时，C3以下的的烃类杂质组分采用经角鲨烷改性的氧化铝柱（等温）进行分析，而C3以上的烃类杂质组分则用不改性氧化铝为固定相的色谱柱（程序升温）进行测定。填充柱气相色谱法国标GB/T 3991-91存在需要两次进样、分析时间长（每个样品约3h）、分离效果差、对C4烃类吸附严重等缺陷，难以满足现在快节奏的生产要求。本人通过实验，以Al2O3 PLOT石英毛细管柱为分析柱，采用毛细管气相色谱法测定乙烯中的烃类杂质，不需双柱二次进样，分析时间也大大的缩短，测定一个样品只需30min，而且色谱柱的分离效果好，方法准确度高、重复性好等特点。

2.试验部分

2.1 毛细管柱与填充柱的性能的对比

2.1.1 通用性：毛细管柱通用性好，一根非极性柱HP-1可分离诸如 苯甲酸、山梨酸、BHA、BHT、TBHQ、甲醇、杂醇油、农药、车间空气等多种组分，因此可不拆柱而同时做几种实验。填充柱通用性较差，不同项目所用柱基本不能通用。存在着经常拆柱的麻烦。

2.1.2 专用性：毛细管柱由于一般相似极性皆可出峰，因此容易产生互相干扰现象。填充柱的特异性较强，许多干扰物质不出峰或峰形极差，干扰较小。（例）项目：苯甲酸、山梨酸 毛细管柱（HP-1）酸性及中性物质皆可出峰，出峰多填充柱（5%DEGS+1%磷酸）只有酸性物质可以出峰，出峰少。

2.1.3 柱容量：填充柱容量较大，可以多次注入较“脏”的样品，对样品前 处理要求不高。毛细管柱容量小，且口径越小，容量越小。如样品处理液成份复杂，极易污染柱子而影响基线及分离效果。因此对 样品前处理要求高。

2.1.4 柱效能：毛细管柱明显好于填充柱，口径越细，效果越明显。由于毛细管柱内径极小，有效地解决了柱内扩散效应，使得峰形尖锐，分离度好口径越细，效果越明显。（例）项目：异丁醇、异戊醇毛细管柱（HP-1，HP-17）峰形尖锐，填充柱（GDX-102 ）峰形宽且钝。

2.1.5 灵敏度：毛细管柱稍好于填充柱。毛细管柱的柱效高，扩散效应低，相同量的物质可以得到更高的峰高。但由于其容量低，进样须采用分流方式，实 际进入柱内的被测物往往不到10%。

2.1.6 检测速度：毛细管柱优于填充柱。由于毛细管柱的空心结构，使得溶剂峰出得又快又窄， 柱内扩散效应低使得提高速度而不影响分离成为可能。 而填充柱的溶剂拖尾效应及高扩散效应影响了被测组 分的分离效果，只能牺牲时间以保证分离质量。

2.1.7 自主性：毛细管柱一般需购买，个人很难配制，价格较贵，污染后只能更换，如折断一小截仍可使用。填充柱可以自行配制填料，自行装填，价格较低，污染后可以更换填料，折断后彻底不可使用。

2.2 主要仪器与试剂

气相色谱仪：GC-2010型，配置氢火焰离子化检测器（FID）和Al2O3 PLOT石英毛细管色谱柱，日本岛津公司；

氢气发生器：LNIS公司。

乙烯内烃类标准气：组成见（表1），大连特种气体产业公司。

高纯氮气：氮气发生器自制；

压缩空气：来自盈德气体的压缩空气。

2.3 试验步骤

色谱柱篇4

【关键词】： 盐酸四环素 原料药 甲醛 高效液相色谱法 柱前衍生化 含量测定

【分类号】：R927.2;O657.72

【正文快照】：

制药工业中常采用消毒液熏蒸法对洁净室气体、生产设备等进行消毒,常用消毒液有环氧乙烷、过氧乙酸、甲醛溶液等,其中甲醛的消毒效果最佳,然而甲醛能引起头痛、恶心、肠胃不舒服、皮肤过敏等反应[1]。美国环保署称甲醛可能是致癌诱导物。我国《工作场所有害因素职业接触限值化

【参考文献】 

 

1 马明;周宇艳;周韵;;顶空-气相色谱法快速测定蜜胺餐具中甲醛单体迁移量[J];分析试验室;2014年09期

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【共引文献】 

 

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8 冯燕;张梁;王晓岩;董丽娜;王俊君;权旭东;刘娜;;两种甲醛测定方法对比研究[J];广州化工;2014年10期

9 马明;周宇艳;赵洁;刘敏华;;基质匹配顶空-气相色谱法测定纺织品中DMF,DMAC与NMP[J];分析试验室;2015年03期

色谱柱篇5

关键词 棉粕；甲醇；毛细管柱；顶空气相色谱法；残留量；测定

中图分类号 O657.7+1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）01-0014-01

Determination of Methanol Residue in Cottonseed Meal by Headspace Gas Chromatography with Capillary Column

WANG Xing-min LI Jing-chao ZHOU Yan-sheng WEI Yun-bo LI Fu-wei ZHANG Rui-ling

（Shandong Provincial Analysis and Test Center，Jinan Shandong 250014）

Abstract Methyl alcohol in cottonseed meal was determined by headspace gas chromatography with capillary column. The results showed that the RSD was 2.10%，recovery rates were between 96.4% and 105.0%. The method was simple，fast and accurate.

Key words cottonseed meal；methanol；capillary column；headspace gas chromatography；residue；determination

棉粕是油料工业的副产品，年产量600万t以上，且大量资源未得到有效开发和利用，造成巨大浪费[1]。其粗蛋白含量很高，具有较高营养价值，经脱毒处理后是制作饲料的主要原料。目前，工业化生产中主要选用甲醇萃取脱去棉酚，以得到低棉酚含量的饲用棉粕，但溶剂的分离回收困难[2]。因此，有必要对其中的甲醇残留量进行控制，而我国饲料标准尚无棉粕的质量标准。笔者探讨采用毛细管柱顶空气相色谱法测定棉粕中甲醇残留量，以期为相关研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验仪器：气相色谱仪为岛津GC-2010，具氢焰离子化检测器；AOC5000自动进样器；20 mL顶空瓶；30 m×0.53 mm×1 μm FFAP毛细管柱。试剂：甲醇为色谱纯；水为超纯水；样品为某企业送检样品。

1.2 试验方法

1.2.1 标准溶液配制。取1滴甲醇置于已知重量的10 mL容量瓶中，准确称量后，用高纯水稀释至标线，计算溶液中的甲醇度，避光保存，此标准溶液含甲醇4 010 mg/L [3]。

1.2.2 色谱条件。柱温70 ℃保留5 min，气化室温度200 ℃，检测器温度280 ℃，载气流量16.3 mL/min；吹扫流量5.0 mL/min；氢气流量40 mL/min；空气流量400 mL/min；分流比2∶1。

1.2.3 标准曲线绘制及样品处理。将配制好的标准溶液逐级稀释成甲醇度分别为0、5.01、10.00、20.10、40.10、201.00、1 000.00、4 010.00 mg/L标准系列；精确称量样品2.00 g置于20 mL顶空瓶中，加水至10 mL，加盖，密封，摇匀待测。将标样、样品及样品空白放入自动进样器中，进行分析，进样1 mL，以峰高对甲醇度绘制标准曲线[4-6]。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

有关标准曲线的相关数据见表1、表2。由表1、表2可知，该方法绘制的低度标准曲线回归方程及相关系数分别为y=0.002 39 x-0.331，r=0.999 5；高度标准曲线回归方程及相关系数分别为y=0.002 55x-10.7，r=0.999 9；在试验范围内，其度与峰高有很好的线性关系。

2.2 检出限

计算3倍噪声相对应甲醇度得到该方法的检出限为0.5 mg/L，当取样2.0 g，加水至10 mL，进样1 mL时，最低检出度为2.5 mg/kg。

2.3 精密度

配制度为20.10 mg/L的甲醇标准溶液（配制方法与标准曲线一致），按1.2.2的色谱条件进行色谱分析，色谱图见图1。重复5次测定，计算其精密度，结果见表3，由表3可知，相对标准偏差为2.10%，说明方法较为精确可靠。

2.4 实际样品测定

对某企业送检棉粕产品中的甲醇残留量进行检测，检测结果见表4。

2.5 加标回收率

对已知甲醇含量的样品，采用标准加入法测定甲醇，计算其回收率，结果见表5。由表5可知，回收率为96.4%~105.0%。

3 结论与讨论

试验结果表明，采用毛细管柱顶空气相色谱法测定棉粕中的甲醇残留量，在0~4 000 mg/L范围内，甲醇度与峰高有良好的线性关系，分析的相对标准偏差为2.10%，加标回收率为96.4%~105.0%，符合有机物检测的相关要求。由此可见，采用毛细管柱顶空气相色谱法测定棉粕中的甲醇残留量是可行的。

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色谱柱篇6

【关键词】 分散液液微萃取，柱前衍生，高效液相色谱，双酚A

1 引 言

双酚A(Bisphenol A，BPA)是生产聚碳酸酯、环氧树脂的重要原料，可用于树脂和阻燃剂生产[1]。BPA属于“环境激素”，具有雌激素效应，ng/L～μg/L水平就会对人类和野生动物的健康带来威胁[2，3]。

BPA检测方法有高效液相色谱法(HPLC)[4]、分子印迹法(MIPM)[5～7]、气相色谱质谱法(GCMS)[8]、酶联免疫吸附法(ELISA)[9]等。由于BPA在水环境中浓度较低[10]，常采用液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE)、液相微萃取(LPME)和固相微萃取(SPME)等预处理方法进行富集，其中SPME和LPME较为常用，具有消耗溶剂少或无需萃取剂、富集效果好、方便等优点，但也存在诸如SPME的萃取头价格昂贵、易碎，LPME平衡时间较长等不足[10，11]。Ahmadi等[12]发明的分散液液微萃取(DLLME)技术，因具有环境友好、操作简单等优点而被广泛应用于环境样品的萃取分离[13，14]。柱前荧光衍生可显著提高BPA荧光效率及检测灵敏度[15]，BPA衍生化测定方法已有报道[15，16]，但衍生化反应需在无水条件下进行，往往需要脱水和氮气缓慢吹扫、挥干等步骤。

本研究采用DLLME技术对水样中BPA进行萃取，对离心后得到的沉淀相(有机相)中的BPA进行衍生化反应，从而简化衍生化过程，最后利用HPLC分析衍生化样品中的BPA。本方法可于室温下进行，操作简便、快速。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

1200型HPLC(美国Agilent公司)，配备Rheodyne 7725i手动进样器、真空脱气装置、二元泵、柱温箱及荧光检测器;TCC18色谱柱(150 mm×4.6 mm， 5 μm);DELTA320梅特勒托利多pH计;216PK冷冻离心机(德国Sigma公司)。

BPA、雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)及17α乙炔基雌二醇(EE2)均购自Sigma公司;[C6MIM][PF6](99%);丙酮、甲醇和乙腈为色谱纯;NaCl和NaOH为分析纯; 2.0 g/L对硝基苯甲酰氯(≥98.0%)乙腈溶液。200 mg/L BPA储备液，置于4 ℃冰箱中保存备用。实验用水由DirectQ3UV(法国Millipore公司)制备。

2.2 分散液液微萃取样品的制备

准确移取适量BPA(0.02 mg/L)使用液于10 mL锥形玻璃离心管内，用1 mL注射器将萃取剂([C6MIM][PF6])和分散剂(丙酮或甲醇)混合液快速注入到离心管内的BPA溶液中，形成混浊液，轻轻摇晃，以5000 r/min离心8 min，用50 μL进样针抽取沉淀相5 μL，进样。

2.3 分散液液微萃取样品的衍生化

准确移取分散液液微萃取样品的沉淀相10 μL于棕色样品瓶中，加入0.10 mL对硝基苯甲酰氯乙腈溶液，摇匀，于暗处放置30 min后，抽取上清液5 μL，进样。

2.4 色谱条件

流动相为甲醇和水，梯度洗脱：0～5 min，70%甲醇;5～10 min，85%甲醇;10～18 min为后运行时间。流速：1.0 mL/min;柱温：30 ℃;荧光检测：λex=230 nm，λem=315 nm。

3 结果与讨论

3.1 分散液液微萃取条件优化

考察萃取剂体积(A)，水样体积(B)，分散剂类型(C)，pH值(D)，离子强度(E)，和分散剂体积(F)6个因素，选取的水平依次为A： 60， 90 μL; B： 3， 5 mL; C： 甲醇、丙酮; D: 4.0， 7.0，E: 0， 0.4 mol/kg; F: 0.4， 0.6 mL。

3.1.1 显著因素的筛选 选取L16(215)正交表进行分析，任意次序完成正交表中的16组实验，每组设两个平行及空白对照，以平行样BPA浓度的平均值与空白实验的差为指标值(Yi)，空白列用于估算实验误差，各影响因素的显著性见表1。从表1看出，对Yi影响显著的因素包括水样体积、萃取剂体积、分散剂类型以及水样体积与萃取剂体积的交互作用(A×B)。根据Yi变化趋势，分散剂类型确定为甲醇;A×B的作用小于因素A和B的单独作用，则进一步的实验着重优化因素A和B。不显著因素确定为pH 4.0、不调节离子强度及分散剂体积0.4 mL。表1 交互正交试验结果的方差分析

3.1.2 混合型优化实验 萃取剂体积(A)和水样体积(B)对Yi的效应相反，分别为正效应和负效应。实验表明，萃取剂体积50 μL和水样体积9 mL时，得到沉淀相小于2 μL，难以取样。为使Yi最大，同时又容易进行取样操作，A水平设50与60 μL，B设5， 6与7 mL。采用混合型21×31设计进行优化(图1)：确定水样体积(B)为7 mL;当萃取剂体积(A)为50 和 60 μL时，BPA萃取率(ER)约分别20%和50%，故确定萃取剂体积为60 μL。

3.1.3 实际水样中BPA的加标回收率 松花江某江段河水、实验室自来水及某排水沟水样中BPA经DLLME后的加标回收率(R)见表2。表2 水样中BPA分散液液微萃取后的加标回收率

3.2 方法的建立

3.2.1 方法的线性范围及检出限 利用优化后的DLLME条件萃取水样中的BPA，对离心后沉淀相中BPA进行衍生化反应，然后利用HPLC分析。方法的线性范围为0.002～0.2 mg/L，相关系数0.9997;检出限0.007 μg/L(S/N=3)。

3.2.2 方法的精密度与准确度 选取不同浓度BPA溶液，进行分散液液微萃取柱前衍生。以外标法计算得到BPA浓度、相对标准偏差(RSD)及萃取率(ER)，见表3。

3.2.3 方法的干扰实验 利用优化后DLLME条件萃取水样中等摩尔浓度(0.5 μmol/L)的5种雌激素(E1， E2， E3， EE2和BPA)，萃取分离效果见图2。在设定色谱条件下，BPA测定不受其它雌激素干扰。调整流动相比例或选用250 mm色谱柱，可同时定量分析水样中多种雌激素。 图2 BPA与其它雌激素分散液液微萃取柱前衍生的色谱图表3 不同BPA浓度的萃取衍生化定量分析

3.2.4 实际水样的测定 利用所建方法测定松花江某江段水、实验室自来水及某排水沟水样中的BPA，见表4， 图3 排水沟水样中BPA分散液液微萃取衍生化色谱图

Fig.3 BPA chromatogram in barreldrain water after DLLME and derivatization其中排水沟水样的色谱图见图3。表4 实际水样中BPA的加标回收率

3.3 方法比较

本方法检出限低于无衍生化HPLCUV测定BPA方法[17]约4个数量级，与MIPMHPLCUV测定BPA方法[9]处于同一水平，且低于HPLCFLD方法[15]3个数量级，可达到GCMS 方法[18～20]水平(表5)。此外，DLLME中沉淀相为有机相，可直接进行BPA衍生化反应，避免了样品脱水和氮气挥干环节，简化了BPA预处理步骤。表5 方法比较

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色谱柱篇7

1引言

铬元素广泛存在于自然界中，常以Cr和Cr两种形式存在。其中Cr是人体必需的微量元素，在正常食品补给剂量下无毒，但较高浓度则表现出细胞毒性反应；Cr易穿过细胞膜被人体吸收，干扰人体内的正常生理过程，是致癌和致突变的诱发因子，浓度大时会导致死亡＼[1＼]。正因二者具有不同的毒副作用，建立针对不同价态铬离子的测定方法就显得尤为重要。

目前针对样品中不同价态的铬，有氧化还原法，分光光度法，原子吸收光谱法等检测方法。比较几种方法，利用过差减法进行的氧化还原法原理简单且成本低，但反应时间长，需严格控制溶液酸度，防止Cr与Cr相互转变，易使检测结果出现误差；分光光度法与原子吸收光谱法发展较快，应用广泛，其中分光光度法在测定Cr时存在基质干扰，导致结果不准确＼[2～4＼]，而原子吸收光谱本身无法分辨Cr与Cr，需借助硅胶等介质，吸附后分别洗脱检测，操作复杂且成本较高＼[5，6＼]。近几年，利用色谱高效的分离性能与几种检测器相结合来测定不同价态铬的方法有了较大的进展[7]，其中离子交换色谱＼[8～11＼]和反相离子对色谱＼[12，13＼]应用较多。

皮革是一种日常生活中经常接触的物质，因其鞣制过程用到铬，而被列入了铬含量测定的黑名单。国际上对皮革中Cr的含量有严格的控制，通用的测定标准一般是先将粉碎的皮革浸提，后加入DPC还原生成紫红色配合物，用紫外可见分光光度法进行测定。但浸提液中存在的水溶性有机物如染料，严重干扰了目标离子的测定。对此，国内外科学家已进行大量研究，解决方法主要有毛细管电泳法预分离＼[14＼]、固相萃取柱除有机基质＼[15，16＼]以及加入有机脱色剂处理＼[17＼]，但这些方法均因成本高、操作复杂或检测灵敏度低等缺点，没有得到广泛应用。本方法利用柱切换技术，于分离系统之前增加了样品前处理系统，除去样品中存在的水溶性有机基质，实现了对样品的在线前处理，省去繁琐的样品前处理过程，减少了人力消耗。与已有方法相比，本方法增加了对Cr的柱前衍生，将待测样品水溶液与EDTA溶液充分反应，使Cr络合生成在可见光区有强吸收的阴离子基团，与未络合的Cr一并进入阴离子色谱柱中分离，Cr在柱后衍生生成在可见光区同样有较强吸收的基团，由此完成对Cr与Cr的同时检测，应用范围更广，对于样品中铬的测定也更加完善。

2实验部分

2.1仪器与试剂

SHCIC离子色谱仪（中国青岛盛瀚色谱技术有限公司），配有一个六通进样阀及100 μL定量环，两个UC3281 HPLC泵，一个柱后衍生装置；实验室自制阴离子柱＼[18＼]，Dionex IonPac NG1（35 mm ×4 mm）反相柱（美国赛默飞世尔科技有限公司）；ZQH100柱切换器（中国青岛盛瀚色谱技术有限公司）；UV3292紫外可见检测器（中国北京优联光电技术有限公司）；P680高效液相色谱四源梯度泵（美国赛默飞世尔科技有限公司）；JY92Ⅱ超声细胞粉碎仪（中国宁波新芝生物科技股份有限公司）；UV2550型紫外可见分光光度计（日本岛津仪器公司）；PHSJ5型pH酸度计（上海仪电科学仪器股份有限公司）； 0.22 μm尼龙滤膜过滤头。

重铬酸钾（K2Cr2O7，分析纯，上海浦江化工厂）；氯化铬（CrCl3・6H2O，分析纯，天津市东丽区天大化学试剂厂）；乙二胺四乙酸二钠（EDTA・2Na，分析纯，北京化工厂）；1，5二苯卡巴肼（DPC，分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；50% （w/w） NaOH（美国赛默飞世尔科技有限公司）； Na2HPO4・12H2O（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；浓H2SO4（衢州巨化试剂有限公司）；乙腈、甲醇（色谱纯，德国默克公司）；实验室用水为18.2 MΩ・cm去离子水（美国密理博公司）。

2.2标准溶液配制及样品前处理

1000 mg/L Cr标准溶液：准确称取0.51 g CrCl3・6H2O于100 mL容量瓶中，以水溶解并定容。

1000 mg/L Cr标准溶液：准确称取0.28 g K2Cr2O7于100 mL容量瓶中，以水溶解并定容，即得。

称取0.37 g EDTA溶于10 mL水中， 得100 mmol/L EDTA溶液。称取质量分数为50% NaOH 0.4 g， 用去离子水稀释至10 mL， 得0.5 mmol/L NaOH溶液。称取0.4 g DPC于100 mL甲醇中，边搅拌边缓慢加入8 mL浓H2SO4，用水定容至1 L， 即得柱后衍生液。

20 mmol/L NaOH溶液：称取质量分数为50 %的NaOH 1.6 g，用水定容至1 L，该淋洗液在氮气保护下现配现用。

磷酸盐缓冲溶液（PBS）：称取约3.58 g Na2HPO4于100 mL容量瓶中，用水溶解并定容，用H3PO4调节缓冲溶液至pH=8.0±0.1。

Cr与Cr混合标样：取不同体积Cr与Cr标准溶液，用磷酸盐缓冲溶液稀释至5 mL，加入0.5 mL 100 mmol/L EDTA溶液与67 μL 0.5 mol/L NaOH溶液，用水定容至10 mL，反应1 h，经0.22 μm尼龙滤膜过滤，收集滤液待用。

样品前处理：称取剪碎的样品约0.30 g，加入10 mL磷酸盐缓冲溶液，在超声细胞粉碎仪中超声萃取约3 h，取5 mL溶液，加入1 mL 100 mmol/L EDTA溶液与0.2 mL 0.5 mol/L NaOH溶液，用水定容至10 mL，反应约1 h，经0.22 μm尼龙滤膜过滤，收集滤液待用。

2.3实验装置

整个检测过程可分为4个步骤：（1）进样：注射进样，使阀1上固定的100 μL定量环充满待测样品；（2）0.0～2.5 min样品中有机基质的在线去除：切换阀1至Inject，当待测样品随着泵1泵入的NaOH淋洗液经过NG1前处理柱时，样品中的有机物基质被保留在柱中，无保留作用的离子则随着淋洗液被固定于阀2上的2 mL接收管收集；（3）2.5～20.0 min目标离子的分析和前处理柱的再生：切换阀1至Load，阀2至Inject，接收管内的待测离子由泵2泵入的NaOH淋洗液带至阴离子分析柱中分离，同时，前处理柱以乙腈为淋洗液，洗去柱中保留的有机物基质，进行再生；（4）20～25.0min平衡系统：前处理柱换NaOH为淋洗液，使前处理柱在下一次进样前得到平衡。最后，Cr的EDTA络合物与经DPC衍生的Cr在545 nm波长下进行吸光度检测，阀2切回Load。色谱仪器装置图如图1所示，阀上实线所示为Load状态，而虚线为Inject状态。

3结果与讨论

3.1样品萃取条件选择

分别以水、pH=8的磷酸盐缓冲溶液、20 mmol/L NaOH溶液为萃取液，提取样品中的Cr与Cr，前处理方法同2.2节。比较3种溶液的萃取效果并参考文献＼[19＼]可知，当pH值过高时，Cr易生成沉淀析出，故以20 mmol/L NaOH为萃取液时，Cr的检出浓度相对最小。同时参考国标方法＼[20＼]，皮革及织物因与皮肤接触而产生危害，宜采用模拟人体汗液体系为萃取液较为合适，因此在本实验中将磷酸盐缓冲溶液（pH=8.0±0.1）选为萃取液。

3.2分析检测条件选择

本实验利用柱切换技术实现对样品萃取液中有机物基质在线去除。为保证前处理柱中洗脱的离子均能被接收管收集，设计以下实验：在未接阴离子分析柱的条件下，经前处理柱洗脱的离子与衍生液反应后直接进入紫外可见检测器检测，离子出峰保留时间在0.9～2.0 min，淋洗液流速为1 mL/min，为避免样品离子在接收管中扩散引起损失，阀2的切换时间为2.5 min，接收管体积为2 mL。

对Cr标样与EDTA衍生产物及Cr标样与DPC衍生产物进行紫外可见全波长扫描，确定二者同时检测波长为545 nm。

优化Cr与EDTA溶液衍生反应条件，分别考察NaOH浓度、EDTA浓度， 以及反应温度和反应时间4个影响因素。

利用分光光度法测定Cr与DPC衍生产物吸光度值，完成对Cr的定量方法已比较成熟＼[2＼] 。本实验考察DPC浓度及酸度对反应影响，如图3所示。保持H2SO4与甲醇浓度不变，配制一系列不同浓度的DPC衍生液，确定浓度为0.4 g/L时，响应较大且噪音小；考察硫酸浓度对衍生反应的影响，在H2SO4浓度较低时，衍生反应慢，无法达到在线衍生检测的要求，而在H2SO4浓度升至0.15 mol/L时，生成衍生物速度较快且信号值相对较为稳定，重现性好。

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20GB/T 228072008， Leather and furChemical testsDetermination of chromium Ⅵ content， National Standards of the People′s Republic of China

皮革和毛皮化学实验六价铬含量的测定， 中华人民共和国国家标准， GB/T 228072008

AbstractA new analytical method has been developed for the simultaneous determination of Cr and Cr using online sample pretreatment valveswitching ion chromatography. The organic matrix in leather was removed by using a reversephase column as the pretreatment column. Before injection， EDTA was added into sample solution to react with the Cr to form anion which could absorb visible light strongly. After injection， the ions separated by the pretreatment column were received in a collection loop. Then the ions were delivered into an analytical column and separated. Cr then was derived with the derivatization reagent 1，5diphenylcarbazide （DPC）， and detected together with CrEDTA complex by a UVVis detector. Under the optimum conditions， the linear range of the method for Cr and Cr was 0.3-10 mg/L （r=0.9991） and 0.05-2 mg/L（r=0.9992）， whereas detection limits （S/N=3） were 80.78 μg/L and 6.67 μg/L， respectively. The recoveries were in the range of 88.7%-108.5% with the relative standard deviations for retention time and peak area less than 3%. The method could be applied to determine Cr and Cr in leather and cloth effectively and quickly.

色谱柱篇8

关键词：气相色谱法、丙烯酸丁酯中控分析

色谱法是一种分离技术，特别适合多组分的分离，它是由惰性气体（流动相）将气化后的试样带入加热的色谱柱内，并携带分子与固定相反复多次作用，达到分离，随后用合适的检测器对分离后的组分进行定性和定量分析。

1.气相色谱法的分析流程

载气经减压阀减压后进入净化器，除去杂质和水分，再由稳压阀和针形阀分别控制载气压力和流量，然后通过气化室进入色谱柱。待载气流量，气化室、色谱柱、检测器的温度以及记录仪的基线稳定后，试样可由进样器进入气化室，则液体试样立即气化为气体并被载气带入色谱柱。由于色谱柱中的固定相对试样中不同组分的吸附能力或溶解能力是不同的，从而使试样中各种组分彼此分离而先后流出色谱柱，然后进入检测器。检测器将混合气体中组分的浓度或质量流量转变成可测量的电信号，并经放大器放大后，通过记录仪即可得到其色谱图。

2气相色谱仪基本构造

气相色谱仪的型号种类繁多，但它们的基本结构是一致的。它们都由气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统等五大部分组成。

3 气相色谱常见分析方法

3.1 气相色谱常用定性分析方法

气相色谱法最根本的定性指标是组分在色谱柱内的滞留时间。当操作条件稳定且重复时，由于不同的组分在两相间有不同的分配系数，所以其保留时间也不同。

3.1.1 利用绝对保留值定性

在柱子和操作条件严格不变的条件下，混合物中组分的出峰时间是一定的。通过比较各个已知纯物质组分与混合物组分的保留时间，就可鉴别出混合物中各峰可能是什么物质。这种定性方法要求严格控制载气流速和柱温，而且为了得到重复可靠的结果，应该在同一台仪器、同一根柱子上进行分析试验。

3.1.2 利用相对保留时间定性

对某些二元、三元或比较简单的多组分样品，如果样品的大概组成可以推测，那么在得到色谱图以后，对每个峰的定性可以通过实测相对保留值与文献上的相对保留值进行对比定性。但在样品组成比较复杂，且相邻两峰距离较近，采用这种方法进行定性就容易出错。利用这种方法定性的优点是相对保留值只受柱温、固定相性质影响，仅有组分的热力学性质决定。对操作条件要求较低。

3.1.3 标准物质加入法定性

先将要测定的样品做色谱试验，然后将已知组分加入到样品中，在相同的色谱条件下再进行实验，比较两次得到的谱图，看色谱峰高的变化，若有色谱峰增高了，则表明样品中可能含有该物质。

3.2 气相色谱常用定量分析方法

根据气相色谱徒进行定量分析时，主要的方法有归一化法、内标法、外标法等，不同的分析方法适用于不同的分析要求。对于定量要求不太高的样品，在所有组分的相对校正因子都知道的情况下，可以采用归一化法。对于大量的分析样品，采用外标法比较合适。对于分析样品数量较少的用内标法较为合适。

3.2.1 归一化法

归一化法只适用于样品中所有组分都能从色谱柱流出并被检测器检出、且都在线性范围内、同时又能测定或查出所有组分相对校正因子的样品。此法的特点是比较简单、方便；其结果和进样量无关；仪器的操作条件稍有变动对结果影响不大。

3.2.2 外标法

外标法是先配制一系列不同浓度的标样进行色谱分析，做出峰面积对浓度的工作曲线，在严格相同的色谱条件下，注射相同量或已知量的试样进行色谱分析，求出峰面积后根据工作曲线求出被测组分的含量。此方法的特点是操作简单，计算方便；但要求分析组分与其他组分完全分开、色谱分析条件也必须严格一致；而且标准物得色谱纯度要求高。

3.2.3 内标法

内标法是将一种纯物质加入到待测样品中，进行色谱定量的一种方法。此法的特点是准确，没有归一化法的那些限制，只要所需分析组分在选定色谱条件下有信号，而且峰面积可测量并在线性范围内就行。缺点是操作复杂，必须事先测得相对校正因子；色谱分离要求高。

4 填充柱与毛细管柱的比较

从毛细管柱和填充柱对丙烯酸丁酯中控样品分析的谱图看，仪器相同、原理相同、仅色谱柱不同。毛细管气相色谱法使用的是毛细管色谱柱，为气液色谱，材质为石英玻璃，长度在几十米，分离效果更好，柱效更高，但因内径过小（0.5mm），故柱容量也很小，且因材质因素，易折断损坏。因柱长较长，分析时间通常也比较长。 填充柱气相色谱法使用的是填充色谱柱，既有气液色谱也有气固色谱，常见管材为不锈钢、玻璃、聚四氟、铜、铝等，除玻璃材质外，其他种类的不易损坏。填充柱分离能力较差，柱效较低，但柱容量大，柱较短，因此分析时间较快。此外，填充柱自己在实验室就可以很方便的填装。而毛细管柱一般均为商品柱，个人很难自行制作，所以毛细管柱价格也是填充柱的好几倍。

填充柱加长柱长使分析时间加长，而毛细管柱在相同条件下，不论增加柱内径还是毛细柱的长度，分析时间都会比没有增加前加长。柱长增加，意味着在同样的流速下，气化后的样品通过柱子的时间增大，到达检测器的时间增大，所以引起保留时间升高。分析时间加长

通过在实际应用中的对比，我们可以发现，毛细管柱的柱效好于填充柱。样品中重组分越多，效果越明显。因为毛细管柱多选用高沸点物质做固定液，在分析重组分样品时，分析时间较填充柱缩短一半时间。由于毛细管柱内径小，有效地解决了柱内扩散效应，使得锋形尖锐，分离度好。但目前毛细管色谱柱也不能完全取代填充色谱柱。从对比谱图可以发现，当轻组分较多或组分较少时，填充柱的分离度和分析时间和毛细管柱相差不大。这样可以充分利用填充柱的优势。

综上所述，在丙烯酸丁酯中控分析中，采用毛细管柱分析含有重组分的采样点，可以缩短分析时间并且得到很好的分离度。采用填充柱分析反应器及醇拔头塔的采样点，也可以得到较好的分离度和短的分析时间。这样的搭配方式，使得中控样品分析时间控制在最短，且减少了毛细管柱的使用量，从而节约了分析成本，提高了工作效率。

参考文献

[1]杨海鹰.气相色谱技术在石油和石化分析中的应用进展[J].石油化工，2005