p63蛋白在乳腺良恶性上皮性病变中的表达及意义

【摘要】目的：探讨p63在乳腺良、恶性疾病中的表达及意义。方法：收集乳腺良、恶性疾病的石蜡包埋标本50例（纤维腺瘤，纤维囊性病，导管内状瘤，导管内癌，浸润性导管癌和浸润性小叶癌）采用免疫组化S-P法检测p63在上述病变中的表达。结果：在乳腺良性病变中几乎所有的腺体外周都见完整的p63阳性的肌上皮围绕；在导管内癌中，部分导管可见完整的p63阳性的肌上皮围绕（24％），部分导管外周p63阳性的肌上皮细胞则呈间断性分布（62％），甚至无肌上皮细胞（14％）；在浸润性癌的癌细胞巢外周未见p63阳性的肌上皮细胞。结论：p63作为肌上皮细胞的标记物有助于在疑难的乳腺病变中正确识别肌上皮细胞，鉴别良恶性病变。

【关键词】乳腺疾病；免疫组织化学；p63

文章编号：1009-5519（2007）22-3341-02 中图分类号：R36 文献标识码：A

Role of p63 in differential diagnosis of epithelial benign and m alignant breast lesions

DENG Xing-hui，YU Wei-dong，ZHOU Wei

（The Central Hospital of Jiangmen，Guangdong 529030，China)

【Abstract】Objective：To study the role of p63 in differential diagnosis of epithelial benign and m alignant breast lesions. Methods：We collected 50 cases of breast benign and m alignant paraffin-embedded samples(including fibroadenoma，fibrocystic diseases，intraductal papilloma，intraductal caicinoma，invasive ductal carcinoma and invasive lobular carcinoma)，and detected the expression of p63 in above breast lesions by immunohistochemistry.Results：In breast benign lesions，almost all of the glands were encircled by p63 positive cells. In intraductal carcinoma，some cancer cell nests(24%) showed continuous positive cells in their circumference；other showed discontinuous or even no positive cells (62% and 14% respectively) .There were no p63 positive cells in invasive carcinomas. Conclusion：As a marker of myoepithelial cells，p63 could help to recognize myoepithelial cells correctly in confusing breast lesions and differentiate epithelial benign from m alignant breast lesions.

【Key words】Breast disease；Immunohistochemistry；P63

肌上皮细胞（myoepithelial cells， MECs）构成乳腺上皮结构的基底细胞层，在乳腺良性增生性病变中，腺体周围MECs存在，而在恶性病变出现浸润时MECs消失，因此MECs存在与否对乳腺良、恶性病变的鉴别诊断具有重要的价值。p63是p53基因家族的一个成员，可表达于多种器官的基底细胞。在乳腺组织中通常只表达于MECs。本文应用免疫组织化学方法于乳腺良、恶性病变中p63的表达情况，研究其在鉴别乳腺良、恶性上皮性病变中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 资料：收集乳腺疾病的存档石蜡标本，共50例。其中乳腺纤维腺瘤10例，纤维囊性病13例，导管内状瘤2例，导管内癌8例，浸润性导管癌13例和浸润性小叶癌4例。所有标本均经10％福尔马林固定，石蜡包埋。

1.2 免疫组化染色：采用S－P法，p63抗体及S－P试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司，实验步骤参照说明书进行。阴性对照以1×TBS代替一抗，阳性对照用已知阳性的乳腺组织切片。

1.3 结果判断：p63以细胞核出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性。

2 结果

在25例乳腺良性病变中，24例MECs均呈p63阳性表达，阳性细胞围绕腺体上皮形成一层大致均匀间隔的点状结构，1例（纤维腺瘤）只有部分MECs p63阳性，敏感性可达96％（24/25）；在所有病例中的腺上皮均为p63阴性表达，区别腺上皮的特异性可达100％（50/50）。随机统计8例导管内癌的50个癌性导管，有完整的MECs围绕的12个（24％），MECs不完整的31个（62％），完全无MECs的7个（14％）。在所有导管内癌和浸润癌中，除2例有极少许癌细胞p63阳性外，其余癌细胞均为阴性，区别癌细胞时特异性可达92％（23/25）。50例良、恶性病变中肌纤维母细胞、血管平滑肌细胞均为p63阴性表达。

3 讨论

MECs在乳腺良、恶性疾病的鉴别诊断中有重要参考价值。因为几乎所有的乳腺良性增生性病变（除微腺性腺病外）和部分原位癌都有MECs，而大多数乳腺恶性上皮性病变（除腺样囊性癌，化生性癌和某些分化差的浸润癌外）通常找不到MECs[1，2]。但在HE切片上，MECs有时和某些梭形的乳腺上皮细胞，肌纤维母细胞、血管平滑肌细胞及有些胞质透亮的癌细胞难以鉴别[3，4]。因此选用合适的标记物标记、识别MECs一直是病理学家关注的问题。

p63是p53基因家族的一员，但二者在功能及表达上存在比较大的差异。研究发现，p63在胚胎外胚层发育中起十分重要的作用，特别是作为上皮生长调节因子对上皮的生长、分化起着不可忽缺的作用；在人类p63基因的突变与严重的乳腺发育缺陷有关，因此研究者注意到p63蛋白表达与上皮、肌上皮的关系。p63蛋白可以在正常乳腺肌上皮、导管原位癌和小叶原位癌的癌巢周围的肌上皮、腺肌上皮瘤及腺样囊性癌的细胞核中表达。

本组实验发现p63恒定表达于乳腺良性病变和导管内癌的MECs，除2例纤维腺瘤中少许MECs为p63阴性外，其余病例中MECs均为p63阳性；除2例有极少许癌细胞p63阳性外，其余病例的上皮细胞和癌细胞均为阴性；在全部病例中，肌纤维母细胞、血管平滑肌细胞均为p63阴性表达。因此，p63标记MECs具有较高的灵敏度和特异性，与国内外学者报道一致[5，6]。在乳腺良性病变腺体周围，MECs呈连续性围绕；在导管内癌癌巢周围，MECs数目减少呈不连续性环状；而在浸润癌癌巢周围，MECs基本消失或无，与文献报道一致，表明从乳腺良性增生到原位癌和浸润癌，MECs的减少、消失是一个逐渐发展的过程[7]。

本组实验还发现导管内癌周围p63阳性MECs呈异质性，有连续的，不连续的。甚至完全缺如不等。增生的导管周围有完整的MECs是良性增生的重要特征，但不是鉴别良、恶性的绝对标准，因为部分导管内癌可有完整的MECs存在。导管内癌如果其外周的MECs不完整甚至缺失，并不能说明发生浸润。一定要密切结合HE和基底膜染色，观察基底膜是否完整和间质是否有癌细胞浸润，才能对浸润有正确的判断。当然，缺乏MECs是大多数浸润癌的特点，所以某些时候MECs状况对判断原位癌还是浸润癌可能还是会有所帮助。

参考文献:

[1] Papotti M，Eusebi V，Gugliotta P，et al. Immunohistochemical analy-sis of benign and m alignant papillary lesions of the breast[J]. Am J Surg Pathol，1993，7:451.

[2] Tannishtha R，Sean J，Micheal F，et al. Stem cells cancer and cancer stem cells[J].Nature，2001，414(3):105.

[3] Barbareschi M，Pecciarini L，Cangi MG，et al. P63，a p53 homologue，is a selective nuclearmarker of myoepithelial cells of the human breast[J].Am J Surg Pathol，2001，25:1054.

[4] Werling RW，Hwang H，Yaziji H，et al. Immunohistochemical distinc-tion of invasive from noninvasive breast lesions[J]. Am J Surg Pathol，2003，27(1):82.

[5] 卢晓梅，陈书媛，张淑红. p63显示肌上皮细胞在乳腺癌诊断中的价值[J]. 临床与实验病理学杂志，2004，20（1）：35.

[6] Batistatou A，Stefanou D，Arkoumani E，et al. The usefulness of p63 as a marker of breast myoepithelial cells[J]. In vivo，2003，17(6):573.

[7] Prasad ML，Hyjek E，Giri DD，et al. Double immunolabling with cy-tokeratin and smooth muscle actin in confirming early invasive carci-noma of breast[J].Am J Surg，1999，23:176.

收稿日期：2007-07-23