P63 Actin CK在乳腺原位癌及早期浸润性癌鉴别诊断中的意义

［摘 要］ 目的：探讨单克隆抗体P63 Actin CK在乳腺原位癌及早期浸润性癌中的表达及意义。方法：采用免疫组化Elivision法检测18例乳腺原位癌，24例乳腺早期浸润性癌中P63 Actin CK的表达。结果：24例乳腺早期浸润性癌中，3例在硬化间质内的“浸润”成分，IHC示CK(+)的细胞周边有P63(+)Actin(+)的肌上皮细胞围绕，而18例乳腺原位癌中2例在间质内发现CK(+)的细胞，周边无P63(+)Actin(+)的肌上皮细胞围绕。结论：P63作为标记肌上皮细胞敏感特异的抗体，极少数报道腺上皮细胞亦着色，但结合Actin的表达和HE切片，可以区分，CK P63 Actin三者联合应用，有助于鉴别间质内为浸润的腺体,还是挤压的导管，以辅助乳腺原位癌及早期浸润癌的诊断及鉴别诊断。

［关键词］ 原位癌；早期浸润；P63；Actin；CK

The Significance of Expression of P63，Actin，CK in the Differential Diagnosis of Breast Carcinoma in Situ or Early Invasive Carcinoma

Abstract： Objective To explore the significance of expression of P63，Actin，CK in the diagnosis and differential diagnosis of breast carcinoma in situ or early invasive carcinoma．Methods Elivision labeling technique was used to study expression of P63 Actin CK in 18 cases of breast carcinoma in situ and 24 cases of early invasive carcinoma．Results Three of 24 cases early invasive carcinoma showed CK Actin and P63 positive for“invasing findings”in stroma，two of 18 cases carcinoma in situ showed CK positive and P63 Actin negtive．Conclusion P63 was able to label myoepithelral cells with high sensitivity and specificity and can different glandular epithelium from ductual complent with CK Actin and HE section，despite of few glandular epithelium was positive for P63．It could be maken a important way to diagnosis the carcinoma in situ or early invasive carcinoma．

Key words：Carcinoma in situ;Eary invasive carcinoma；P63；Actin;CK

乳腺原位癌及早期浸润性癌的诊断及鉴别诊断是乳腺疾病病理诊断中的一个难题，肌上皮细胞的标记物P63的应用，对这两种疾病的诊断有很大的帮助，由于多种因素的影响，原位癌和早期浸润性癌的肌上皮细胞都可呈不连续表达，癌巢周围肌上皮的部分缺失并不能说明浸润，特别是硬化的间质内出现的小簇状、条索状、小管样及形状的细胞团，是浸润的腺上皮细胞,还是挤压的小导管，采用P63 Actin CK联合标记，会在一定程度上解除疑惑，减少误诊。

1 资料与方法

1．1 临床资料 收集2002年至2005年本院乳腺手术标本42例，其中乳腺原位癌18例，原位癌合并早期浸润癌24例。

1．2 方法 采用免疫组化Envision法。抗体P63(MAB?0365)、CK(AE1／AE3)、(MAB?0049)、Actin(HHF35)(MAB?0001)工作液及免疫组化ElivisionTM法试剂盒均购自福州迈新生物技术开发中公司，石蜡切片经抗原修复，3％的双氧水封闭内源性的过氧化物酶后，在切片上滴加一抗工作液，4 ℃冰箱过夜，次日滴加二抗，DAB显色，苏木素复染，以不加一抗的组织切片作阴性对照，已知的阳性反应片作阳性对照。阳性结果判断，P63以细胞核中出现棕黄色染色颗粒为阳性，CK和Actin以细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性细胞。

2 结果

18例乳腺原位癌，经标记后发现有2例在硬化的间质内可见CK(+)的细胞周边无P63(+)Actin(+)的肌上皮细胞围绕；24例乳腺原位癌并早期浸润癌的病例，其中有3例原认为硬化的间质内为浸润的腺上皮细胞，IHC示CK(+)的细胞且周边有P63(+)Actin(+)的肌上皮细胞围绕。

3 讨论

P63作为肌上皮的标记物，其抗原及特异性强，敏感性高，广泛应用于乳腺疾病的诊断及鉴别诊断，但由于P63为核阳性，不能显示连续的肌上皮细胞［1］，Actin为浆阳性，可在一定程度上弥补此缺陷。文献报道在良性腺体周围及良性病变的腺体周围，肌上皮细胞呈连续性围绕，而在导管原位癌、小叶原位癌癌巢周围肌上皮细胞数目减少呈间断或不连续的环状，乳腺浸润性癌癌巢周围，肌上皮细胞基本消失或无肌上皮围绕［1］，早期浸润性癌，浸润处肌上皮消失［2］。总之，从乳腺的良性病变到原位癌、早期浸润癌、浸润性导管癌，肌上皮细胞的消失是一个逐渐的过程。31％乳腺原位癌腺体肌上皮细胞P63呈不完全性表达(少于25％的肌上皮细胞着色)，而69％完全阳性表达的病例(多余75％的肌上皮细胞着色)大多也呈跳跃性胞核着色［3］，所以乳腺原位癌和早期浸润癌，腺体周围的肌上皮细胞都可为不连续围绕。单凭P63的表达有时无法鉴别，在硬化的间质内，有小簇状、条索状、小管样细胞团，其周边有P63(+)Actin(+)肌上皮围绕，则说明为挤压的小导管，如果其周围无P63(+)Actin(+)的肌上皮细胞，则提示浸润，因为可有以下两种情况存在：其就是浸润的腺上皮细胞，周围的肌上皮细胞已经消失;其为挤压的良性小导管，周围有肌上皮存在，但导管的走向与切面垂直，或为癌性导管，肌上皮细胞极少，由于切片的原因，在观察的切面上看不到。再者由于间质的硬化，某些挤压的腺上皮细胞与肌纤维母细胞或血管内皮细胞在HE切片上有时难以分辨而被忽落，若标记CK，则可避免，因此免疫组化标记P63 Actin CK，对于乳腺原位癌及早期浸润性癌的诊断极鉴别诊断有很大的帮助。随着人们对生活质量的不断提高，医生可根据乳腺癌患者是否浸润、肿瘤的大小、核分级、有无中心性坏死、前哨淋巴结的活检、临床腋下淋巴结的检查情况等综合分析选择不同的术式及放疗方式，不仅保证了患者的寿命，也保证了生活质量，意义重大。

参考文献：

［1］ 景洪标．P63蛋白在乳腺良、恶性疾病鉴别诊断中的意义［J］．诊断病理学杂志，2004，11(5)：308?310.

［2］ Pyasad ML，Hyjek E,Giri DD,et al．Double immunolableling with cytokeratin and smooth muscle actin in confirming early invasive carcinoma of breast［J］．AM J Surg,1999,23：176?81.

［3］ 耿建祥．乳腺增生性病变中P63蛋白的表达和意义［J］．临床与实验病理学杂志，2005Apr,21(2)：204?207.

［4］ 董丹丹．P63／α?SMA鸡尾酒法标记肌上皮细胞在诊断乳腺导管原位癌和浸润性癌中的应用［J］．实用医院临床杂志，2004,1(4)：87?89.