浅析高效液相色谱法检测食品中的黄曲霉毒素

【前言】浅析高效液相色谱法检测食品中的黄曲霉毒素由文秘帮小编整理而成，但愿对你的学习工作带来帮助。由于黄曲霉毒素具有极强的毒性和致癌性，因此我国的标准对其严格的控制，根据GB 2761-2011《食品安全国家标准 食品中真菌毒素的限量》对谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及其籽类、油脂及其制品、调味品、特殊膳用食品等食品的黄曲霉毒素都由严格的限量控制。目前黄...

摘要：该文介绍近年高效液相色谱法检测食品黄曲霉毒素，试样经过甲醇-水提取，用高效液相色谱法进行测定。方法的选择性好，灵敏度高，适用于测定食品中的黄曲霉毒素。

关键词：检测 食品 黄曲霉毒素

1概述

黄曲霉毒素种类较多，主要为B1，B2，G1，G2，M1，M2。它们的结构式不同，其毒性和危害也有很大差异。其中以黄曲霉毒素B1的毒性及致癌性最强，在食品中的污染最广泛，对食品的安全性影响最大。其中M1和M2主要存在于牛奶中。

黄曲霉毒素有很强的急性毒性也有很明显的慢性毒性和致癌性。急性毒性表现为氰化钾的10倍。

由于黄曲霉毒素具有极强的毒性和致癌性，因此我国的标准对其严格的控制，根据GB 2761-2011《食品安全国家标准 食品中真菌毒素的限量》对谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及其籽类、油脂及其制品、调味品、特殊膳用食品等食品的黄曲霉毒素都由严格的限量控制。目前黄曲霉毒素的检测方法有薄层色谱法、免疫化学分析法、高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱法。我结合GB/T 18979-2003 《食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》浅析高效液相色谱法检测食品中的黄曲霉毒素。

2方法的原理

试样经过甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水或吐温-20/PBS将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后衍生后测定黄曲霉毒素的含量。

3实验前的准备

4样品的前处理

4.1提取

准确称取经过磨细（粒度小于2 mm）的大米试样25. 0 g于250 mL具塞锥形瓶中，加5. 0 g氯化钠，用70%甲醇定容至125.0mL ，以均质器高速搅拌提取2 min。定量滤纸过滤，准确移取15.0 mL滤液并加入30.0 mL水稀释，用玻璃纤维滤纸过滤1-2次，至滤液澄清，备用。

4.2净化

将免疫亲和柱连接于20. 0 ml玻璃注射器下。准确移取15.0 mL样品提取液注人玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约6 mI./min流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2 mL-3 mL空气通过柱体。以10 mL水淋洗柱子两次，弃去全部流出液，并使2 mL-3 mL空气通过柱体。准确加人1.0 mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 mL/min-2 mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。

5色谱条件

结果讨论

用上述方法测定大米中黄曲霉毒素B1，使用外标定量法计算结果。所得回收率为85%可见，本实验的精密度、准确度均较好。

8注意事项

（1）黄曲霉毒素可以致癌，实验过程中应做好防护工作，佩戴口罩、防有机溶剂手套、防护目镜，在通风橱中操作。

（2）使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素溶液瓶最好用pH7的高氯酸溶液（10%V/V）浸泡过夜。

（3）必须使用在有效期范围内的免疫亲和柱。

（4）免疫亲和柱在2-8℃储存，不得冻存。使用前免疫亲和柱需回至室温（22-25℃）。

（5）每次上柱液体都应完全排干。

（6）过滤中使用定量滤纸和玻璃纤维滤