帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠炎症状态的影响

摘要：目的 探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠炎症状态的影响。方法 采用链尿佐菌素（STZ）腹腔注射的方法构建DN大鼠动物模型，将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组），并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周灌胃帕立骨化醇3次，每次剂量0.4 μg/kg，给药12 w后检测各组血超敏C反应蛋白（hc-CRP）、白细胞介素6（IL-6）、24 h尿蛋白定量及一般生化指标。结果 与N组相比，D组和P组hc-CRP、IL-6、24 h尿蛋白定量明显升高，差异均有统计学意义（P

关键词：糖尿病肾病；微炎症；帕立骨化醇

Effect of Parylene Alcohol on Inflammatory State of Diabetic Nephropathy Rats

LAN Kai，YANG Ying，QIN Ying-xia，WU Xiao-hui，ZHANG Wei-min

（School of Clinical Medicine，Xi'an Medical College，Xi'an 710021，Shaanxi，China）

Abstract：Objective To investigate the paricalcitol on diabetic nephropathy（DN）rats inflammation.Methods Using streptozotocin（STZ）intraperitoneal injection method to construct DN rat animal model，the successful model of the rats were randomly divided into paricalcitol group（P group），DN group （D group），and healthy control group（group N）.P group rats were gavaged weekly paricalcitol 3 times at a dose of 0.4μg/kg，12 w after drug serum hypersensitive C reactive protein（hc-CRP），interleukin 6（IL-6），24 h urinary protein and the general biochemical indicators.Results Compared with N group，D group and P group hc-CRP，IL-6，24h urinary protein increased significantly，the differences were statistically significant（P

Key words：Diabetic nephropathy；Inflammation；Paricalcitol

糖尿病肾病是糖尿病引起的危害性最大的一种并发症，是糖尿病患者主要死亡原因之一，因此早期干预非常重要。炎症反应是糖尿病肾病持续进展的重要因素，抑制炎症介质的产生已成为目前治疗糖尿病肾病重要途径之一。近年来有研究发现活性维生素D类似物帕立骨化醇具有减少糖尿病肾病大鼠尿蛋白及肾脏保护作用[1]，但具体作用机制尚不清楚，可能与抑制微炎症状态有关，目前这方面的研究较少。本研究拟通过帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠hc-CRP、IL-6、24 h尿蛋白的影响，探讨其对糖尿病肾病微炎症状态的影响。

1材料与方法

1.1动物模型的建立与分组 清洁级封闭群雄性SD大鼠30只，体质量（210±20）g。20只大鼠造模，10只为健康对照组（N组）。大鼠造模后禁食10 h，单次无菌腹腔注射65 mg/kg链脲菌素（购于美国Sigma公司）。72 h后取尾静脉血测空腹血糖（FBG），FBG≥16.65 mmol/L确定为糖尿病大鼠，3 w后24 h尿蛋白量≥30 mg确认糖尿病肾病大鼠模型制备成功；健康对照组注射等量的柠檬酸缓冲液。造模成功的糖尿病肾病大鼠随机分成：帕立骨化醇治疗组（P组，10只），将帕立骨化醇溶于丙二醇中，以0.4 μg/kg的剂量3次/w灌胃；糖尿病肾病组（D组，10只）。D组与N组给予等量丙二醇灌胃，连续12w。12 w后收集24 h尿，心脏取血4～5 ml。

1.2一般指标检测 24 h尿蛋白定量、空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、血}、血磷和甲状旁腺激素（PTH）。

1.3hc-CRP、IL-6测定 hc-CRP采用全自动生化分析仪测定，血清IL-6采用酶联免疫吸附法检测。

1.4统计学处理 计量资料数据用（x±s）表示。多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用LSD-t检验。采用SPSS17.0软件包进行统计学分析。

2结果

2.1治疗12 w后各组大鼠指标变化： P、D组24 h尿蛋白量、空腹血糖、肌酐和PTH均高于N组，差异均有统计学意义（均P

2.2治疗12 w后各组大鼠血hc-CRP、IL-6指标变化：P组和D组hc-CRP、IL-6水平高于N组（均P

3讨论

糖尿病肾病是糖尿病患者临床最为常见的慢性微血管并发症之一，严重影响糖尿病患者预后。随着糖尿病发病率不断提高，该病呈现逐年上升趋势，但其确切的发病机制尚不明确。研究发现，氧化和抗氧化系统的失衡使患者体内炎症因子合成增多，可引起肾小球滤过屏障的损伤，导致蛋白尿的发生，而微量蛋白尿是糖尿病肾病的早期标志[2]。炎症介质和氧化应激等因素在糖尿病肾病发生发展中起了重要作用，糖尿病肾病患者hc-CRP、IL-6较正常人群明显升高，目前临床没有有效的干预手段。

目前研究发现帕立骨化醇作为一种维生素D类似物，可通过细胞内特异的维生素D受体（vitamin D receptor，VDR）介导发挥其生物活性，不仅具有调节钙磷代谢的生物学作用，还可通过抑制RAS系统、炎症因子分泌、细胞外基质沉积、系膜细胞增殖等途径改善糖尿病肾病病理生理过程，具有独立于钙磷代谢以外的肾脏保护作用[3-4]。研究表明帕立骨化醇可以使糖尿病肾病大鼠肾小管上皮间充质转化及小管间质改变减轻，同时伴有肾保护作用，并且未发生高钙血症等问题[5-6]。帕立骨化醇可以通过抑制肾素合成基因表达的环腺苷酸信号通路，阻断部分环腺苷酸与环腺苷酸反应原件结合区对肾素基因启动子的活化，可以抑制肾素基因转录启动，从而减少肾素的合成[7-8]。目前大量研究集中在帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾素抑制及肾小管上皮间充质转化等机制上，对糖尿病肾病炎症介质的影响相关研究较少。

Hc-CRP是一种非特异的炎症标志物，近年来的研究揭示了hc-CRP直接参与了炎症反应，并且是心肾血管疾病最强有力的预示因子与危险因子。IL-6可由多种细胞合成，包括活化的T胞和B细胞、单核巨核细胞、内皮细胞、上皮细胞以及成纤维细胞等[9-10]。其可以刺激肝细胞合成急性期蛋白，参与炎症反应[11]。研究发现，在糖尿病患者的胰岛细胞中，一些细胞因子如IL-6、IFN-γ、TNF-α通过诱导刺激COX-2表达，使PGE2合成增加，造成胰岛β细胞功能障碍和退化[12-14]。本研究发现在帕立骨化醇治疗12 w后糖尿病肾病大鼠血hc-CRP、IL-6指标较未治疗组明显下降，帕立骨化醇可能具有抑制炎症反应的作用，其作用途径有待于经一步研究。

糖尿病肾病大鼠存在微炎症反应，是糖尿病慢性并发症重要诱因之一，可直接导致肾功能减退。炎症反应在糖尿病肾病病情发生发展中起了重要作用，通过本研究发现帕立骨化醇可以改善糖尿病肾病大鼠微炎症状态，给糖尿病肾病的治疗提供了新思路。

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