血细胞检测的质量保证

【关键词】 血细胞检测

血细胞检测结果的准确性对疾病的诊断、治疗和监测有直接影响。因此，必须严把质量关，认真做好血细胞分析前、中、后的各项质量控制工作。

1 分析前质量控制

1.1 检验人员要求 选择高素质的专业技术人员，上机前应经严格的有关仪器的培训，仔细阅读说明书，对血细胞分析仪的原理、操作规程、使用注意事项、细胞分布直方图、散点图的意义、异常报警的含义，一般故障的解除，仪器保养维护以及引起实验误差的因素有充分的了解，掌握用NC-CLS推荐方法校准仪器每个参数的程序。

1.2 血细胞分析仪的安装要求 为确保仪器的正常工作，安装时应注意:（1）仪器安放在远离电磁干扰源、热源的位置;（2）放置仪器的实验台要稳固，仪器两边、后部和上面空出至少0.5m的空间，以易于保养和使用，后板和墙壁间至少留出0.2m，以易于散热和清洗，工作环境要清洁;（3）防潮、防阳光直射，通风条件好，室内温度应维持在15℃～30℃，最佳温度为25℃，相对湿度为30%～85%;（4）为了仪器安全和抗干扰，仪器应用稳压器最好是净化电源，并连接符合标准的专用地线。仪器安装后或每次维修后，必须对仪器的技术性能进行测试、校准和评价。ICSH公布了对血细胞分析仪的评价方案，在对细胞计数和血红蛋白测定方面，要对仪器测试样本的总变异、携带污染率、线性范围、可比性、重复性、准确性进行评价。白细胞计数总变异系数应<3%，携带污染率<2%，重复性<3%，线性范围较宽，应在电阻抗法进行白细胞分群时应注意细胞分类结果与显微镜检查的符合性;（5）仪器的校准、仪器验收或仪器检修更换零件后或临床使用半年后，必须进行一次校准。仪器校准是保证检测结果准确与否的关键步骤，须高度重视。校准用的标准物一是来自本仪器的配套标准物，二是来自新鲜人血（但定值要求直接或间接地溯源至国际标准）。校准时最好使用新鲜血作为校准物，采用间接溯源到国际标准的定值方法:一是在二级标准检测系统（即参考实验室）定值，二是在规范操作的检测系统即在使用配套试剂，用配套标准定期进行仪器校准规范地开室内质控，参加室间质评成绩优良，人员经过培训的仪器上定值，再按推荐校准方法一步一步地校准仪器;（6）标本的采集:①血标本:全自动血细胞分析仪一般要求用抗凝的静脉血，尽可能不用末梢血，因为末梢血的误差大，重复性较差，除少数不易抽取静脉血者，如婴儿、大面积烧伤患者等。多项目同时抽血时应用第一管作血常规标本，②容器:采血时最好采用真空采血系统，可使采集标本标准化，又可进行质量控制，减少交叉感染，③抗凝剂:ICSH推荐用EDTA-K 2量规定1.5～2.0mg/ml，此抗凝剂对血细胞数目及大小，红细胞形态影响较小，可抑制血小板聚集。标本采集完毕，要立即充分混匀，混匀次数、方式要基本保持一致，标本在2h内检测完毕，因白细胞形态在2h内是基本稳定的，2h后粒细胞形态有变化，故应先推制血片。检查完毕，标本应室温保存，不宜放冰箱，因血小板不宜在低温下贮存，否则会影响PLT和MPV值，以备复查。

2 分析中质量控制

分析中血细胞的质量控制贯穿于血细胞分析仪分析样本的全过程，要始终对血细胞分析仪进行监控，确保仪器和试剂处于良好的工作状态，保证检验报告的准确性、可靠性。

2.1 每天开机时的检查 开机后要检查仪器电压、气压等各种指标在仪器质检后是否在规定范围内，试剂量是否充足，若不足准备好替代试剂。环境温度是否达到仪器要求，本底测试是否通过，确保有足够的打印纸打印当天的样本数据等。

2.2 试剂 血细胞分析仪的使用试剂一般分为稀释液、溶血剂和清洗剂3种，良好的试剂对保证仪器的正常运行和日常维护及获得准确的测试结果至关重要。（1）最好使用仪器的原装配套试剂，以保证测试结果的准确性，同时也保证仪器附件的正常使用和仪器寿命;（2）半自动血细胞仪严格掌握使用溶血剂用量及溶血时间，不同仪器溶血剂的用量及溶血时间有差异，溶血剂量不足或溶血时间过短，使细胞溶解不完全，时间太久可使血细胞明显变形，发生计数误差;（3）稀释液的渗透压、离子强度、电导率、pH值等指标应作为每批试剂验收的标准，绝对不允许使用过期稀释液。

2.3 标本要求 测试时要检查血液标本有无凝块，仪器吸样前标本充分混匀，且混匀次数、方式要基本保持一致。

2.4 严格执行操作规程 操作规程是临床实验室的法规，人人必须遵守，不得擅自更改，并认真做好仪器日常的清洗，保养工作，同时做好记录。

2.5 受检者生理状态对实验结果的影响 注意避免由于生理状态引起的各参数的变化造成的偏差是质量控制的重要环节。如每天的早、中、晚的白细胞总数有一定的差别，一般下午较上午高，剧烈运动、情绪激动、严寒、暑热等使白细胞增多;新生儿白细胞总数明显增高;妊娠5个月以上及分娩时白细胞增多;服用某些药物也可干扰白细胞等，所以对非急诊患者应固定时间检查。

2.6 注意仪器的报警、提示（1）堵孔，仪器会出现波形或出现报警声，指示灯闪烁或提示警告信号（CLOG），应找出原因，及早解除，使仪器回复运转。（2）血细胞分析仪在检测过程中，标本有异常细胞及非典型细胞时，有的仪器白细胞散点图异常，有的白细胞直方图异常可在报告单上或屏幕上或用警告信号（-、-、-或***或Aty/Abn-LY、IMM Gran等）提示出某个区域有异常细胞。种类不同仪器报警方式不同，此时要作显微镜下分类。

2.7 注意病理因素对血细胞分析仪的使用影响 （1）巨球蛋白血症，自身免疫性疾病，某些感染时，血中含有冷球蛋白或糖尿病、血栓疾病等血中存在冷纤维蛋白使血中非晶体物质发生聚集，从而导致血细胞计数值增高，可将标本置于37℃水浴箱，10min后消除影响;（2）血液中白细胞显著增高影响红细胞计数，或有核红细胞影响白细胞计数;（3）红细胞内含有大量Hb和HbCO，某些肝病患者红细胞膜质异常，抵抗溶血剂作用，致使红细胞破坏不全可使白细胞计数假性升高;（4）各种病因引起血栓前状态使血小板聚集;大量巨大血小板或小红细胞的存在，影响血小板和红细胞检查;（5）M蛋白增多时，在低pH情况下，M蛋白可与溶血剂发生沉淀反应，使结果偏高。高脂血症可使Hb假性增高，以上影响可通过观察直方图、散点图的变化反映出来。所以监测直方图、散点图的变化，并根据直方图、散点图及参数的变化确定白细胞分类是否需要显微镜检查。

3 分析后质量控制

（1）保留标本备查:血样标本测试完毕，标本应在室温保留至少一天，以备临床医师对检查结果有疑惑时复查，核对时用。（2）重视室内质控，每天坚持做1～2次质控，检查当日质控物各参数是否在规定范围内，只有在质控时才允许检测病人标本。（3）发出实验结果之前，应由检验师或主管检验师严格审核报告单，查看各参数是否与临床诊断相符，数据间是否有矛盾及各参数之间的联系，仔细观察直方图、散点图的变化以确定实验结果可否鉴别，是否需要复查或重采标本。（4）加强与临床科室联系，若报告结果超出生理变化范围，并与诊断结果不符，要及时与临床医师取得联系，对检验结果做出合理的解释，这就要求检验工作者也应具备一定的临床基础知识。（5）积极参加室间质量控制，通过参加室间质评可以将自己的血细胞分析仪的准确度与精密度和同类仪器进行比较，及时发现问题，有利于保证血细胞检测的质量。

认真做好血细胞分析前、中、后的质量控制，保证检验结果准确、及时、可靠，可以为临床提供病人的相关资料，为临床诊断和治疗提供精确的科学依据，指导临床合理用药。