玉米茎腐病生防菌的筛选鉴定

摘要：以禾谷镰刀菌为指示菌测定生物活性，土壤中分离16个细菌菌株具有抑菌活性的生防菌，其抑菌率在75.9%～46.2%。采用生防菌菌悬液，于发病初期对茎基部喷雾，生防菌A2和A7防效最高，分别为74.7%和71.3%。

关键词：玉米茎腐病；分离筛选；生防菌

项目基金：吉林农业科技学大学生创新项目（项目编号：2012119）

中图分类号： S436 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/ki.jlny.2015.12.025

玉米茎腐病指发生在玉米茎或茎基部腐烂，并导致全株迅速枯死症状的一类病害，茎基髓部中空，极易折倒。一般对玉米茎腐病的防治，主要通过使用化学药剂种子包衣、选用抗病品种、轮作换茬等方法，但应用最多的还是依靠化学防治，随着生活质量的不断提高，人们的生活理念、消费观念、生存方式等都发生巨大的变革，追求安全、无害、营养的绿色食品（粮食、蔬菜、水果和中药材）已成为时尚与潮流。目前，普遍倡导并推行以生物防治、生态控制为主的有害生物综合治理理念，逐步取代化学农药的使用，保护生物多样性，实现农业的可持续发展，生产出更多更好的绿色食品。国内对于生物防治茎腐病的报道很多，但是应用于田间的较少。本试验对该病的生物防治技术进行了初步研究，通过对病株根际土壤样品的筛选获得高效玉米茎腐病的生防菌株，通过拮抗作用和盆栽防效试验，对土壤中分离较好生防菌。

1 材料与方法

1.1 材料

菌株：自长春市郊区以往茎腐病发病的农田的根际土分离获得。

药剂对照：20%福克可湿性粉剂。

培养基：PDA培养基。

供试病原菌：玉米茎腐病禾谷类镰刀菌，由吉林农业科技学院病理实验室提供。

田间供试品种：黄早4。

1.2 方法

1.2.1生防菌拮抗效果测定 制备含活化好的靶标菌茎腐病原菌的平板，将带测定生防菌饼打成6毫米接于平板上，培养，记录拮抗作用。每个处理 3 次重复，培养5～7天后，测量菌落直径，计算抑菌率。

1.2.2 生防菌株盆栽防效试验 盆摘成株期伤茎根埋法接种，于发病初期对茎基部喷雾（生防菌菌液浓度为108cfu・mL-1），使用量为0.3升/株。设对照药剂及空白处理，每个处理3次重复。

1.2.3 调查方法

调查时间：8月中下旬和9月初。

发病率（%）=病苗数/出苗数×100%

防治效果（%）=[（对照田发病株数-防治田发病株数）/对照田发病株数]×100%

2 结果与分析

2.1 基本菌种判别

16株生防菌，革兰氏染色均为阳性，细胞呈直杆状，芽孢椭圆、卵圆、柱状、圆形，初步鉴定为芽孢杆菌属。

2.2 16株生防菌对玉米茎腐病的抑制效应

分离筛选后有16株生防菌对靶标菌表现出效果的抑制效果，其对靶标菌玉米茎腐病的抑菌率见表1，空白对照菌落直径30.3毫米，菌丝直径均在14毫米以上，其中A2和A7抑制活性最高，抑制率达到75.9%和74.6%，效果较差是A40，抑制率为46.2%。A12等虽有抑菌效果但是抑菌效果较弱，最低为A20，抑菌效果为10.9%。

2.3 生防菌防治玉米茎腐病盆栽试验

从16株生防菌中选择6株抑制效果较好的菌株进行盆栽试验，从表2可以看出，空白处理发病后，茎基髓部中空，腐烂，病情指数达到56.6，药剂处理后防治效果达到80.3%。6株生防菌对玉米茎腐病均有防治效果，防效达到74.7%～29.6%，生防菌A2和A7防效最高，分别为74.7%和71.3%。但防治效果低于化学防治的对照药剂。

3 结论与讨论

生物农药及生物防治越来越受到人们的重视，但是目前市场上生物农药的份额只占较少的一部分，这当然和生物农药在应用时遇到的瓶颈有关，但是其拓展空间仍然很大。本实验从土壤中分离生防菌，采用以菌治菌的方法。A2防治效果最好，盆栽试验防治效果可达到74.7%，进一步可进行生防菌培养条件优化等相关内容。但是盆栽试验得最佳防治效果仍低于化学对照药剂，可也是生防菌剂开发的瓶颈，环境因素对生防菌剂的防效影响较大。另外本文只对该生防菌进行了初步鉴定为芽孢杆菌属，以后可以对其进行16S rDNA序列分析。

参考文献

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作者简介：郭月霞，吉林农业科技学院，本科在读，研究方向：农药分析及生物农药。

通讯作者：李宛泽，硕士，吉林农业科技学院，讲师，研究方向：农药分析及生物农药。