HPLC法测定丹七合提物中丹参素和丹参酮ⅡA的含量

【摘 要】目的：建立HPLC法测定丹参素和丹参酮ⅡA的分析方法，并测定各成分的含量。方法：采用HPLC法，Discovery C18（25 cm×4.6 cm，5 μm）；流动相：甲醇-0.5%醋酸水，洗脱梯度（0-10 min，9%75%甲醇；10-40 min，75%甲醇）；流速：1.0 mL・min-1；柱温：25℃；检测波长：275nm。结果：丹参素钠线性范围为0.0996-1.1952 μg，平均回收率为101.33%；丹参酮ⅡA线性范围为0.026-0.312 μg，平均回收率为100.24%。结论：本研究建立的方法简便快速，结果准确可靠，可用于丹七合提物的质量控制。

【关键词】丹七合提物；丹参素；丹参酮ⅡA；HPLC法；含量测定

【中图分类号】R461 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4588-01

丹参可祛淤止痛、活血通经，主要有效成分包括脂溶性成分丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA和水溶性成分丹参素、原儿茶醛等；三七，活血散瘀，更擅定痛，主要有效成分是皂苷类。两药配伍，相辅相成，使活血散瘀、通经止痛之功倍增，用于冠心病、心绞痛，具有良好的化瘀止痛作用[1]。本研究以丹参三七为53的比例，采用酶解辅助超声提取法对丹参和三七药对进行合提，得到丹参和三七的混合提取物（ 简称丹七合提物）。为更好地发挥二者的协同药效及进一步研究制剂提供资料，并考察提取效果，本研究建立了HPLC法同时测定丹七合提物中丹参酮ⅡA和丹参素的含量。

3讨论

3.1 本实验将丹参和三七合提，在提取时分别进行了水提和醇提，同时兼顾了丹参水溶性成分和脂溶性成分的溶出，并建立了同时测定丹七合提物中丹参素和丹参酮ⅡA的分析方法，经过比较多种流动相及其不同配比，最终选择的流动相为甲醇-0.5%醋酸水，洗脱梯度：0-10 min，9%75%甲醇，10-40 min，75%甲醇的洗脱条件能使分离效果较好，分析时间较短，可用来控制丹七合提物中有效成分的含量。

3.2 使用二极管阵列检测器对丹参混合对照品进行全波长扫描，结果丹参素在220 nm和280 nm附近有强吸收，丹参酮ⅡA在254 nm和270 nm处有较强吸收，为了同时测定丹参素和丹参酮ⅡA，实验过程中同时监测了280 nm、275 nm、270 nm下的测定结果，最终选择275 nm，使二者的吸收均较高。

3.3 据文献[2-4]报道，丹参酮ⅡA性质不稳定，见光易分解，丹参素钠稳定性较差，实验中发现丹参素钠放置一段时间后含量降低，故操作中应低温、避光保存，临用现配。在制备供试品过程中，分别考察了不同的溶剂对样品的溶解效果，结果50%的甲醇溶解效果最好，有效成分较稳定，样品溶液经微孔滤膜过滤后也应低温保存，24 h内测定含量，以免影响实验结果。

参考文献

[1] 郑琴，彭常春，沈美兰，等. 丹参和三七的配伍研究概况[J].中国实验方剂学杂志，2009，15（2）：83-86.

[2] 柳涛. HPLC法测定药典方丹参片中丹参酮Il A及丹酚酸B的含量[J].药物研究，2008，5（23）：30-32.

[3] 董燕. 丹红注射液中丹参水溶性成分的含量测定[J].时珍国医国药，2013，24（12）：2896-2897.

[4] 张荣，王涛，何思敏.丹参-三七药对不同配伍比例对丹参素含量的影响.亚太传统医药.2009，5（8）：49-51.

项目：

河北省高校重点学科建设项目资助

作者简介：

刘沛，硕士，助教，从事中药制剂现代化研究。

通讯作者：

刘翠哲，博士，研究员，从事中药制剂现代化研究。