头孢曲松在家兔胆汁中的药物浓度分布的研究

摘要：目的 研究头孢曲松在胆汁中的药物浓度分布，为防治肝胆系统感染用药提供参考。方法 家兔行胆总管造瘘术，静脉注射头孢曲松后不同时间采集胆汁标本，采用高效液相色谱法（HPLC）测定胆汁中的药物浓度。用药动学软件分析并得出药动学参数。结果 家兔静脉注射头孢曲松后迅速分布，在胆汁中达峰时间Tmax 为 (0.036±0.094)h；峰浓度Cmax为(1509.20±584.60)μg/ml；消除半衰期T1/2为(3.31±0.59)h。8h胆汁中药物浓度仍远超过胆道常见致病菌的MIC90。结论 头孢曲松在胆汁中浓度很高且有效作用时间长，是预防和治疗胆道感染较好的药物。

关键词：头孢曲松；胆汁；浓度；分布；高效液相色谱法

Study on the Drug Concentration in Rabbit Bile of Ceftriaxone

ZHENG Jing-lei1, LIANG Li-jian2, WANG Zai-guo1, CHEN Liu-zhen1, HU Xia-rong1, HE Run-pei1, YE Zhen-wei1

(1. Department of Oncosurgery, Dongguan People's Hospital, Dongguan 523059,Guangdong,China; 2.Department of Hepatobiliary, Tthe First Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080,Guangdong,China)

Abstract：ObjectiveTo study the distribution of ceftriaxone in rabbit bile.MethodsThe rabbits were administered i.v. with ceftriaxone and their drug concentrations in bile were measured by HPLC. Parameters of ceftriaxone were analyzed by Shanghai Hongneng pharmacokinetic sofeware, such as maximum concentration(Cmax),peak time(Tmax),half-life time(T1/2),clearance(CL) and apparent volume of distribution(VD). Results After a single i.v. administration of 75mg/kg of ceftriaxone, Cmax（1509.20±584.60）μg/ml was reached at Tmax (0.036±0.094)h in bile. After 8h of the injection ，the concentration of ceftriaxoneremained much higher than the MIC90 of most biliary pathogens. Conclusion Ceftriaxone reaches high concentration in bile, which indicates that it is a practical and promising antibiotic for the treatment of biliary tract infection.

Key words：Ceftriaxone；Bile；Concentration；Distribution；HPLC胆道感染应优选在胆汁中浓度高且有效作用时间长的抗生素[1,2]。头孢曲松是第三代头孢类抗生素，由于具有抗菌谱广、杀菌效力强、半衰期长和副作用小等特点[3]，胆道感染革兰阴性和革兰阳性等常见致病菌对其较敏感，常用于胆道感染的防治。本文通过高效液相色谱法测定头孢曲松胆汁中的浓度，了解其在胆汁中的分布代谢规律，汇报如下。

1资料与方法

1.1试剂和药品实验用抗生素：头孢曲松，上海罗氏制药公司生产，规格0.5g/支，批号：SH0060。

头孢曲松对照品：中国药品生物制品检定所提供，批号：2480；

色谱纯：乙腈；分析纯：枸橼酸钠、枸橼酸、磷酸氢二钾、、磷酸二氢钾、四庚基溴化铵；超纯水。

1.2仪器高效液相色谱系统：岛津LC-10AD泵, SCL-10A进样器，SPD-10AV紫外检测器, CTO-10A柱温箱，N-2000双通道色谱工作站；0.45um微孔滤膜；微量采样器。

1.3实验动物健康实验用家兔7只（雄性4只，雌性3只），体重（2.5±0.5）kg，由中山大学动物实验中心提供。

1.4方法

1.4.1家兔胆汁采集方法禁食12h，腹腔注射3%戊巴比妥全麻后，行胆总管造瘘术。留取空白胆汁标本后，静脉注射头孢曲松75mg/kg，给药结束后分别在即时、15、30、45、60、90、120、180、240、360、480min收集胆汁标本1.5ml, -20℃低温保存。

1.4.2胆汁药物浓度测定采用HPLC法测定胆汁中头孢曲松浓度。

1.4.2.1色谱条件色谱柱：Spherisorb ODS Sm C18, 5μ,150×4.6mm；流动相：0.8%四庚基溴化铵乙腈溶液-水-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾4.0g和磷酸氢二钾13.6g，溶于1000ml水中，调节pH=7.0) -枸橼酸盐缓冲液（取枸橼酸钠25.8g,置1000ml量瓶中，加水500ml使溶解，用20%枸橼酸溶液调节Ph至5.0）（500：440：55：5）；流速：1ml/min；进样量：20μl；柱温：25℃；检测波长：254nm。

1.4.2.2 胆汁样品预处理[4]精密取胆汁200 l，加入乙腈至2ml，旋涡振荡，离心（15000 rpm ）10min，取上清液经微孔滤膜过滤后进样。

1.4.2.3 胆汁样品药物浓度和药动学数据计算通过HPLC色谱仪测定各胆汁样品头孢曲松的色谱峰面积，计算其相应的药物浓度。用上海宏能药动学软件处理，得出各项药动学参数，如：峰浓度,达峰时间,半衰期,清除率, 表观分布容积,曲线下面积等。

2结果

2.1头孢曲松在胆汁中的浓度家兔静脉注射头孢曲松后胆汁中药物浓度达峰时间极短，均在15min内达峰值；峰浓度很高（674.29~2398.22μg/ml）。用药后8h仍可在胆汁中测到较高的药物浓度。见表1。

2.2头孢曲松在胆汁中的药动学参数胆汁药物浓度－时间数据用上海宏能药动学软件进行房室模型及非房室模型-统计矩分析，拟合结果显示：头孢曲松在家兔胆汁中的分布符合二房室模型，头孢曲松峰浓度为(1509.20±584.60)μg/ml，半衰期为(3.29±0.62)h。见表2。

3讨论

肝胆系统感染时合理选用抗生素应符合以下基本原则：①抗生素对致病菌敏感：抗生素的抗菌谱和当时当地的细菌耐药情况是选择抗生素主要的依据。应选择对致病菌有较强活性、细菌耐药性较少的广谱抗生素；②抗生素在胆汁中浓度高：抗菌治疗的最终目的是根除特定感染部位的微生物致病菌，这是通过在该部位达到和维持一定的抗菌药物浓度来实现的，药物浓度要达到或超过最低抑菌浓度（MIC）[6]。因而药物的疗效及抗菌活性取决于感染部位的药物浓度。故肝胆系统感染时首选能在肝、胆组织和胆汁中形成较高浓度的抗菌药物；③药物的毒副作用小，尽可能经济实惠。关于药物的敏感性和毒副作用问题已受到广泛重视，在临床实践中大都根据具体实际情况选用比较理想的药物。因此在治疗胆道感染选用抗生素时，除了应考虑药物对致病菌的敏感性和杀菌力、血药浓度、毒副作用等因素外，该抗生素在胆汁中的浓度非常重要。只有药物的胆汁浓度高且对致病菌敏感，在胆道感染治疗中才能达到好的效果[5]。头孢曲松杀菌力强，毒副作用小，对大多数G＋和G－菌敏感，是治疗胆道感染的常用药物之一。目前关于头孢曲松药动学方面的资料绝大部分偏重于血药浓度，而胆汁中的药物浓度及半衰期等药动学参数却鲜有报道。

每种抗菌药物由于药物成分结构的不同而排泄途径不一，胆汁中的药物浓度与其脂溶性、蛋白结合程度、分子量等经肝细胞分泌相关因素有关。少数抗生素主要经肝胆排泄，部分经肝胆排泄的抗生素比较多，有的能在肝胆组织和胆汁中形成超高浓度，但有些抗生素则很少进入肝胆系统。由于抗生素在肝胆组织中的穿透力具有较大的差异，因而了解抗菌药物在胆汁中的穿透力，能指导临床上肝胆系统感染时正确选用在肝胆中分布较好、能达到有效治疗浓度的抗菌药物。本文采用HPLC法测定家兔胆汁中头孢曲松的浓度,HPLC法具有高效、快速、准确、灵敏度高，且重现性好的优点[6]。研究结果显示，通过静脉注射给药后头孢曲松在家兔胆汁中迅速分布，胆汁中药物峰浓度为(1509.20±584.60)μg/ml；达峰时间为(0.036±0.094)h，消除半衰期为(3.31±0.59)h。给药后8h胆药浓度仍超过大多数胆道感染常见病原菌的最低抑菌浓度[7]。另外，本实验观测到全组7只实验家兔中有3只家兔达最大峰浓度之后出现一个或多个小高峰，提示头孢曲松在部分家兔胆道中的浓度并非完全呈线性下降，而是在有上升的波动中逐渐消除，原因可能是药物不断在家兔体内再分布后经肝胆系统排泄所致。可见, 头孢曲松有大量原形药物经胆道排泄，在胆汁中具有很高浓度且有效作用时间长，可作为预防和治疗胆道感染较好的药物。

参考文献：

[1]Westphal JF, Brogard JM. Biliary Tract Infections-A Guide to Drug Treatment[J]. Drugs, 1999,57 (1): 81-91

[2]中华医学会外科学分会胆道外科学组. 急性胆道系统感染的诊断和治疗指南(2011版) [J]. 中华消化外科杂志,2011,10(1): 9-13.

[3]Leone M, Albanese J, Tod M, et al. Ceftriaxone (1 g intravenously) penetration into abdominal tissues when administered as antibiotic prophylaxis during nephrectomy[J]. J Chemother,2003,15(2):139-142.

[4]郑惊雷，梁力建，黄文静，等.高效液相色谱法测定胆汁中美罗培南的浓度[J].中国抗生素杂志,2007，32（9）：553-555，574

[5]郑惊雷，梁力建，赖佳明. 胆道感染病原菌及其对抗生素敏感性变化的研究[J].中国实用外科杂志，2005，25（2）:80-82.

[6]徐叔云，卞如濂，陈修，主编.药理实验方法学[M].第3版.北京：人民卫生出版社，2002:740-742.

[7]Tanaka A, Takada T, Kawarada Y, et al. Antimicrobial therapy for acute cholangitis: Tokyo Guidelines[J]. J Hepatobiliary Pancreat Surg,2007, 14(1):59-67.编辑/哈涛